非酒精性脂肪肝患者體內(nèi)鐵代謝水平臨床分析

陳 學(xué),龍 靜,杜梅英,張余川,韋衍莉

(1.海南省?？谑械谌嗣襻t(yī)院檢驗科 571100;2.海南省海口市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科 571100)

?

·論 著·

非酒精性脂肪肝患者體內(nèi)鐵代謝水平臨床分析

陳 學(xué)1,龍 靜1,杜梅英2,張余川1,韋衍莉1

(1.海南省海口市第三人民醫(yī)院檢驗科 571100;2.海南省?？谑腥嗣襻t(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科 571100)

目的 研究鐵代謝相關(guān)指標(biāo)在非酒精性脂肪肝(NAFLD)患者中的水平及其意義。方法 選取127例NAFLD患者和130例健康人進(jìn)行血清學(xué)、肝臟B超和鐵代謝指標(biāo)檢查。NAFLD患者行肝臟活組織檢查。分析并評價血清鐵(SI)代謝指標(biāo)在NAFLD患者的變化。結(jié)果 NAFLD患者體質(zhì)量指數(shù)、腰圍、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)、總膽固醇(TC)和三酰甘油(TG)明顯高于健康者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。NAFLD患者鐵代謝的相關(guān)指標(biāo)SI、鐵蛋白(SF)高于健康者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；鐵調(diào)素(HEPC)低于健康者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。女性NAFLD患者血清SI和SF水平均低于男性NAFLD患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，肥胖NAFLD患者血清SI和SF均高于體質(zhì)量正常的NAFLD患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，HEPC相對較低(P<0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，SI與ALT、TG、TC呈正相關(guān)(P<0.05)，SF與ALT、TC呈正相關(guān)(P<0.05)，HEPC與ALT、GGT、TG、TC均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論 血清SI、SF和HEPC水平與NAFLD患者的肥胖和肝功能相關(guān)，聯(lián)合相關(guān)指標(biāo)檢測有助于判斷NAFLD患者肝損傷的進(jìn)展。

非酒精性脂肪肝；鐵代謝；肝損傷

非酒精性脂肪肝(NAFLD)是西方國家最常見的肝臟疾病，成人發(fā)病率高達(dá)30%左右，研究顯示其與肥胖、血脂紊亂和胰島素抵抗等因素有關(guān)。超過1/3的患者會引起非酒精性脂肪性肝炎，繼而發(fā)展為肝纖維化或肝硬化，而此類患者也具有發(fā)生肝細(xì)胞癌的風(fēng)險[1-2]。國內(nèi)NAFLD的發(fā)病率較低，但是近幾年有逐漸上升的趨勢，除病毒性肝炎之外，NAFLD的發(fā)病率位于所有肝病發(fā)病率的第2位。鐵是人體必需的微量元素，肝臟是鐵的主要代謝器官，同時，過多的鐵元素也會在肝臟內(nèi)堆積，造成肝損傷。研究發(fā)現(xiàn)，多種肝臟疾病存在鐵代謝紊亂的現(xiàn)象，過量的鐵沉積會加重肝纖維化和肝硬化的進(jìn)程[3]。同時鐵作為氧化劑能夠激活氧化應(yīng)激反應(yīng)，促進(jìn)自由基生成，引起肝細(xì)胞器的損傷和肝細(xì)胞死亡。弭希峰等[4]發(fā)現(xiàn)鐵沉積是NAFLD的重要的危險因素。肝臟活組織檢查是診斷鐵沉積的金標(biāo)準(zhǔn)，但是由于肝臟活組織檢查是一種創(chuàng)傷性極大的檢查，并非所有患者均能實施，因此尋找其他能夠代替肝臟活組織檢查的無創(chuàng)指標(biāo)更具有可行性。目前鐵代謝相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)在中國人群中的報道相對較少。本研究通過檢測NAFLD患者體內(nèi)鐵代謝的情況，并分析其與其他血清學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，旨在明確NAFLD患者體內(nèi)鐵元素水平及其對NAFLD的臨床提示價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年10月至2014年10月在海口市第三人民醫(yī)院就診并確診為NAFLD的患者127例，排除年齡小于18歲、病毒性肝炎、藥物性肝炎、肝豆?fàn)詈俗冃院陀写罅匡嬀剖返幕颊?。其中?1例(55.9%)、女56例(44.1%)，平均年齡(53.6±6.5)歲。所有納入對象均經(jīng)常規(guī)實驗室和影像學(xué)檢查，并聯(lián)合肝臟活組織檢查后確診。納入同期?？谑械谌嗣襻t(yī)院體檢的健康者130例，其中男69例(53.1%)、女61例(46.9%)，平均年齡(52.3±8.2)歲。所有研究對象自愿簽署知情同意書，本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會審核通過。

