• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑LC-MS/MS檢測(cè)方法概論

    2021-12-09 06:01伊淑平
    天津農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021年11期

    摘 ? ?要:β-受體激動(dòng)劑作為食品源動(dòng)物中的禁用藥,需要被嚴(yán)格監(jiān)督與管控。時(shí)隔十年,今年的“315”晚會(huì)又爆出“瘦肉精”事件,說明瘦肉精監(jiān)管形勢(shì)依然十分嚴(yán)峻。因此,尋求一種易于采集的瘦肉精生物樣本和高效、準(zhǔn)確、便捷的檢測(cè)方法顯得十分緊迫。動(dòng)物毛發(fā)易于采集,且其中的藥物殘留量高、不易消除、監(jiān)測(cè)窗久,而LC-MS/MS檢測(cè)方法提取過程相對(duì)簡(jiǎn)單,且具有高靈敏度和準(zhǔn)確度?;诖?,本文對(duì)近幾年國內(nèi)研究的具有代表性的利用LC-MS/MS檢測(cè)動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑的方法進(jìn)行了比較和分析,在靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度方面,LC-MS/MS法都已經(jīng)達(dá)到一定程度的成熟,可以滿足一定的檢測(cè)要求。

    關(guān)鍵詞:β-受體激動(dòng)劑;獸藥殘留;LC-MS/MS;動(dòng)物毛發(fā)

    中圖分類號(hào):S859.84 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A ? ? ? ? ?DOI 編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2021.11.008

    Introduction to LC-MS/MS Methods for the Detection of β-Receptor Agonists in Animal Hair

    YI Shuping

    (Center of Agricultural Products Quality Inspection and Monitoring,Cangzhou Agricultural and Rural Bureau in Hebei Province, Cangzhou, Hebei 061000, China)

    Abstract: As the banned drugs in food-derived animals, the β-receptor agonists need to be strictly monitored and controlled. After a lapse of ten years, the 2021 World Consumer Right Day broke out the incident of illegal use of β-receptor agonists, indicating that the supervision situation of β-receptor agonists is still very severe. Therefore, it is urgent to find an efficient, accurate and convenient detection method for β-receptor agonists from an easy-to-collect biological sample. The animal hair is easy to collect, and the monitoring window of drug residue is long because of the high level of drug residue in the hair. Moreover, the extraction process of LC-MS/MS detection method is relatively simple, highly sensitive and accurate. The manuscript compared and analyzed the representative LC-MS/MS methods for the detection of the β-receptor agonists in animal hair in recent years, and the results indicated that LC-MS/MS methods have reached a certain degree of maturity in terms of sensitivity, precision and accuracy, which could meet certain testing requirements.

    Key words: β-receptor agonists; residue of veterinary drugs; LC-MS/MS; animal hair

    β-受體激動(dòng)劑,俗稱“瘦肉精”,可用于防治人和動(dòng)物的支氣管哮喘和痙攣,因能促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)、營養(yǎng)重分配,提高胴體瘦肉率,而被用作食品動(dòng)物生產(chǎn)環(huán)節(jié)的促生長(zhǎng)添加劑[1]。但過量使用此類藥物會(huì)在動(dòng)物可食性組織中造成獸藥殘留和蓄積,人在大量或長(zhǎng)期食用該獸藥殘留的動(dòng)物組織后,可能會(huì)出現(xiàn)肌肉震顫、頭疼、嘔吐等不良反應(yīng),對(duì)高血壓、心臟病和甲亢等疾病患者的危害極大,嚴(yán)重者可致死亡[2]。中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號(hào)明確將β-興奮劑(β-agonists)類及其鹽、酯列入食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其它化合物清單[3]。

    然而,在實(shí)際生產(chǎn)環(huán)節(jié),瘦肉精的使用仍屢禁不止。繼2011年“315”晚會(huì)上曝光的“健美豬”事件,2021年的“315”晚會(huì)又曝光了違禁使用瘦肉精的現(xiàn)象,瘦肉精監(jiān)管工作面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。

    近年來,針對(duì)β-受體激動(dòng)劑開展的檢測(cè)項(xiàng)目和方法很多,但監(jiān)管的靶標(biāo)主要以動(dòng)物可食性組織和尿液為主。但實(shí)際上,動(dòng)物可食性組織的采集需在屠宰之后,具有很大的局限性;且由于檢測(cè)的時(shí)滯性,即便檢出不合格,對(duì)于已流入市場(chǎng)的不合格樣品也難以做到及時(shí)有效的管控[4]。尿液的采集非常復(fù)雜且對(duì)采樣人員要求較高,在收集過程中易對(duì)動(dòng)物造成創(chuàng)傷,嚴(yán)重會(huì)致動(dòng)物憋悶死亡。此外,有研究表明,無論是尿液、血液還是可食性組織,在動(dòng)物停藥一段時(shí)間后,由于新陳代謝,獸藥殘留量會(huì)低于許多檢測(cè)方法的檢出限,致使無法檢出,成為了不法養(yǎng)殖逃避監(jiān)管的漏洞[5]。

