慢性社交挫敗應(yīng)激抑郁模型建立與評(píng)價(jià)及其在中藥抗抑郁研究中的應(yīng)用

王 琦，趙慧亮，楊 晨，向 歡，秦雪梅*，田俊生*

慢性社交挫敗應(yīng)激抑郁模型建立與評(píng)價(jià)及其在中藥抗抑郁研究中的應(yīng)用

王 琦1，趙慧亮1，楊 晨1，向 歡2，秦雪梅1*，田俊生1*

1. 山西大學(xué) 中醫(yī)藥現(xiàn)代研究中心，地產(chǎn)中藥功效物質(zhì)研究與利用山西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山西大學(xué)化學(xué)生物學(xué)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山西 太原 030006 2. 山西大學(xué)體育學(xué)院，山西 太原 030006

慢性社交挫敗應(yīng)激抑郁（chronic social defeat stress depression，CSDS）模型是利用生理和心理雙重應(yīng)激使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)抑郁樣狀態(tài)，進(jìn)一步以傳統(tǒng)抑郁動(dòng)物模型評(píng)價(jià)指標(biāo)及社會(huì)交互作用指數(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)。該模型可以較好地模擬人類在日常的交往活動(dòng)中因?yàn)樯缃粔毫^大、頻繁的挫敗感或長(zhǎng)期遭受欺凌而導(dǎo)致的社交挫敗抑郁樣行為，同時(shí)也可以在動(dòng)物水平的研究中評(píng)價(jià)藥物對(duì)于抑郁狀態(tài)及社會(huì)功能的改善作用。主要對(duì)CSDS模型的建立方法、評(píng)價(jià)指標(biāo)以及在抗抑郁中藥研究方面的應(yīng)用等進(jìn)行綜述，為該模型在社交挫敗抑郁疾病發(fā)生機(jī)制以及抗抑郁藥物研發(fā)和作用機(jī)制研究方面的應(yīng)用提供支撐。

社交挫敗抑郁疾?。宦陨缃淮鞌?yīng)激抑郁模型；社會(huì)交互作用指數(shù)；心理應(yīng)激；社會(huì)功能

目前全世界約有3.4億以上的人患有抑郁癥，我國(guó)抑郁癥患者人數(shù)也超過9500萬，并且患者人數(shù)呈現(xiàn)逐年升高的趨勢(shì)，抑郁癥已經(jīng)成為危害人類社會(huì)的一種嚴(yán)重精神疾病[1-2]。社會(huì)交往是人類社會(huì)中個(gè)體之間相互往來，進(jìn)行物質(zhì)精神交流的一種活動(dòng)。來自社會(huì)生活中的不正常社交現(xiàn)象如社交壓力、社交恐懼、校園欺凌等為誘發(fā)抑郁癥等精神類疾病的重要因素。大量因社會(huì)交往活動(dòng)遭受挫折而產(chǎn)生社交挫敗抑郁行為的人群正面臨著一系列社交活動(dòng)障礙、工作效率下降、生活質(zhì)量降低、社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)力低下等重大社會(huì)問題，早期預(yù)防因長(zhǎng)期的社交挫敗而引發(fā)的抑郁癥也顯得尤為重要[3]。

然而，目前對(duì)于社交挫敗所致抑郁行為尚未引起足夠重視，更缺乏明確、有效、精準(zhǔn)的防治措施，針對(duì)社交挫敗抑郁行為的研究是抑郁癥臨床治療的迫切需求。人類社交失敗的研究及其與動(dòng)物社交失敗研究具有一定的相似性，基于人類社會(huì)中“欺凌弱小者”和“遭受欺凌者”的關(guān)系，在關(guān)于社交失敗的動(dòng)物研究中提出了基于嚙齒動(dòng)物居住者-入侵者范式，即慢性社交挫敗應(yīng)激抑郁（chronic social defeated stress，CSDS）模型[4]。CSDS模型原理即將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（入侵者）引入到一個(gè)較大的、好斗且占優(yōu)勢(shì)的同物種動(dòng)物原駐居民（攻擊者）的籠中，使得入侵者遭到原駐居民的襲擊并失敗，表現(xiàn)為從生理方面遭受應(yīng)激壓力。一旦發(fā)生身體攻擊或威脅攻擊，將原駐居民與入侵者隔開，使其在兩側(cè)共同居住一定時(shí)間，表現(xiàn)為遭受心理方面的壓力。將測(cè)試嚙齒動(dòng)物暴露于不同的攻擊者，并重復(fù)遭受一定時(shí)間的生理和心理雙重壓力，最終表現(xiàn)出順從、投降、社交恐懼、自我封閉等社交挫敗抑郁行為。

