李 穎 董長興 劉志勇
1.河北省唐山市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河北唐山063000;2.河北省唐山市豐南區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,河北唐山063300
奶牛子宮內(nèi)膜炎與普通的子宮炎癥不同,對(duì)于奶牛自身的健康不會(huì)造成較大的影響。但由于該病的病原體具備特殊性(如胎兒彎曲桿菌性病亞種以及胎兒毛滴蟲等),能夠?qū)е履膛2辉胁挥?,?yán)重影響奶牛群體的繁衍質(zhì)量,使養(yǎng)殖戶遭受較大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,我國獸醫(yī)行業(yè)針對(duì)該病提出了一些新的治療方案。
奶牛子宮內(nèi)膜炎是奶牛子宮器官的一種常見病,其臨床診斷難點(diǎn)在于如果病變的程度較輕,則無論是養(yǎng)殖人員還是經(jīng)驗(yàn)豐富的獸醫(yī)均很難及時(shí)發(fā)現(xiàn)并確診;如果癥狀處于“隱性”狀態(tài),則成功發(fā)現(xiàn)的可能性更是微乎其微。
1)產(chǎn)房的衛(wèi)生條件沒有達(dá)到相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)。如臨產(chǎn)母牛的外陰處、尾根部長期沾染糞便且未能得到有效清洗;人工助產(chǎn)、剝離牛犢胎衣的過程中未曾消毒的器具、工作人員的手臂或其他物品接觸到了奶牛下陰,導(dǎo)致胎衣無法剝離、腐敗分解、惡露停滯等,均會(huì)在奶牛產(chǎn)后引發(fā)子宮內(nèi)膜炎[1]。
2)奶?;加性摬〉某跗?,相關(guān)癥狀尚不明顯,但化膿性放線菌、壞死梭桿菌、溶血性鏈球菌、梭狀芽孢桿菌等病原在奶牛生產(chǎn)期間均已“潛伏”在奶牛子宮處,如果產(chǎn)后未能及時(shí)治療或長期無法好轉(zhuǎn),則癥狀將會(huì)轉(zhuǎn)入慢性。
1)產(chǎn)后1 周左右,如果癥狀較輕,則奶牛全身沒有明顯跡象,但此后無法受孕;如果癥狀較重,則奶牛的機(jī)體溫度會(huì)顯著提升,伴隨呼吸頻率增加、精神萎靡不振、缺乏食欲、反芻現(xiàn)象明顯減少。
2)患牛的拱腰、舉尾等常見動(dòng)作與正常狀態(tài)下的差別較大,其陰道內(nèi)經(jīng)常流出較大量、較濃的黃褐色黏稠狀分泌物,伴隨強(qiáng)烈的腥臭味,甚至經(jīng)常出現(xiàn)絮狀物或牛犢的胎衣碎片,附著在尾根處,漸漸形成結(jié)痂。
奶牛出現(xiàn)上述癥狀之后,為了進(jìn)一步確認(rèn)是否患有子宮內(nèi)膜炎,可以圍繞以下要點(diǎn)展開實(shí)驗(yàn)室診斷。
1)對(duì)子宮的分泌物進(jìn)行鏡檢,制作成涂片后,經(jīng)過顯微鏡觀察,能夠明顯發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、白細(xì)胞等。
2)對(duì)奶牛發(fā)情時(shí)的子宮分泌物進(jìn)行化學(xué)檢測(cè),采用濃度為4%氫氧化鈉溶液(劑量為2 mL),與等量分泌物混合后,加熱沸騰,待其冷卻后,如果顏色從無色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闄幟庶S(微弱),則表明子宮內(nèi)膜炎檢測(cè)呈陽性。
在不同的地區(qū),引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌不盡相同,為了確定,需要針對(duì)細(xì)菌展開分離培養(yǎng)、純化、鑒定,具體流程如下。
1)收集患牛子宮分泌物(劑量50 μL 為1 份),接種到常規(guī)的肉湯培養(yǎng)基,濃度為10%的綿羊血瓊脂培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等,在溫度達(dá)到37 ℃的溫箱內(nèi)累計(jì)培養(yǎng)24 h。在此期間,實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)該對(duì)病原菌的單菌落進(jìn)行劃線純化分離操作,重點(diǎn)審查細(xì)菌的生長情況、是否溶血、具體形態(tài)、顏色等。該過程結(jié)束的標(biāo)志在于得到完全純化的菌種,并加入營養(yǎng)肉湯(內(nèi)含濃度為20%的甘油)培養(yǎng)基中,以-80 ℃的溫度冷藏保存。
