四環(huán)三萜化合物在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的研究進(jìn)展

楊素梅，梅佳輝，姜 睿，楊曦亮,2,3*

1武漢科技大學(xué) 醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系；2武漢科技大學(xué)感染免疫與腫瘤微環(huán)境研究所；3職業(yè)危害識(shí)別與控制湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430081

四環(huán)三萜化合物是植物界中具有多種生物活性的一類重要次生代謝產(chǎn)物，多以游離或成苷的形式存在于自然界中。神經(jīng)系統(tǒng)是機(jī)體內(nèi)具有調(diào)節(jié)功能的主導(dǎo)系統(tǒng)，其一旦受損則不可逆。由于全球人口老齡化加劇，老年癡呆、帕金森病、腦卒中、癲癇等神經(jīng)系統(tǒng)疾病對人類健康的危害日益加重，且發(fā)病率呈上升和年輕化趨勢，病毒攻擊及其他疾病亦會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)損傷[1,2]。天然藥物不良反應(yīng)小且效果顯著，在神經(jīng)系統(tǒng)疾病領(lǐng)域的研究和開發(fā)已經(jīng)受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。但目前鮮有具有神經(jīng)活性的四環(huán)三萜的綜述報(bào)道。本文從結(jié)構(gòu)類型、植物來源、神經(jīng)藥理活性和構(gòu)效關(guān)系等方面，對近五年來具有神經(jīng)活性的四環(huán)三萜化合物進(jìn)行綜述，為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的藥物研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)和參考。

1 四環(huán)三萜化合物的分類

從結(jié)構(gòu)特點(diǎn)來看，主要分為三大類：達(dá)瑪烷型(1～19)、羊毛脂烷型(20～29)和環(huán)阿屯烷型(30～37)，詳細(xì)見表1和圖1，本文綜述具有神經(jīng)藥理活性的四環(huán)三萜化合物37個(gè)，詳述如下。

1.1 達(dá)瑪烷型

在具有神經(jīng)活性的四環(huán)三萜中，達(dá)瑪烷型的植物來源最廣泛，主要源自五加科，例如我國人參、三七、西洋參等植物，主要活性成分是達(dá)瑪烷型[3]。具體參見化合物1～19(見表1)。

1.2 羊毛脂烷型

具有神經(jīng)活性的羊毛脂烷型大部分來自于多孔菌科赤芝的干燥子實(shí)體靈芝和茯苓的干燥菌核。研究表明，靈芝子實(shí)體的化學(xué)成分以羊毛脂烷型三萜為主，在神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療上的研究也較為集中，其主要成分為靈芝酸。具體參見化合物20～29(表1)。

1.3 環(huán)阿屯烷型

環(huán)阿屯烷型亦稱為環(huán)菠蘿蜜烷型，該類型的神經(jīng)活性成分存在于莎草科、豆科、毛茛科以及西番蓮科。豆科黃芪較早用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其目前的臨床制劑主要成分為黃芪甲苷。另外莎草科香附子具有抗抑郁作用，西番蓮科西番蓮具有減輕神經(jīng)毒性作用。具體活性成分參見化合物30～37(見表1)。

表1 具有神經(jīng)系統(tǒng)活性的四環(huán)三萜化合物

續(xù)表1(Continued Tab.1)

2 四環(huán)三萜化合物的神經(jīng)活性

2.1 治療神經(jīng)退行性疾病

神經(jīng)退行性疾病的特征之一是大腦特定區(qū)域的神經(jīng)元進(jìn)行性和永久性喪失，主要包括阿爾茨海默癥(AD)、帕金森病(PD)、亨廷頓病(HD)、血管性癡呆(VD)等。四環(huán)三萜化合物是治療退行性疾病的潛在天然藥物，其主要通過抑制膽堿酯酶、拮抗Aβ的生成、抑制細(xì)胞凋亡、治療神經(jīng)炎癥等途徑發(fā)揮作用。

2.1.1 抑制膽堿酯酶

增強(qiáng)中樞膽堿能活性是改善認(rèn)知功能的治療方法之一，使用膽堿酯酶抑制劑可以提高腦乙酰膽堿水平。An等[44]用東莨菪堿誘發(fā)的小鼠記憶障礙模型發(fā)現(xiàn)1和5可通過抑制AChE升高大腦中乙酰膽堿水平，來改善記憶障礙。提示人參皂苷可能通過抑制AChE而增加腦膽堿能活性，從而逆轉(zhuǎn)認(rèn)知功能障礙。