    針對(duì)監(jiān)管中的難點(diǎn)、痛點(diǎn),檢測(cè)手段也在不斷與時(shí)俱進(jìn)。有研究表明,β-受體激動(dòng)劑在被動(dòng)物攝入后,主要經(jīng)由尿液排出體外,除了血液,在多種組織器官,如肌肉、內(nèi)臟、毛發(fā)、眼等均有殘留[6]。其中,毛發(fā)與其它生物樣本相比,生物結(jié)構(gòu)和生長(zhǎng)規(guī)律獨(dú)特,β-受體激動(dòng)劑與黑色素存在較高親和力,在毛發(fā)形成過程中,β-受體激動(dòng)劑可能通過與黑色素結(jié)合,參與毛纖維的形成,從而與毛纖維緊密結(jié)合,不易從毛發(fā)中消除,殘留量高,監(jiān)測(cè)窗久[7-9]。且毛發(fā)易于采集,對(duì)動(dòng)物無創(chuàng)傷,這些特點(diǎn)使得毛發(fā)可以成為一種很好的檢測(cè)靶標(biāo)。

    目前,已經(jīng)報(bào)道的關(guān)于動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑類藥物檢測(cè)技術(shù)主要有酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、生物傳感器法、高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)、氣相色譜質(zhì)譜法(GC-MS)等[7]。其中,LC-MS/MS法相比于ELISA法、生物傳感器法,其準(zhǔn)確度(定性)和靈敏度(定量)都更高。GC-MS法中,由于氣相色譜對(duì)目標(biāo)化合物有低沸點(diǎn)的要求,往往需要在樣品前處理過程中進(jìn)行復(fù)雜的衍生化操作,而LC-MS/MS法相對(duì)簡(jiǎn)單。因此,本文主要對(duì)近幾年國內(nèi)報(bào)道的動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑的LC-MS/MS檢測(cè)方法進(jìn)行了比較、分析和總結(jié),旨在為動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑在實(shí)際檢測(cè)分析中提供更多有意義的參考和借鑒,也會(huì)在接下來的實(shí)際工作中探索進(jìn)一步優(yōu)化和簡(jiǎn)化檢測(cè)方法的可能性。

    1 樣品制備方法

    因?yàn)閯?dòng)物毛發(fā)長(zhǎng)時(shí)間暴露在外部環(huán)境中,會(huì)接觸到各種各樣的環(huán)境污染,因此即使在相對(duì)干凈區(qū)域采集的樣本,在樣品制備時(shí)也要先實(shí)施清洗,以盡可能去除外源干擾物[5]。

    目前LC-MS/MS檢測(cè)法中常用到的洗滌劑有1% SDS(十二烷基磺酸鈉)、1%吐溫-80溶液、甲醇等,最后用水將洗滌劑洗凈,可以配合超聲清洗。洗凈后可以選擇自然風(fēng)干,或者40~50 °C烘干[10-13]。干燥后剪成適宜長(zhǎng)度的小段備用。市面上也有毛發(fā)研磨器在售賣,但是對(duì)于含油脂成分比較多的毛發(fā),如羊毛等,在實(shí)際中研磨效果不是很理想,常常需要配合液氮使用,成本昂貴,操作復(fù)雜,不太容易實(shí)現(xiàn)大范圍推廣使用。

    2 提取方法

    因?yàn)槊l(fā)獨(dú)特的生物學(xué)結(jié)構(gòu),β-受體激動(dòng)劑在被攝入后進(jìn)入體液,或和血漿蛋白結(jié)合,或呈離子狀態(tài),和細(xì)胞中的其它組分,如黑色素、蛋白質(zhì)等相互作用,保留在角質(zhì)纖維中[14]。若想將藥物從毛發(fā)緊湊、堅(jiān)固的結(jié)構(gòu)中釋放出來,需要通過水解破壞毛發(fā)結(jié)構(gòu)。

    目前LC-MS/MS檢測(cè)方法中用到的水解手段主要有酸水解法、堿水解法以及酶水解法。

    2.1 酸水解法

    酸水解法條件相對(duì)溫和,適用范圍較廣,釋放效率較高。目前用到的水解物有0.1~0.6 mol·L-1鹽酸、0.2 mol·L-1三氟乙酸等,水解條件為47~70 °C消化[15-19]。有研究表明,用酸和甲醇/二硫蘇糖醇的混合溶液,能減少水解時(shí)間,提高效率[20]。

    蘇曉鷗和沈建忠[10]在其研究中用的0.1 mol·L-1的鹽酸溶液水解。60 °C下溫育過夜,水解時(shí)間較長(zhǎng),但酸水解后無需再用其它試劑進(jìn)行提取或者置換,直接進(jìn)行凈化處理。

