調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及其細(xì)胞因子在自身免疫性疾病中的研究進(jìn)展

尹創(chuàng)新，侯振江

(1.聯(lián)勤保障部隊第九八三醫(yī)院輸血醫(yī)學(xué)科，天津 300142；2.滄州醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校甲狀腺疾病研究所/滄州市甲狀腺疾病工程技術(shù)研究中心，河北 滄州 061001)

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell，Treg細(xì)胞)是一類具有免疫抑制功能的T細(xì)胞亞群，具有特殊免疫調(diào)控作用，是維持機(jī)體免疫耐受的關(guān)鍵細(xì)胞，可調(diào)控CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和抗原呈遞細(xì)胞等的免疫應(yīng)答。Treg細(xì)胞是CD4+T細(xì)胞的主要亞群之一，主要通過分泌多種抑制性細(xì)胞因子和細(xì)胞間接觸方式，抑制其他免疫細(xì)胞的增殖與活化，從而發(fā)揮免疫抑制作用[1]。Treg細(xì)胞在免疫過程中扮演重要角色，具有多種不同的調(diào)節(jié)機(jī)制，可以根據(jù)不同微環(huán)境采取不同的免疫調(diào)控策略，叉頭框蛋白P3(forkhead box protein P3，F(xiàn)oxP3)持續(xù)表達(dá)可促進(jìn)Treg細(xì)胞分化并提高免疫抑制能力[2]。自身免疫性疾病(autoimmune diseases，AID)是環(huán)境、遺傳和免疫等因素相互作用所致的多基因遺傳性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)、自身免疫性甲狀腺疾病(autoimmune thyroid diseases，AITD)等。研究證實，Treg細(xì)胞及其細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子與機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)的維持和AID的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，Treg細(xì)胞數(shù)量減少或功能缺陷影響機(jī)體的免疫狀態(tài)，引起自身免疫耐受紊亂，導(dǎo)致AID發(fā)生[3]。因此，Treg細(xì)胞及其細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子成為AID發(fā)生、轉(zhuǎn)歸和治療的熱點?，F(xiàn)就Treg細(xì)胞及其細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子在AID中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以了解Treg細(xì)胞及其細(xì)胞因子在AID發(fā)病中的作用，以進(jìn)一步揭示AID的發(fā)病機(jī)制，為AID的診療和預(yù)防開辟新途徑。

1 Treg細(xì)胞分化與調(diào)節(jié)

1.1Treg細(xì)胞的分類 Treg細(xì)胞主要包括天然Treg細(xì)胞和誘導(dǎo)Treg細(xì)胞兩大類，其主要功能是抑制其他T細(xì)胞的活化，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)和誘導(dǎo)免疫耐受的作用。根據(jù)Treg細(xì)胞的功能和分泌細(xì)胞因子的種類進(jìn)一步分為輔助性T細(xì)胞(helper T cell，Th細(xì)胞)1、Th2、Th17和Treg四個亞群，其亞群的分化取決于微環(huán)境中細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子的種類及水平[3]。Treg細(xì)胞通過分泌的抑制性細(xì)胞因子和細(xì)胞間的接觸，調(diào)節(jié)CD4+T細(xì)胞的分化與增殖，是細(xì)胞免疫穩(wěn)定和自身免疫耐受的關(guān)鍵因素，在維持機(jī)體免疫穩(wěn)定和預(yù)防自身免疫反應(yīng)等方面具有重要的作用。