圖1 具有神經(jīng)系統(tǒng)活性的四環(huán)三萜化合物Fig.1 Chemical constituents of tetracyclic triterpene compounds with neuroprotective activity

2.1.2 抗淀粉樣β蛋白作用

淀粉樣β蛋白(Aβ)作為老年斑的主要蛋白質(zhì)成分，是目前AD的治療靶標(biāo)之一。人參皂苷具有抗Aβ作用，2可通過顯著減輕Aβ25-35誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激和阻止海馬神經(jīng)元丟失等作用，保護(hù)Aβ25-35誘導(dǎo)的原代培養(yǎng)海馬神經(jīng)元[45]；10能明顯減少APP/PS1小鼠模型腦內(nèi)海馬DG區(qū)Aβ堆積[46]，11則通過減弱Aβ25-35誘導(dǎo)的乳酸脫氫酶釋放、細(xì)胞內(nèi)鈣濃度和活性氧水平的增加等系列反應(yīng)，提高細(xì)胞存活率[47]。此外，有研究報(bào)道7可改善APP/PS1小鼠和SAMP8小鼠的家族性、散發(fā)性AD模型認(rèn)知障礙，其機(jī)制可能是基于抑制淀粉樣前體蛋白(APP)的生成途徑，降低小鼠海馬和皮層BACE1的高表達(dá)從而減少Aβ聚集，減弱tau蛋白過度磷酸化[48,49]。

2.1.3 抗氧化應(yīng)激作用

四環(huán)三萜化合物通過拮抗活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、過氧化氫(H2O2)等氧化標(biāo)志物，提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)等抗氧化酶水平治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病。7可通過降低H2O2和MDA水平，提高SOD活性和谷胱甘肽(GSH)含量來緩解認(rèn)知水平輕度損傷[50]。9可通過抑制順鉑誘導(dǎo)的大鼠腦內(nèi)氧化應(yīng)激和神經(jīng)元丟失等方式有效改善順鉑引起的記憶障礙[51]。10上調(diào)APP/PS1小鼠海馬組織的SOD、GSH-Px、CAT活性，下調(diào)MDA水平發(fā)揮抗氧化作用，從而改善認(rèn)知功能障礙[46]。17可提高AD模型小鼠血清及腦組織內(nèi)抗氧化物酶活性改善AD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力[52]。Li等[53]通過研究19對脂多糖誘導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞C6的作用，發(fā)現(xiàn)其可以影響ROS、MDA、GSH及SOD活性發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用。Pan等[54]發(fā)現(xiàn)32通過治療神經(jīng)炎癥和減輕氧化應(yīng)激治療AD，抗氧化應(yīng)激方面通過32注射液能有效恢復(fù)SOD、GSH-Px和過CAT的活性，從而清除自由基，保護(hù)Aβ1-42所致的氧化損傷。

2.1.4 抗調(diào)亡作用

Yang等[55]研究發(fā)現(xiàn)，H2O2誘導(dǎo)的SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞調(diào)亡與JNK/Bcl-2/Bax信號(hào)通路有關(guān)，竹節(jié)參總皂苷通過上調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)，下調(diào)Bax表達(dá)，抑制JNK磷酸發(fā)揮抗凋亡作用，從而保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞。13有效抑制ASK1的磷酸化、JNK1的活化從而抑制線粒體凋亡作用，拮抗Aβ所致的神經(jīng)毒性，提示其可作為抗AD的潛在治療方式[56]。

2.1.5 抗炎癥作用

抑制促炎介質(zhì)和抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的神經(jīng)炎癥反應(yīng)都可以減輕或延緩神經(jīng)退行性疾病的惡化。Sheng等[57]采用體外的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)的斑馬魚和小鼠驗(yàn)證模型，研究發(fā)現(xiàn)28通過NF-κB途徑抑制脂多糖誘導(dǎo)的神經(jīng)炎癥。Jiao等[36]發(fā)現(xiàn)，29和27可以抑制BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞激活產(chǎn)生NO和炎癥反應(yīng)從而減輕神經(jīng)功能損害。此外，研究報(bào)道32明顯抑制Aβ1-42大鼠海馬區(qū)IL-1β及TNF-α、IL-1α和β-mRNA水平[54]，可以顯著降低LPS-AD小鼠腦內(nèi)海馬區(qū)IL-1β及TNF-α的含量，抑制小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥反應(yīng)改善AD小鼠學(xué)習(xí)記憶能力[58]。

