PPD試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB試驗(yàn)在中老年活動(dòng)性肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值研究

何祥金

（安順市人民醫(yī)院，貴州 安順 561000）

結(jié)核病是一種在全球范圍內(nèi)流行的傳染病。此病是所有傳染病中造成成年人死亡最主要的疾病之一。早期結(jié)核病患者的臨床癥狀不明顯，其病情易被誤診或漏診，從而可導(dǎo)致傳染范圍進(jìn)一步擴(kuò)大，嚴(yán)重危害公共衛(wèi)生安全[1]。肺結(jié)核是指結(jié)核分枝桿菌侵襲肺部引起的一種慢性傳染病?；顒?dòng)性肺結(jié)核是指進(jìn)行痰液細(xì)菌涂片檢查的結(jié)果呈陽(yáng)性的一類肺結(jié)核。對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核患者的病情進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷和及時(shí)的治療至關(guān)重要[2]。本文主要是探討結(jié)核菌素試驗(yàn)（PPD 試驗(yàn)）聯(lián)合結(jié)核感染T 細(xì)胞斑點(diǎn)試驗(yàn)（T-SPOT.TB 試驗(yàn)）在中老年活動(dòng)性肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 基線資料

選擇2019 年7 月至2021 年2 月期間我院收治的50 例中老年活動(dòng)性肺結(jié)核患者作為研究對(duì)象。其納入標(biāo)準(zhǔn)是：病情經(jīng)痰液細(xì)菌涂片檢查、胸部影像學(xué)檢查等得到確診；病歷資料完整且認(rèn)知功能正常；知悉本研究?jī)?nèi)容，并簽署了自愿參與本研究的知情同意書。其排除標(biāo)準(zhǔn)是：合并有其他嚴(yán)重的器質(zhì)性疾?。荒挲g＜40 歲；存在其他可能影響本研究結(jié)果的因素。隨機(jī)將其分為觀察組與對(duì)照組，每組各有25 例患者。在觀察組中，有男14 例，女11 例；其年齡為47～84 歲，平均年齡為（65.35±1.52）歲。在對(duì)照組中，有男13 例，女12 例；其年齡為48～85 歲，平均年齡為（65.38±1.51）歲。兩組患者的基線資料相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

對(duì)對(duì)照組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)，方法是：在試驗(yàn)前詳細(xì)詢問患者的病史，明確其有無藥物過敏史。指導(dǎo)患者取舒適的體位，囑其放松手臂肌肉。用1 mL 注射器抽取0.1 mL的結(jié)核菌素純蛋白衍生物后注射在患者前臂掌側(cè)中下段的交界處，并在局部形成皮丘后的48～72 h 內(nèi)進(jìn)一步測(cè)量其皮膚硬結(jié)的平均直徑。整個(gè)試驗(yàn)過程要嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，并在光線充足處對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行判讀。皮膚硬結(jié)的平均直徑=（硬結(jié)橫徑+硬結(jié)縱徑）/2。若硬結(jié)的平均直徑＜5 mm，表示試驗(yàn)的結(jié)果呈陰性；若硬結(jié)的平均直徑≥5 mm，表示試驗(yàn)的結(jié)果呈陽(yáng)性。對(duì)觀察組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)。對(duì)其進(jìn)行PPD 試驗(yàn)的方法與對(duì)照組相同，對(duì)其進(jìn)行T-SPOT.TB 試驗(yàn)的方法是：采集其外周靜脈血4 mL，置于肝素鋰抗凝管中，在4 h 內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。采用T-SPOT.TB試劑盒（由英國(guó) Oxford Immunotec 公司生產(chǎn)）分離血液標(biāo)本中的單個(gè)核細(xì)胞，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。以RD1 編碼的結(jié)核分枝桿菌早期分泌抗原靶-6（ESAT-6）和10 kD培養(yǎng)濾過蛋白（CFP-10）肽段庫(kù)為刺激原，檢測(cè)標(biāo)本中釋放γ-干擾素的結(jié)核分枝桿菌特異性T 淋巴細(xì)胞的數(shù)量。本試驗(yàn)設(shè)有空白對(duì)照孔、陽(yáng)性對(duì)照孔及以ESAT-6和CFP-10 肽段庫(kù)作為刺激原的試驗(yàn)孔。空白對(duì)照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)＜10且陽(yáng)性對(duì)照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)＞20 時(shí)，視為試驗(yàn)有效。若空白對(duì)照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)＜6，其他任一孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)減去空白對(duì)照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)≥6，則表示試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性；若空白對(duì)照孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)≥6，其他任一孔內(nèi)的斑點(diǎn)數(shù)超過空白對(duì)照孔內(nèi)斑點(diǎn)數(shù)的2 倍，則表示試驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)并比較對(duì)兩組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)及PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率。統(tǒng)計(jì)并比較用PPD 試驗(yàn)及PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷兩組患者病情的敏感度及特異度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 20.0 軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用%表示，用χ2 檢驗(yàn)，計(jì)量資料用表示，用t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)兩組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)及PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率

