張遠(yuǎn),杜文燕,吳建軍,蔡亦紅
1.安徽醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院衛(wèi)生檢驗(yàn)與檢疫學(xué)系,安徽 合肥 230032;2.安徽醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室; 3.安徽醫(yī)科大學(xué)人畜共患病安徽高校省級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;4.安徽省疾病預(yù)防控制中心
艾滋病(AIDS)又名獲得性免疫缺陷綜合征,是一種由人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一種慢性傳染病。艾滋病嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康,截至2019年全球約有7 000萬(wàn)人感染HIV,近3 000萬(wàn)人因感染死亡,我國(guó)存活HIV/AIDS患者人數(shù)約為125萬(wàn)[1]。
弓形蟲(chóng)是一種機(jī)會(huì)性致病原蟲(chóng),寄生于人和溫血?jiǎng)游锏挠泻思?xì)胞內(nèi)。在免疫功能健全者體內(nèi)弓形蟲(chóng)感染一般不引起明顯癥狀或僅引起輕度自限性疾病,但在器官移植、免疫缺陷患者體內(nèi)嚴(yán)重時(shí)可致死亡。HIV感染者不僅易感染弓形蟲(chóng),其體內(nèi)潛在感染的弓形蟲(chóng)蟲(chóng)體也會(huì)被激活。HIV感染者中弓形蟲(chóng)腦病較常見(jiàn),在HIV感染期間,潛在弓形蟲(chóng)感染者中有20%~47%發(fā)展為弓形蟲(chóng)腦病[2],且疾病進(jìn)展較快,治療效果差,死亡率高。
報(bào)道顯示,HIV/AIDS患者中弓形蟲(chóng)感染率可高達(dá)35.8%,其中亞洲太平洋地區(qū)感染率為25.1 %[3]。1999—2017年,江蘇、浙江、安徽、福建、江西、廣東等13個(gè)省份零星報(bào)道了HIV/AIDS患者弓形蟲(chóng)感染情況,各省份感染率為2.09%~32.90%,其中安徽省HIV/AIDS患者弓形蟲(chóng)感染率為2.09%,處于較低水平[4]。但近年來(lái)安徽省缺乏系統(tǒng)全面的HIV/AIDS患者弓形蟲(chóng)感染情況調(diào)查。阜陽(yáng)市位于安徽省西北部,是安徽省艾滋病疫情高發(fā)地區(qū)。本研究收集了安徽省阜陽(yáng)市2020年1月至2021年3月新報(bào)告且未經(jīng)治療HIV/AIDS患者的全血和血清樣本,調(diào)查其弓形蟲(chóng)感染狀況,同時(shí)觀察HIV/AIDS合并弓形蟲(chóng)感染患者體內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞水平,從而為HIV/AIDS患者弓形蟲(chóng)病防控提供參考依據(jù)。
1.1材料來(lái)源 收集安徽省阜陽(yáng)市2020年1月至2021年3月新報(bào)告且未經(jīng)治療的HIV/AIDS患者的全血和血清樣本,所有樣本均經(jīng)安徽省疾病預(yù)防控制中心免疫印跡試驗(yàn)確證HIV病毒陽(yáng)性。
1.2方法
1.2.1弓形蟲(chóng)感染情況檢測(cè) 用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)(購(gòu)自北京貝爾生物生物工程股份有限公司)進(jìn)行血清樣本弓形蟲(chóng)IgG抗體檢測(cè)。
1.2.2CD4+T淋巴細(xì)胞水平檢測(cè) 分離外周靜脈血中外周血單核細(xì)胞(Peripheral blood mononudear cell,PBMC),調(diào)整細(xì)胞數(shù)至1×106個(gè)/mL,取100 μL細(xì)胞懸液至流式檢測(cè)管中,加入CD4-PE抗體20 μL,混勻,并設(shè)陰性對(duì)照組。室溫避光孵育20 min,加入2 mL PBS洗液重懸細(xì)胞,離心半徑8.5 cm,1 000 r/min離心5 min,棄上清,加入0.5 mL PBS洗液重懸細(xì)胞,流式上機(jī)檢測(cè)。
1.2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 23.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),服從正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示;不服從正態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)(四分位間距)表示,組間比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
1.3倫理學(xué)聲明 本研究經(jīng)過(guò)安徽醫(yī)科大學(xué)生物倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)(許可證號(hào):2019006),所有患者均已簽署知情同意書(shū),符合醫(yī)學(xué)倫理規(guī)定。
2.1HIV/AIDS患者基本情況 2020年1月至2021年3月,安徽省阜陽(yáng)市新報(bào)告且未經(jīng)治療的HIV/AIDS患者共449例。其中,男性348例,女性75例,26例性別不詳;年齡以20~60歲為主,年齡為21~40歲和41~60歲的人群分別占31.6%(142/449)和31.8%(143/449);婚姻狀況以已婚為主,占41.0%(184/449);文化程度以初中及以下為主,見(jiàn)表1。對(duì)感染途徑進(jìn)行分析,449例患者中異性性傳播254例,占56.6%;同性性傳播167例,占37.2%;血液傳播和母嬰傳播各1例,均占0.2%;其他傳播途徑26例,占5.8%。