Kudryavtseva等[5]發(fā)現(xiàn)C57BL/6J小鼠在長(zhǎng)期經(jīng)歷社交挫敗應(yīng)激之后，順從性增加并且出現(xiàn)了抑郁樣行為，并在1991年初步建立了以C57BL/6J小鼠為研究對(duì)象的社交挫敗抑郁模型，即CSDS模型前身。Tornatzky等[6]于1993年在大鼠中建立了該模型。Golden等[7]在2011年對(duì)C57BL/6J小鼠的CSDS模型進(jìn)一步制定了標(biāo)準(zhǔn)化的操作程序。自然條件下大多數(shù)的雌性嚙齒類動(dòng)物不具有自發(fā)的攻擊性，故社交挫敗應(yīng)激模型常以雄性動(dòng)物為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。目前發(fā)現(xiàn)少數(shù)雌性嚙齒動(dòng)物可以表現(xiàn)出一定的攻擊性，如加利福尼亞小鼠和敘利亞倉(cāng)鼠以及田鼠[8-10]。此外，處于妊娠期或有特定雄性伴侶的雌性小鼠也具有一定的攻擊性[11]，或?qū)⑿坌詺馕秳┗蚧瘜W(xué)激動(dòng)劑涂抹于雌性小鼠身體，也可激活雄性小鼠對(duì)雌性小鼠的攻擊性[12]。近年來，一些非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物也逐漸應(yīng)用于情緒障礙性疾病的研究，如對(duì)樹鼩、食蟹猴等動(dòng)物進(jìn)行社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)應(yīng)激，使得實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型更加接近人類的水平，以彌補(bǔ)該模型在嚙齒類動(dòng)物水平上無法模擬復(fù)雜的人類社會(huì)環(huán)境的局限性[13-14]。

相對(duì)于其他以單純的外界“應(yīng)激”為原理或藥物誘導(dǎo)的抑郁實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型來說，CSDS模型是基于社會(huì)從屬關(guān)系衍生，從生理和心理2個(gè)方面同時(shí)給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)激，可以更好地模擬人類在日常的社交活動(dòng)中因社交壓力過大、頻繁的挫敗感而引起的情緒低落、快感缺失等典型抑郁狀態(tài)，并且可以反映在社交過程是否出現(xiàn)社交回避行為，可以更好地從生理和心理2個(gè)方面模擬人類抑郁癥的疾病誘因。隨著該模型不斷的發(fā)展和改進(jìn)，在雌性動(dòng)物和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物的研究上也取得了一定的進(jìn)步，這也為充分認(rèn)識(shí)抑郁癥發(fā)病機(jī)制研究以及抗抑郁藥物藥效評(píng)價(jià)提供支撐。

因此，本文將主要介紹CSDS模型的建立方法與評(píng)價(jià)指標(biāo)以及現(xiàn)階段該模型在抗抑郁藥物作用及機(jī)制研究方面的應(yīng)用情況，為社交挫敗抑郁疾病發(fā)生機(jī)制及藥物干預(yù)作用機(jī)制研究提供參考依據(jù)。

1 不同模式動(dòng)物下CSDS模型的建立與評(píng)價(jià)

多種模式動(dòng)物可用于CSDS模型的研究，包括嚙齒類動(dòng)物C57BL/6小鼠、SD大鼠和雌性田鼠以及非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物樹鼩和食蟹猴等，其中以C57BL/6J小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物最為常用。

1.1 以嚙齒類動(dòng)物為研究對(duì)象的CSDS模型的建立與評(píng)價(jià)

