豬圓環(huán)病毒病的研究進展

許亞改，武瑞栓，張 濤，化世鵬

（1.石家莊市動物疫病預(yù)防控制中心，河北石家莊 050030；2.石家莊市平山縣裕農(nóng)養(yǎng)殖有限公司，河北石家莊 050030）

1 前言

我國豬病較為復(fù)雜，除新病、外來病外，一些免疫抑制病引起的繼發(fā)感染對養(yǎng)豬業(yè)也是一個重大威脅，其中圓環(huán)病毒病就是此類疾病的代表之一。1991年，PCV2首次在加拿大報道。郎洪武等在2000年首次提出PCV2在我國流行。經(jīng)過這些年的研究，人們對圓環(huán)病毒的認(rèn)識不斷更新。本文對其研究進展進行簡單概括，為有效防控此病提供參考。

2 病原學(xué)

豬圓環(huán)病毒是世界上迄今為止已知的最小的一種無囊膜的單股環(huán)狀DNA病毒。其直徑約12～23nm，呈二十面體對稱，因其DNA呈環(huán)狀，故命名為圓環(huán)病毒。2016年以前根據(jù)抗原性和基因型的不同分PCV1和PCV2。2016年，美國PaLinski等從病豬的病理織中檢測出一種新型圓環(huán)病毒—豬圓環(huán)病毒3型，2017年，我國首次報道了PCV3。2019年，湖南大學(xué)生物學(xué)院獸禽病毒學(xué)研究組發(fā)現(xiàn)了一種新型豬圓環(huán)病毒（暫命名PCV4）。PCV1無致病性，PCV2、PCV3有致病性，PCV4致病性尚未明確。我國流行范圍最廣的PCV2毒株為PCV2b。PCV病毒因其無囊膜，也稱裸病毒。目前，已知的豬圓環(huán)病毒、口蹄疫病毒、豬細(xì)小病毒和豬水皰病病毒均屬于裸病毒。這類病毒對外界的抵抗力較強，對熱具有一定的耐受力，對苯酚、氧化劑、氫氧化鈉和季胺類化合物等比較敏感。不具血凝性，不凝集牛、羊、豬、雞等多種動物和人的紅細(xì)胞。

3 流行病學(xué)

豬圓環(huán)病毒在自然界中廣泛存在，其自然宿主是家豬和野豬，各年齡段的豬均易感，仔豬感染后發(fā)病嚴(yán)重，6～12周齡豬多見。病豬和帶毒豬（多數(shù)為隱性感染）為本病主要傳染源。病豬所接觸的物品（飼料、飲水、墊料、運輸工具等）、病豬分泌物（尿液、糞便等）也可能帶有病原。

PCV可經(jīng)口腔、呼吸道感染豬，種公豬和懷孕母豬通過精液和胎盤感染胎兒。有研究表明，PCV2通過初乳可以垂直傳播給哺乳仔豬[3]。近幾年也有母豬初乳中含有PCV3型的相關(guān)研究。

4 致病機理

圓環(huán)病毒2型的致病機理一直研究的熱點問題，研究相對比較成熟，這里我們對其進行闡述，主要觀點有以下三種。一是靶細(xì)胞機制。PCV2感染的靶細(xì)胞主要是單核/巨噬細(xì)胞系。有研究表明，PCV2的靶細(xì)胞在胎兒期是心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。對新生仔豬來說，巨噬細(xì)胞是其唯一的感染細(xì)胞。二是免疫抑制機制。PMWS病豬表現(xiàn)為嚴(yán)重的淋巴組織損傷，包括淋巴細(xì)胞缺失和淋巴組織的巨噬細(xì)胞浸潤等。PCV-2可能依賴自身和其它未知輔助因子的免疫調(diào)節(jié)活性誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞凋亡和抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生，引起機體免疫抑制。三是應(yīng)激及其他因素響。PCV2雖然是致病因素，但不是充分條件，必須在其他因素參與下才導(dǎo)致明顯臨床癥狀。這些因素主要有飼養(yǎng)管理不善、應(yīng)激等。動物機體受外界刺激產(chǎn)生應(yīng)激時，免疫系統(tǒng)機能亢進，免疫細(xì)胞分裂增殖活性增強，導(dǎo)致PCV-2大量增殖而致病。如斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的發(fā)生，多由于現(xiàn)代規(guī)?；B(yǎng)豬場過度追求生產(chǎn)效率以及經(jīng)濟效益，對哺乳仔豬實行早期斷奶產(chǎn)生強烈應(yīng)激，加之其免疫系統(tǒng)功能及消化系統(tǒng)不完善、母源抗體水平低下等因素綜合作用下，使仔豬易暴發(fā)PMWS。在生產(chǎn)中，豬圓環(huán)病毒還常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬細(xì)小病毒混合感染，導(dǎo)致豬發(fā)生嚴(yán)重的臨床癥狀。