1.2 研究方法 記錄所有研究對象的一般資料：包括年齡、性別、體質(zhì)量、腰圍、臀圍、血壓；對研究對象進(jìn)行常規(guī)實驗室檢查：包括天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)和堿性磷酸酶(ALP)；總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)。所有研究對象禁食12 h后采集早晨空腹靜脈血4 mL，3 000 r/min離心10 min，取上清液。檢測血清鐵(SI)及總鐵結(jié)合力(TIBC)的試劑盒購自寧波市江北區(qū)寧波瑞源生物科技有限公司，儀器為日本東芝全自動生化儀(TBA-120FR)；鐵蛋白(SF)的檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)購自上海市浦東新區(qū)貝克曼庫爾特商貿(mào)(中國)有限公司，ACCESS全自動微?；瘜W(xué)免疫分析儀；檢測鐵調(diào)素(HEPC)的ELISA試劑盒購自上海瓦蘭生物科技有限公司，所有操作嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。每例標(biāo)本檢測2次，最后結(jié)果取2次的平均值。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 2010年中華醫(yī)學(xué)會重新修訂的非酒精性脂肪肝病診療指南中的診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)無飲酒史或飲酒乙醇量男性小于140克/周，女性小于70克/周；(2)排除病毒性肝炎、藥物性肝病、全胃腸外營養(yǎng)、肝豆?fàn)詈俗冃?、自身免疫性肝病等可?dǎo)致脂肪肝的特定疾病。B超檢查征象：(1)肝區(qū)近場回聲彌漫性增強(qiáng)，強(qiáng)于腎臟，遠(yuǎn)場回聲減弱；(2)肝內(nèi)管道結(jié)構(gòu)顯示不清；(3)肝臟輕至中度腫大，邊緣角變鈍[5]。脂肪肝的病理診斷標(biāo)準(zhǔn)：肝腺泡3區(qū)大泡性或以大泡為主的混合性肝細(xì)胞脂肪變，伴或不伴肝細(xì)胞氣球樣變、小葉內(nèi)混合性炎性反應(yīng)細(xì)胞浸潤及竇周纖維化。

2 結(jié) 果

2.1 兩組研究對象一般臨床病理參數(shù)比較 見表1。兩組在年齡、性別、ALP差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，NAFLD患者體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、腰圍、ALT、GGT、TC和TG明顯高于健康者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。鐵代謝相關(guān)指標(biāo)SI、SF高于健康者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，HEPC低于健康者，差異也有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表1 NAFLD患者和健康者一般資料比較

續(xù)表1 NAFLD患者和健康者一般資料比較

表2 鐵代謝指標(biāo)在不同臨床病理參數(shù)NAFLD患者中的比較

注：與男性患者比較，*P<0.05；與BMI<28比較，△P<0.05。

2.2 鐵代謝指標(biāo)在不同臨床病理參數(shù)NAFLD患者中的比較 見表2。血清SI、SF和HEPC與NAFLD患者年齡和高血壓狀況無關(guān)(P>0.05)，女性NAFLD患者血清SI和SF水平均低于男性NAFLD患者，而HEPC與性別無關(guān)。BMI≥28的NAFLD患者血清SI和SF高于BMI<28的NAFLD患者，HEPC則相對較低。

表3 NAFLD患者其他血清學(xué)指標(biāo)與鐵代謝相關(guān)性分析

2.3 NAFLD患者其他血清學(xué)指標(biāo)與鐵代謝指標(biāo)相關(guān)性分析 見表3。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，SI與ALT、TG、TC呈正相關(guān)(P<0.05)，SF與ALT、TC呈正相關(guān)(P<0.05)，HEPC與ALT、GGT、TG、TC均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。