1.1.1 雄性C57BL/6J小鼠CSDS模型的建立 選用6～8周齡的雄性C57BL/6J小鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，選用雄性CD-1退役種鼠作為原駐居民。在造模前將雄性CD-1退役種鼠單籠飼養(yǎng)7 d以建立領(lǐng)地意識(shí)，同時(shí)以連續(xù)攻擊次數(shù)不少于3次或攻擊潛伏期小于30 s等為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行2次篩選。隨后，將C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組和模型對(duì)照組。將模型對(duì)照組的C57BL/6J小鼠放入陌生的CD-1小鼠的籠子里，遭受CD-1小鼠的攻擊，持續(xù)5～10 min。期間，C57BL/6J小鼠會(huì)表現(xiàn)出驚恐、逃避、僵直以及尖叫等行為狀態(tài)。隨后使用帶孔的透明隔板進(jìn)行分隔24 h，使得兩者不能直接接觸，但仍能看到彼此并且嗅到彼此的氣味。此過程重復(fù)10 d左右，并使C57BL/6J小鼠每天暴露在不同的CD-1小鼠的攻擊下[7]，并最終表現(xiàn)出抑郁樣行為，具體操作流程及實(shí)驗(yàn)裝置如圖1所示。

1.1.2 雌性小鼠CSDS模型的建立 在多數(shù)情況下，雄鼠都不會(huì)攻擊雌性侵入者，但可利用其他雄鼠尿液中氣味和信息素增加其攻擊行為。即將其他雄鼠尿液應(yīng)用于雌性小鼠尾巴根部及會(huì)陰處，誘導(dǎo)具有攻擊性的雄性CD1小鼠反復(fù)攻擊雌性入侵者C57BL/6J小鼠，每次5～10 min，持續(xù)10 d[15]。

圖1 以C57BL/6J小鼠為研究對(duì)象的CSDS模型的建立流程(A)和相應(yīng)裝置(B)

而與大多數(shù)雌性嚙齒動(dòng)物相比，雌性田鼠對(duì)同性個(gè)體可以表現(xiàn)出高度的自發(fā)性攻擊[16]。選擇80～120 d齡的雌性田鼠作為原駐居民，同樣以連續(xù)攻擊次數(shù)不小于3次或攻擊潛伏期小于30 s等作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行篩選。選擇70 d齡的雌性田鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，實(shí)驗(yàn)田鼠遭受原駐居民攻擊10 min，之后用帶孔的透明隔板分隔24 h，每天受到不同原駐居民的攻擊并持續(xù)14 d，最終表現(xiàn)為抑郁樣狀態(tài)[17]。

1.1.3 雄性SD大鼠CSDS模型的建立 選擇雄性SD大鼠作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，Long-Evans大鼠作為原駐居民主動(dòng)攻擊SD大鼠。造模時(shí)間持續(xù)1 h，前30 min讓其任意打斗，后30 min在飼養(yǎng)盒中間放置一個(gè)鐵絲網(wǎng)制成的隔板，使2只動(dòng)物無法直接接觸，但存在視覺、嗅覺、觸覺的接觸，1 h后SD大鼠回籠。上述操作每隔1 d執(zhí)行1次，重復(fù)10次[18]。

1.1.4 嚙齒類CSDS模型的評(píng)價(jià)

（1）一般外觀狀態(tài)：正常實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有著較強(qiáng)的好奇心，毛發(fā)光滑，性格活潑。而遭受社交挫敗應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物則會(huì)表現(xiàn)出易受驚嚇、逃避以及蜷縮的狀態(tài)，自主活動(dòng)較少，毛發(fā)雜亂無光澤。

（2）常規(guī)抑郁樣行為學(xué)特征：在抑郁實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型中，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物行為學(xué)上的改變可以間接反映動(dòng)物的心理變化，可以初步判斷造模的成功與否以及作為藥物篩選和評(píng)價(jià)藥效的基本依據(jù)。常規(guī)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)包括對(duì)體質(zhì)量變化、獎(jiǎng)賞反應(yīng)、活動(dòng)情況和絕望程度的評(píng)價(jià)，實(shí)驗(yàn)鼠在造模后的抑郁樣行為學(xué)特征主要為體質(zhì)量增長(zhǎng)降低；糖水偏愛實(shí)驗(yàn)中的糖水偏愛率（sucrose preference ratio，SPR）的減少；曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（open flied test，OFT）中總穿越距離減少，直立次數(shù)減少；強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)（force swimming test，F(xiàn)ST）和懸尾實(shí)驗(yàn)（tail suspension test，TST）中不動(dòng)時(shí)間增加[19]。

（3）社會(huì)交互作用實(shí)驗(yàn)（social interaction test，SIT）：為了反映實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的社會(huì)交互作用行為，SIT被用于模擬在社會(huì)環(huán)境中的社交活動(dòng)情況，觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)于陌生目標(biāo)的接觸情況，從而評(píng)價(jià)其有無社交回避現(xiàn)象。如圖2所示，在有無陌生動(dòng)物的情況下，記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入社交區(qū)域（虛線內(nèi)）的時(shí)間總和，計(jì)算社會(huì)交互作用指數(shù)（social interaction ratio，SIR）。

