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    我國豬群偽狂犬病病毒變異株感染人的警示

    2021-12-05 08:32:01牛中偉
    豬業(yè)科學(xué) 2021年9期
    關(guān)鍵詞:狂犬病毒力毒株

    牛中偉,張 軍

    (法國詩華動物保健公司,北京 100102)

    皰疹病毒是一群有囊膜的DNA病毒,生物學(xué)特性相似,歸類為皰疹病毒科。目前總共發(fā)現(xiàn)了100多種,分為α、β、γ三大亞科。其中代表性的α皰疹病毒有3種:人的皰疹病毒、雞的馬立克氏病病毒和哺乳動物尤其豬偽狂犬病病毒。

    偽狂犬病,顧名思義是一種以疾病癥狀的方式命名的病種,因早期發(fā)現(xiàn)該病時主要見于一些終末宿主如貓、狗等伴侶動物表現(xiàn)類似狂犬病的癥狀而得名。我國第一例偽狂犬病病例報道為1947年上海的1只貓。偽狂犬病病毒具有廣泛的哺乳動物宿主,豬是唯一的自然儲毒庫,感染后有的豬癥狀輕微甚至不被發(fā)現(xiàn)。其他動物感染后表現(xiàn)奇癢、狂犬病類似癥狀終歸死亡。近年國內(nèi)豬場偽狂犬病“變異株”流行及人Covid-19疫情背景下,偽狂犬病病毒的人獸共患問題引起國內(nèi)外廣泛關(guān)注。

    1 國內(nèi)豬群偽狂犬病病毒的變異

    1950年國內(nèi)證實偽狂犬病病毒存在以來,家養(yǎng)豬群一直飽受偽狂犬病病毒的困擾。偽狂犬病病毒感染豬群不分日齡、種群:可以造成公豬的不育、母豬的死胎流產(chǎn)等繁殖障礙;也可以感染產(chǎn)房仔豬造成神經(jīng)癥狀、腹瀉死亡;保育、育肥豬的感染引起呼吸道疾病、細(xì)菌繼發(fā)感染等,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。豬只日齡越小對偽狂犬病病毒越易感,產(chǎn)房仔豬感染死亡率近100%。

    1970年為控制國內(nèi)豬群偽狂犬病,我國引入匈牙利偽狂犬病疫苗Bartha株免疫豬只。偽狂犬病弱毒疫苗Bartha-k61為人工傳代致弱,缺失主要毒力基因gE,使用至今有60年歷史,是同期世界上最優(yōu)秀的疫苗之一。其良好的安全性及高效的保護(hù)幫助很多國家控制了當(dāng)?shù)刎i群偽狂犬病,應(yīng)用配套區(qū)分疫苗、野毒的檢測試劑盒,很多國家也成功在家養(yǎng)豬群凈化了該病。我國自免疫該疫苗以來,很好控制了國內(nèi)豬群偽狂犬病,到20世紀(jì)90年代很少有豬偽狂犬病流行的報道,絕大多數(shù)豬場也放松了對豬偽狂犬病的警惕。

    偽狂犬病病毒為雙鏈DNA病毒,遺傳相對穩(wěn)定。雖然公認(rèn)的偽狂犬病病毒只有一個血清型,但不同分離株毒力有明顯差異,現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)能找出這些毒株的遺傳差異,并研究其與毒力表型的關(guān)聯(lián)。基于全基因組測序,人們習(xí)慣把歐美及中國的偽狂犬病毒株分成兩類:基因Ⅰ型、基因Ⅱ型。歐美毒株多為基因Ⅰ型,比如我國引入的弱毒疫苗Bartha株;亞洲尤其中國流行基因Ⅱ型,包括20世紀(jì)國內(nèi)豬群偽狂犬病流行期間分離的經(jīng)典毒株Fa、Ea、Sc等,以及一些以這些豬場分離株為基礎(chǔ)研發(fā)的弱毒疫苗HB98、SA215株等?;蛐偷牟煌]有影響疫苗的效果,Bartha-k61幫助我國很好地控制了20世紀(jì)豬群偽狂犬病的流行并持續(xù)使用至今。