2.1.6 抑制NMDA受體作用

海馬神經(jīng)元NMDA受體(NMDAR)作為突觸后受體可誘發(fā)興奮性突觸后電流，參與神經(jīng)元—膠質(zhì)細(xì)胞間信息通訊，并可產(chǎn)生興奮性神經(jīng)毒性作用，導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶障礙及AD等神經(jīng)退行性疾病。早期研究發(fā)現(xiàn)9、10和12及其主要代謝物的20(S)特異性異構(gòu)體可通過甘氨酸結(jié)合位點(diǎn)抑制NMDAR，而3可能通過與多胺結(jié)合位點(diǎn)的相互作用抑制受體，兩者作用效應(yīng)相似且具有疊加效應(yīng)[59]；近期該團(tuán)隊(duì)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)12的熱脫水產(chǎn)物1和5，對NMDAR也具有抑制作用，其中1和12對NMDAR的抑制途徑相似，5則競爭性結(jié)合NMDAR的多胺結(jié)合位點(diǎn)而發(fā)揮拮抗作用，并且其效力明顯高于9和12[60]。

2.2 對腦缺血損傷的作用

腦缺血是由血液供應(yīng)不足或出血引起的，大量研究表明，四環(huán)三萜主要是通過抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子釋放和減少血栓形成等機(jī)制保護(hù)神經(jīng)元免受損傷。Zhang等[61]以大腦動(dòng)脈閉塞(MCAO)腦缺血再灌注損傷小鼠造模，腹腔注射9，結(jié)果顯示9可增加Cav-1 mRNA和蛋白含量發(fā)揮腦保護(hù)作用。類似模型實(shí)驗(yàn)表明8可顯著改善大鼠的行為障礙和減少神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)，劑量依賴性降低Calpain II和Caspase-3 mRNA的表達(dá)，對大鼠缺血再灌注后遲發(fā)性神經(jīng)元損傷有保護(hù)作用[62]。Liu等[63]對180例住院治療的急性缺血性腦卒中患者進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，2注射液聯(lián)合注射用阿替普酶通過抑制血小板活化和功能，進(jìn)而抑制血栓形成，顯著改善患者癥狀。Yuan等[64]研究發(fā)現(xiàn)7不僅能減輕急性腦卒中的損傷，而且在慢性恢復(fù)過程中促進(jìn)了紋狀體的神經(jīng)再生，有利于感覺運(yùn)動(dòng)功能障礙的恢復(fù)。另外，以短暫中腦動(dòng)脈閉塞(tMCAO)誘發(fā)的缺血性中風(fēng)小鼠造模，首次判斷出7可能通過激活腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)/TrkB信號(hào)通路改善遠(yuǎn)期神經(jīng)功能缺損，促進(jìn)神經(jīng)元再生。缺氧缺血性腦病(HIE)是一種嚴(yán)重的腦部疾病，會(huì)導(dǎo)致不可逆轉(zhuǎn)的細(xì)胞壞死、凋亡和神經(jīng)元死亡。氧糖剝奪再灌注(OGD/R)損傷模型實(shí)驗(yàn)證明17通過雌激素受體調(diào)控ATF6/Akt信號(hào)通路，抑制促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表達(dá)，也可通過抑制PLC/IP3R通路的激活進(jìn)而抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ca2+釋放、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和CaMKII激活來減少細(xì)胞凋亡[65,66]。Qu等[67]對腦缺血再灌注損傷大鼠模型腹腔注射18，發(fā)現(xiàn)其改善機(jī)制可能與抗炎及抗氧化應(yīng)激有關(guān)，也可能通過鈍化Ca2+依賴的NMDA受體，降低細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+水平，發(fā)揮對海馬神經(jīng)元的神經(jīng)保護(hù)作用[68]。

