膀胱癌腫瘤微環(huán)境中抑制性免疫浸潤細(xì)胞的研究進(jìn)展

黃 楠 綜述，鄧紅彬 審校

(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤科，重慶 400016)

膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的腫瘤。在初診時(shí)，約有75%的患者被診斷為非肌層浸潤性膀胱癌(NMIBC)，約25%被診斷為肌層浸潤性膀胱癌(MIBC)或轉(zhuǎn)移性膀胱癌。免疫治療在這兩類分期的膀胱癌患者中發(fā)揮了重要作用。對(duì)于NMIBC腫瘤切除術(shù)后的中高危患者，術(shù)后行膀胱內(nèi)卡介苗(BCG)灌注可降低腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。而對(duì)于MIBC中順鉑不耐受或轉(zhuǎn)移性膀胱癌的患者，免疫檢查點(diǎn)抑制劑(ICIs)可提高腫瘤客觀緩解率、延長患者生存期，但是仍有大部分患者不能從免疫治療過程中獲益[1-2]。

腫瘤微環(huán)境(TME)由腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞、間質(zhì)細(xì)胞、細(xì)胞外基質(zhì)、細(xì)胞分泌的因子組成，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、免疫抑制過程中發(fā)揮重要作用，其中TME內(nèi)有一組具有免疫抑制表型的免疫浸潤細(xì)胞，可通過內(nèi)在或外在兩種途徑共同調(diào)控腫瘤免疫抑制。免疫抑制的內(nèi)在控制是通過表達(dá)抑制性受體介導(dǎo)的，而外在控制是通過細(xì)胞間的接觸和(或)分泌抑制因子介導(dǎo)的[3]。為提高膀胱癌患者對(duì)免疫治療的反應(yīng)率及拓寬免疫治療策略提供參考，本文針對(duì)膀胱癌TME中的抑制性免疫浸潤細(xì)胞，先概述其在多種腫瘤中的免疫調(diào)節(jié)功能及機(jī)制，再分別對(duì)其在膀胱癌微環(huán)境中促癌機(jī)制、潛在的治療靶點(diǎn)、對(duì)預(yù)后的預(yù)測價(jià)值進(jìn)行綜述。

1 抑制性免疫浸潤細(xì)胞的生物學(xué)功能及免疫調(diào)節(jié)機(jī)制

最近針對(duì)TME的研究發(fā)現(xiàn)，幾種免疫浸潤細(xì)胞展現(xiàn)出重要的免疫抑制功能，其包括髓樣抑制細(xì)胞(MDSCs)、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(TAMs)、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)和腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞(TANs)。了解這些細(xì)胞的生物學(xué)功能及其發(fā)揮免疫抑制的作用機(jī)制或促癌機(jī)制，能夠?yàn)槟孓D(zhuǎn)膀胱癌的免疫抑制微環(huán)境提供新的思路。

1.1MDSCs MDSCs是一群異質(zhì)性的不成熟的髓系細(xì)胞，主要由兩個(gè)亞群組成：單核性髓樣抑制細(xì)胞(M-MDSCs)和粒性髓樣抑制細(xì)胞(G-MDSCs)。在慢性炎癥及腫瘤等病理狀態(tài)下，MDSCs相關(guān)基因表達(dá)水平改變，使得微環(huán)境中活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)水平增加，精氨酸酶(Arg1)、前列腺素E2(PGE2)和一些抗炎細(xì)胞因子表達(dá)上調(diào)，導(dǎo)致免疫抑制，并支持腫瘤的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移[4]。MDSCs大致通過以下4種機(jī)制實(shí)現(xiàn)其促癌作用：(1)保護(hù)腫瘤細(xì)胞免受免疫殺傷；(2)TME的重塑；(3)轉(zhuǎn)移前微環(huán)境的建立；(4)與腫瘤細(xì)胞相互作用促進(jìn)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)[5]。

