贛南地區(qū)桃金娘果實(shí)多酚含量研究

劉曉東 龔小嬌 廖禹東 郭忠 李明

摘要：桃金娘Rhodomyrtus tomentosa（Ait.）Hassk.為桃金娘科植物，屬灌木，入藥部位主要有根、葉以及果實(shí)，民間還以果實(shí)作為副食品以及釀制保健酒。本實(shí)驗(yàn)主要對(duì)江西省贛州市桃金娘果實(shí)富含的多酚類物質(zhì)進(jìn)行含量測(cè)定，并對(duì)相應(yīng)的抗氧化活性進(jìn)行檢測(cè)，為合理開(kāi)發(fā)利用贛南地區(qū)桃金娘果實(shí)提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：桃金娘;多酚;抗氧化

【中圖分類號(hào)】G644.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）14-01

桃金娘為桃金娘科桃金娘屬灌木，國(guó)內(nèi)主要分布在江西、福建、廣東、廣西、云南、貴州、湖南最南部及臺(tái)灣等，入藥部位有根、葉以及果實(shí)，功效為活血通絡(luò)，收斂止瀉。臨床上將桃金娘開(kāi)發(fā)成標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油用于治療急性支氣管炎效果較顯著[1]，劉立立[2]等對(duì)標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病進(jìn)行了系統(tǒng)評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病有效，安全性好。張奕[3]等對(duì)利用標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油治療分泌性中耳炎進(jìn)行系統(tǒng)分析，發(fā)現(xiàn)有一定療效。經(jīng)筆者實(shí)地走訪贛州地區(qū)發(fā)現(xiàn)，贛南地區(qū)人民每年七八九月間廣泛食用桃金娘果實(shí)，同時(shí)也會(huì)將桃金娘果實(shí)泡酒食用，當(dāng)成滋補(bǔ)型藥酒進(jìn)行食用，但通過(guò)走訪也發(fā)現(xiàn)村民食用過(guò)量桃金娘果實(shí)后可以會(huì)引起便秘、結(jié)石等癥狀。鑒于桃金娘果實(shí)豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)具有開(kāi)發(fā)成保健品的市場(chǎng)前景[4]。羅爽妍等[5]對(duì)桃金娘果實(shí)進(jìn)行成分以及活性分析，測(cè)定結(jié)果每克桃金娘相當(dāng)于67.2μmol抗壞血酸和28.5μmol沒(méi)食子酸當(dāng)量，而且他們認(rèn)為桃金娘現(xiàn)出的高抗氧化性，與含大量多酚類物質(zhì)有關(guān)。谷榮輝[6]等利用HPLC-TOF-MS法對(duì)桃金娘根、枝、葉與果實(shí)的化學(xué)成分進(jìn)行分析，在果實(shí)中分離得到?jīng)]食子酸、白藜蘆醇、白皮杉醇、沒(méi)食子酸乙酯、maslinic acid 5個(gè)成分。肖婷等[7]利用HPLC方法測(cè)定沒(méi)食子酸、原兒茶酸、兒茶素、鞣花酸、白藜蘆醇5種酚類成分的含量發(fā)現(xiàn)，6個(gè)產(chǎn)地桃金娘中沒(méi)食子酸和鞣花酸含量都較高，其中云南產(chǎn)地桃金娘中沒(méi)食子酸、鞣花酸、白藜蘆醇含量為6個(gè)產(chǎn)地中最高;DPPH法抗氧化能力的測(cè)定結(jié)果顯示5種酚類成分抗氧化具有良好表現(xiàn)，抗氧化作用均強(qiáng)于VC的活性，且沒(méi)食子酸的抗氧化活性最強(qiáng)。

根據(jù)以上信息，本課題主要利用高效液相色譜法研究贛南地區(qū)桃金娘果實(shí)富含的多酚類物質(zhì)進(jìn)行含量測(cè)定，并對(duì)贛南地區(qū)桃金娘果實(shí)相應(yīng)的抗氧化活性進(jìn)行檢測(cè)，為合理開(kāi)發(fā)利用贛南地區(qū)桃金娘果實(shí)提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料與試劑

桃金娘，產(chǎn)地為江西省贛州市大余縣，采收時(shí)間為2019年9月份，采收后立即進(jìn)行烘干，烘干后于零下15℃環(huán)境中冷凍保藏，干燥后的樣品再次用中藥粉碎機(jī)磨碎，后過(guò)120目篩混合后備用。沒(méi)食子酸對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定所）、白藜蘆醇對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定所），甲醇為色譜純，水為哇哈哈純凈水。

1.2儀器與設(shè)備

高效液相色譜儀（waters 2695;PDA-3000二極管陣列紫外檢測(cè)器），十萬(wàn)分之一電子天平（精度0.1mg，METTLER TOLEDO，LE204E），jzx-9070MBE數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱，YF-11B型中藥粉碎機(jī);超聲波清洗機(jī)（KQ-300DE型超聲波清洗機(jī)、300w、頻率40）。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1多酚含量的測(cè)定

取150 mg的干燥粉末，溶于15 mL 90%甲醇中，超聲提取15分鐘，以6 000轉(zhuǎn)每分鐘的方式離心10分鐘，離心沉淀后取上清液。重復(fù)提取沉淀物3次，直至上清液變?yōu)闊o(wú)色?；旌锨懊嫠拇翁崛‰x心得到的上清液，在40攝氏度條件下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除甲醇。通過(guò)5 mL 100%甲醇回收旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后的剩余物，剩余物用0.45 nm的PTFE注射器式過(guò)濾器過(guò)濾，及得到提取物。提取物于零下15℃保存?zhèn)溆?。整個(gè)操作過(guò)程在避光櫥中進(jìn)行。[5]精密稱定桃金娘果提取物樣品15.00 mg，精密加入甲醇2mL溶解，搖勻，濾過(guò)，即得。