5 臨診癥狀

5.1 斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）

該病主要侵襲哺乳期和保育期仔豬，尤其是6～18周齡仔豬最易感。病豬出現(xiàn)呼吸急促或困難、腹瀉、貧血、進行性消瘦等特征。該病嚴(yán)重影響豬的生長發(fā)育，耐過后多變?yōu)榻┴i。發(fā)病率和死亡率隨飼養(yǎng)條件、爆發(fā)的階段不同而不同。剖檢可見淋巴結(jié)異常腫大、肝硬變、脾萎縮、肺有時擴張、腎皮質(zhì)表面會出現(xiàn)白點，許多組織中可見局灶性淋巴組織細(xì)胞浸潤。

5.2 豬皮炎腎病綜合征（PDNS）

該病被認(rèn)為是一種免疫介導(dǎo)的水皰性病，主要影響皮膚和腎。常發(fā)生于保育階段結(jié)束進入生長階段的豬群。臨床癥狀主要為皮膚發(fā)生近似圓形的紫色丘疹，與周圍健康皮膚界限清楚。會陰部、四肢、胸腹部較早出現(xiàn)，有時可擴展到耳朵等處皮膚。如無繼發(fā)感染，死亡率較低。剖檢可見腎腫大、皮質(zhì)有密集白色壞死灶，使腎外觀呈花斑狀。

5.3 新生仔豬先天性震顫

先天性震顫主要發(fā)生于剛出生不久的仔豬，表現(xiàn)全身肌肉震顫，頭部尤為明顯，無其他明顯變化。本病只通過母豬垂直傳給仔豬，仔豬之間不水平傳播。癥狀輕微者數(shù)小時或數(shù)日自愈，重癥者病程可持續(xù)數(shù)周，若能吃到母乳的仔豬，一般預(yù)后良好，有的病豬因吃不到母乳或受擠壓而死。腦組織無特征性病變，僅利用免疫組化技術(shù)發(fā)現(xiàn)病毒陽性信號。

5.4 繁殖障礙

母豬無明顯臨床癥狀，在不同妊娠階段發(fā)生流產(chǎn)、死胎等。解剖流產(chǎn)和死胎，呈現(xiàn)肝充血和心臟肥大、心肌變色。從流產(chǎn)胎兒中檢測出圓環(huán)病毒2型，可作出診斷。

5.5 肺炎

病豬表現(xiàn)呼吸困難，肺臟點狀出血。豬圓環(huán)病毒2型與肺炎支原體、藍(lán)耳病毒、流感病毒等組成了呼吸道疾病綜合征的主要病原。

5.6 腸炎

有報道在發(fā)生腹瀉的豬腸粘膜中，用免疫組化技術(shù)發(fā)現(xiàn)了病毒信號，用PCR方法從糞便中檢測出病毒，病變主要是肉芽腫腸炎。

6 診斷

根據(jù)病豬腹股溝淋巴結(jié)腫大，脾、腎腫大，肝萎縮，漸進性消瘦等臨床癥狀和病理變化可做出初步診斷，但要確診，需應(yīng)用實驗室方法。常用診斷方法有以下幾種：