1.2TAMs 巨噬細(xì)胞幾乎存在于人體所有組織中。根據(jù)環(huán)境中不同的刺激信號(hào)，巨噬細(xì)胞可以彈性分化為不同的表型，如M1和M2樣巨噬細(xì)胞。在病原體感染或炎癥早期，M1樣或經(jīng)典途徑激活[γ干擾素(IFN-γ)]的巨噬細(xì)胞能夠產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子[白細(xì)胞介素-6(IL-6)、IL-12、腫瘤壞死因子α(TNF-α)等]，表現(xiàn)出殺傷和抗病原體效應(yīng)。而慢性炎癥時(shí)，M2樣或替代途徑激活(IL-4)的巨噬細(xì)胞通過產(chǎn)生抗炎細(xì)胞因子(IL-10、CCL-22等)、組織修復(fù)因子[轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(BMP-2)等]、促血管化因子[血管生長因子A(VEGF-A)]，抑制免疫反應(yīng)，并促進(jìn)組織修復(fù)[6]。TAMs中部分表現(xiàn)為M1樣巨噬細(xì)胞表型，尤其在腫瘤發(fā)生早期，呈現(xiàn)出抗腫瘤效應(yīng)，而腫瘤通過對(duì)TAMs進(jìn)行重編程，使得TAMs中絕大多數(shù)表現(xiàn)為M2樣巨噬細(xì)胞表型，在促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要的作用[7-8]。

1.3Tregs Tregs首次在小鼠中被描述為抑制性CD4+T細(xì)胞，對(duì)維持免疫穩(wěn)態(tài)和自我耐受至關(guān)重要[9]。Tregs是有著Foxp3和(或)CD25表達(dá)的CD4+T細(xì)胞，F(xiàn)oxp3能夠抑制炎癥因子的轉(zhuǎn)錄，CD25為IL-2受體的α鏈。Tregs主要通過以下5種機(jī)制實(shí)現(xiàn)其免疫抑制功能：(1)釋放抑制性細(xì)胞因子，如TGF-β、IL-10；(2)通過免疫檢查點(diǎn)分子的細(xì)胞-細(xì)胞接觸：如CTLA-4、LAG3；(3)通過穿孔素或顆粒酶誘導(dǎo)細(xì)胞溶解；(4)IL-2的消耗導(dǎo)致T細(xì)胞的凋亡；(5)通過胞外酶CD39將ATP水解為ADP和AMP，阻斷效應(yīng)T細(xì)胞的ATP供應(yīng)，并占據(jù)T細(xì)胞表面A2A腺苷受體而抑制效應(yīng)T細(xì)胞功能[3,10]。

1.4TANs 中性粒細(xì)胞是感染初期最重要的免疫防御細(xì)胞。但在腫瘤組織中，環(huán)境中的信號(hào)因子可調(diào)控中性粒細(xì)胞的分化及表型，使TANs具有不同的功能。當(dāng)TME中含有IFN-β或TGF-β通路被抑制時(shí)，TANs表現(xiàn)免疫殺傷及抑癌作用的N1表型。當(dāng)環(huán)境中富含TGF-β時(shí)，TANs表現(xiàn)出免疫抑制及促癌作用的N2表型，其細(xì)胞內(nèi)的基因表達(dá)模式也發(fā)生變化，如CCL17、Arg1、MMP9上調(diào)[11]。N2中性粒細(xì)胞主要通過以下5種途徑實(shí)現(xiàn)促癌作用：(1)通過產(chǎn)生ROS、NO，導(dǎo)致體細(xì)胞DNA失穩(wěn)，促進(jìn)腫瘤發(fā)生；(2)通過產(chǎn)生前列腺素E2(PEG2)等促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長；(3)通過產(chǎn)生蛋白酶水解組織結(jié)構(gòu)及抗腫瘤因子利于腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移；(4)通過釋放Bv8、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)等促進(jìn)腫瘤血管生成；(5)通過上調(diào)Arg1、PD-1抑制抗腫瘤免疫[11]。