    2.2 堿水解法

    堿水解法可使毛發(fā)完全溶解,藥物釋放完全,但水解條件較激烈,不適合對(duì)含不穩(wěn)定化合物的樣品進(jìn)行處理。目前使用的水解物主要有0.1~5 mol·L-1氫氧化鈉(在45~100 °C消化10 min~過夜)[21-22],0.2 mol·L-1氨水或者0.5 mol·L-1氫氧化鉀(60 °C消化)[23-26]。

    吳澤君等[11]、張罡等[12]在其研究中皆使用1 mol·L-1氫氧化鈉溶液水解,80 °C水浴保溫1 h,水解時(shí)間較短,但在后續(xù)提取中,需要調(diào)節(jié)pH值,還需用到有機(jī)試劑分多次萃取,氮吹后置換溶劑,無論是提取還是凈化,步驟都相對(duì)比較繁瑣。

    2.3 酶水解法

    相較于酸堿水解,酶水解在中性pH下進(jìn)行,水解條件溫和,對(duì)不穩(wěn)定的化合物適用,專屬性強(qiáng),適用范圍廣,提取效率高,缺點(diǎn)是價(jià)格昂貴。目前已知的水解酶有β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶、蛋白酶K和鏈蛋白酶等[27]。

    閔佳玲等[13]在其研究中使用了β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶進(jìn)行水解。加入乙酸銨緩沖溶液和β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶于37 °C水浴振蕩12 h,水解時(shí)間長(zhǎng),但后續(xù)提取和凈化步驟較簡(jiǎn)單。該方法研究了畜禽毛發(fā)樣品中8種β-受體激動(dòng)劑的痕量分析檢測(cè)。

    3 定量方法

    在色譜分析中,常用的定量方法有校正因子定量、歸一化法、標(biāo)準(zhǔn)加入法、外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法等[28]。在已發(fā)表的關(guān)于動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑LC-MS/MS檢測(cè)方法的文章中,最常用外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量分析。

    3.1 外標(biāo)法

    用待測(cè)組分的純品作為對(duì)照物,通過對(duì)待測(cè)組分與對(duì)照物的信號(hào)響應(yīng)值相比較進(jìn)行定量的方法,稱為外標(biāo)法,又稱直接比較法[28]。相較于內(nèi)標(biāo)法,外標(biāo)法操作簡(jiǎn)單,無需校正因子,適合大批量樣品檢測(cè)分析,但結(jié)果準(zhǔn)確性易受進(jìn)樣重復(fù)性和實(shí)驗(yàn)條件穩(wěn)定性的影響,易出現(xiàn)分析誤差,對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境、實(shí)驗(yàn)操作、儀器性能等要求較高[29]。

    3.2 內(nèi)標(biāo)法

    選擇樣品中不含的某一種或幾種純物質(zhì)作為對(duì)照物加入待測(cè)樣品中,通過對(duì)待測(cè)組分與對(duì)照物的信號(hào)響應(yīng)值進(jìn)行比較,測(cè)定待測(cè)組分含量的方法稱為內(nèi)標(biāo)法[28]。與外標(biāo)法最大的不同就是會(huì)把對(duì)照物,又稱內(nèi)標(biāo)物,加到待測(cè)樣品中一同前處理,因而內(nèi)標(biāo)法能夠在一定程度上消除操作條件的變化而引起的誤差,保證了精密度和準(zhǔn)確度[29]。當(dāng)對(duì)樣品情況不了解、樣品的基質(zhì)很復(fù)雜或者不需要測(cè)定出樣品中所有組分時(shí),可以采用此方法,但內(nèi)標(biāo)物不易找,操作繁瑣,不適合大批量操作。

    4 方法比較

    β-受體激動(dòng)劑為食品源動(dòng)物的禁用藥,因此在實(shí)際檢測(cè)過程中,方法的靈敏度至關(guān)重要。對(duì)上述提到的近年來發(fā)表的動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑LC-MS/MS檢測(cè)方法進(jìn)行歸納比較。結(jié)果(表1)可見,不同水解方法,由于提取過程的復(fù)雜程度和各種干擾因素,如基質(zhì)干擾,皆會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果的靈敏度和精確度;但隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷完善和發(fā)展,方法在更新,從酸水解、堿水解到酶水解,水解物種類越來越多,涉及的β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè)參數(shù)也在不斷增多;同時(shí)內(nèi)標(biāo)物的合理使用,使得部分參數(shù)的回收率也有所改善和提高。

    5 結(jié)論與建議

    毛發(fā)作為監(jiān)管生產(chǎn)環(huán)節(jié)違法使用β-受體激動(dòng)劑的一種靶標(biāo),具有眾多優(yōu)勢(shì):無創(chuàng)傷,易于采集、運(yùn)輸、貯存,監(jiān)測(cè)窗久等[7-9]。LC-MS/MS檢測(cè)方法以其高靈敏度和準(zhǔn)確度在眾多檢測(cè)方法中脫穎而出。

