血清IL-37、MMP-8水平與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征的相關(guān)性分析

魏慧娜

（鄭州市第二人民醫(yī)院 消化內(nèi)科，河南 鄭州 450015）

結(jié)直腸癌（colorectal cancer,CRC）作為消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，發(fā)病率與病死率僅次于胃癌、食管癌及肝癌，且流行病學(xué)調(diào)查顯示，近年來CRC 發(fā)生率逐年升高［1］。CRC 患者因腫瘤局限在腸壁，多數(shù)預(yù)后較好，但部分CRC 患者就診時腫瘤已浸潤至腸外，有較高的預(yù)后不良風(fēng)險。據(jù)報道，TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等與CRC 患者的預(yù)后息息相關(guān)［2］。因此，積極探尋與CRC 患者臨床病理特征相關(guān)的指標(biāo)尤為必要。癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA）是臨床評估CRC患者病理特征及預(yù)后的常用標(biāo)志物，具有較高敏感性，但有研究指出，CEA 容易受到炎癥或其他指標(biāo)影響，其穩(wěn)定性不佳、應(yīng)用有限［3］。

研究發(fā)現(xiàn)，CRC 的發(fā)展與免疫平衡紊亂有關(guān)，其中促炎-抑炎因子失衡可能會促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移等［4］。白細(xì)胞介素-37（interleukin-37,IL-37）是抗炎家族新成員。研究指出，該因子具有阻滯腫瘤細(xì)胞增殖、抑制新血管生成等作用［5］。基質(zhì)金屬蛋白酶-8（matrix metalloproteinase-8,MMP-8）是一種細(xì)胞降解基質(zhì)，可降解多種細(xì)胞外基質(zhì)，損傷腫瘤細(xì)胞侵襲組織屏障，促進(jìn)腫瘤侵襲［6］。IL-37、MMP-8 可能與CRC 患者臨床病理特征有關(guān)，但目前相關(guān)研究較少。本研究通過觀察CRC 患者血清IL-37、MMP-8 表達(dá)，旨在分析患者血清IL-37、MMP-8 表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年7 月至2020 年4 月鄭州市第二人民醫(yī)院收治93 例CRC 患者作為研究對象。其中，男性57 例，女性36 例；年齡41～67 歲，平均（54.36±3.34）歲；腫瘤位置：直腸45 例，乙狀結(jié)腸26 例，盲腸17 例，其他5 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①CRC 符合《中國結(jié)直腸癌診療規(guī)范（2017 年版）》［7］中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)腸鏡活檢組織學(xué)病理檢查確診；②均首次接受治療；③均接受手術(shù)為主的綜合治療方案，且患者預(yù)計(jì)生存期≥3 個月；④精神正常，可配合研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并胃癌、肝癌等其他惡性腫瘤；②合并心肌炎、腎衰竭等重要臟器疾?。虎酆喜⒏腥拘苑窝住⒁倚透窝椎雀腥拘约膊。虎芗韧蟹呕熤委熓?；⑤合并免疫系統(tǒng)疾病。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者及其家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 臨床病理特征評估方法 結(jié)合影像學(xué)檢查、活檢組織學(xué)病理檢查等結(jié)果評估CRC 患者臨床病理特征，特征包括腫瘤直徑（＞5 cm、≤5 cm）、TNM 分期［8］（Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期）、腫瘤分化程度［9］（高分化、低分化）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移［10］［經(jīng)CT、MRI 等影像學(xué)檢查提示可見區(qū)域淋巴結(jié)腫大（單個淋巴結(jié)短徑≥8 mm 或有≥3 個直徑＜8 mm 淋巴結(jié)聚集）］等。

