細針穿刺細胞學(xué)檢查聯(lián)合BRAF 基因檢測在甲狀腺微小乳頭狀癌診斷中的應(yīng)用價值

廖鵬娟，楊 毅

（1 廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院病理科 廣東 廣州 510260）

（2 惠州市中心人民醫(yī)院病理科 廣東 惠州 516000）

甲狀腺癌是臨床上最常見的惡性腫瘤之一，其中甲狀腺微小乳頭狀癌（PTMC）是指癌灶直徑≤10 mm 的甲狀腺癌[1]。隨著超聲醫(yī)學(xué)的發(fā)展及健康意識的提升，甲狀腺微小乳頭狀癌的檢出率逐年升高，甲狀腺微小乳頭狀癌早期常無明顯臨床癥狀，但中晚期患者預(yù)后常不盡人意，如不及時治療將嚴重威脅生命健康[2]。PTMC 的發(fā)病機制較為復(fù)雜，其預(yù)后和病理分期明顯相關(guān)，因此早期診斷及治療對患者的預(yù)后至關(guān)重要[3]。目前甲狀腺微小乳頭狀癌的診斷方式較多，如彩超、超聲造影、CT、穿刺等，但均有一定的誤診率而導(dǎo)致非必要的手術(shù)。本研究通過對比FNAC、BRAF 基因檢測及FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測評價其臨床應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年6 月—2020 年5 月惠州市中心人民醫(yī)院收治的120 例行手術(shù)治療的高度疑似PTMC 的患者，其中男性37 例，女性83 例，年齡22 ～65 歲，平均年齡（40.2±2.3）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①彩超ACR TI-RADS 分類為4c 類或5 類者；②患者要求并同意手術(shù)；③本次研究所有患者對此研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①既往有甲狀腺手術(shù)史；②1 月內(nèi)出現(xiàn)急性甲狀腺炎者；③合并有其他部位晚期惡性腫瘤者。

1.2 方法

FNAC：患者仰臥位，暴露穿刺部位，利多卡因麻醉，常規(guī)消毒鋪巾，在彩超引導(dǎo)下定位需要穿刺的可疑惡性結(jié)節(jié)，用細穿刺針從不同部位快速反復(fù)穿刺抽吸，涂片、酒精固定后送檢。穿刺結(jié)果按照甲狀腺細針穿刺細胞病理學(xué)Bethesda 標(biāo)準(zhǔn)判定[4]。BRAF 基因檢測：在超聲引導(dǎo)下細針穿刺取材后，使用弗萊斯生物科技公司提供的BRAF 基因檢測試劑盒，使用實時PCR 儀器對BRAF 基因是否突變進行檢測。當(dāng)BRAF 基因為突變型時為陽性，代表為惡性腫瘤，當(dāng)BRAF 基因為野生型時為陰性，代表為良性腫瘤。

1.3 觀察指標(biāo)

以手術(shù)后的石蠟病理為診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，分析FNAC、BRAF 基因檢測及FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測的敏感度、特異度和準(zhǔn)確度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

使用SPSS 26.0 統(tǒng)計分析軟件，計數(shù)資料以百分數(shù)（%）表示，采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 FNAC 及BRAF 基因檢測與術(shù)后病理檢查結(jié)果的統(tǒng)計分析

術(shù)后病理顯示120 例患者中甲狀腺微小乳頭狀癌98 例；非甲狀腺微小乳頭狀癌22 例，其中：結(jié)節(jié)性甲狀腺腫21 例，濾泡性腺瘤1 例。FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測的敏感度及準(zhǔn)確度均高于單獨的FNAC 或BRAF 基因檢測，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 120 例患者FNAC 及BRAF 基因檢測與術(shù)后病理檢查結(jié)果（例）

2.2 FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測與術(shù)后病理檢查結(jié)果

FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測與術(shù)后病理檢查結(jié)果的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度的統(tǒng)計分析見表2。

表2 120 例患者FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測與術(shù)后病理檢查結(jié)果（%）

3.討論

甲狀腺微小乳頭狀癌是最常見的惡性腫瘤之一，是甲狀腺癌4 大病理類型中最常見的病理類型，占各種惡性腫瘤的近5%左右[5]。甲狀腺微小乳頭狀癌早期常無明顯的臨床癥狀，較容易漏診、誤診而延誤治療。彩超是評估甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的主要的無創(chuàng)檢查手段之一，但常有一定的局限性，不能達到確診的目的[6]。因此及時準(zhǔn)確的診斷并給予早期治療是提升患者預(yù)后的關(guān)鍵[7-8]。

FNAC 是診斷甲狀腺癌靈敏性和特異性最高的診斷方法[9]，其通過在彩超引導(dǎo)下行FNAC，通過觀察細胞形態(tài)學(xué)變化來確診甲狀腺癌。但仍有15%左右的FNAC 結(jié)果為意義不明確的細胞異型性病變或細胞成分過少而無法診斷的情況。本研究中，120 例行FNAC 的患者中，有9.17%（11/120）的患者穿刺結(jié)果為無法明顯細胞性質(zhì)，僅45.45%（5/11）是需要行手術(shù)治療的，說明穿刺存在一定的誤診率，導(dǎo)致了部分患者實施不必要的手術(shù)治療。BRAF 基因分為野生型及突變型，BRAF 基因突變的最常見位點為V600E[10]。當(dāng)V600E 位點發(fā)生突變后，可激活BRAF 激酶，進一步激活相關(guān)通路導(dǎo)致癌變的發(fā)生[11]。國內(nèi)學(xué)者Xing 等[12]的研究提示BRAF 基因突變在甲狀腺乳頭狀中的發(fā)生率為44%左右，且BRAF V600E 突變的存在與甲狀腺乳頭狀癌患者癌癥相關(guān)病死率的增加顯著相關(guān)。

本文結(jié)果顯示：FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測的敏感度及準(zhǔn)確度均高于單獨的FNAC 或BRAF 基因檢測，說明FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測在診斷PTMC 方面有較高的臨床價值，優(yōu)于單獨的FNAC 或BRAF 基因檢測。FNAC 可以確診大多數(shù)的PTMC，但是仍有一定的誤診率導(dǎo)致過度手術(shù)。可能的原因主要是穿刺者技術(shù)問題導(dǎo)致沒穿到惡性細胞、穿刺細胞過少難以觀察等。BRAF 基因位點中的V600E 突變是PTMC 最常見的基因突變位點，有報道稱52%～87%的PTMC 可出現(xiàn)BRAF 基因V600E 位點的突變[13]。本文結(jié)果顯示最終術(shù)后病理確診為PTMC 的患者BRAF 基因突變率為54.08%，與其報道基本一致。在FNAC 的基礎(chǔ)之上行BRAF 基因檢測有助于降低單行FNAC 的誤診率，通過FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測可使診斷的敏感度及準(zhǔn)確度明顯提升。

綜上所述，對于可疑甲狀腺微小乳頭狀癌的患者實施FNAC 聯(lián)合BRAF 基因檢測可明顯提高診斷正確率，避免不必要的手術(shù)，具有較高的臨床價值。