2)為了明晰引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎的確切病原種類,分離鑒定操作必須采用“引物”。其中,上游引物序列為5’-AGAGTTTGATCCT-GGCTCAG-3’,下游引物序列為5’-AAGGAGGTGATC-CAGCC-3’。若要獲取最佳效果,菌種擴(kuò)增片段的長度需要達(dá)到至少1 500 bp。具體方式為,將100~150 μL 的菌種液涂抹到普通的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上,在37 ℃的環(huán)境下培養(yǎng)18~24 h,待復(fù)蘇培養(yǎng)3 代后,制備成待測(cè)菌液。
3)對(duì)菌液的DNA 序列進(jìn)行檢測(cè),將結(jié)果與細(xì)菌庫中的標(biāo)準(zhǔn)化樣本進(jìn)行對(duì)照,最終確定誘發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎的細(xì)菌,進(jìn)而“對(duì)癥下藥”。
經(jīng)過檢測(cè),如果發(fā)現(xiàn)引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎的病菌為葡萄球菌、大腸桿菌、鏈球菌等,則奶牛多患有漿液性、卡他性、慢性子宮內(nèi)膜炎。面對(duì)此種情況,獸醫(yī)可以采用甲硝唑與青霉素聯(lián)合的方式,對(duì)患牛進(jìn)行治療,具體過程如下。
1)將0.5 g 甲硝唑、80 萬國際單位青霉素放入250 mL 葡萄糖溶液中,均勻混合后,對(duì)患牛的子宮進(jìn)行全面清洗(必須等到患牛癥狀相對(duì)穩(wěn)定時(shí)方可進(jìn)行)。
2)選用甲硝唑注射液(根據(jù)患牛癥狀的輕重,最少劑量為500 mL,最大劑量為1 000 mL),采用靜脈注射的方式完成治療。通常情況下,每天需要注射2 次,如果癥狀較輕,則連續(xù)注射3 d 即可;如果癥狀較重,可適當(dāng)延長,以7~10 d 為最佳。
3)基于甲硝唑的抗厭氧菌功效,其能夠在無氧環(huán)境下經(jīng)由氧化還原反應(yīng)生成氨基,達(dá)到防止細(xì)菌感染的目的。將上述2 種方法聯(lián)合使用,對(duì)于治療奶牛子宮內(nèi)膜炎能夠起到十分有效的作用。
如果奶牛確診為急性子宮內(nèi)膜炎,則常規(guī)的西藥治療起到的效果有限,故可以采用雙聯(lián)益母液或其他中成藥進(jìn)行干預(yù)。雙聯(lián)益母液的主要成分為熟地、當(dāng)歸、木香、赤芍、雞冠花、益母草、連翹、雙花等,制備成藥業(yè)后,可以直接注射進(jìn)病牛的子宮內(nèi)。除此之外,獸醫(yī)及養(yǎng)殖人員還可以選用柴胡、白芍、當(dāng)歸、陳皮、山藥等藥物各60 g,配以白術(shù)、甘草、艾葉40 g,搭配茯苓、魚腥草75 g,益母草、肉桂、杜仲50 g[2],充分混合后,加入3 000 mL 清水,煎成藥液后,清除所有殘?jiān)?,喂食患牛(每?.5 kg 劑量,每天服用2 次)。此種借助中醫(yī)藥治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的方式,經(jīng)臨床觀察,有效率超過95%,患牛使用后,子宮收縮反應(yīng)完全恢復(fù)正常,分泌物不再黏稠,不孕不育癥狀完全消失。
引發(fā)奶牛子宮內(nèi)膜炎癥狀的病原多種多樣,故治療方式應(yīng)有所區(qū)分。實(shí)踐表明,為了提升治療成效,不同地區(qū)的獸醫(yī)防疫站應(yīng)該配備全套的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)設(shè)備,目的在于針對(duì)病原菌進(jìn)行分離鑒定,從而找到治療該病的最佳方式。本文介紹的甲硝唑、雙聯(lián)益母液等藥物效果良好,均為可行性較高的治療干預(yù)方式。