    本文通過對(duì)近幾年發(fā)表的關(guān)于動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑LC-MS/MS檢測(cè)方法進(jìn)行分析,對(duì)于毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè),多年來的研究探討表明,LC-MS/MS檢測(cè)方法,無論是酸水解、堿水解亦或是酶水解法,在靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度方面,都已經(jīng)達(dá)到一定程度的成熟,可以滿足一定的檢測(cè)要求。

    但是也不能忽視,我國目前尚未出臺(tái)有關(guān)毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)毛發(fā)也還不能像尿液、血液一樣實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)速測(cè),對(duì)檢測(cè)條件要求較高,不能進(jìn)行大范圍的普及應(yīng)用。所以接下來,除了不斷明確和完善有關(guān)毛發(fā)中藥物進(jìn)入、蓄積以及內(nèi)外源干擾因素等理論機(jī)制研究,還需要在簡(jiǎn)化提取方法、優(yōu)化檢測(cè)方法方面努力,這樣毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑的檢測(cè)作為一種對(duì)現(xiàn)有其它生物樣本檢測(cè)方法的補(bǔ)充,提供更多的用藥信息,對(duì)監(jiān)管生產(chǎn)環(huán)節(jié)禁用藥的使用、杜絕非法添加具有更加重要的意義。

    參考文獻(xiàn):

    [1] ZHANG J, HE Q, LIU Q Y, et al. Differential gene expression profile in pig adipose tissue treated with/without clenbuterol[J]. BMC Genomics, 2007, 8(1): 433.

    [2] 沈建忠, 江海洋. 畜產(chǎn)品中β-受體激動(dòng)劑殘留及其危害[J]. 中國動(dòng)物檢疫, 2011, 28(6): 27-28.

    [3] 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部. 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第 250 號(hào)[EB/OL].(2021-01-06)[網(wǎng)絡(luò)訪問日期缺失]. http://www.moa.gov.cn/gk/tzgg_1/gg/202001/t20200106

    _6334375.htm.

    [4] 包世俊, 王思珍. 獸藥殘留危害及控制措施[J]. 農(nóng)村經(jīng)濟(jì)與科技, 2020, 31(9): 98-99.

    [5] 曲斌, 耿士偉, 姜加華, 等. 動(dòng)物毛發(fā)中獸藥殘留檢測(cè)進(jìn)展[J]. 畜牧與獸醫(yī), 2012, 44(3): 91-96.

    [6] 劉文光. 動(dòng)物毛發(fā)及尿液中β-受體激動(dòng)劑的殘留測(cè)定UPLC-MS/MS法[D]. 廣州: 華南農(nóng)業(yè)大學(xué), 2018: 1-83.

    [7] 張凱, 張軍民, 趙青余. 動(dòng)物毛發(fā)中β-受體激動(dòng)劑殘留消除規(guī)律及檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào), 2016, 18(2): 41-46.

    [8] 李勵(lì)軍. 鹽酸克倫特羅在肉牛體內(nèi)殘留消除規(guī)律[D]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院, 2014: 1-50.

    [9] TANG C, ZHANG J, LI L, et al. Ractopamine residues in urine, plasma and hair of cattle during and after treatment[J]. Journal of Analytical Toxicology, 2014, 38(3): 149-154.

    [10] 蘇曉鷗, 沈建忠. 用HPLC-MS/MS研究動(dòng)物毛發(fā)中克倫特羅的殘留及代謝規(guī)律[J]. 中國畜牧雜志, 2008, 44(11): 41-46.

    [11] 吳澤君, 龍凌云, 郭世明. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法研究豬毛發(fā)中克侖特羅和萊克多巴胺的殘留及代謝規(guī)律[J]. 中國獸藥雜志, 2010, 44(8): 22-26.

    [12] 張罡, 王鳳美, 湯志旭, 等. 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法研究克倫特羅在豬毛發(fā)中殘留及蓄積代謝規(guī)律[J]. 食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào), 2014, 5(12): 3778-3783.

    [13] 閔佳玲, 費(fèi)丹, 周瑤敏, 等. 超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定畜禽毛發(fā)中8種β-受體激動(dòng)劑[J]. 分析試驗(yàn)室, 2020, 40(8): 942-947.

    [14] CONE E J. Mechanisms of drug incorporation into hair[J]. Therapeutic Drug Monitoring, 1996, 18(4): 438-443.

    [15] GRATACS-CUBARS? M, GARC?A-REGUEIRO J A, CASTELLARI M. Assessment of enrofloxacin and ciprofloxacin accumulation in pig and calf hair by HPLC and fluorimetric detection[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2007, 387(6): 1991-1998.

    [16] DUNNETT M, RICHARDSON D W, LEES P. Detection of enrofloxacin and its metabolite ciprofloxacin in equine hair[J]. Research in Veterinary Science, 2004, 77(2): 143-151.