供試品處理：流動(dòng)相采用色譜70%或80%甲醇梯度洗脫，0～20 min，5%A;22～25 min，8%A;42～70 min，11%A;72 min，14%A;74 min，17%A;76～90 min，22.5%A;92 min，100%A;體積流量1 mL/min;柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm;進(jìn)樣量10μL。

對(duì)照品處理：取沒(méi)食子酸2.00 mg、白藜蘆醇2.00mg置于10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，即得對(duì)照品溶液。對(duì)照品色譜條件：流動(dòng)相采用色譜純70%或80%甲醇梯度洗脫，0～20 min，5%A;22～25 min，8%A;42～70 min，11%A;72 min，14%A;74 min，17%A;76～90 min，22.5%A;92 min，100%A;體積流量1 mL/min;柱溫25℃;檢測(cè)波長(zhǎng)為280 nm;進(jìn)樣量10μL。

結(jié)果：精密吸取供試品溶液10μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定色譜峰面積。結(jié)果顯示沒(méi)食子酸、白藜蘆醇的平均含量分別為15.5911（mg·g-1）和6.2123（mg·g-1）。

討論：目前，桃金娘果實(shí)、根、葉所含化學(xué)成分的研究，主要集中具有抗氧化活性的多酚成分、黃酮類成分，具有保肝降酶作用的桃金娘多糖成分，具有治療急、慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病的揮發(fā)油成分，另外還有具有抗炎、平喘作用的石竹烯成分、對(duì)皮膚霉菌病有一定作用的石竹烯氧化物，最后肖婷等[6]還發(fā)現(xiàn)桃金娘具有α-葡萄糖苷酶抑制活性，具有一定的降血糖作用，但降血糖單體還有待進(jìn)一步分析研究。目前臨床上將桃金娘開(kāi)發(fā)成標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油用于治療急、慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病，但是作為其他藥物開(kāi)發(fā)未見(jiàn)，基于桃金娘良好的抗氧化活性、降血糖作用，以及豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)格，有一定的藥物以及保健品開(kāi)發(fā)空間。同時(shí)，目前關(guān)于桃金娘的研究主要集中在桃金娘果實(shí)的抗氧化性能上，且產(chǎn)地集中在廣東、廣西等地，產(chǎn)地覆蓋不夠廣闊，對(duì)于不同產(chǎn)地的桃金娘的果實(shí)縱向比較少見(jiàn)，針對(duì)桃金娘的根、葉所含各類化學(xué)成分的對(duì)比研究少見(jiàn)，可待進(jìn)一步研究。2015年CFDA（2015年第53號(hào)）已經(jīng)明令禁止銷售標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油，主要是經(jīng)國(guó)家藥監(jiān)總局檢查發(fā)現(xiàn)，德國(guó)保時(shí)佳大藥廠的標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油腸溶膠囊（兒童型）的實(shí)際處方與注冊(cè)申報(bào)處方不一致，工廠留存的生產(chǎn)記錄未能說(shuō)明原料“標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油”的原料來(lái)源，不符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》第一百五十二條、第一百六十一條的要求，違反《藥品注冊(cè)管理辦法》第八十四條第二款的規(guī)定。臨床上研究發(fā)現(xiàn)將桃金娘開(kāi)發(fā)成標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油用于治療急性支氣管炎效果較顯著[1]，劉立立[2]等對(duì)標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病進(jìn)行了系統(tǒng)評(píng)價(jià)，發(fā)現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油治療慢性支氣管炎和慢性阻塞性肺疾病有效，安全性好，張奕[3]等對(duì)利用標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油治療分泌性中耳炎進(jìn)行系統(tǒng)分析，發(fā)現(xiàn)有一定療效。在臨床療效和2015年CFDA（2015年第53號(hào)）已經(jīng)明令禁止銷售標(biāo)準(zhǔn)桃金娘油的決定間，存在進(jìn)一步研究桃金娘油的必要性，說(shuō)明桃金娘油具有國(guó)內(nèi)潛在開(kāi)發(fā)空間。贛南地區(qū)人民廣泛食用桃金娘果實(shí)，同時(shí)也會(huì)將桃金娘果實(shí)泡酒食用，當(dāng)成滋補(bǔ)型藥酒進(jìn)行食用，但臨床發(fā)現(xiàn)村民食用過(guò)量桃金娘果實(shí)后可以會(huì)引起便秘、結(jié)石等癥狀。此種情形下，我們不僅要關(guān)注不同產(chǎn)地的桃金娘果實(shí)多酚類成分的抗氧化性能力對(duì)比上，同時(shí)要密切關(guān)注桃金娘果實(shí)潛在的不利于身體健康的化學(xué)成分，只有通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)篩查出可能導(dǎo)致便秘、結(jié)石的化學(xué)成分，在后期的提取等工藝中予以充分關(guān)注，設(shè)計(jì)分離去除的流程，才能使桃金娘果實(shí)開(kāi)發(fā)成為可能。

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[5]羅爽妍，王超，段翰英，等.野生桃金娘主要抗氧化成分及其抗氧化能力[J].食品科學(xué)，2015，36（17）：77-82.

[6]谷榮輝，黎平，王藝舟，等.HPLC-TOF-MS分析桃金娘不同部位的化學(xué)成分[J].中草藥，2018，49（3）：554-560.

基金項(xiàng)目：江西省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目（181578）

通訊作者：龔小嬌，贛南衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院藥學(xué)系。