1.2Treg細(xì)胞的分化與調(diào)節(jié) Th17和Treg細(xì)胞起源于同一類CD4+T細(xì)胞，先由Th0分化為中間細(xì)胞，其后的分化方向主要取決于環(huán)境中不同的細(xì)胞因子。轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)可誘導(dǎo)T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為Treg細(xì)胞，導(dǎo)致白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-6向Treg細(xì)胞分化減少、向Th17分化增加。因此，IL-6決定著T細(xì)胞的分化方向。Treg細(xì)胞分泌IL-10、TGF-β等抑制性細(xì)胞因子，兩者共同誘導(dǎo)Treg細(xì)胞不斷分化，或通過直接的細(xì)胞接觸，抑制效應(yīng)性T細(xì)胞(effector T cell，Teff細(xì)胞)的活化、增殖，發(fā)揮免疫負(fù)調(diào)控作用，維持機(jī)體的免疫平衡。Treg細(xì)胞不僅能分泌IL-10、TGF-β等細(xì)胞因子，還可上調(diào)IL-2受體的表達(dá)，通過IL-2受體與IL-2競爭性結(jié)合，對其他T細(xì)胞的增殖發(fā)揮阻斷作用，且IL-2還能使FoxP3 Treg高表達(dá)[4]。FoxP3不僅是調(diào)控Treg細(xì)胞分化和功能的特異性轉(zhuǎn)錄因子，也是目前Treg細(xì)胞最好的特異性分子標(biāo)志物，在Treg細(xì)胞的分化和功能調(diào)節(jié)方面起重要作用[5]。FoxP3持續(xù)高表達(dá)是CD4+CD25+Treg細(xì)胞的典型特征，與T細(xì)胞亞群的抑制作用密切相關(guān)，因此CD4+CD25+FoxP3 Treg細(xì)胞被認(rèn)為是最能代表Treg細(xì)胞的一種細(xì)胞亞群[6]，可反映CD4+CD25+Treg細(xì)胞的水平和功能。維甲酸孤兒核受體家族γt和FoxP3的表達(dá)水平在一定程度上反映了Th17和Treg細(xì)胞的活躍程度[7]，兩者平衡狀態(tài)的改變導(dǎo)致Th17/Treg細(xì)胞的分化偏移，參與AID的發(fā)生發(fā)展。

2 Treg細(xì)胞與AID

AID是機(jī)體免疫功能紊亂、自身抗原的免疫耐受力降低、自身抗體和免疫復(fù)合物大量產(chǎn)生引發(fā)的以多器官受損為特征的一大類疾病，其疾病譜廣泛，主要包括RA、SLE等，各種AID的臨床表現(xiàn)各異，其病因及機(jī)制尚不明確。近年來，AID患病率呈上升趨勢，嚴(yán)重影響患者的勞動能力和生活質(zhì)量，已成為重要的公共衛(wèi)生問題[8]。Treg細(xì)胞作為一類具有免疫抑制作用的T細(xì)胞，主要功能是抑制其他T細(xì)胞的活化，在防止AID發(fā)生等方面起重要作用。Treg細(xì)胞與AID的關(guān)系一直是免疫學(xué)領(lǐng)域研究的熱點。近年來，Treg細(xì)胞在RA、SLE等AID中的臨床研究廣泛開展，并取得了一定的進(jìn)展。

2.1Treg細(xì)胞與RA RA是一種臨床常見的AID，主要表現(xiàn)為關(guān)節(jié)滑膜的慢性進(jìn)行性和侵襲性炎癥，通過炎癥細(xì)胞引起骨和軟骨組織的破壞，致殘率和死亡率較高。傳統(tǒng)觀點認(rèn)為，Th1/Th2細(xì)胞失衡是導(dǎo)致RA發(fā)生的關(guān)鍵因素。RA患者關(guān)節(jié)內(nèi)滑膜液Th1細(xì)胞增多，并分泌γ干擾素等細(xì)胞因子，引起關(guān)節(jié)滑膜的局部慢性炎癥和基質(zhì)破壞，并抑制Th2細(xì)胞表達(dá)，導(dǎo)致Th2細(xì)胞缺陷[9]。目前關(guān)于RA患者Treg細(xì)胞的研究結(jié)果仍有爭議。Attridge等[10]認(rèn)為，多種細(xì)胞因子可影響Treg細(xì)胞的抑制功能，如Th17細(xì)胞分泌的IL-21使Teff抵抗Treg細(xì)胞的抑制作用。腫瘤壞死因子-α是影響RA患者Treg細(xì)胞功能的主要細(xì)胞因子，過多的腫瘤壞死因子-α能下調(diào)FoxP3的磷酸化水平，從而抑制Treg細(xì)胞的功能，故Treg細(xì)胞不能完全有效地抑制RA患者的炎癥反應(yīng)[11]。位于基因座上游增強(qiáng)子區(qū)域的FoxP3甲基化紊亂及細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白4表達(dá)和功能缺失也可引起Treg細(xì)胞功能缺陷。早期RA患者滑膜、滑液和血漿IL-21水平升高，破骨細(xì)胞生成增加，滑膜組織Treg細(xì)胞數(shù)量增多，外周血Treg細(xì)胞比例減少，關(guān)節(jié)功能發(fā)生障礙。Moradi等[12]發(fā)現(xiàn)，RA患者滑膜液中Treg細(xì)胞比例減少，Th17細(xì)胞增多，但滑膜液中Treg細(xì)胞比例高于外周血。有研究顯示，慢性RA患者外周血Treg細(xì)胞比例和健康對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義[13]。Kawashiri等[14]發(fā)現(xiàn)，活動期RA患者Treg細(xì)胞明顯減少，且免疫抑制功能缺陷，而緩解期與健康對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，故可通過外周血Treg細(xì)胞比例的改變監(jiān)測RA的病情變化。