2 膀胱癌TME中的免疫抑制細(xì)胞與腫瘤進(jìn)展

腫瘤進(jìn)展的標(biāo)志之一是免疫抑制TME的形成[12]。在此環(huán)境下，腫瘤細(xì)胞逃逸免疫系統(tǒng)的殺傷是腫瘤進(jìn)展的前提條件。同時(shí)，腫瘤細(xì)胞還需要和TME中的其他細(xì)胞相互作用，提供必備的信號(hào)分子和通路。若能夠以免疫抑制細(xì)胞為中心，通過抑制這些信號(hào)通路，可能為抑制膀胱癌的進(jìn)展提供新的策略。

2.1MDSCs可促進(jìn)膀胱癌進(jìn)展 最新的證據(jù)表明，膀胱癌微環(huán)境中的腫瘤細(xì)胞或其他細(xì)胞能夠誘導(dǎo)MDSCs的募集，發(fā)揮免疫抑制作用，從而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。對(duì)97例膀胱癌患者的腫瘤組織分析發(fā)現(xiàn)，趨化因子CXCL2、MIF及MDSCs表面受體CXCR2的表達(dá)上調(diào)與更晚的臨床分期有關(guān)[13]。膀胱癌細(xì)胞通過CXCL2/MIF-CXCR2信號(hào)通路誘導(dǎo)MDSCs的募集，隨后MDSCs通過上調(diào)抑制性介質(zhì)的表達(dá)，如Arg1、iNOS、ROS、PD-L1和P-STAT3，促進(jìn)免疫抑制環(huán)境的形成及腫瘤進(jìn)展[13]。CHEVALIER等[14]發(fā)現(xiàn)固有淋巴細(xì)胞2組(ILC2)能夠通過分泌IL-13誘導(dǎo)MDSCs的募集，并上調(diào)了Arg1、iNOS和C/EBPβ的表達(dá)，顯著抑制T細(xì)胞增殖，導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展。MDSCs促進(jìn)膀胱癌進(jìn)展的作用是較明確的，但目前研究是以回顧性分析為主，或研究對(duì)象主要集中于外周血循環(huán)MDSCs,故仍需要有更多的前瞻性研究來驗(yàn)證。

2.2TAMs能夠促進(jìn)膀胱癌進(jìn)展 目前較多的研究表明，TAMs除介導(dǎo)免疫抑制實(shí)現(xiàn)腫瘤免疫逃逸外，還參與腫瘤進(jìn)展的各個(gè)階段。研究者對(duì)155例NMIBC患者的腫瘤組織分析發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá)的CXCL1能夠促進(jìn)TAMs和癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAFs)的浸潤，并與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)。TAMs及CAFs能通過產(chǎn)生CXCL1促進(jìn)膀胱癌的侵襲性，促進(jìn)癌細(xì)胞與兩者之間的黏附。TAMs、CAFs及膀胱癌細(xì)胞三者共同建立的荷瘤小鼠中，CXCL1的過表達(dá)能夠促進(jìn)腫瘤的生長[15]。MARTNEZ等[16]發(fā)現(xiàn)，膀胱癌細(xì)胞表達(dá)的BMP-4參與了巨噬細(xì)胞向M2樣表型的分化，而M2樣巨噬細(xì)胞通過產(chǎn)生IL-6、TGF-β、VEGFA等因子促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。TAKEUCHI等[17]在21例膀胱癌患者的腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)大量TAMs和M2樣巨噬細(xì)胞分布，并且TAMs計(jì)數(shù)與微血管計(jì)數(shù)呈正相關(guān)，故推測出TAMs能促進(jìn)腫瘤血管生成。CHEN等[18]發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼RNA——LNMAT1在淋巴結(jié)陽性的患者腫瘤中表達(dá)上調(diào)，并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。LNMAT1能夠表觀激活趨化因子CCL2的表達(dá)和上調(diào)，促進(jìn)TAMs的募集，TAMs通過分泌VEGFC促進(jìn)膀胱癌淋巴管的生成及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。WU等[19]發(fā)現(xiàn)TAMs可通過產(chǎn)生CXCL8，刺激膀胱癌細(xì)胞分泌MMP-9、VEGF，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲、遷移及內(nèi)皮細(xì)胞管生成。這些研究表明，TAMs通過與腫瘤細(xì)胞及其他間質(zhì)細(xì)胞的相互作用，促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的侵襲、黏附和轉(zhuǎn)移，促進(jìn)腫瘤血管及淋巴管生成，從而促進(jìn)膀胱癌的進(jìn)展。但目前研究大多基于離體實(shí)驗(yàn)，需要進(jìn)一步的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證。