    [17] ANTIGNAC J P, LE BIZEC B, MONTEAU F, et al. Multi-residue extraction-purification procedure for corticosteroids in biological samples for efficient control of their misuse in livestock production[J]. Journal of Chromatography. B, Biomedical Sciences and Applications, 2001, 757(1): 11-19.

    [18] RAMBAUD L, MONTEAU F, DECEUNINCK Y, et al. Development and validation of a multi-residue method for the detection of a wide range of hormonal anabolic compounds in hair using gas chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Analytica Chimica Acta, 2007, 586(1/2): 93-104.

    [19] HERNNDEZ-CARRASQUILLA M. Gas chromatography-mass spectrometry analysis of anabolic compounds in bovine hair: evaluation of hair extraction procedures[J]. Analytica Chimica Acta, 2001, 434(1): 59-66.

    [20] GLEIXNER A. Analysis of anabolic sex steroids in calf hair. Meanings for residue control[J]. Journal for Meat Production and Meat Processing, 1997, 6: 40-43.

    [21] MCGRATH G J, OKANE E, SMYTH W F, et al. Investigation of the electrochemical oxidation of clenbuterol at a porous Carbon electrode, and its application to the determination of this β-agonist in bovine hair by liquid chromatography with coulometric detection[J]. Analytica Chimica Acta, 1996, 322(3): 159-166.

    [22] GAILLARD Y, VAYSSETTE F, BALLAND A, et al. Gas chromatographic-tandem mass spectrometric determination of anabolic steroids and their esters in hair[J]. Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, 1999, 735(2): 189-205.

    [23] GRATACS-CUBARS M, CASTELLARI M, GARCA-REGUEIRO J A. Detection of sulphamethazine residues in cattle and pig hair by HPLC-DAD[J]. Journal of Chromatography B, 2006, 832(1): 121-126.

    [24] FONT H, ADRIAN J, GALVE R, et al. Immunochemical assays for direct sulfonamide antibiotic detection in milk and hair samples using antibody derivatized magnetic nanoparticles[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2008, 56(3): 736-743.

    [25] ADRIAN J, GRATACS-CUBARS? M, SNCHEZ-BAEZA F, et al. Traceability of sulfonamide antibiotic treatment by immunochemical analysis of farm animal hair samples[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2009, 395(4): 1009-1016.

    [26] CASTELLARI M, GRATACS-CUBARS? M, GARC?A-REGUEIRO J A. Detection of tetracycline and oxytetracycline residues in pig and calf hair by ultra-high-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2009, 1216(46): 8096-8100.

    [27] 凌文婷, 陳桂良, 徐偉東, 等. 動(dòng)物濫用藥物的毛發(fā)分析[J]. 藥物分析雜志, 2008, 28(9): 1578-1582.

    [28] 崔野韓, 曾慶, 奚朝鸞. 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)技術(shù)實(shí)務(wù)[M]. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2011: 21-23.

    [29] 夏玉宇. 化驗(yàn)員實(shí)用手冊(cè)[M]. 北京: 化學(xué)工業(yè)出版社, 1999: 1057.

    收稿日期:2021-07-06

    作者簡(jiǎn)介:伊淑平(1993—),女,河北滄州人,助理農(nóng)藝師,主要從事農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗(yàn)檢測(cè)方面研究。