健康人Th17/Treg細(xì)胞比值降低，而RA患者明顯升高，尤其活動期升高更明顯[15]，Th17/Treg細(xì)胞比值越高，關(guān)節(jié)炎越嚴(yán)重。Meta分析也證實，外周血Treg細(xì)胞比例減少和Th17細(xì)胞比例增加與RA的發(fā)病有關(guān)，Th17/Treg細(xì)胞失衡是引起RA發(fā)病的主要原因[16]。用單抗治療RA可使患者Treg細(xì)胞比例增加，其與RA的嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)。RA患者外周血CD4+CD25+誘導(dǎo)Treg細(xì)胞與健康對照組無明顯差異，但關(guān)節(jié)液中CD4+CD25+Treg細(xì)胞比例明顯增多。有資料顯示，RA患者外周血Treg細(xì)胞比例減少，而Th17細(xì)胞比例增加，且血清IL-17水平升高[17-18]。Rosenzwajg等[19]報道，活動期RA患者CD4+CD25+Treg細(xì)胞比例顯著降低，IL-17和TGF-β水平高于非活動期和健康對照組，Treg細(xì)胞比例與血清IL-17水平呈負(fù)相關(guān)，而與TGF-β水平呈正相關(guān)，提示Th17/Treg細(xì)胞失衡及TGF-β參與RA的發(fā)生發(fā)展。Astry等[20]報道，RA患者外周血FoxP3降低，而IL-17顯著升高。Treg細(xì)胞與RA臨床指標(biāo)的研究結(jié)果存在差異。林輝等[21]發(fā)現(xiàn)，CD4+CD25+FoxP3+T細(xì)胞與類風(fēng)濕因子滴度、紅細(xì)胞沉降率、C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)及其他病情活動指標(biāo)均無明顯相關(guān)性，而Kawashiri等[14]則認(rèn)為，CD4+CD25highCD127low/-Treg細(xì)胞與Th17/Treg細(xì)胞比值、IL-17、TGF-β等呈負(fù)相關(guān)。不同研究結(jié)果的差異可能與檢測方法、樣本納入量、患者病情嚴(yán)重程度有關(guān)。推測CD4+CD25+Treg細(xì)胞參與RA的發(fā)生發(fā)展過程。

Treg細(xì)胞比例減少或功能缺陷，引起免疫功能紊亂，釋放多種細(xì)胞因子，參與免疫應(yīng)答，抵抗Treg細(xì)胞的免疫抑制作用，促進(jìn)炎癥性Th17細(xì)胞增多，使Th17/Treg細(xì)胞失衡，從而導(dǎo)致RA的發(fā)生發(fā)展及病情變化。李智偉等[22]發(fā)現(xiàn)，RA患者CD4細(xì)胞明顯增加，CD8細(xì)胞則明顯降低，CD4/CD8比值顯著增高，T細(xì)胞、B細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞絕對值明顯低于健康對照組，而B細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞無明顯變化；同時，Treg細(xì)胞減少，而Th17細(xì)胞明顯升高，因此，淋巴細(xì)胞亞群改變及Treg/Th17細(xì)胞失衡參與RA的發(fā)病。項海燕等[23]報道，RA患者外周血單個核細(xì)胞中Th17細(xì)胞、Th17/Treg細(xì)胞比值和血清IL-17水平均顯著升高，Treg細(xì)胞(CD4+FoxP3+T細(xì)胞)減少，miR-498低表達(dá)，而信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子(signal transduction and activator of transcription，STAT)3高表達(dá)。向野生型STAT3基因質(zhì)粒的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染miR-498 mimic/inhibitor后，STAT3基因和蛋白的表達(dá)均明顯改變，而突變型STAT3基因質(zhì)粒的細(xì)胞轉(zhuǎn)染后上述指標(biāo)無顯著性變化；另外，miR-498 mimic轉(zhuǎn)染CD4+T細(xì)胞后，Th17細(xì)胞顯著降低，IL-17含量減少，與pcDNA-STAT3共轉(zhuǎn)染CD4+T細(xì)胞，則Th17細(xì)胞和IL-17水平明顯升高，說明RA患者CD4+T細(xì)胞過表達(dá)miR-498，可靶向下調(diào)STAT3信使RNA(messenger RNA，mRNA)和蛋白表達(dá)，抑制Th17細(xì)胞分化和IL-17分泌[24]。