SIR＝有陌生目標(biāo)在社交區(qū)域內(nèi)的累計(jì)時(shí)間/無陌生目標(biāo)在社交區(qū)域內(nèi)的累計(jì)時(shí)間

圖2 SIT的實(shí)驗(yàn)示意圖

正常實(shí)驗(yàn)鼠會(huì)頻頻靠近陌生鼠，發(fā)生社交行為，而遭受社交挫敗的實(shí)驗(yàn)鼠會(huì)出現(xiàn)社交逃避現(xiàn)象。一般地，在一定時(shí)間內(nèi)，接受過CSDS的實(shí)驗(yàn)鼠與陌生鼠接觸時(shí)間會(huì)顯著低于正常鼠與陌生鼠的接觸時(shí)間。嚙齒類動(dòng)物的CSDS模型中，因個(gè)體差異的存在常會(huì)通過SIR將接受應(yīng)激的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物區(qū)分為耐受型和易感型，當(dāng)SIR＞1時(shí)，該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為耐受型，當(dāng)SIR＜1時(shí)，該實(shí)驗(yàn)動(dòng)物則為易感型。

（4）抑郁伴發(fā)癥狀行為學(xué)評(píng)價(jià)：抑郁實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛣?dòng)物常伴發(fā)精神癥狀和軀體癥狀，如焦慮、學(xué)習(xí)記憶力降低、性功能低下、胃腸功能障礙等，因此明確藥物的抗抑郁藥效后，在行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中增加其他評(píng)價(jià)指標(biāo)可以對(duì)藥物獨(dú)特的藥效進(jìn)行評(píng)價(jià)，從而在臨床上指導(dǎo)合理用藥。①實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的焦慮狀態(tài)常用高架十字迷宮（elevated plus-maze test，EPM）評(píng)價(jià)，體現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入開臂次數(shù)、時(shí)間以及向下探頭次數(shù)等減少。②實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力常用水迷宮（Morris water maze，MWM）、Y迷宮和新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)（novel object recognition，NOR）評(píng)價(jià)。MWM中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在游泳速度無差異的情況下，以空間探索期穿越平臺(tái)次數(shù)和目標(biāo)象限活動(dòng)路程比例等指標(biāo)評(píng)價(jià)長(zhǎng)期空間學(xué)習(xí)記憶能力。Y迷宮以自發(fā)交替正確率或各臂停留時(shí)間評(píng)價(jià)短期記憶力。NOR以新物體識(shí)別指數(shù)或辨別指數(shù)來評(píng)價(jià)對(duì)新物體的能力。③交配實(shí)驗(yàn)常用于評(píng)價(jià)性功能。④胃排空實(shí)驗(yàn)和小腸推進(jìn)實(shí)驗(yàn)中的排空率和推進(jìn)率用于評(píng)價(jià)胃腸功能[20-22]。

1.2 以非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物為研究對(duì)象的CSDS模型的建立及評(píng)價(jià)

1.2.1 樹鼩CSDS模型的建立與評(píng)價(jià) 樹鼩是一種具有較強(qiáng)領(lǐng)地意識(shí)的非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物，在樹鼩自然群居生活中，常會(huì)因爭(zhēng)奪領(lǐng)地和交配權(quán)發(fā)生打斗現(xiàn)象。

實(shí)驗(yàn)室條件下，將具有戰(zhàn)勝經(jīng)歷的樹鼩與未經(jīng)歷打斗的樹鼩安置在2個(gè)獨(dú)立的籠子中，由帶小門的鐵絲網(wǎng)隔板隔開。小門每天被開1 h，二者因?yàn)楦?jìng)爭(zhēng)領(lǐng)地而發(fā)生短暫的戰(zhàn)斗，最終確立明顯的主導(dǎo)-從屬關(guān)系。被擊敗的樹鼩被稱為挫敗者，而勝利的一方則被稱為主宰者。樹鼩之前的打斗隨機(jī)發(fā)生在9:00～18:00進(jìn)行。在每天的剩余時(shí)間里，挫敗者可在視覺聽覺和嗅覺中感受到主宰者，共持續(xù)21 d，最終挫敗者表現(xiàn)出抑郁樣狀態(tài)[23]。