3 討 論

NAFLD屬于一種代謝應(yīng)激性肝損傷，與肥胖、糖尿病等密切相關(guān)，尤其與肥胖的關(guān)系密切，其在普通人群中的發(fā)病率約占30%左右，但是在肥胖患者中的發(fā)病率高達(dá)80%以上[6]。NAFLD的發(fā)病機(jī)制又稱為“二次打擊”學(xué)說，“初次打擊”指肝臟內(nèi)TC或TG的堆積，“二次打擊”主要是由炎性反應(yīng)相關(guān)信號通路激活、氧化應(yīng)激和線粒體功能異常等引起的肝細(xì)胞的慢性炎性反應(yīng)和壞死。

小腸是吸收鐵的主要器官，肝臟是儲存鐵的主要部位。由于大部分人飲食中的鐵元素水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于機(jī)體的需要，肝臟作為代謝鐵的主要器官，其損傷很容易引起鐵在肝臟中沉積。

在NAFLD發(fā)病的“二次打擊”學(xué)說中，最常見的即是腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、核因子κB(NF-κB)等相關(guān)信號通路的激活引起的基因轉(zhuǎn)錄及其表達(dá)產(chǎn)物增加。TNF-α、IL-1β、NF-κB可促進(jìn)SF合成，而IL-1β和IL-6的高表達(dá)可上調(diào)HEPC基因的轉(zhuǎn)錄，SF與鐵結(jié)合儲存于巨噬細(xì)胞中，SF的增高不僅加重了鐵在肝臟中的沉積，還可通過誘導(dǎo)炎性反應(yīng)、氧化應(yīng)激和抑制脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)一步誘發(fā)肝細(xì)胞的壞死，促進(jìn)肝纖維化、肝結(jié)構(gòu)重塑，甚至促進(jìn)肝細(xì)胞發(fā)生癌變。SI和組織鐵的平衡依賴鐵調(diào)節(jié)蛋白的調(diào)節(jié)，人體存在多種鐵調(diào)節(jié)蛋白，近十幾年發(fā)現(xiàn)了一種新的鐵調(diào)節(jié)蛋白——HEPC，研究發(fā)現(xiàn)其在鐵代謝中起至關(guān)重要的作用，尤其是在某些慢性貧血性疾病中起到重要的調(diào)節(jié)作用[7]。HEPC是肝臟分泌的小分子抗菌肽，其作用的靶細(xì)胞包括腸上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，HEPC能夠與此類細(xì)胞膜上的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1結(jié)合，抑制轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白對鐵的轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)鐵在細(xì)胞內(nèi)的沉積。研究發(fā)現(xiàn)持續(xù)的放血療法使患者處于缺鐵的狀態(tài)，可以顯著緩解肝炎患者炎性反應(yīng)的程度和纖維化的進(jìn)展，提示肝臟鐵負(fù)荷過多可能使肝病患者病情加重。

近期動物試驗研究結(jié)果顯示，鐵與肝細(xì)胞內(nèi)堆積的脂肪可協(xié)同誘導(dǎo)肝細(xì)胞的損傷和死亡[8]。多數(shù)國外的研究結(jié)果顯示，SI和SF在NAFLD患者中升高，且能夠作為NAFLD患者病情嚴(yán)重程度的重要參考指標(biāo)，但是關(guān)于血清HEPC在NAFLD患者中水平的研究相對較少。

本研究發(fā)現(xiàn)，SI和SF 2項指標(biāo)在NAFLD患者組中明顯升高，與健康者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義，與前人的研究相符。同時本研究檢測了NAFLD患者HEPC水平，發(fā)現(xiàn)其水平低于健康人群，與潘衛(wèi)華等[9]對乙型肝炎患者HEPC水平的研究結(jié)果相似。本研究繼而分析了鐵代謝指標(biāo)與NAFLD患者年齡、性別和肥胖之間的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，SI和SF在男性和肥胖NAFLD患者中高于非肥胖患者，由此推測鐵超載可能與內(nèi)分泌激素調(diào)節(jié)有關(guān)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示,鐵代謝的血清學(xué)指標(biāo)分別與肝功能和血脂水平具有相關(guān)性，表明HEPC確實與肥胖相關(guān)，且可能同時加重患者肝功能的損害。