表1 阜陽(yáng)市HIV/AIDs患者基本情況
2.2弓形蟲(chóng)IgG抗體檢測(cè)結(jié)果 共檢測(cè)449例HIV/AIDS患者血清,弓形蟲(chóng)IgG抗體陰性444例,陽(yáng)性5例,陽(yáng)性率為1.11%。
2.3CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果 449例HIV/AIDS患者中413例接受了CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè),最低為1個(gè)/μL,最高為1 616個(gè)/μL,中位數(shù)(四分位間距)為286(169,439)個(gè)/μL。444例弓形蟲(chóng)IgG抗體陰性的HIV/AIDS患者有409例接受了CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè),CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)最低為1個(gè)/μL,最高為1 616個(gè)/μL,中位數(shù)(四分位間距)為287(170,439)個(gè)/μL;5例弓形蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性的HIV/AIDS患者有4例接受了CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè),CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)最低為43個(gè)/μL,最高為325個(gè)/μL,中位數(shù)(四分位間距)為139(86,237)個(gè)/μL。弓形蟲(chóng)IgG抗體陰性和陽(yáng)性的HIV/AIDS患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.749,P>0.05 )。在4例進(jìn)行CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)的弓形蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性者中,CD4+T淋巴細(xì)胞<200個(gè)/μL的有3例,占75%。
弓形蟲(chóng)感染在全球廣泛存在,孕婦感染弓形蟲(chóng)可導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的發(fā)生,且有40%左右可經(jīng)胎盤(pán)垂直傳播[5],弓形蟲(chóng)感染與育齡期婦女不孕不育也有一定關(guān)系,不孕不育的育齡期婦女弓形蟲(chóng)抗體IgM檢出率高于正常妊娠者[6]。弓形蟲(chóng)感染對(duì)患者中樞神經(jīng)系統(tǒng)有著多方面的影響,對(duì)患者精神癥狀、行為認(rèn)知等也會(huì)產(chǎn)生影響[7]。艾滋病患者感染弓形蟲(chóng)后約有25%~37%可發(fā)展為弓形蟲(chóng)腦炎[8],其臨床癥狀復(fù)雜、確診困難、致死率高,是艾滋病患者常見(jiàn)的致死病因之一[9]。
截至2019年10月底,全國(guó)報(bào)告存活HIV/AIDS人數(shù)約為95.8萬(wàn),2019年1—10月新報(bào)告?zhèn)魅菊咧?異性性傳播占73.7%,男男同性性傳播占23.0%,性傳播是主要的傳播方式[10]。本研究中449例艾滋病患者中傳播途徑為異性性傳播占56.6%,同性性傳播占37.2%,性傳播同樣是主要的傳播方式。同時(shí),本研究結(jié)果表明艾滋病患者以男性為主,年齡以20~60歲為主,婚姻狀況以已婚為主,不同文化程度均有??傮w來(lái)說(shuō),阜陽(yáng)市艾滋病疫情分布不平衡,波及范圍廣泛,影響因素復(fù)雜多樣,防治形勢(shì)仍然嚴(yán)峻,防治任務(wù)更加艱巨,仍需加強(qiáng)艾滋病防治。
本研究發(fā)現(xiàn),阜陽(yáng)市HIV/AIDS患者弓形蟲(chóng)感染率為1.11%,低于安徽省HIV/AIDS患者弓形蟲(chóng)感染率(2.09%)[3],遠(yuǎn)低于蕪湖市調(diào)查結(jié)果[11]。究其原因,可能與阜陽(yáng)地區(qū)居民飲食習(xí)慣(如不喜食生肉等)有關(guān),也可能與一部分感染弓形蟲(chóng)的HIV/AIDS患者因?yàn)椴∏檩^嚴(yán)重已經(jīng)死亡有關(guān)。弓形蟲(chóng)感染與機(jī)體免疫水平有關(guān),有報(bào)道顯示,CD4+T淋巴細(xì)胞低于200個(gè)/μL的人群,其弓形蟲(chóng)發(fā)病率較高[12-13]。本研究中弓形蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性的HIV/AIDS患者CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)為139(86,237)個(gè)/μL,75%的患者CD4+T淋巴細(xì)胞低于200個(gè)/μL,但與弓形蟲(chóng)IgG抗體陰性的HIV/AIDS患者相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這可能是由于此次收集的樣本來(lái)自早期HIV/AIDS患者,CD4+T淋巴細(xì)胞水平較高,也可能是由于弓形蟲(chóng)IgG抗體陽(yáng)性的HIV/AIDS患者樣本量太小。因此,有關(guān)CD4+T淋巴細(xì)胞水平在HIV/AIDS患者合并弓形蟲(chóng)感染中的意義仍需進(jìn)一步研究。