環(huán)阿屯烷型三萜類化合物可以調(diào)節(jié)興奮性氨基酸受體、抑制炎癥反應(yīng)來改善腦缺血損傷。Li等[69]表明，口服32可改善雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎所致短暫性腦缺血再灌注后的認(rèn)知功能障礙，提示32可能通過減少小膠質(zhì)細(xì)胞活化和炎性細(xì)胞因子的表達(dá)、抑制TLR4信號(hào)通路和NLRP3炎性小體過度激活而發(fā)揮抗炎作用，從而對短暫性腦缺血再灌注具有神經(jīng)保護(hù)作用。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可向神經(jīng)細(xì)胞方向分化，移植后顯著改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的神經(jīng)修復(fù)能力，有治療腦缺血損傷的潛能。在通過OGD/R建立的體外缺血再灌注損傷模型中[70]，32配伍三七總皂苷能促進(jìn)BMSCs增殖、向損傷部分遷移、向神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞定向分化。此外，Wu等[71]用MCAO構(gòu)造局灶腦缺血模型，連續(xù)一周對大鼠腹腔注射33(6 mL/kg/d)，推測33能透過血腦屏障，調(diào)節(jié)腦缺血興奮性氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)的功能紊亂，以保護(hù)缺血腦組織神經(jīng)元。

2.3 抗抑郁作用

四環(huán)三萜化合物還具有抗抑郁作用，目前研究顯示，四環(huán)三萜通過調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)水平和下丘腦-垂體-腎上腺軸(HPA)功能、拮抗氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡、促進(jìn)BDNF信號(hào)通路等機(jī)制發(fā)揮抗抑郁作用。1和12在強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)(FST)、懸尾試驗(yàn)(TST)、慢性社會(huì)失敗壓力抑郁(CSDS)模型中能促進(jìn)BDNF信號(hào)通路，阻止海馬BDNF信號(hào)級聯(lián)反應(yīng)的減少[72,73]。另有研究[74]表明12通過磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白和BDNF信號(hào)介導(dǎo)，使FST、TST、蔗糖偏好試驗(yàn)(SPT)模型中的生理行為有明顯好轉(zhuǎn)。Zhu等[75]研究表明，長期腹腔注射10可改善大鼠的SPT和FST中的抑郁樣行為。在慢性不可預(yù)測輕度應(yīng)激(CUMS)模型和去性腺(GDX)模型中，證實(shí)10可能通過調(diào)節(jié)HPA和下丘腦-垂體-性腺軸(HPG)，減輕動(dòng)物抑郁行為[76]。在慢性束縛應(yīng)激(CRS)誘導(dǎo)小鼠的抗抑郁模型中，10與調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)水平和HPA功能、抗凋亡氧化、恢復(fù)前額葉皮層中BDNF/TrkB信號(hào)通路有關(guān)[77]，還可以通過抗細(xì)胞凋亡、保護(hù)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，并調(diào)控炎癥因子的表達(dá)間接發(fā)揮治療抑郁的作用[78]。Zhang等[79]采用坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷模型大鼠，通過明暗箱實(shí)驗(yàn)和FST，檢測出11可抑制機(jī)械痛敏，延長熱痛潛伏期，顯著改善焦慮、抑郁狀態(tài)。15在CUMS模型中的抗抑郁作用提示與抑制NF-κB信號(hào)通路降低海馬組織炎性反應(yīng)、促使海馬神經(jīng)元成熟和神經(jīng)發(fā)生有關(guān)[80]。Zhou等[37]采用UV、MS和NMR分析結(jié)合化學(xué)降解鑒定香附根莖中分離得到的兩個(gè)新的環(huán)阿屯烷型四環(huán)三萜30和31，通過FST和TST評價(jià)30和31在絕望小鼠模型實(shí)驗(yàn)中具有抗抑郁活性。

2.4 鎮(zhèn)靜催眠與鎮(zhèn)痛作用

Yu等[81]采用直接睡眠實(shí)驗(yàn)、延長戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間實(shí)驗(yàn)等多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)靈芝三萜酸(100 mg/kg)與戊巴比妥鈉、巴比妥鈉均具有協(xié)同作用，可改善小鼠睡眠情況。Mu[82]研究發(fā)現(xiàn)6可增加下丘腦和皮質(zhì)層中5-HT含量，縮短小鼠的睡眠潛伏期，延長睡眠時(shí)長。Shao等[83]發(fā)現(xiàn)1和5可增加腦組織和血清中的GABA/Glu的比值，上調(diào)5-HT1A的表達(dá)從而增強(qiáng)催眠效應(yīng)。19通過調(diào)節(jié)GABA受體亞基mRNA的表達(dá)，下調(diào)腸粘膜系統(tǒng)中相關(guān)炎癥細(xì)胞因子的合成和分泌[84]。Feng等[85]發(fā)現(xiàn)20可使ICR雄性小鼠鎮(zhèn)靜，睡眠時(shí)間延長，睡眠潛伏期縮短。