綜上所述，NAFLD患者鐵代謝相關(guān)的血清學(xué)指標(biāo)確實異于健康人群，且與患者的性別、肥胖和肝功能相關(guān)。本研究在前人的基礎(chǔ)上，同時檢測了NAFLD患者HEPC水平，補(bǔ)充了以往針對NAFLD患者SI和SF的研究，進(jìn)一步補(bǔ)充說明了NAFLD患者鐵代謝的情況。同時研究認(rèn)為鐵代謝的情況與NAFLD患者的肥胖密切相關(guān)，二者結(jié)合分析有可能可以推測NAFLD患者肝功能損害的程度和纖維化的進(jìn)展。

[1]Dowman JK，Tomlinson JW，Newsome PN.Pathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease [J].QJM，2010，103(2)：71-83.

[2]White DL,Kanwal F,El-Serag HB.Association between nonalcoholic fatty liver disease and risk for hepatocellular cancer,based on systematic review[J].Clin Gastroenterol Hepatol，2012，10(1):1342-1359.

[3]趙晉英，李艷偉，李琳.鐵和鐵調(diào)素在肝纖維化中的作用[J].生理科學(xué)進(jìn)展，2010，41(3)：183-186.

[4]弭希峰,黃子成,王木成,等.非酒精性脂肪肝患者血清鐵、轉(zhuǎn)鐵蛋白、血清鐵蛋白水平測定[J].上海醫(yī)藥,2006,27(11):517-518.

[5]范高建.非酒精性脂肪性肝病診療指南(2010年修訂版)[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2011,27(5):641-644.

[6]劉笑雷,楊志英.非酒精性脂肪肝病與原發(fā)性肝癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J].癌癥進(jìn)展，2014,12(1)：59-63.

[7]薛成蓮,錢忠明,李琳.鐵調(diào)素、炎癥因子與鐵代謝[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2007,38(2):170-173.

[8]Haap M，Machann J，von Friedeburg C，et al. Insulin sensitivity and liver fat:role of iron load[J].J Clin Endocrinol Metab，2011，96(6):958-961.

[9]潘衛(wèi)華，黎映芹，朱平安.乙肝病毒攜帶者鐵代謝與血清鐵調(diào)素相關(guān)性研究[J].海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2014,20(10):1371-1373.

Clinical analysis of iron metabolism in patients with nonalcoholic fatty liver disease

CHENXue1,LONGJing1,DUMei-ying2,ZHANGYu-chuan1,WEIYan-li1

(1.DepartmentofClinicalLaboratory,theThirdPeople′sHospitalofHaikouCity,Haikou,Hainan571100,China; 2.DepartmentofClinicalLaboratory,People′sHospitalofHaikouCity,Haikou,Hainan571100,China)

Objective To study the iron metabolism and its significance in patients with nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD).Methods 127 cases of NAFLD patients and 130 cases of healthy people were selected and their levels of serum indexes,hepatic B-ultrasonography and biomarkers of iron metabolism were detected.NAFLD patients received liver biopsy.The changes of serum iron (SI) biomarkers of iron metabolism in NAFLD patients were analyzed and estimated.Results The levels of BMI,waist circumference,ALT,GGT,TC,TG,SI and SF of NAFLD patients were significantly higher than those of healthy people (P<0.05),while the level of HEPC was significantly lower than healthy people (P<0.05).The SI and SF levels of female NAFLD patients were significantly lower than those of male NAFLD patients (P<0.05),which of obese NAFLD patients were significantly higher than non-obese patients (P<0.05).HEPC had an inverse relationship between different genders and weights (P<0.05).The results of spearman analysis showed that SI was positively correlated with ALT,TG and TC (P<0.05); SF was positively correlated with ALT and TC (P<0.05); HEPC was negatively correlated with ALT,GGT,TG and TC (P<0.05).Conclusion Serum levels of SI,SF and HEPC are correlated with obesity situation and liver function of NAFLD patients.Combined detection related indexes would be helpful to estimate liver damage.

nonalcoholic fatty liver disease;iron metabolism;liver damage

陳學(xué)，男，本科，主管檢驗技師，主要從事生化檢驗、免疫檢驗、臨床輸血。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.23.014

A

1672-9455(2015)23-3484-03

2015-03-06

2015-06-18)