凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞生長性能及消化酶活性的影響

白 實(shí) 何洪丹

（1.敦化市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，吉林 敦化 133700；2.敦化市江南鎮(zhèn)綜合服務(wù)中心畜牧獸醫(yī)站，吉林 敦化 133700）

目前，養(yǎng)殖行業(yè)對(duì)抗生素的使用要求越來越嚴(yán)格，食用動(dòng)物禁止使用抗生素。鑒于此，抗生素替代品的研究受到人們的高度重視。凝結(jié)芽孢桿菌作為兼性厭氧菌，能在腸道低氧環(huán)境下生長，耐酸耐高溫，有維持腸道內(nèi)菌群平衡的功能，且能夠促進(jìn)營養(yǎng)物消化吸收，減少腹瀉、嘔吐，增強(qiáng)食欲。另外，凝結(jié)芽孢桿菌的代謝過程可以產(chǎn)生乳酸，降低動(dòng)物腸道pH值［1］。在飼料中添加芽孢桿菌制劑雖然可以減少抗生素的使用，但益生菌在畜禽飼養(yǎng)方面的效果不及抗生素。對(duì)此，筆者探究凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)發(fā)酵床飼養(yǎng)肉雞的生長性能、肌肉品質(zhì)及消化酶活性的作用，為減少抗生素使用并提高凝結(jié)芽孢桿菌使用價(jià)值提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)材料與試驗(yàn)動(dòng)物。試驗(yàn)用的凝結(jié)芽孢桿菌為粉制劑，含活菌總數(shù)≥5.0×108CFU/g，由吉林省沃泰生物技術(shù)股份有限公司提供；試驗(yàn)動(dòng)物為1日齡健康817肉仔雞180只，購買自吉林省慶豐珍禽養(yǎng)殖孵化場，養(yǎng)殖于吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院畜禽試驗(yàn)基地。

1.1.2 主要試劑。中性蛋白酶、淀粉酶試劑盒、考馬斯亮藍(lán)G-250顯色法蛋白含量檢測試劑盒均購自吉林吉爾藥業(yè)有限公司。百里香粉植物精油購自安徽海華科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)于2021 年3 月開始，整個(gè)過程為42 d。選擇試驗(yàn)對(duì)象為180 只1 日齡817 肉雞，隨機(jī)將這些肉雞分為3個(gè)不同的試驗(yàn)組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12只?？瞻讓?duì)照為I組，飼喂普通日糧；抗生素對(duì)照組為Ⅱ組，飼喂基礎(chǔ)日糧+50 mg/kg 土霉素、30 mg/kg 鏈霉素、20 mg/kg青霉素；試驗(yàn)組為Ⅲ組，飼喂基礎(chǔ)日糧+300 mg/kg凝結(jié)芽孢桿菌制劑。

1.3 檢測指標(biāo)

1.3.1 生長性能測定。將各重復(fù)作為依據(jù)，對(duì)每日供料量、余料量進(jìn)行準(zhǔn)確檢測，并根據(jù)檢測結(jié)果，對(duì)日均采食量進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)算。在計(jì)算日均增質(zhì)量和料重比時(shí)，需要以期初、期末體質(zhì)量的測定結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)。于第28 d及第42 d 07:00 在每個(gè)重復(fù)組中隨機(jī)抓取3 只肉雞進(jìn)行空腹稱質(zhì)量，稱質(zhì)量前至少斷料8 h、斷水2 h，將各重復(fù)組雞稱活質(zhì)量后屠宰，宰殺后再稱一次屠體質(zhì)量，進(jìn)而計(jì)算屠宰率，肉雞放血后進(jìn)行解剖，需要稱量全凈膛質(zhì)量、半凈膛質(zhì)量、胸肌率、腿肌率等［2-4］。

1.3.2 肌肉品質(zhì)測定。①嫩度：規(guī)定測量每只肉雞的胸肌，用肌肉嫩度儀測定肌肉嫩度，嫩度常采用剪切力值測定［2］。該試驗(yàn)規(guī)定測定時(shí)切刀與肉樣纖維方向垂直，最大值即為剪切值，單位kg，剪切力值的大小代表嫩度的高低，剪切力值越小，嫩度越高，品質(zhì)越好。②脂肪、蛋白含量：稱取5 g胸肌和5 g腿肌混合，用組織搗碎機(jī)搗碎，在檢測腿部肌肉蛋白和胸部肌肉蛋白含量的過程中，所使用的方法為考馬斯亮藍(lán)G-250顯色法。在檢測脂肪含量時(shí)，所采取的方法為氯仿-甲醇提取法。③失水率：測定肌肉失水率，取腿肌和胸肌鮮樣各10 g（M1），使用質(zhì)構(gòu)儀，啟動(dòng)測試程序，測試完成后用天平稱取肉樣質(zhì)量（M2），數(shù)據(jù)自動(dòng)上傳至TA1系統(tǒng)。失水率=（M1-M2）/M1×100%。