    亚洲成av人片免费观看| 久久精品91蜜桃| 色哟哟哟哟哟哟| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 成人特级av手机在线观看| 国产不卡一卡二| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| .国产精品久久| 99国产极品粉嫩在线观看| 精品久久久久久久久av| 一级作爱视频免费观看| 成人欧美大片| 91午夜精品亚洲一区二区三区 | 亚洲av.av天堂| 成人午夜高清在线视频| 亚洲avbb在线观看| 在线a可以看的网站| 婷婷色综合大香蕉| 欧美在线一区亚洲| 特大巨黑吊av在线直播| 少妇高潮的动态图| 国产精品av视频在线免费观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 美女高潮的动态| 中文字幕av在线有码专区| 一区二区三区高清视频在线| 十八禁网站免费在线| 日本一二三区视频观看| 久久人妻av系列| 又黄又爽又免费观看的视频| 看十八女毛片水多多多| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 久久这里只有精品中国| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 欧美又色又爽又黄视频| 嫩草影视91久久| 国产av在哪里看| 丰满乱子伦码专区| 成年免费大片在线观看| 国内精品一区二区在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 毛片一级片免费看久久久久 | 又爽又黄a免费视频| 白带黄色成豆腐渣| 免费电影在线观看免费观看| 在现免费观看毛片| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国内精品美女久久久久久| 天堂动漫精品| 国产麻豆成人av免费视频| 真人做人爱边吃奶动态| 国产野战对白在线观看| 岛国在线免费视频观看| 又爽又黄a免费视频| 欧美区成人在线视频| 精品一区二区免费观看| 色精品久久人妻99蜜桃| 老女人水多毛片| 全区人妻精品视频| 国产av不卡久久| 真人一进一出gif抽搐免费| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 成人特级黄色片久久久久久久| 国产精品久久久久久精品电影| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 国产成人啪精品午夜网站| 欧美不卡视频在线免费观看| 亚洲激情在线av| 日韩欧美精品免费久久 | 成人特级av手机在线观看| 51国产日韩欧美| 国产在线男女| 国产三级中文精品| 性色av乱码一区二区三区2| 国产精品亚洲av一区麻豆| 国产免费男女视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 欧美成人一区二区免费高清观看| 久久精品国产亚洲av天美| 国语自产精品视频在线第100页| 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产精品永久免费网站| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产亚洲欧美在线一区二区| 女人被狂操c到高潮| 一个人看视频在线观看www免费| 丁香欧美五月| 高清毛片免费观看视频网站| 赤兔流量卡办理| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 在线观看66精品国产| av在线蜜桃| 免费看a级黄色片| 亚洲国产精品999在线| av欧美777| 床上黄色一级片| 精品久久久久久久久av| 亚洲成a人片在线一区二区| 一本综合久久免费| 亚洲激情在线av| 国产亚洲精品久久久com| 国产色婷婷99| 成人av一区二区三区在线看| 日韩成人在线观看一区二区三区| 亚洲av美国av| 亚洲av电影在线进入| 在线观看午夜福利视频| 少妇人妻精品综合一区二区 | 精品无人区乱码1区二区| 国产大屁股一区二区在线视频| 在线播放无遮挡| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产真实伦视频高清在线观看 | 搡老妇女老女人老熟妇| 久99久视频精品免费| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 亚洲欧美日韩东京热| 精品国产三级普通话版| 午夜精品久久久久久毛片777| 午夜日韩欧美国产| 男女下面进入的视频免费午夜| 午夜老司机福利剧场| 亚洲av成人精品一区久久| 老熟妇仑乱视频hdxx| a级毛片免费高清观看在线播放| 最新在线观看一区二区三区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 长腿黑丝高跟| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 欧美黄色片欧美黄色片| 欧美3d第一页| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 一区二区三区激情视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 亚洲国产精品sss在线观看| 91av网一区二区| 免费高清视频大片| 一个人观看的视频www高清免费观看| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲av成人精品一区久久| 成年版毛片免费区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产av不卡久久| 男人的好看免费观看在线视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产亚洲精品av在线| 国产高潮美女av| 十八禁网站免费在线| 久久性视频一级片| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 一区二区三区激情视频| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲av不卡在线观看| 一级毛片久久久久久久久女| 亚洲人成网站高清观看| 国产野战对白在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲av五月六月丁香网| 久久人人精品亚洲av| 波多野结衣高清作品| 嫩草影院入口| 免费在线观看亚洲国产| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲国产精品sss在线观看| 男女床上黄色一级片免费看| 偷拍熟女少妇极品色| 精品欧美国产一区二区三| 亚洲第一电影网av| 黄色一级大片看看| 免费看a级黄色片| 淫秽高清视频在线观看| 一进一出抽搐动态| 看免费av毛片| 国产极品精品免费视频能看的| 婷婷六月久久综合丁香| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 美女高潮的动态| 搡老熟女国产l中国老女人| 亚洲精品在线观看二区| 国产一区二区在线av高清观看| 久9热在线精品视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 久久精品人妻少妇| 禁无遮挡网站| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 久久人妻av系列| 日本五十路高清| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 看片在线看免费视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 好男人在线观看高清免费视频| 欧美乱色亚洲激情| 