1.2.2 血清IL-37、MMP-8 水平檢測方法 于患者入院第2 天取其空腹肘部靜脈血5 mL，采用低速離心機(jī)（廣州吉迪儀器有限公司，型號：JIDI-18RH）以4 000 r/min 轉(zhuǎn)速離心10 min。采集血清用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法測定IL-37、MMP-8 水平，檢測試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司，檢驗(yàn)流程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)軟件。全部計(jì)量資料均經(jīng)Shapiro-Wilk 正態(tài)性檢驗(yàn)，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較用單因素方差分析，偏態(tài)分布的計(jì)量資料用四分位數(shù)間距［M（P25,P75）］表示，組間比較用Mann-WhitneyU檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示；繪制受試者工作曲線（ROC），并計(jì)算曲線下面積（AUC），以檢驗(yàn)血清IL-37、MMP-8 預(yù)測CRC 患者不同臨床病理特征風(fēng)險的價值：AUC 值＞0.90 表示預(yù)測性能較高，0.71～0.90 表示有一定預(yù)測性能，0.50～0.70表示預(yù)測性能較差；P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 93 例CRC 患者臨床病理特征分析

93 例CRC 患者臨床病理特征見表1。

表1 93 例CRC 患者臨床病理特征分析

2.2 不同臨床病理特征CRC 患者血清IL-37、MMP-8 水平比較

TNM 分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CRC 患者血清IL-37 水平低于TNM 分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，而MMP-8 水平高于TNM 分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。其他不同臨床病理特征CRC 患者IL-37、MMP-8水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2、表3。

表2 不同臨床病理特征CRC 患者血清IL-37 水平比較

表3 不同臨床病理特征CRC 患者血清MMP-8水平比較

2.3 血清IL-37、MMP-8 預(yù)測CRC 患者TNM 高分期風(fēng)險價值分析

繪制ROC 曲線（見圖1）發(fā)現(xiàn)，當(dāng)血清IL-37、MMP-8 Cut-off 值分別取43.385 pg/mL、70.255 ng/mL時，兩者單一及聯(lián)合預(yù)測CRC 患者TNM 高分期風(fēng)險的AUC 分別為0.865、0.871、0.935，均有一定預(yù)測價值。見表4。

表4 血清IL-37、MMP-8 預(yù)測CRC 患者TNM 高分期風(fēng)險價值分析參數(shù)

圖1 血清IL-37、MMP-8 預(yù)測CRC 患者TNM 高分期風(fēng)險的ROC 曲線

2.4 血清IL-37、MMP-8 預(yù)測CRC 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險價值分析

繪制ROC 曲線（見圖2）發(fā)現(xiàn)，當(dāng)血清IL-37、MMP-8 Cut-off 值分別取40.750 pg/mL、71.265 ng/mL時，兩者單一及聯(lián)合預(yù)測CRC 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險的AUC 分別為0.854、0.792、0.929，均有一定預(yù)測價值。見表5。

圖2 血清IL-37、MMP-8 預(yù)測CRC 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險的ROC 曲線

表5 血清IL-37、MMP-8 預(yù)測CRC 患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險價值分析參數(shù)

3 討論

目前CRC 的篩查與治療雖有一定進(jìn)步，但患者5 年生存率仍較低，且約有36%晚期CRC 患者經(jīng)治療后5 年內(nèi)可能出現(xiàn)復(fù)發(fā)，預(yù)后情況并不理想［11］。相關(guān)研究顯示，TNM 分期、腫瘤浸潤深度等均是CRC 患者預(yù)后的影響因素［12］。因此明確CRC 患者臨床病理特征，對指導(dǎo)臨床干預(yù)尤為必要。