糖蛋白A為主的重復(fù)序列(glycoprotein A repetitions predominant，GARP)是潛在的TGF-β結(jié)合蛋白，與TGF-β的激活密切相關(guān)，可促進(jìn)TGF-β的活化與分泌，CD25+GARP+Treg細(xì)胞較CD25+GARP-Treg細(xì)胞的免疫抑制能力更強(qiáng)。Liénart等[25]發(fā)現(xiàn)，Treg細(xì)胞能特異性表達(dá)GARP跨膜性蛋白，其中活化的CD4+Treg細(xì)胞高表達(dá)GARP，而活化的Th細(xì)胞不表達(dá)GARP。白麗杰等[26]觀察GARP活化態(tài)Treg細(xì)胞對RA的影響發(fā)現(xiàn)，RA患者γ干擾素和IL-17A水平、Th1/Th2指數(shù)和抗環(huán)瓜氨酸肽抗體、類風(fēng)濕因子、CRP水平及紅細(xì)胞沉降率均明顯升高，GARP+Treg細(xì)胞、TGF-β1、FoxP3 mRNA和IL-4水平明顯降低，且CRP水平和紅細(xì)胞沉降率與外周血GARP+Treg細(xì)胞數(shù)量呈明顯負(fù)相關(guān)，與Th1/Th2指數(shù)呈明顯正相關(guān)，提示GARP+Treg細(xì)胞比例可能作為新的診斷RA的免疫學(xué)指標(biāo)。同時TGF-β、γ干擾素顯著增加，且IL-4水平降低，說明GARP+Treg細(xì)胞可與CD4+CD25+FoxP3+Treg細(xì)胞共同調(diào)控炎癥反應(yīng)中Th1/Th2細(xì)胞向Th2細(xì)胞發(fā)展，GARP+Treg細(xì)胞變化可能參與RA的發(fā)生發(fā)展，GARP+Treg細(xì)胞通過調(diào)控Th1/Th2細(xì)胞平衡向Th2細(xì)胞發(fā)展以及自身與Th17反應(yīng)平衡參與RA的發(fā)病過程。

2.2Treg細(xì)胞與SLE SLE是一種常見的非器官特異性自身免疫性結(jié)締組織疾病，以產(chǎn)生抗雙鏈DNA為主的多種自身抗體并形成免疫復(fù)合物為特征，導(dǎo)致多器官損傷。絕大多數(shù)患者面頰部出現(xiàn)典型的蝶形或盤狀紅斑，狼瘡性腎炎是SLE最常見、最嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，已成為終末期腎病的主要病因。SLE的發(fā)病與遺傳、環(huán)境、雌激素、感染等因素有關(guān)，但具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚。與自體Teff細(xì)胞共同培養(yǎng)的SLE患者Treg細(xì)胞的抑制功能減弱，而與正常人Teff細(xì)胞共同培養(yǎng)Treg細(xì)胞的抑制功能不受影響，證實Treg細(xì)胞不能有效阻抑Teff細(xì)胞[27]。目前關(guān)于SLE患者Treg細(xì)胞比例及功能的研究尚有爭議，黃華等[28]認(rèn)為，SLE患者血液Treg細(xì)胞比例明顯降低或功能受損。另有學(xué)者認(rèn)為，SLE患者Treg細(xì)胞數(shù)量及體外抑制Teff細(xì)胞功能無異常改變，且Treg細(xì)胞與SLE發(fā)病無關(guān)，Treg細(xì)胞數(shù)量和功能與正常人群比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義[27]。上述研究結(jié)果的差異可能與SLE患者的疾病期和種族差異以及藥物影響有關(guān)。Lee等[29]報道，SLE患者的CD4+CD25+Treg細(xì)胞較正常對照組下降22.1%，且抑制功能下降。另有研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者CD25-FoxP3+細(xì)胞增加，體外研究證實SLE患者與健康人的Treg細(xì)胞不同，不能有效阻抑Teff細(xì)胞。