1.3.3 消化酶活性測定。于第28 d 和第42 d，在每個(gè)大組中5 個(gè)重復(fù)組中隨機(jī)抽取4 只，舌后靜脈放血致死。采集其空腸（卵黃囊憩室前約2 cm處）及回腸中間部分內(nèi)容物于采樣袋中編號(hào)，迅速置于保冷箱中，-30 ℃保存帶回實(shí)驗(yàn)室。按照中性蛋白酶檢測試劑盒和淀粉酶檢測試劑盒的說明書及操作步驟，分別檢測空腸及回腸內(nèi)中性蛋白酶和淀粉酶活性。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用Excel 2010 進(jìn)行整理，采用GraphPad Prism 8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，結(jié)果用（Mean±SEM）表示。P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞生長性能的影響

由表1 可知，試驗(yàn)組的肉雞死亡率在8~28 日齡這一階段為6.6%，日均采食量和料重比均低于對(duì)照Ⅰ組。隨著日齡的增加，該組肉雞的死亡率也在逐漸下降，后期沒有死亡，后期的日均增重比大幅度增加，日均采食量稍高于對(duì)照Ⅰ組，料重比下降幅度為5.9%。

表1 飼喂凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞生長性能的影響

對(duì)照Ⅱ組在8~28 日齡這一階段，與空白對(duì)照組相比，肉雞死亡率也在降低，相較于對(duì)照組，日均增重增加8.3%，日均采食量低5.7%，料重比低7.5%。在29~42 日齡這個(gè)階段，對(duì)照Ⅱ組肉雞死亡率為1.7%，日均增重比高于對(duì)照Ⅰ組11%，平均日采食量比對(duì)照Ⅰ組高0.03%，料重比降低約9.21%。

從表2中可見，相較于空白組，在日糧中添加百里香酚植物精油的試驗(yàn)組屠宰率、胸肌率、腿肌率均有所提高，其增幅分別為4.8%、2.3%和1.5%。與空白對(duì)照組相比，將凝結(jié)芽孢桿菌加入日料中的試驗(yàn)組上述指標(biāo)同樣有所提升，其增幅分別為4.5%、2.2%和1.3%。相較于上述指標(biāo)，全凈膛率和半凈膛率的變化并不明顯，但有一定的提高趨勢。

表2 飼喂凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞屠宰性能的影響

2.2 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞肌肉品質(zhì)的影響

由表3可知，凝結(jié)芽孢桿菌組飼喂的肉雞的失水率、嫩度、蛋白含量等常規(guī)肉質(zhì)指標(biāo)與百里香酚植物精油對(duì)照組和基礎(chǔ)日糧對(duì)照組未出現(xiàn)顯著差異，但凝結(jié)芽孢桿菌組飼喂的肉雞的胸肌脂肪含量在一定程度上優(yōu)于常規(guī)日糧飼養(yǎng)模式。

表3 飼喂凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞肌肉品質(zhì)的影響

2.3 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞消化酶活性的影響

由表4 和表5 可見凝結(jié)芽孢桿菌制劑對(duì)肉雞腸道消化酶活性的影響。在8~28 d階段，試驗(yàn)組的空腸和回腸淀粉酶活性以及29~42 d試驗(yàn)組的空腸和回腸中性蛋白酶活性顯著高于基礎(chǔ)日糧對(duì)照組（P＜0.05），其余均無顯著性差異（P＞0.05），與抗生素對(duì)照組相比沒有顯著差異。