既往臨床評估CRC 患者臨床病理特征多依賴病理組織學(xué)檢查、影像學(xué)檢查等，該類方式雖可明確患者病變情況、指導(dǎo)臨床干預(yù)，但無法預(yù)測TNM 高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等風(fēng)險，應(yīng)用存有局限［13］。隨著細(xì)胞分子學(xué)的發(fā)展，研究顯示，多種血清指標(biāo)與CRC 患者臨床病理特征均存在一定關(guān)系，可為臨床早期干預(yù)提供參考［14］。IL-37 是白細(xì)胞介素-1 抗炎家族一員，具有抑制炎癥介質(zhì)生成作用，研究指出，IL-37 表達(dá)情況與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)［15］。相關(guān)研究表明，IL-37 可抑制腫瘤細(xì)胞增殖，遏制腫瘤進(jìn)展［16］。另有報道顯示，IL-37 與肺癌患者血管內(nèi)皮生長因子、微血管密度有關(guān)，且其IL-37 可抑制肺癌A549 細(xì)胞生長，阻止上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化，且可阻滯新血管生成［17］。結(jié)合上述研究發(fā)現(xiàn)，IL-37 抑制腫瘤細(xì)胞增殖機(jī)制，推測IL-37 可能與CRC 患者臨床病理特征有一定關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，TNM 分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CRC 患者血清IL-37 水平低于TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，初步說明IL-37表達(dá)降低提示CRC 患者TNM 分期高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高風(fēng)險；進(jìn)一步繪制ROC 曲線發(fā)現(xiàn)，IL-37預(yù)測CRC 患者TNM 分期高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險均有理想的價值。當(dāng)IL-37 Cut-off 值分別取43.385、40.750 pg/mL，可獲得最佳預(yù)測價值，且隨著IL-37 水平降低，TNM 分期高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險增加。分析原因在于CRC 患者血清IL-37表達(dá)降低減弱對腫瘤細(xì)胞增殖、新血管生成有抑制作用，且可能會影響白細(xì)胞介素-6/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）炎癥信號通路，從而促進(jìn)炎癥因子釋放，推進(jìn)疾病進(jìn)展［18］。

MMP 是Zn2+依賴性蛋白酶家族的一員，具有降解細(xì)胞外基質(zhì)作用，研究發(fā)現(xiàn)，MMP 表達(dá)與卵巢癌、胃癌等多種惡性腫瘤的發(fā)生均有關(guān)，且MMP 調(diào)控血管生成可能對腫瘤細(xì)胞新血管生成有促進(jìn)作用［19］。MMP-8 是MMP 家族的一員，細(xì)胞降解作用與MMP 家族成員基本相同，劉小野等［20］研究顯示，MMP-8 表達(dá)顯著高于對照組，且MMP-8表達(dá)增加可能會增加腫瘤轉(zhuǎn)移風(fēng)險。結(jié)合上述研究猜測，MMP-8 表達(dá)可能與CRC 患者臨床病理特征存在一定關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，TNM 分期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移CRC 患者血清MMP-8 水平高于TNM 分期Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，初步說明MMP-8 與CRC 患者臨床病理特征有關(guān)；進(jìn)一步繪制ROC 曲線發(fā)現(xiàn)，MMP-8 預(yù)測CRC 患者TNM 分期高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險均有理想的價值，當(dāng)MMP-8 Cut-off 值分別取70.255、71.265 ng/mL時，可獲得最佳預(yù)測價值，且隨著MMP-8 水平升高，TNM 分期高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險增加。分析原因在于在腫瘤細(xì)胞侵襲過程中，MMP-8 表達(dá)增加可能會降解細(xì)胞基質(zhì)屏障，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞入侵淋巴管，導(dǎo)致腫瘤出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；同時可能會造成腫瘤進(jìn)一步浸潤，推進(jìn)疾病進(jìn)展［21］。此外有研究指出，腫瘤分化程度也是CRC 患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素［22］，但本研究發(fā)現(xiàn)低分化、高分化患者血清IL-37、MMP-8 表達(dá)比較無差異，這一結(jié)果可能與研究納入樣本量少、腫瘤低分化率低有關(guān)，因而未來需要進(jìn)一步增加樣本量進(jìn)行研究加以驗(yàn)證。

綜上所述，CRC 患者TNM 高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能與血清IL-37 低表達(dá)、MMP-8 過表達(dá)有關(guān)，考慮未來可檢測患者入院時血清IL-37、MMP-8 水平，輔助評估TNM 高分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險，可能對臨床擬定的治療方案具有參考意義。