外周血Treg/Th17細(xì)胞失衡和相關(guān)細(xì)胞因子異常共同參與SLE的發(fā)病過程，并與SLE活動性相關(guān)。賈慧宇和程光慧[30]研究發(fā)現(xiàn)，活動期SLE患者Treg細(xì)胞和TGF-β水平低于非活動期和健康對照組，Th17細(xì)胞、Th17/Treg細(xì)胞比例和IL-6、IL-17、IL-23水平高于非活動期和健康對照組，非活動期SLE患者Treg細(xì)胞低于對照組，Th17細(xì)胞、Th17/Treg細(xì)胞比例及IL-6、IL-17、IL-23水平高于健康對照組，說明SLE患者外周血Treg細(xì)胞比例減少，Th17細(xì)胞增加，導(dǎo)致Treg/Th17細(xì)胞失衡和相關(guān)細(xì)胞因子的異常。姜黃素能顯著下調(diào)SLE患者Th17水平并上調(diào)Treg細(xì)胞比例。黃可可等[31]研究顯示，應(yīng)用AG490免疫抑制劑阻斷STAT3信號通路可影響Th17/Treg細(xì)胞平衡，結(jié)果顯示，SLE患者Th17細(xì)胞顯著增加，而Treg細(xì)胞顯著減少，隨著AG490水平的升高，Th17/Treg細(xì)胞比值、IL-17、IL-6水平均降低，而IL-10、TGF-β水平顯著升高。Th17/Treg細(xì)胞經(jīng)不同濃度AG490處理后，STAT3、維甲酸孤兒核受體家族γt mRNA水平及STAT3水平均顯著降低，而FoxP3 mRNA水平顯著增加，提示阻斷STAT3信號通路，Th17/Treg細(xì)胞平衡向Treg偏移，誘導(dǎo)向Treg細(xì)胞的分化，抑制向Th17細(xì)胞的分化，從而調(diào)控Th17/Treg細(xì)胞平衡及維甲酸孤兒核受體家族γt、FoxP3水平。

Th17/Treg細(xì)胞參與SLE的發(fā)生發(fā)展過程，Th17/Treg細(xì)胞可作為判斷SLE疾病活動和病情評價的可靠指標(biāo)。胡偉等[32]發(fā)現(xiàn)，SLE患者外周血Th17和Treg細(xì)胞比例均明顯升高，與CRP水平呈顯著正相關(guān)，Th17細(xì)胞數(shù)量與疾病活動性評分呈顯著負(fù)相關(guān)，但SLE患者Th1和Th2細(xì)胞水平及Th1/Th2和Th17/Treg細(xì)胞與健康對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。郝慧琴等[33]報道，SLE患者Th17細(xì)胞比例和血清IL-17水平均顯著升高，且活動期顯著高于非活動期，而Treg細(xì)胞比例顯著減少，活動期顯著低于非活動期，活動期Th17/Treg細(xì)胞顯著高于非活動期和健康對照組，而SLE活動期、非活動期TGF-β水平與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。因此，Treg/Th17細(xì)胞失衡在SLE發(fā)病中起重要作用，通過藥物或免疫抑制劑上調(diào)Treg細(xì)胞和下調(diào)Th17細(xì)胞將為SLE的發(fā)病和免疫學(xué)機(jī)制的研究及治療提供新思路。

2.3Treg細(xì)胞與炎性腸病(inflammatory bowel disease，IBD) IBD是一種非特異性結(jié)腸炎癥，包括克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎，腸黏膜的免疫功能異?？赡軈⑴cIBD的發(fā)病過程，但病因和發(fā)病機(jī)制尚不清楚。研究認(rèn)為，遺傳、環(huán)境和免疫因素共同參與克羅恩病的發(fā)生發(fā)展，免疫功能紊亂是關(guān)鍵因素之一；通常情況下，Th1/Th2細(xì)胞平衡紊亂參與IBD的發(fā)病[34]，而Treg細(xì)胞主要通過抑制腸黏膜免疫的負(fù)反饋調(diào)節(jié)維持Th1/Th2細(xì)胞平衡[35]。