2.3Tregs能夠促進(jìn)膀胱癌進(jìn)展 Tregs在正常情況下維持機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)，但在TME中，通過誘導(dǎo)Tregs募集，發(fā)揮其免疫抑制功能，促進(jìn)膀胱癌進(jìn)展。CCR8是腫瘤組織中Tregs表面重要的趨化因子受體。CCR8能夠通過上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子Foxo1和c-MAF的表達(dá)，穩(wěn)定Tregs表型及免疫抑制功能，塑造MIBC內(nèi)的免疫抑制環(huán)境，促進(jìn)膀胱癌進(jìn)展[20]。在對(duì)犬膀胱癌組織的分析中，腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的趨化因子CCL17，能夠與Tregs表面的受體CCR4結(jié)合，誘導(dǎo)Tregs向腫瘤組織浸潤，實(shí)現(xiàn)免疫抑制功能，導(dǎo)致腫瘤進(jìn)展[21]。盡管Tregs的免疫抑制作用已較為明確，但仍需要有更多的實(shí)驗(yàn)來支持。

2.4TANs可能與膀胱癌進(jìn)展有關(guān) 目前針對(duì)TANs的研究主要集中于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，或人體循環(huán)中性粒細(xì)胞。關(guān)于人體腫瘤組織中的TANs研究相對(duì)較少。細(xì)胞共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，中性粒細(xì)胞通過上調(diào)雄激素受體(AR)信號(hào)，使得MMP-13在膀胱癌細(xì)胞的表達(dá)上調(diào)，從而促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的侵襲[22]。由于TANs存在抑癌和促癌作用的兩種表型，鑒于目前有限的研究，TANs與膀胱癌進(jìn)展的關(guān)系需要進(jìn)一步探索。

3 膀胱癌微環(huán)境中的免疫抑制細(xì)胞與抗腫瘤治療

通過靶向膀胱癌微環(huán)境中免疫抑制細(xì)胞或信號(hào)通路，可作為一種潛在的抗腫瘤治療方式。目前研究多針對(duì)MDSCs、TAMs、Tregs這3類免疫抑制細(xì)胞，而對(duì)TANs暫無明確的治療靶點(diǎn)。推測可能是TANs兩種表型鑒定的困難；其次是中性粒細(xì)胞作為機(jī)體重要的免疫防御細(xì)胞，通過靶向該細(xì)胞而實(shí)現(xiàn)抗腫瘤作用可能給機(jī)體造成嚴(yán)重的感染。

3.1抑制MDSCs能夠提高化療及免疫治療療效 單獨(dú)靶向MDSCs的抗腫瘤效應(yīng)是有限的，因此多數(shù)研究致力于靶向MDSCs聯(lián)合傳統(tǒng)治療方式，產(chǎn)生協(xié)同增效作用。對(duì)荷瘤小鼠聯(lián)合注射順鉑及MDSCs抑制劑(α-Gr1抗體)能夠協(xié)同減少膀胱癌組織中G-MDSCs的數(shù)量，使得 CD8+T細(xì)胞含量增加，顯著抑制腫瘤進(jìn)展[23]。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，RS 504393(一種選擇性的CCL2拮抗劑)能夠抑制M-MDSCs募集,克服吉西他濱耐藥，使得荷瘤小鼠的生存延長[24]。當(dāng)對(duì)鉑類耐藥鼠注射MDSCs抑制劑時(shí)，MDSCs數(shù)量明顯減少，而CD8+T細(xì)胞的浸潤增加，產(chǎn)生抗腫瘤效應(yīng)。當(dāng)MDSCs抑制劑與α-PD-L1聯(lián)合作用于耐藥鼠時(shí)，觀察到了顯著的抗腫瘤效應(yīng)，推測可能是由于MDSCs抑制劑通過增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的功能從而提高了α-PD-L1的抗腫瘤療效[25]。靶向MSDCs聯(lián)合其他治療方式的臨床研究已在其他腫瘤中開展(NCT03302247、NCT02991196等)，但針對(duì)膀胱癌的臨床研究尚少見報(bào)道。