    研究者的關(guān)注點不同,分類結(jié)果也會不同。巴西學(xué)者Fonseca依據(jù)偽狂犬病病毒gC基因?qū)⑹澜绺鞯氐膫慰袢《局攴譃?個基因型,剛好與依據(jù)分離地域建立的毒株分類結(jié)果相符,表明1902年Aujeszky確診首例偽狂犬病以來,隨著國際貿(mào)易、養(yǎng)殖量、規(guī)模及密度不斷擴(kuò)大,偽狂犬病病毒在世界傳播并繼續(xù)演變?yōu)榫哂械胤教攸c的毒株。Fonseca同時發(fā)現(xiàn)了明顯的病毒重組跡象。所以人們要習(xí)慣偽狂犬病病毒具有毒株多樣性,雖然它只有一個血清型!

    2011年以后,中國免疫豬群暴發(fā)偽狂犬病引起了人們的警覺,尤其華北、中原地區(qū)疫情初期很多豬場家養(yǎng)的貓、狗感染偽狂犬病死亡。童光志課題組率先分離了毒株,并進(jìn)行了測序和毒力研究,證實了其與國內(nèi)經(jīng)典毒株毒力和遺傳的差異。雖然早期的毒力實驗動物選擇有所爭議,但后續(xù)研究者的跟進(jìn)報道和重復(fù)驗證,讓國內(nèi)存在毒力增強的偽狂犬病變異株這一提法深入人心,不同課題組陸續(xù)分離到了變異株HN1201、ZJ01、TJ等,同時也在緊鑼密鼓地開展相應(yīng)毒株的疫苗研發(fā)。據(jù)報2013年國內(nèi)有9個省區(qū)分離到變異株,2016年時分離出變異株的省區(qū)就達(dá)到了23個。“變異株”的提法是與原經(jīng)典毒株Fa、Ea、Sc等進(jìn)行了區(qū)分,無論經(jīng)典還是變異毒株其基因型還是屬于我國地域性的基因Ⅱ型。變異毒株的出現(xiàn)除了引發(fā)國內(nèi)豬群新一輪偽狂犬病流行外,也引起了人們對公共衛(wèi)生方面的擔(dān)憂

    2 人感染偽狂犬病病毒的近況及歷史

    人Covid-19疫情初期,張文宏教授曾提到華山醫(yī)院感染收治的病例:來自江西的某豬場女工因豬糞水入眼引發(fā)疾病,表現(xiàn)發(fā)熱、頭痛、視力受損,NGS(高通量測序技術(shù))和Real-time PCR確認(rèn)病原為國內(nèi)變異株偽狂犬病病毒。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、河南省人民醫(yī)院及動物疫病控制中心聯(lián)合報道了4例偽狂犬病病毒感染引起的人急性腦炎病例,成功分離出PRV hsD-1/2019致病株,完善了Koch's假說證據(jù)鏈。

    2018年至今國內(nèi)報道人感染偽狂犬病病毒23例,21例經(jīng)NGS確認(rèn),患者大都是養(yǎng)豬人、屠夫、獸醫(yī)、豬肉販等。高福院士也撰文:偽狂犬病是被忽視的人獸共患病嗎?

    人是否能感染偽狂犬病病毒一直存在爭議。2001年Skinner對455名疑似患者和高危人群進(jìn)行偽狂犬病病毒中和抗體調(diào)查,結(jié)果都為陰性,人工感染高含量病毒也未見任何癥狀。1914年最早報道的2例疑似人感染病例為兩名實驗員,接觸病貓后表現(xiàn)虛弱、咽喉痛、奇癢、不安,抗體檢測和病毒分離失?。?940年兩名實驗員,1963年4名種豬場工人接觸病狗,1983年兩名游客因照顧病貓感染,以上案例都沒有確診。1986年3名歐洲人接觸患病動物后出現(xiàn)發(fā)熱、虛弱、盜汗、疲憊等癥狀,近一年時間才恢復(fù),3人在病后半年至一年內(nèi)檢測到特異性中和抗體,但沒有做IgG、IgM分型,不足以直接證明被感染。