2.5 神經(jīng)保護(hù)作用

四環(huán)三萜類化合物還具有神經(jīng)保護(hù)作用，Yu等[86]發(fā)現(xiàn)26通過興奮β腎上腺素能受體保護(hù)SH-SY5Y細(xì)胞免受硝普鈉損傷。此外，經(jīng)體內(nèi)、體外分別研究顯示2通過抑制NF-κB表達(dá)來緩解岡田酸導(dǎo)致的神經(jīng)元損傷，證實(shí)其潛在的神經(jīng)保護(hù)作用[87]。最近，10可對脊髓再灌注損傷大鼠模型神經(jīng)細(xì)胞起保護(hù)作用，該作用一定程度上是通過升高脊髓組織SOD活性、降低MDA含量、降低脊髓組織IL-6和NF-κB含量和升高脊髓線粒體COX的活性實(shí)現(xiàn)的[88]。

2.6 其他神經(jīng)活性

Li等[32]對從茯苓中分離得到的羊毛脂醇型三萜皂苷進(jìn)行了神經(jīng)伸展活性的測試，發(fā)現(xiàn)21～25對神經(jīng)生長因子(NGF)誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的神經(jīng)纖維伸展具有促進(jìn)活性，但有濃度限制。Zhang等[89]通過BrdU標(biāo)記實(shí)驗(yàn)和CCK-8檢測實(shí)驗(yàn)研究12能夠明顯促進(jìn)NSCs增殖。Xu等[41]從西番蓮中提取的環(huán)阿屯烷型化合物34～37可拮抗Glu誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞神經(jīng)毒性。Chen等[90]發(fā)現(xiàn)，12可通過促進(jìn)NGF表達(dá)來減輕大鼠奧沙利鉑化療的神經(jīng)毒性。Wang等[91]證實(shí)16可治療神經(jīng)炎癥相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，具有良好的抑制脂多糖和TNF-α聯(lián)合誘導(dǎo)的大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞C6炎癥基因表達(dá)和致炎因子分泌的作用。

3 四環(huán)三萜化合物神經(jīng)活性的構(gòu)效關(guān)系研究

四環(huán)三萜類作為治療神經(jīng)疾病的先導(dǎo)化合物，需要經(jīng)過合適的結(jié)構(gòu)修飾和改造才能顯現(xiàn)出較強(qiáng)的神經(jīng)活性。藥理研究表明，人參皂苷對NMDARs有抑制作用，C-3位和C-20位可能是調(diào)節(jié)NMDARs的重要位點(diǎn)。Lee等[59]使用反相低壓柱色譜分離，比較了人參皂苷Rg3和Rh2同分異構(gòu)體的活性，20(S)-Rg3和20(R)-Rg3的抑制程度相似，而20(R)-Rh2的抑制程度明顯小于20(S)-Rh2(P< 0.01)，表明人參皂苷Rh2具有立體特異性效應(yīng)。另外，20(S)-Rg3、20(S)-Rh2和Rk1通過不同的結(jié)合位點(diǎn)抑制NMDARs，其中Rk1的作用最強(qiáng)。Rh2和Rk1分別為Rg3的代謝產(chǎn)物和熱脫水產(chǎn)物，三者之間的結(jié)構(gòu)差異微小，但與NMDARs復(fù)合體的結(jié)合位點(diǎn)卻不同。這種微妙的結(jié)構(gòu)變化可能涉及C-20位，因?yàn)槠渲車木植拷Y(jié)構(gòu)決定著人參皂苷與NMDARs之間的相互作用。人參皂苷Rk1中C-20位的雙鍵引入可能是競爭性相互作用從甘氨酸結(jié)合位點(diǎn)向多胺結(jié)合位點(diǎn)轉(zhuǎn)移的原因[60]。從此推測出，C-3位的單糖基化基團(tuán)和C-20的S異構(gòu)體及其周圍局部雙鍵組成的三維結(jié)構(gòu)是與多胺結(jié)合所必需的(人參皂苷與NMDAR結(jié)合位點(diǎn)示意圖見圖2)。