亚洲av美国av| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲成人久久性| 欧美日韩乱码在线| 免费观看精品视频网站| 久久99热这里只有精品18| 欧美xxxx性猛交bbbb| 成人国产综合亚洲| 亚洲国产欧美人成| 日本在线视频免费播放| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 亚洲精品久久国产高清桃花| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲国产欧美人成| 国产精品一区二区免费欧美| 亚洲美女视频黄频| 欧美黄色淫秽网站| 又粗又爽又猛毛片免费看| 日韩av在线大香蕉| 国产精品亚洲美女久久久| 久久精品国产清高在天天线| 一级av片app| 国产一区二区三区视频了| 欧美日韩乱码在线| 免费人成在线观看视频色| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 精品福利观看| 一夜夜www| 亚洲av成人精品一区久久| 精品久久久久久,| 男插女下体视频免费在线播放| 欧美乱色亚洲激情| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 久久精品国产亚洲av天美| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 欧美在线一区亚洲| 乱码一卡2卡4卡精品| 99视频精品全部免费 在线| 高清日韩中文字幕在线| 亚洲五月天丁香| 成年女人毛片免费观看观看9| 午夜日韩欧美国产| 91久久精品电影网| 一二三四社区在线视频社区8| 十八禁人妻一区二区| 久久久久精品国产欧美久久久| 久久香蕉精品热| 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美色视频一区免费| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 身体一侧抽搐| 国产亚洲欧美在线一区二区| 欧美色欧美亚洲另类二区| 国产伦一二天堂av在线观看| 一级a爱片免费观看的视频| 成人午夜高清在线视频| 国产久久久一区二区三区| 日本成人三级电影网站| 国产欧美日韩精品亚洲av| 性色avwww在线观看| 精品久久久久久久久久免费视频| 国内精品美女久久久久久| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲精华国产精华精| 亚洲天堂国产精品一区在线| 熟女电影av网| 啪啪无遮挡十八禁网站| 久久久久久久久久成人| 淫秽高清视频在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 亚洲国产精品久久男人天堂| 深夜a级毛片| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲中文字幕日韩| 免费搜索国产男女视频| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产成年人精品一区二区| 亚洲久久久久久中文字幕| 波多野结衣高清无吗| 日韩欧美精品免费久久 | 久久久久国内视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 亚洲熟妇熟女久久| 乱码一卡2卡4卡精品| 丁香欧美五月| 久久久国产成人精品二区| 91久久精品电影网| 精品欧美国产一区二区三| 精品福利观看| 亚洲国产精品成人综合色| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 观看美女的网站| 特大巨黑吊av在线直播| 99国产精品一区二区三区| 91字幕亚洲| 99热只有精品国产| 久久久色成人| 日韩中文字幕欧美一区二区| 在线观看午夜福利视频| 免费av不卡在线播放| 欧美日韩乱码在线| 久久久久久久久久成人| 最近视频中文字幕2019在线8| 怎么达到女性高潮| 亚州av有码| 亚洲第一电影网av| 国内精品美女久久久久久| 天美传媒精品一区二区| 中文资源天堂在线| 欧美性感艳星| 日韩欧美在线乱码| 国产一区二区激情短视频| 中文在线观看免费www的网站| www日本黄色视频网| 国产麻豆成人av免费视频| 日韩中文字幕欧美一区二区| 亚洲精华国产精华精| 黄色配什么色好看| 69人妻影院| 一本综合久久免费| 免费观看人在逋| 午夜日韩欧美国产| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 日韩欧美在线乱码| 我要看日韩黄色一级片| 18+在线观看网站| 国产不卡一卡二| 男插女下体视频免费在线播放| 国产精品野战在线观看| 此物有八面人人有两片| 99国产综合亚洲精品| 亚洲精品456在线播放app | 精品一区二区三区av网在线观看| 一区二区三区激情视频| 欧美一区二区国产精品久久精品| 热99re8久久精品国产| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲片人在线观看| 99riav亚洲国产免费| 成人欧美大片| 美女免费视频网站| 男人的好看免费观看在线视频| 中文字幕高清在线视频| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 最后的刺客免费高清国语| 国产精品人妻久久久久久| 五月伊人婷婷丁香| 亚洲精品久久国产高清桃花| 日日摸夜夜添夜夜添小说| av国产免费在线观看| 免费观看的影片在线观看| 亚洲午夜理论影院| 一进一出好大好爽视频| 首页视频小说图片口味搜索| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 日本黄色视频三级网站网址| 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲专区国产一区二区| 精品免费久久久久久久清纯| 免费看光身美女| 久久久久久大精品| 在线播放无遮挡| a级毛片免费高清观看在线播放| 99精品在免费线老司机午夜| 精品久久国产蜜桃| 看免费av毛片| 国产成人福利小说| a级一级毛片免费在线观看| 国产精品一区二区三区四区久久| 亚洲在线自拍视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产成人a区在线观看| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 五月玫瑰六月丁香| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产av不卡久久| 天堂影院成人在线观看| 天堂动漫精品| 日日夜夜操网爽| 国产一区二区激情短视频| 成人精品一区二区免费| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 欧美激情国产日韩精品一区| 欧美成人性av电影在线观看| .国产精品久久| 成人无遮挡网站| 国产精品98久久久久久宅男小说| 一本久久中文字幕| 成人av一区二区三区在线看| 很黄的视频免费| 国产三级在线视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 日本三级黄在线观看| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 国产精品永久免费网站| 亚洲,欧美精品.