3.2TAMs可作為潛在治療靶點(diǎn) 將膀胱癌細(xì)胞及巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄因子核因子κB (NF-κB )抑制劑BAY11-7082，能夠通過miR-30a/NF-κB/Snail信號(hào)通路，抑制巨噬細(xì)胞向M2樣表型分化，從而抑制癌細(xì)胞的上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，降低膀胱癌的侵襲及轉(zhuǎn)移[26]。有研究者分析了一種TAMs亞型——DC-SIGN+TAMs，其在MIBC患者腫瘤組織中大量表達(dá)。與M2表型相似，DC-SIGN+TAMs能夠分泌抗炎細(xì)胞因子，表現(xiàn)出免疫抑制及促癌作用。當(dāng)用中和抗體廢除DC-SIGN+TAMs的功能時(shí)，其產(chǎn)生抗炎細(xì)胞因子的功能被削弱，并且還能增強(qiáng)PD-1抑制劑介導(dǎo)的CD8+T細(xì)胞對(duì)膀胱癌細(xì)胞的免疫殺傷效應(yīng)[27]。由于目前針對(duì)TAMs的研究主要集中于離體實(shí)驗(yàn)，故其作為治療靶點(diǎn)需要更多的活體實(shí)驗(yàn)來證明。

3.3Tregs可作為潛在的治療靶點(diǎn) 如前所述，CCR8能夠穩(wěn)定Tregs表型而實(shí)現(xiàn)免疫抑制功能，阻斷CCR8可使Tregs失穩(wěn)并轉(zhuǎn)變?yōu)榇嘈员硇停瑢?dǎo)致抗腫瘤免疫重新被激活，并進(jìn)一步提高PD-1抑制劑的療效[20]。在另一項(xiàng)研究中，CCL17-CCR4的結(jié)合能夠誘導(dǎo)Tregs的浸潤，當(dāng)用人源化抗體阻斷CCR4后，異種移植小鼠模型中Tregs的浸潤和腫瘤的生長均受到抑制?；加凶园l(fā)性膀胱癌的犬對(duì)CCR4阻斷劑同樣可產(chǎn)生療效應(yīng)答，使其生存率提高[21]。值得注意的是，因?yàn)門regs在維持機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵作用，故研究對(duì)象應(yīng)限定為腫瘤組織中的Tregs，如何特異地靶向TME的Tregs將是今后的努力方向。

4 膀胱癌微環(huán)境中的免疫抑制細(xì)胞與患者預(yù)后

目前的研究證據(jù)顯示，膀胱癌微環(huán)境中的某些免疫抑制細(xì)胞具有預(yù)后價(jià)值，這些細(xì)胞包括TAMs、Tregs和TANs。多數(shù)的研究結(jié)論傾向于高浸潤水平的TAMs及Tregs與患者預(yù)后不良相關(guān)，而TANs的預(yù)后作用具有異質(zhì)性。膀胱癌微環(huán)境的MDSCs預(yù)后作用尚不明確。