對(duì)于樹鼩CSDS模型的評(píng)價(jià)主要是體質(zhì)量、自主活動(dòng)、躲避行為、自我修飾行為及領(lǐng)域標(biāo)記行為等行為學(xué)指標(biāo)。還可通過尿液皮質(zhì)醇水平等的變化對(duì)其評(píng)價(jià)[24]。

1.2.2 食蟹猴CSDS模型的建立與評(píng)價(jià) 雄性和雌性食蟹猴在自然狀態(tài)下，由于食物資源、田地和交配權(quán)等因素，食蟹猴具有很強(qiáng)的攻擊性產(chǎn)生行為，時(shí)間約為3個(gè)月。

對(duì)于食蟹猴CSDS模型的評(píng)價(jià)主要是利用動(dòng)物行為分析系統(tǒng)對(duì)友好、休息、攝食、飲水、聚溫、交配、運(yùn)動(dòng)、沖突、焦慮、抑郁、其他11類行為進(jìn)行記錄和分析[25]，具體內(nèi)容見表1。

表1 食蟹猴行為分析的具體內(nèi)容

Table 1 Specific content of behavior analysis of cynomolgus monkeys

行為名稱具體含義 友好個(gè)體主動(dòng)或被攻擊后為其他個(gè)體進(jìn)行毛發(fā)梳理 休息站、坐、躺時(shí)間持續(xù)5 s以上 攝食個(gè)體在食槽內(nèi)抓取食物 飲水個(gè)體在飲水處進(jìn)行飲水 聚溫個(gè)體相互依偎在一起保持體溫 交配異性之間進(jìn)行性行為 運(yùn)動(dòng)快速或緩慢地進(jìn)行移動(dòng)，移動(dòng)距離大于半臂的長(zhǎng)度 沖突指撕咬、抓、威脅對(duì)方個(gè)體 焦慮個(gè)體快速地進(jìn)行搔癢持續(xù)3 s以上 抑郁抑郁樣核心行為（睜眼、蜷縮、低頭） 其他以上10類以外的行為

在嚙齒類動(dòng)物中，C57BL/6J品系小鼠因其容易獲得、價(jià)格較低、實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好的特點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用。SD大鼠雖然可獲得樣本量大，但實(shí)驗(yàn)操作性復(fù)雜，應(yīng)用較少。雌性小鼠在CSDS模型中曾因自身攻擊性小而很難實(shí)施，或只能使用非標(biāo)準(zhǔn)物種，因此限制了將雌性小鼠納入CSDS模型的研究。但目前通過增加外部條件及篩選攻擊性強(qiáng)的品系小鼠使之在該模型中變得可行。嚙齒類動(dòng)物的CSDS模型從生理和心理雙重角度對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行造模，可以從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般狀態(tài)、常規(guī)抑郁樣行為學(xué)指標(biāo)的多個(gè)方面較好地反映其抑郁樣狀態(tài)以及社交回避現(xiàn)象。

在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物中，樹鼩具有體型小、易飼養(yǎng)、繁殖快、研究成本低等優(yōu)點(diǎn)，且神經(jīng)功能和代謝系統(tǒng)與人類近似。食蟹猴則因其具有社會(huì)等級(jí)的特點(diǎn)能夠模擬人類復(fù)雜的生活環(huán)境，同時(shí)因其與人類在組織結(jié)構(gòu)、生理和代謝機(jī)能上極為相似，以此類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為研究對(duì)象的研究結(jié)果能更貼近人類，且是藥理實(shí)驗(yàn)中理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。綜上，此模型有著較好的疾病同源性和表象一致性。

2 嚙齒類動(dòng)物CSDS模型在中藥抗抑郁作用及機(jī)制研究中的應(yīng)用

傳統(tǒng)中藥具有多成分、多途徑、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，在抑郁癥的治療中發(fā)揮了重要作用，也越來越受到關(guān)注[26]。基于CSDS模型的傳統(tǒng)中藥抗抑郁作用研究中，發(fā)現(xiàn)中藥的單體成分、提取物以及復(fù)方均可以顯著改善CSDS模型動(dòng)物的抑郁樣行為學(xué)特征，其作用機(jī)制研究涉及炎癥因子調(diào)控、神經(jīng)元保護(hù)、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)節(jié)等多個(gè)方面[27-29]。