表4 空腸消化酶活性

表5 回腸消化酶活性

3 分析與討論

3.1 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞生長性能的影響

試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，要想降低料重比，可通過在普通日料中添加凝結(jié)芽孢桿菌的方式實(shí)現(xiàn)，平均日增質(zhì)量也有所提升，并且明顯降低了1~28日齡肉仔雞的死亡率。趙娜等在22~42日齡肉雞的日糧中添加3×105CFU/g凝結(jié)芽孢桿菌，提高了肉雞日均采食量和日增質(zhì)量［3］，也證明了此觀點(diǎn)。周洪彬、張文靜等研究表明，植物精油可以提高肉仔雞生長性能，可以提高肉仔雞均日增質(zhì)量［4-5］。該試驗(yàn)在對(duì)比過程中也有證明，飼喂植物精油對(duì)肉雞的影響與飼喂凝結(jié)芽孢桿菌的肉雞長速差異不大。綜上所述，在日糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌制劑，不僅可以達(dá)到與植物精油相似的生長效果，而且成本較低。

3.2 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞肌肉品質(zhì)的影響

屠宰率和全凈膛率要達(dá)到80%和60%以上，才能滿足肉用性能標(biāo)準(zhǔn)。究其原因，主要是凝結(jié)芽孢桿菌的添加，有助于肉雞生長性能的增強(qiáng)。張日?。?］和周映華等［7］有相關(guān)證明。在第1 次屠宰后，試驗(yàn)組肉雞體質(zhì)量比空白對(duì)照組體質(zhì)量高30 g 左右，第2 次屠宰后試驗(yàn)組肉雞比空白對(duì)照組肉雞體質(zhì)量增高更多。經(jīng)分析，原因可能是28~42 日齡肉雞骨架已經(jīng)基本定型，這階段開始以增肉為主，所以胸肌質(zhì)量和腿肌質(zhì)量相對(duì)較高。因此，筆者認(rèn)為該試驗(yàn)的屠宰性能提高與凝結(jié)芽孢桿菌相關(guān)，這與Zhou等［8］的報(bào)道一致。

對(duì)于肌肉嫩度、失水率、蛋白及脂肪含量的測定結(jié)果表明，試驗(yàn)組28~42日齡的肉雞胸肌、腿肌脂肪高于空白對(duì)照組，與植物精油對(duì)照組差異不明顯，但植物精油對(duì)照組的肉雞羽毛鮮亮順滑，屠宰后毛細(xì)血管相對(duì)更加清晰，呼吸系統(tǒng)、喉管氣管等都很干凈，沒有黏液、漿液，氣管沒有“咕?！币?。嫩度、失水率、蛋白含量沒有顯著差異，但是有一定上升趨勢。1~28日齡肉雞肌肉品質(zhì)的各項(xiàng)測定指標(biāo)無明顯變化。

3.3 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)肉雞腸道消化酶活性的影響

消化酶是維持機(jī)體代謝重要活性物質(zhì)，主要由消化腺分泌。消化酶包含淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶。當(dāng)畜禽體內(nèi)消化酶不足時(shí)，易出現(xiàn)腹脹、腹瀉、食欲不振、體質(zhì)量減輕等癥狀，此前已經(jīng)有試驗(yàn)將以上結(jié)論予以證明［9］。此外，需要外源性的補(bǔ)充消化酶，從而幫助消化道消化吸收食物，滿足畜禽的營養(yǎng)需求。

Wang 等研究表明，飼糧中添加 2×106cfu/g 凝結(jié)芽孢桿菌顯著提高了肉雞十二指腸食糜中淀粉酶活性［10］。湯江武等研究顯示，飼喂凝結(jié)芽孢桿菌72 h后，僅有十二指腸中的蛋白酶活性高于對(duì)照組，其他酶活性較對(duì)照組都沒有差異［11］。從該試驗(yàn)結(jié)果來看，基礎(chǔ)日糧配合300 mg/kg凝結(jié)芽孢桿菌使空腸淀粉酶活性在28日齡提高57%，回腸中性蛋白酶活性在42日齡提高31%。這可能是因?yàn)槟Y(jié)芽孢桿菌是乳酸菌，在腸道內(nèi)產(chǎn)生乳酸，降低腸道pH值，為消化酶提供適宜環(huán)境?；啬c中酶的活性普遍沒有空腸中酶的活性高，原因可能是小腸不同部位的pH值不同，越靠近尾端pH 值越高，不利于凝結(jié)芽孢桿菌產(chǎn)生活性。李曉東等研究表明，添加植物精油提高了腸道淀粉酶和蛋白酶活性，以添加100 mg/kg 和200 mg/kg 效果最為顯著［12］。結(jié)合該試驗(yàn)結(jié)果推測，飼喂300 mg/kg百里香酚植物精油，肉雞的消化酶活性沒有凝結(jié)芽孢桿菌試驗(yàn)組高，可能是過量精油會(huì)產(chǎn)生抑制作用。