4.1TAMs的浸潤與膀胱癌患者的預(yù)后相關(guān) 較多的證據(jù)提示TAMs的浸潤水平與膀胱癌患者的預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，但有少數(shù)的研究得出相反的結(jié)論。BOSTR?M等[28]對(duì)184例手術(shù)后膀胱癌患者進(jìn)行中位時(shí)間達(dá)6年的隨訪，發(fā)現(xiàn)腫瘤組織內(nèi)高水平的M2樣巨噬細(xì)胞計(jì)數(shù)是術(shù)后患者的獨(dú)立預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)因子。而在92例全膀胱切除術(shù)后的患者中，腫瘤內(nèi)高水平的TAMs與更短的腫瘤特異性生存(CSS)及總生存率(OS)相關(guān)。YANG等[29]對(duì)91例T1高級(jí)別膀胱癌患者分析發(fā)現(xiàn)，在60個(gè)月的中位隨訪時(shí)間內(nèi)，腫瘤組織內(nèi)高水平的M2樣巨噬細(xì)胞患者腫瘤復(fù)發(fā)和進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)增高，有更短的無復(fù)發(fā)生存(RFS)、無進(jìn)展生存(PFS)和CSS。TAMs的浸潤水平可能與BCG灌注治療后腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。99例經(jīng)BCG治療后的NIMBC患者，BCG治療失敗的腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)大量的TAMs，并且占主導(dǎo)的M2樣巨噬細(xì)胞集中在腫瘤組織的間質(zhì)區(qū)域，該類患者具有更短的RFS[30]。71例NMIBC患者術(shù)后的腫瘤組織中，高含量的TAMs與BCG灌注治療后更短的RFS或PFS相關(guān)[31]。與大多數(shù)研究結(jié)論相反的是，有研究對(duì)103例MIBC患者腫瘤組織分析發(fā)現(xiàn)，在CD163腫瘤細(xì)胞的亞組內(nèi)，M2樣巨噬細(xì)胞高浸潤的患者比低浸潤患者出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)更低、CSS更長。CD163是巨噬細(xì)胞的標(biāo)志分子，在腫瘤細(xì)胞上表達(dá)的CD163可能是浸潤的TAMs與其雜交所致，這種雜合腫瘤細(xì)胞的DNA修復(fù)能力增強(qiáng)，故該類腫瘤中TAMs高浸潤的患者預(yù)后反而更好[32-33]。盡管TAMs的預(yù)后作用似乎比較明確，但研究仍以回顧性分析為主，因此TAMs的預(yù)后價(jià)值需要更多的前瞻性研究來驗(yàn)證。

4.2Tregs的浸潤與膀胱癌患者的預(yù)后相關(guān) 大多數(shù)研究證實(shí)Tregs浸潤程度與膀胱癌患者生存率呈負(fù)相關(guān)。在攜帶自發(fā)性膀胱癌的犬中，腫瘤浸潤性Tregs與預(yù)后不良有關(guān)[21]。高水平的CCR8+Tregs與患者更差的OS及RFS有關(guān)[20]。在115例NMIBC患者腫瘤組織中，發(fā)現(xiàn)高水平Tregs浸潤的患者有更短的RFS，并且是復(fù)發(fā)的獨(dú)立預(yù)測因子[34]。此外，在腫瘤間質(zhì)內(nèi)高水平Tregs浸潤也與BCG灌注治療后患者更短的RFS相關(guān)[31]。Tregs對(duì)膀胱癌預(yù)后的影響可能是通過與腫瘤細(xì)胞之間的相互作用實(shí)現(xiàn)。膀胱癌細(xì)胞表面S1P1的表達(dá)水平和Tregs浸潤計(jì)數(shù)均與預(yù)后呈負(fù)相關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，S1P1蛋白的上調(diào)能夠促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞分泌TGF-β和IL-10，從而促進(jìn)Tregs的生成及遷移[35]。但與大多數(shù)關(guān)于Tregs的預(yù)后作用研究結(jié)果相反的是，腫瘤侵襲前緣的低水平Tregs浸潤，與患者更差的預(yù)后相關(guān)。深入研究提示，Tregs可能通過抑制膀胱癌細(xì)胞及TAMs表達(dá)侵襲因子MMP-2，從而降低腫瘤細(xì)胞的侵襲性，導(dǎo)致了Tregs在膀胱癌中的積極預(yù)后作用[36]。與TAMs研究現(xiàn)狀相似，Tregs的預(yù)后價(jià)值需要更多的前瞻性研究來驗(yàn)證。