2.1 應(yīng)用CSDS模型從炎癥因子調(diào)控角度探究中藥抗抑郁作用機(jī)制

近年來炎癥因子假說是抑郁癥發(fā)病機(jī)制的一個(gè)重要假說，而氧化應(yīng)激反應(yīng)和炎癥因子之間又互相影響。Gao等[30]從氧化應(yīng)激角度出發(fā)，發(fā)現(xiàn)大蒜素可使CSDS小鼠的體質(zhì)量增加，SPR增加，F(xiàn)ST中不動(dòng)時(shí)間減少，也可增加SIR，改善抑郁樣狀態(tài)。通過降低活性氧、丙二醛等氧化應(yīng)激指標(biāo)水平，抑制尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4及核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3等炎性小體過度表達(dá)，上調(diào)超氧化物歧化酶和核因子E2相關(guān)因子2/血紅素加氧酶1抗氧化途徑的活性，從而抑制海馬中小膠質(zhì)細(xì)胞的活化并下調(diào)炎性細(xì)胞因子。即大蒜素通過減少體內(nèi)的氧化劑及相應(yīng)代謝物，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)展，進(jìn)而緩解神經(jīng)炎癥，從而減輕了CSDS小鼠的抑郁樣行為。

另外，機(jī)體的炎性狀態(tài)可通過直接測(cè)定中樞組織及外周血清中的炎癥因子水平，如白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-6、IL-1β及腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）等。Aubry等[31]發(fā)現(xiàn)飲食中補(bǔ)充1.5%姜黃素可提高129/SvEv小鼠因CSDS造模引起的SIR降低。姜黃素可減少CSDS模型小鼠血清中的IL-6，抑制核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）途徑，進(jìn)而改善其抑郁樣行為。Jiang等[32]發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1可顯著增加CSDS模型小鼠的SIR和SPR，減少FST和TST實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間。人參皂苷Rg1可降低CSDS模型小鼠海馬中IL-6、IL-1β和TNF-α炎性因子的表達(dá)，抑制NF-κB途徑的激活及小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，逆轉(zhuǎn)CSDS模型小鼠中海馬神經(jīng)發(fā)生的減少，從而發(fā)揮抗抑郁作用。Deng等[33]發(fā)現(xiàn)苦瓜多糖可增加CSDS模型小鼠的SIR，提高SPR，減少TST實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間，通過降低CSDS模型小鼠海馬中的炎性因子（IL-1β、IL-6和TNF-α），抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B途徑發(fā)揮作用。Sato等[34]發(fā)現(xiàn)柑橘提取物可增加CSDS模型小鼠的SIR，減少血清中IL-6、IL-1β和海馬中犬尿氨酸等致炎因子水平，從而表現(xiàn)出抗抑郁作用。以上多種藥物均可通過減少機(jī)體的炎癥因子及促炎因子的水平，抑制炎癥相關(guān)通路的激活方式改善機(jī)體外周及中樞的炎性狀態(tài)，進(jìn)而改善CSDS模型小鼠的抑郁樣行為。

CSDS造模過程中，因應(yīng)激造成實(shí)驗(yàn)動(dòng)物下丘腦-垂體-腎上腺軸軸亢進(jìn)，導(dǎo)致外周和中樞炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的增加，氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)，促進(jìn)抑郁疾病的發(fā)生和發(fā)展。而以上傳統(tǒng)中藥的單體成分或提取物可通過降低外周炎性介質(zhì)，增加抗炎因子，抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)，從而降低外周炎性水平?；蛲瑫r(shí)抑制中樞神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的活性與炎癥相關(guān)通路的激活，最終減輕神經(jīng)炎癥，使機(jī)體處于正常生理狀態(tài)，發(fā)揮抗抑郁作用。