| 亚洲在线观看片| 波多野结衣高清作品| 精品国内亚洲2022精品成人| a级毛片a级免费在线| 在线播放无遮挡| 极品教师在线免费播放| 日韩国内少妇激情av| 日日干狠狠操夜夜爽| 看十八女毛片水多多多| 97热精品久久久久久| 日本黄色视频三级网站网址| 欧美日韩福利视频一区二区| 亚洲精品在线观看二区| 国产精品伦人一区二区| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲久久久久久中文字幕| 久久精品国产自在天天线| 欧美xxxx性猛交bbbb| 黄色日韩在线| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲天堂国产精品一区在线| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲av一区综合| 怎么达到女性高潮| 久久国产乱子免费精品| 精品一区二区三区视频在线| 欧美日韩瑟瑟在线播放| АⅤ资源中文在线天堂| 中文字幕免费在线视频6| 欧美又色又爽又黄视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 乱人视频在线观看| 亚洲三级黄色毛片| 香蕉av资源在线| 亚洲av电影不卡..在线观看| 午夜福利在线在线| 麻豆国产av国片精品| av天堂中文字幕网| 99国产精品一区二区蜜桃av| 91九色精品人成在线观看| 国产成人福利小说| 观看免费一级毛片| 国产精品av视频在线免费观看| 久久久国产成人精品二区| 日韩免费av在线播放| 中亚洲国语对白在线视频| 成人永久免费在线观看视频| 精品久久久久久久久av| 欧美国产日韩亚洲一区| av天堂在线播放| 国产欧美日韩一区二区精品| 免费av不卡在线播放| 91久久精品国产一区二区成人| 亚洲午夜理论影院| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲欧美激情综合另类| 老司机午夜福利在线观看视频| 99热精品在线国产| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲成a人片在线一区二区| 中文字幕av成人在线电影| 精品欧美国产一区二区三| 熟女电影av网| 日韩欧美精品免费久久 | 露出奶头的视频| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲精品一区av在线观看| 在线免费观看不下载黄p国产 | 亚洲美女搞黄在线观看 | 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产在视频线在精品| 99久久精品热视频| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产极品精品免费视频能看的| 大型黄色视频在线免费观看| 最近在线观看免费完整版| 精品一区二区三区人妻视频| 一本一本综合久久| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产亚洲av嫩草精品影院| 国产精品久久久久久久电影| 十八禁人妻一区二区| 午夜两性在线视频| 久久午夜福利片| 亚洲专区国产一区二区| 毛片一级片免费看久久久久 | 国内精品久久久久精免费| 91字幕亚洲| 三级毛片av免费| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲人成电影免费在线| 两个人的视频大全免费| 亚洲五月婷婷丁香| 国产视频一区二区在线看| 亚洲精品久久国产高清桃花| 一级黄色大片毛片| 一区二区三区免费毛片| 熟女电影av网| 亚洲欧美清纯卡通| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 国产爱豆传媒在线观看| 国产美女午夜福利| 日本五十路高清| 男人狂女人下面高潮的视频| 美女免费视频网站| 国产成人欧美在线观看| 亚洲真实伦在线观看| 日韩有码中文字幕| 国产高潮美女av| 国产美女午夜福利| 国产av在哪里看| 国产精品伦人一区二区| 日韩精品青青久久久久久| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲av五月六月丁香网| 国产黄色小视频在线观看| av专区在线播放| 精品午夜福利在线看| 国产精品电影一区二区三区| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 国产精品不卡视频一区二区 | 国产精品人妻久久久久久| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 69av精品久久久久久| 女同久久另类99精品国产91| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产免费一级a男人的天堂| 久99久视频精品免费| 久久人人精品亚洲av| 婷婷丁香在线五月| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国产精品免费一区二区三区在线| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 18+在线观看网站| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产探花极品一区二区| 欧美激情在线99| 中文字幕高清在线视频| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 久久精品综合一区二区三区| 91狼人影院| 99国产精品一区二区蜜桃av| h日本视频在线播放| 嫩草影院入口| 亚洲成人免费电影在线观看| 简卡轻食公司| 无遮挡黄片免费观看| 欧美高清性xxxxhd video| www.色视频.com| 男插女下体视频免费在线播放| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 国产精品一区二区免费欧美| 性色av乱码一区二区三区2| 日韩中文字幕欧美一区二区| 一级av片app| 哪里可以看免费的av片| 国产精品乱码一区二三区的特点| 午夜精品久久久久久毛片777| 一区福利在线观看| 真人做人爱边吃奶动态| 久久久久国内视频| 精品久久久久久,| 午夜精品一区二区三区免费看| 两个人视频免费观看高清| 日韩免费av在线播放| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲电影在线观看av| 欧美3d第一页| www.999成人在线观看| 特级一级黄色大片| 成人av在线播放网站| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| netflix在线观看网站| 久久久久国内视频| 亚洲国产精品sss在线观看| 啦啦啦韩国在线观看视频| 欧美黑人巨大hd| 成人国产一区最新在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 欧美日韩乱码在线| 久久久久久九九精品二区国产| 高清在线国产一区| 免费观看人在逋| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲男人的天堂狠狠| 我要看日韩黄色一级片| 999久久久精品免费观看国产| 欧美另类亚洲清纯唯美| a级毛片a级免费在线| 欧美三级亚洲精品| 国产日本99.免费观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产免费男女视频| 可以在线观看的亚洲视频| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 国内精品久久久久精免费| 最近视频中文字幕2019在线8| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产黄色小视频在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 给我免费播放毛片高清在线观看| 老熟妇仑乱视频hdxx| 美女高潮的动态| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 日本一本二区三区精品| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 中文字幕av在线有码专区| 制服丝袜大香蕉在线| 欧美潮喷喷水| 久久久久久久午夜电影| 中文字幕高清在线视频| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片|