    筆者接聽豬場工人電話咨詢時,也不乏被問到給豬免疫偽狂犬病疫苗時不小心打到自己手上、胳膊上會不會被感染、該如何處理的情況,極少個例出現(xiàn)有胳膊腫脹的,但難以確診因疫苗毒引起,絕大多數(shù)工人未做任何處理且未有進(jìn)一步發(fā)展。但短期內(nèi)變異株偽狂犬病感染人數(shù)量激升且確診,不得不讓人擔(dān)憂。

    3 人感染偽狂犬病病毒的生物學(xué)和環(huán)境基礎(chǔ)

    偽狂犬病病毒通過糖蛋白gD與細(xì)胞nectin-1受體結(jié)合入侵宿主細(xì)胞,人與豬細(xì)胞的nectin-1受體結(jié)構(gòu)相似,氨基酸同源性>90%,存在跨物種傳播的可能。

    中國是世界最大的生豬產(chǎn)地,有龐大的從業(yè)人員,生產(chǎn)模式多樣。檢測水平提高,尤其NGS的應(yīng)用讓很多傳染病得以確診,豬病流行與人感染病例“暴發(fā)”時間上重疊,加重了人們的疑慮。但相對于龐大的從業(yè)人員基數(shù),確診的感染病例還是少數(shù)。偽狂犬病的跨種傳播僅局限于個別毒株、特定條件?還是大量的隱性感染未被發(fā)現(xiàn)?這需要做深入研究。從業(yè)人員屬于密接人群,需重視偽狂犬病感染人的風(fēng)險并采取防護(hù)措施。豬群內(nèi)偽狂犬病的傳播除了母仔、精液的垂直傳播外,體液分泌如唾液、鼻液,排泄物如尿液、糞便等含有大量病毒污染周圍環(huán)境。如在華山醫(yī)院確診被感染的江西女工,由豬舍糞水內(nèi)污染的偽狂犬病病毒濺入眼睛而直接感染。

    4 豬群偽狂犬病凈化

    Elizabeth通過神經(jīng)系統(tǒng)感染模式動物的研究,發(fā)現(xiàn)偽狂犬病病毒的毒力與感染神經(jīng)系統(tǒng)的能力呈負(fù)相關(guān)。強毒株過早地致死宿主并未入侵中樞神經(jīng),弱毒如Bartha株等相比強毒即使將宿主致死,也獲得了幾倍的存活時長并占位中樞神經(jīng)。種間傳播表明毒株已經(jīng)在選擇壓力下改變,人感染并確診病例數(shù)增多是一個危險的信號??刂撇艋瘋魅驹词歉镜某雎?。

    我國自免疫Bartha株,在1990-2010年間控制了偽狂犬病流行,但盲目樂觀坐失了強制免疫和檢測凈化的機會,許多偽狂犬病變異株流行的地區(qū),當(dāng)時正減免甚至不免偽狂犬病疫苗,張文宏教授報道的江西病例其所在豬場也沒免疫。高頻次、大劑量偽狂犬病疫苗免疫恢復(fù)后,2015年以來變異株的流行明顯降低。但在非洲豬瘟疫情期間,很多豬場定點清除過程中采取的靜默生產(chǎn),讓偽狂犬病等的免疫陷入混亂;大量三元母豬未經(jīng)馴化培育入群;為恢復(fù)生產(chǎn)多來源背景不明的豬只混群,又讓很多豬場偽狂犬病大量轉(zhuǎn)陽?,F(xiàn)階段,即使免疫,大家對偽狂犬病的期望普遍采取免疫不發(fā)病的心態(tài),也增加了其繼續(xù)流行的風(fēng)險??刂曝i群偽狂犬病,DIVA免疫凈化是關(guān)鍵。疫苗研發(fā)依然沒有脫離缺失gE基因的方向,gE抗體的鑒別診斷已經(jīng)深入人心。考慮人獸共患的風(fēng)險及種間傳播,經(jīng)典疫苗安全有效的情況下應(yīng)審慎地推進(jìn)變異株弱毒疫苗的大規(guī)模接種,避免人為的選擇壓力和適應(yīng)。運用現(xiàn)有的、保守、低風(fēng)險、有效的手段,配以嚴(yán)格的凈化控制偽狂犬病是當(dāng)務(wù)之急。

    (參考文獻(xiàn)略)

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