2.2 應(yīng)用CSDS模型從神經(jīng)元保護(hù)角度探究中藥抗抑郁作用機(jī)制

神經(jīng)元是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基本單位，其數(shù)量、結(jié)構(gòu)和功能的正常完整是神經(jīng)系統(tǒng)功能正常的關(guān)鍵。王樂等[35]發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素可顯著增加CSDS模型小鼠的SIR，減少FST和TST實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間，同時(shí)提高NOR中辨別指數(shù)和Y迷宮新穎臂停留時(shí)間，降低其焦慮水平。通過增加CSDS模型小鼠海馬中沉默信息調(diào)節(jié)因子1蛋白的表達(dá)水平，提高腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）水平來改善抑郁樣狀態(tài)。劉志強(qiáng)等[36]發(fā)現(xiàn)綠茶多酚減少CSDS模型小鼠FST實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間和MWM實(shí)驗(yàn)中的潛伏時(shí)間，通過激活CSDS模型小鼠海馬環(huán)磷腺苷效應(yīng)元件結(jié)合蛋白-BDNF通路改善抑郁樣狀態(tài)。Jiang等[37]發(fā)現(xiàn)參元湯可增加CSDS模型小鼠的SIR和SPR，減少FST和TST實(shí)驗(yàn)中的不動(dòng)時(shí)間。通過降低CSDS模型小鼠血清中皮質(zhì)酮（corticosterone，CORT）水平，以及激活海馬BDNF-酪氨酸激酶受體B信號(hào)通路改善抑郁樣狀態(tài)。

CSDS造模過程中的應(yīng)激導(dǎo)致中樞炎癥水平升高，可以導(dǎo)致神經(jīng)元受損、神經(jīng)發(fā)生減少，最終表現(xiàn)為抑郁狀態(tài)。而BDNF作為神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，能夠維持神經(jīng)細(xì)胞存活，促進(jìn)神經(jīng)發(fā)生，提高神經(jīng)元可塑性。以上藥物都是從增加海馬神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)，保護(hù)海馬神經(jīng)元細(xì)胞方面來發(fā)揮抗抑郁作用。

2.3 應(yīng)用CSDS模型從單胺類神經(jīng)遞質(zhì)調(diào)節(jié)角度探究中藥抗抑郁作用機(jī)制

單胺類神經(jīng)遞質(zhì)假說是抑郁癥發(fā)病經(jīng)典假說之一，即體內(nèi)5-羥色胺（5-hydroxytryptamine，5-HT）水平降低和5-HT與5-羥基吲哚乙酸（5-hydroxyindoleacetic acid，5-HIAA）比率的減少會(huì)導(dǎo)致抑郁樣狀態(tài)，CSDS造模后也表現(xiàn)出相似的結(jié)果。Lin等[38]發(fā)現(xiàn)天麻水提物能夠顯著逆轉(zhuǎn)CSDS模型小鼠體質(zhì)量的減輕，增加SIR。通過升高CSDS模型小鼠血清CORT，回調(diào)了5-HIAA和5-HT的比率，增加前額葉皮層中5-HT和5-HT/色氨酸值來發(fā)揮抗抑郁作用，可見，天麻水提物可以通過影響單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的水平進(jìn)而發(fā)揮抗抑郁作用。

綜上所述，一些傳統(tǒng)單體成分、單味藥水提物、中藥復(fù)方的補(bǔ)充可以通過不同的作用機(jī)制，改善CSDS引起的體內(nèi)神經(jīng)生化指標(biāo)的異常，通過糾偏發(fā)揮抗抑郁作用，最終達(dá)到治療的效果。除經(jīng)典的抑郁樣行為學(xué)指標(biāo)和神經(jīng)生化指標(biāo)外，CSDS模型還可以通過SIT中社交率的改變?cè)u(píng)價(jià)藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物社會(huì)功能方面的改善作用，全面地闡述藥物的藥效特點(diǎn)及機(jī)制，也表明了該模型具有較好的藥物預(yù)見性。

3 結(jié)語與展望

隨著對(duì)抑郁癥這類情緒障礙疾病研究的不斷深入，應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來建立不同的情緒障礙疾病的模型一直在不斷發(fā)展與進(jìn)步。不僅是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的種類在不斷增加和完善，并且同一類疾病以及不同的發(fā)病機(jī)制建立了不同的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型在疾病發(fā)生機(jī)制的研究、藥物的篩選以及評(píng)價(jià)等方面具有重要作用，需要同時(shí)滿足疾病同源性、表象一致性和藥物預(yù)見性3個(gè)條件[39]。CSDS模型可以較好的滿足以上3個(gè)條件，但某些方面還存在一些問題，其中1個(gè)突出的問題是它在受試對(duì)象方面還存在局限性。但是，近年來對(duì)于雌性嚙齒類動(dòng)物在該模型應(yīng)用方面的研究也有了一些進(jìn)步，但并沒有廣泛地應(yīng)用于研究中。同時(shí)，該模型在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物領(lǐng)域的研究中，由于研究對(duì)象與人類的近緣關(guān)系更加接近，對(duì)其抑郁行為的腦機(jī)制研究或藥物評(píng)價(jià)可能更具潛在價(jià)值，也應(yīng)該建立相應(yīng)的動(dòng)物模型構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范。