4.3TANs在膀胱癌中的預(yù)后價(jià)值具有異質(zhì)性 在102例膀胱癌患者腫瘤組織中，TANs計(jì)數(shù)高的患者更易出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)，并且OS更短[37]。另一項(xiàng)研究納入3個(gè)中心共計(jì)666例MIBC患者，發(fā)現(xiàn)TANs浸潤水平越高的患者OS越短。對(duì)其中405例來自公共數(shù)據(jù)庫的轉(zhuǎn)錄組表達(dá)譜進(jìn)行基因集富集分析提示淋巴細(xì)胞和T細(xì)胞激活的兩條通路均富集在TANs低浸潤組，TANs的浸潤與CD8+T細(xì)胞的浸潤呈負(fù)相關(guān)，并且TANs低浸潤組更能從輔助化療中獲益，這提示高浸潤的TANs可能通過免疫抑制及化療抵抗影響了膀胱癌患者的預(yù)后[38]。盡管部分研究發(fā)現(xiàn)高水平的TANs與不良預(yù)后相關(guān)，但仍有研究發(fā)現(xiàn)TANs計(jì)數(shù)與預(yù)后呈正相關(guān)。根據(jù)膀胱癌表面特征表達(dá)分子將MIBC分為腔內(nèi)型(Lunimal)和基底型(Basal),發(fā)現(xiàn)基底型膀胱癌組織中有更多的CD66+TANs浸潤，并且高浸潤的TANs與患者預(yù)后呈正相關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)基底型腫瘤組織中表達(dá)高水平的促炎細(xì)胞因子(CXCL1、CXCL2、CXCL8)，促進(jìn)TANs趨化作用[39]。推測此時(shí)的TANs因展現(xiàn)出N1表型而發(fā)揮抗腫瘤功能。在BCG治療后可誘導(dǎo)膀胱癌組織內(nèi)中性粒細(xì)胞外陷阱(NET)的形成。NET能夠阻止膀胱癌細(xì)胞的存活、遷移及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并能通過攻擊腫瘤細(xì)胞和增加免疫細(xì)胞浸潤來抑制小鼠腫瘤的生長。故TANs與預(yù)后呈正相關(guān)的機(jī)制之一可能是NET的形成所致[40]。由于對(duì)TANs的研究較少，故對(duì)其預(yù)后價(jià)值需要進(jìn)一步探究。

5 結(jié) 語

免疫治療在早期及晚期膀胱癌患者中均占據(jù)重要地位。但無論是對(duì)NMIBC患者膀胱內(nèi)注射BCG，還是對(duì)晚期膀胱癌患者應(yīng)用ICIs治療，都存在較高的失敗率。腫瘤內(nèi)免疫抑制微環(huán)境的形成是免疫治療失敗的重要機(jī)制之一，其中抑制性免疫浸潤細(xì)胞發(fā)揮主要作用。本文通過對(duì)膀胱癌TME內(nèi)4種抑制性免疫浸潤性細(xì)胞的促癌機(jī)制及潛在的治療靶點(diǎn)進(jìn)行闡述，為提高免疫治療應(yīng)答提供了新的策略。目前靶向這些細(xì)胞聯(lián)合免疫治療的方式在膀胱癌的臨床前實(shí)驗(yàn)中取得一定的療效，但其療效需要在臨床試驗(yàn)中進(jìn)一步驗(yàn)證。目前仍有幾個(gè)重要問題亟待解決：一是確立這類抑制性免疫浸潤細(xì)胞區(qū)別于其他表型的特異分子標(biāo)志物；二是聯(lián)合免疫治療時(shí)，如ICIs，靶向這類細(xì)胞的治療時(shí)機(jī)和最佳策略。因此，未來需要更多的基礎(chǔ)及臨床研究來探討膀胱癌TME中抑制性免疫浸潤細(xì)胞的生物學(xué)功能，期待有更多的患者能從免疫治療中獲益。