近年來，Th17/Treg細(xì)胞失衡學(xué)說成為研究熱點。Treg是一種具有抑制Teff細(xì)胞增殖和活化功能的細(xì)胞亞群，能減輕IBD患者的腸道炎癥。Chao等[36]認(rèn)為，Th17細(xì)胞與Treg細(xì)胞可以相互轉(zhuǎn)化，并介導(dǎo)慢性炎癥和AID的發(fā)生。Th17/Treg細(xì)胞在克羅恩病腸道炎癥的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用，其失衡可能是IBD發(fā)病的原因之一[37]。潰瘍性結(jié)腸炎雄性BALB/c小鼠模型的Thl7細(xì)胞數(shù)量增加，而Treg細(xì)胞減少[38]，通過增加IL-10、TGF-β等抗炎因子的分泌抑制腸炎癥的級聯(lián)放大效應(yīng)，顯著改善腹瀉小鼠及IBD的臨床癥狀[39]。IBD患者腸黏膜中Th17細(xì)胞大量浸潤，IL-17A、IL-6、IL-1β和FoxP3高表達(dá)，且IL-17水平升高，而TGF-β僅在潰瘍性結(jié)腸炎中高表達(dá)。潰瘍性結(jié)腸炎患者結(jié)腸黏膜內(nèi)表達(dá)IL-17+IFNγ+T細(xì)胞和IL-17+FoxP3+T細(xì)胞，使體內(nèi)Treg細(xì)胞易轉(zhuǎn)化成分泌IL-17的Th17細(xì)胞，且IL-17+FoxP3+T細(xì)胞能抑制T細(xì)胞活化，促進(jìn)潰瘍性結(jié)腸炎的發(fā)生[40]?；顒悠贑D4+CD25+FoxP3+Treg細(xì)胞減少，緩解期升高，提示Treg細(xì)胞在IBD腸道炎癥中發(fā)揮免疫保護(hù)作用，Th17/Treg細(xì)胞比例失衡與IBD的病程發(fā)展有關(guān)。此外，Th17/Treg細(xì)胞失衡參與了克羅恩病腸道炎癥的發(fā)生發(fā)展。趙小靜等[41]發(fā)現(xiàn)，輕中度活動期患者外周血Treg細(xì)胞顯著低于緩解期和正常對照組，Treg細(xì)胞減少與克羅恩病的活動程度有關(guān)，而Th17細(xì)胞高于緩解期患者，且Th17/Treg細(xì)胞變化與反映克羅恩病活動的紅細(xì)胞沉降率、CRP等炎癥指標(biāo)以及克羅恩病活動指數(shù)呈負(fù)相關(guān)，血清CRP水平與克羅恩病的活動度呈正相關(guān)，可反映克羅恩病的炎癥活動情況[42]。由此可見，Th1/Th2和Th17/Treg細(xì)胞及其細(xì)胞因子共同參與了IBD的發(fā)生發(fā)展過程，并與病情密切相關(guān)。

2.4Treg細(xì)胞與AITD AITD是人類常見的一種器官特異性AID，也是除碘缺乏病以外最常見的甲狀腺疾病，近年來發(fā)病率呈上升趨勢。研究發(fā)現(xiàn)，90%的甲狀腺疾病為AITD，主要包括彌漫性毒性甲狀腺腫(Graves′ disease，GD病)和橋本甲狀腺炎(hashimoto thyroiditis，HT)，其共同特點是對自身甲狀腺組織的免疫耐受缺陷，常伴有多種自身抗體陽性和淋巴細(xì)胞浸潤，分別以甲狀腺功能亢進(jìn)和甲狀腺功能減退為特征。AITD的病因復(fù)雜，有相似的遺傳和免疫學(xué)基礎(chǔ)，長時間暴露于環(huán)境誘因下，可導(dǎo)致具有特定基因背景人群患病。既往關(guān)于AITD與Th1/Th2細(xì)胞亞群及細(xì)胞因子的研究認(rèn)為，AITD的發(fā)病與Th1和Th2細(xì)胞密切相關(guān)，隨著研究的不斷深入，發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)的Th1/Th2細(xì)胞失衡不能很好地解釋AITD的發(fā)病機(jī)制。Wang等[43]首次用雌性恒河猴模擬人類GD模型發(fā)現(xiàn)，Treg細(xì)胞減少，Th17/Treg細(xì)胞比值升高。對剛出生小鼠行胸腺切除術(shù)，消除外周CD4+CD25+Treg細(xì)胞，可引發(fā)多種器官特異性AID，可能與小鼠CD4+CD25+Treg細(xì)胞抑制血清甲狀腺球蛋白引起的自身免疫性反應(yīng)有關(guān)。AITD患者外周血表達(dá)FoxP3+的T細(xì)胞增加，但對細(xì)胞增殖的抑制能力降低，多數(shù)不能下調(diào)自身免疫反應(yīng)，表明AITD患者Treg細(xì)胞的免疫抑制能力有缺陷[44]。AITD患者CD4+CD25+Treg細(xì)胞數(shù)量減少，其中以FoxP3+CD4+CD25+Treg細(xì)胞減少更明顯，而活化的CD4+T細(xì)胞增加。陳萬志[45]發(fā)現(xiàn)，HT患者甲狀腺組織IL-17A mRNA和血清IL-17水平均顯著高于健康對照組，且甲狀腺功能減退HT組高于甲狀腺功能正常HT組，而FoxP3 mRNA和IL-10水平明顯低于對照組，但甲狀腺功能減退HT組與甲狀腺功能正常HT組的IL-10水平無明顯差異。