對(duì)于抗抑郁藥物療效的評(píng)價(jià)不僅包括其對(duì)于抑郁癥典型癥狀的改善作用，還要注重對(duì)于心理及社會(huì)功能的改善作用[40]。常規(guī)抑郁癥動(dòng)物模型在研究藥物治療效果時(shí)，往往因?yàn)槟Ｐ妥陨硖攸c(diǎn)，僅關(guān)注藥物對(duì)于抑郁樣行為的改善作用。而CSDS模型因其造模程序和原理，不僅可以研究抗抑郁藥物的抗抑郁藥效，還能以SIT中SIR來對(duì)其社會(huì)功能的恢復(fù)進(jìn)行初步預(yù)判。無論是以中藥為主的慢性抗抑郁藥物，還是以氯胺酮為代表的快速起效抗抑郁藥物，都可以在CSDS模型中表現(xiàn)出良好的抗抑郁效果及對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物社會(huì)功能的改善。而該模型在中藥復(fù)方抗抑郁作用及機(jī)制的研究中尚且薄弱，但是單味中藥提取物采用該模型在藥效及機(jī)制的研究應(yīng)用逐漸增多，對(duì)此本課題組在成功復(fù)制CSDS模型的基礎(chǔ)上，開展中藥復(fù)方逍遙散及其拆方制劑柴歸顆粒改善社交挫敗抑郁行為的藥效與作用機(jī)制研究，初步發(fā)現(xiàn)柴歸顆?？梢酝ㄟ^調(diào)節(jié)CSDS小鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)與功能，進(jìn)一步影響支鏈氨基酸分解代謝與轉(zhuǎn)運(yùn)而發(fā)揮抗抑郁的作用，研究結(jié)果正在整理當(dāng)中。

因此，CSDS模型可從另一種角度去模擬臨床抑郁癥人群中以社交壓力為誘導(dǎo)原因的患者，該模型為抑郁癥動(dòng)物模型增加了一種新的表型，以多種模型共同去評(píng)價(jià)抗抑郁藥物的治療效果，也能夠?yàn)橐钟舭Y發(fā)病機(jī)制研究以及抗抑郁藥物研發(fā)提供更好的支撐。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Establishment and evaluation of chronic social defeat stress depression model and its application in study on antidepressant effect of traditional Chinese medicine

WANG Qi1, ZHAO Hui-liang1, YANG Chen1, XIANG Huan2, QIN Xue-mei1, TIAN Jun-sheng1

1. Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Education, Key Laboratory of Effective Substances Research and Utilization in TCM of Shanxi Province, Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine, Shanxi University, Taiyuan 030006, China 2. School of Physical Education, Shanxi University, Taiyuan 030006, China

Chronic social defeat stress depression (CSDS) model is a kind of depression-like state in experimental animals caused by physiological and psychological stress. And it is further evaluated by traditional indexes of depressive state and social interaction ratio. CSDS model can better simulate the depressive behavior caused by excessive social pressure, frequent defeat, or being long-term bullied in human daily communication activities. Meanwhile, the effect of drugs on improvement of depression and social function can also be evaluated in animal-level studies by using this model. In this paper, establishment methods, evaluation indexes, and application of the model in the study on antidepressant effect of traditional Chinese medicine are reviewed, in order to provide important support for the study of pathological mechanism of depression as well as research and mechanism of action of antidepressant drugs.

social defeated depression; chronic social defeat stress depression model; social interaction index; psychological stress; social function

R285.51

A

0253 - 2670(2022)01 - 0288 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.01.033

2021-08-09

國(guó)家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)（2017ZX09301047）；國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（82074147）；山西省科技廳重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（201903D321210）；地產(chǎn)中藥功效物質(zhì)研究與利用山西省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（202105D121009）

王 琦（1995—），女，博士研究生，研究方向?yàn)橹兴幩幚碜饔脵C(jī)制研究。E-mail: wangqi70942@163.com

田俊生，副教授，博士，研究方向?yàn)橹兴幩幚砼c新藥研發(fā)。Tel: (0351)7019297 E-mail: jstian@sxu.edu.cn

秦雪梅，教授，博士，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)控、評(píng)價(jià)與代謝組學(xué)。Tel: (0351)7018379 E-mail: qinxm@sxu.edu.cn

[責(zé)任編輯 崔艷麗]