圖2 四環(huán)三萜與NMDA受體結(jié)合位點(diǎn)示意圖(以人參皂苷為例)Fig.2 Schematic diagram of binding sites between tetracyclic triterpenes and NMDA receptors (Take ginsenosides as an example)

另外，研究發(fā)現(xiàn)原人參二醇型皂苷對H2O2誘導(dǎo)的C6細(xì)胞和SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞損傷保護(hù)作用強(qiáng)于原人參三醇型皂苷；人參皂苷C-20R構(gòu)型保護(hù)活性大于S構(gòu)型；側(cè)鏈環(huán)化導(dǎo)致作用削弱；C-3位連接的糖基數(shù)量與保護(hù)作用呈正比[92]。因此推測達(dá)瑪烷型三萜化合物C-3以及C-20位的結(jié)構(gòu)修飾對神經(jīng)活性有一定的影響。

有研究運(yùn)用體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)靈芝子實(shí)體中的羊毛脂烷型三萜化合物對AChE有抑制作用，尤其是含有正丁酯側(cè)鏈的羊毛脂烷型三萜的抑制作用比其相應(yīng)的酸更強(qiáng)[93]。Wei等[94]通過改良的Ellman法，用分子對接建模發(fā)現(xiàn)C17側(cè)鏈長度影響抑制活性，尤其是25-COOH與抑制活性密切相關(guān)，合成實(shí)驗(yàn)時(shí)可參考此舉提高其藥理活性。Li[32]將茯苓中具有神經(jīng)伸展促進(jìn)活性的羊毛脂烷三萜類化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行對比，表明化合物的C-7和C-9位連接的二烯鍵可能是神經(jīng)伸展促進(jìn)活性的關(guān)鍵基團(tuán)。

4 結(jié)語

四環(huán)三萜類化合物在自然界中分布廣泛，資源豐富。近年來，研究四環(huán)三萜的神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥理作用機(jī)制的文獻(xiàn)逐年增多，尤其對AD、認(rèn)知障礙、腦缺血損傷和抑郁癥均有明顯藥理作用。四環(huán)三萜可通過降低氧化物水平、拮抗線粒體凋亡、抗炎癥、拮抗NMDA受體、調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)水平、促進(jìn)BDNF信號(hào)通路、抑制PLC/IP3R通路的激活等不同的機(jī)制治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其中達(dá)瑪烷型和羊毛脂烷型四環(huán)三萜效果最為明顯。由此可見，該類化合物在未來開發(fā)為治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥物蘊(yùn)含較大潛力。四環(huán)三萜的構(gòu)效關(guān)系研究主要集中在與NMDAR拮抗劑作用相關(guān)結(jié)合位點(diǎn)的研究，表明對其苷元和側(cè)鏈糖基進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和優(yōu)化可得到高效低毒的新型神經(jīng)活性單體藥物。前期研究提示，開發(fā)四環(huán)三萜達(dá)瑪烷型化合物作為NMDAR拮抗劑治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病將會(huì)是有效的路徑。

現(xiàn)階段研究表明，四環(huán)三萜類作為神經(jīng)活性藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的的研究將進(jìn)一步深入。一方面可以建立快速而可靠的純化富集方法，逐步采用超臨界流體萃取技術(shù)提取和超聲波輔助提取等先進(jìn)提取技術(shù)，超高效液相色譜聯(lián)合新型的質(zhì)譜檢測器，如高分辨率質(zhì)譜儀(HRMS)、四級桿飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(Q-TOF)、線性離子阱質(zhì)譜儀(LTQ-Orbitrap)等液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)高效純化分離。另一方面是需要結(jié)合高通量篩選和計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)等現(xiàn)代分析技術(shù)，研究構(gòu)效關(guān)系，尋找具有神經(jīng)活性的四環(huán)三萜先導(dǎo)化合物，進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和優(yōu)化以期得到高效低毒的新化合物，進(jìn)行新藥研發(fā)生產(chǎn)。

綜上所述，四環(huán)三萜類化合物在藥理作用機(jī)制及各環(huán)節(jié)都顯現(xiàn)出治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病的潛力，亟需進(jìn)一步探尋藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和深入挖掘藥物作用機(jī)制，從而為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床治療奠定基石。