6.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測是一種快速、特異性強的診斷方法，可以直接檢測到病毒核酸，是獸醫(yī)臨床最常用的分子生物學(xué)實驗技術(shù)。

6.2 原位雜交技術(shù)（in situ hybridization）

原位雜交技術(shù)檢測靈敏度較高，能夠精確定位PCV2病毒的DNA在細(xì)胞中的位置，可用于檢測臨診病料和病理分析。

6.3 酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELlSA）

ELISA方法適合大規(guī)模檢測，可用于檢測血清中的病毒抗體。對實驗條件和人員要求不高，在獸醫(yī)臨床診斷中廣泛應(yīng)用。

6.4 間接免疫熒光法（llF）

此方法適宜檢測細(xì)胞培養(yǎng)物中的PCV。用組織病料以蓋玻片在PK-15細(xì)胞培養(yǎng)后進行檢測，也可對PCV進行分型。

6.5 電鏡觀察

利用電鏡，依據(jù)病毒自身形態(tài)結(jié)構(gòu)等不同特征，能很快做出診斷。Steveson GW等在透射電鏡下觀察感染PCV2的PK-15細(xì)胞，首次發(fā)現(xiàn)了PCV的包涵體。

7 防治

7.1 疫苗

目前滅活疫苗較為成熟，具有無毒、無害、效果穩(wěn)定的優(yōu)勢。國內(nèi)主要有LG株、SH株、DBN-SX07株、WH株及ZJ/c株。毒株間遺傳差異不大，僅是分離地點不同而已，這5個毒株均屬于PCV-2b。關(guān)于PCV2的弱毒疫苗的相關(guān)研究類報道較少。有人將PCV2的ORF2克隆到缺失ORF2的PCV1的骨架中，得到 PCV1-2嵌合型病毒。研究表明，該嵌合型病毒是減毒的，能刺激機體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，且毒力不易返強，可作為制備PCV弱毒疫苗的優(yōu)勢毒株。亞單位疫苗方面，Cap蛋白是ORF2編碼的PCV-2的主要結(jié)構(gòu)蛋白，其能刺激動物機體產(chǎn)生針對PCV-2的特異性免疫應(yīng)，是國產(chǎn)豬圓環(huán)疫苗重點研發(fā)方向。同時，由于PCV-2可與多種疾病發(fā)生混合感染，PCV-2與其他疾病的聯(lián)合疫苗的研發(fā)成為研究的熱點。已有多家機構(gòu)進行了豬圓環(huán)病毒2型與豬細(xì)小病毒二聯(lián)滅活疫苗、豬圓環(huán)病毒2型與副豬嗜血桿菌二聯(lián)滅活疫苗、圓環(huán)病毒2型、副豬嗜血桿菌和與豬肺炎支原體三聯(lián)滅活疫苗研究。

7.2 綜合防控措施

對PCV的防控，要重點做好以下幾方面。一要加強生物安全管理。堅持自繁自養(yǎng)和實行全進全出，保持環(huán)境衛(wèi)生。人員、車輛、豬只運輸用具等要執(zhí)行嚴(yán)格的消毒標(biāo)準(zhǔn)。做好引種防疫工作，及時隔離、淘汰病豬。二要加強飼養(yǎng)管理。豬場分區(qū)布局合理，豬舍保持良好通風(fēng)，飼養(yǎng)密度適中，避免將不同日齡的豬混群飼養(yǎng)。減少各種應(yīng)激因素，特別是減少對斷奶仔豬的應(yīng)急。保障仔豬及時、充分獲得初乳，避免過早斷奶和換料，給予優(yōu)質(zhì)全價飼料。三要做好免疫預(yù)防。圓環(huán)病毒疫苗免疫主要有兩種方法：一種是免疫懷孕母豬，使母源抗體通過哺乳傳遞給仔豬。二是免疫仔豬，在新生仔豬感染該病毒前進行免疫接種，誘導(dǎo)其產(chǎn)生相應(yīng)抗體。同時做好豬瘟、豬細(xì)小病毒病、豬支原體肺炎等疫苗的免疫接種，預(yù)防和控制其他感染性疾病。