GD患者Treg細(xì)胞的免疫抑制能力明顯降低，且Treg數(shù)量和(或)功能異常與GD的發(fā)病和預(yù)后密切相關(guān)。Kahaly等[46]發(fā)現(xiàn)，GD患者外周血Treg細(xì)胞免疫抑制能力明顯低于健康對照組，但外周血Treg細(xì)胞數(shù)量與健康對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與唐大海等[47]的研究結(jié)果一致。Glick等[48]發(fā)現(xiàn)，AITD患者Treg CD4+T細(xì)胞數(shù)量與健康對照組無明顯差異，但Treg CD4+T細(xì)胞抑制能力下降，提示AITD患者Treg細(xì)胞功能降低。青少年GD患者經(jīng)甲巰咪唑治療后，外周血Treg細(xì)胞比例和絕對值升高[49]。李忠原等[50]報道，老年GD患者外周血CD4+CD25+Treg細(xì)胞比例和FoxP3 mRNA水平均顯著降低，經(jīng)131I治療3個月后，CD4+CD25+Treg細(xì)胞百分率、FoxP3 mRNA表達(dá)水平均隨病情緩解明顯升高，且優(yōu)于甲巰咪唑治療組，而甲巰咪唑治療組FoxP3 mRNA表達(dá)水平較治療前升高，提示131I可能通過增加CD4+CD25+Treg細(xì)胞數(shù)量和FoxP3 mRNA水平，改善老年GD患者的免疫耐受，并影響甲狀腺激素代謝水平。HT患者外周血和甲狀腺組織中Treg細(xì)胞免疫抑制能力下降，而Th17細(xì)胞應(yīng)答增強(qiáng)，Th17/Treg細(xì)胞失衡可能參與HT的發(fā)生發(fā)展過程。上述研究表明，AITD患者以Treg細(xì)胞減少多見，并伴有Treg細(xì)胞功能異常，但也有Treg數(shù)量增加和無明顯變化的報道，可能與檢測方法、樣本量、病情程度有關(guān)。

3 小 結(jié)

目前，國內(nèi)外Treg細(xì)胞的相關(guān)研究已廣泛開展。Treg細(xì)胞數(shù)量改變和功能異常參與RA、SLE、AITD等AID的發(fā)生發(fā)展過程，其變化與疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。通過運用調(diào)控Treg細(xì)胞的策略，針對AID靶向上調(diào)Treg細(xì)胞或下調(diào)Th17細(xì)胞水平，從Treg細(xì)胞角度為AID提供新的免疫學(xué)治療方案，干預(yù)并糾正Treg/Th17細(xì)胞比例失衡取得了一定的治療效果。但由于AID的發(fā)病涉及Treg/Th17和Th1/Th2細(xì)胞及其相應(yīng)細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)調(diào)控體系，大樣本前瞻性研究和隨機(jī)雙盲多中心試驗研究成為今后研究的重點。探討Treg/Th17和Th1/Th2細(xì)胞及其相應(yīng)細(xì)胞因子和轉(zhuǎn)錄因子在疾病中的相互關(guān)系及其與靶細(xì)胞的作用和免疫調(diào)節(jié)的精準(zhǔn)機(jī)制，將有助于尋找可靠有效的AID診斷、治療和預(yù)防方法。