對(duì)觀察組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率為96.00%，對(duì)對(duì)照組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率為76%。與對(duì)對(duì)照組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率相比，對(duì)觀察組患者進(jìn)行PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。

2.2 用PPD 試驗(yàn)及PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷兩組患者病情的敏感度及特異度

用PPD 試驗(yàn)診斷對(duì)照組患者病情的敏感度及特異度分別為72.00% 與68.00%，用PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷觀察組患者病情的敏感度及特異度分別為96.00% 與23.00%。與用PPD 試驗(yàn)診斷對(duì)照組患者病情的敏感度及特異度相比，用PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷觀察組患者病情的敏感度和特異度均更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2。

3 討論

相關(guān)的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，肺結(jié)核在全球范圍內(nèi)具有較高的發(fā)病率和致死率。出現(xiàn)活動(dòng)性結(jié)核是造成肺結(jié)核擴(kuò)散的主要原因。因此，對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核進(jìn)行早期診斷和治療十分重要。進(jìn)行痰液細(xì)菌涂片檢查是臨床上診斷活動(dòng)性肺結(jié)核最準(zhǔn)確的方法。但該檢查的耗時(shí)較長(zhǎng)，不利于及時(shí)對(duì)患者進(jìn)行后續(xù)治療。采用胸部影像學(xué)檢查診斷活動(dòng)性肺結(jié)核雖然能明確患者肺部病變的情況，但誤診率和漏診率較高。因此，為活動(dòng)性肺結(jié)核尋找一種更為準(zhǔn)確、快速、便捷的診斷方式至關(guān)重要[3]。T-SPOT.TB 試驗(yàn)是指利用結(jié)核特異抗原ESAT-6和CFP-10，通過酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)檢測(cè)受試者體內(nèi)是否存在結(jié)核效應(yīng)T 淋巴細(xì)胞，從而判斷其是否感染結(jié)核分枝桿菌的一種檢測(cè)技術(shù)。用T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷活動(dòng)性肺結(jié)核具有診斷的敏感度和特異度高、耗時(shí)短等優(yōu)點(diǎn)。PPD 試驗(yàn)是指在皮內(nèi)注射結(jié)核菌素，并根據(jù)注射部位皮膚的狀況判斷有無陽(yáng)性反應(yīng)的一種結(jié)核分枝桿菌感染檢測(cè)技術(shù)[4]。但進(jìn)行PPD 試驗(yàn)易受到多種因素的影響而導(dǎo)致試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。本研究的結(jié)果顯示，與用PPD 試驗(yàn)診斷對(duì)照組患者病情的敏感度及特異度相比，用PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷觀察組患者病情的敏感度及特異度均更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。這與相關(guān)文獻(xiàn)[5-7]報(bào)道的結(jié)果基本一致。

綜上所述，用PPD 試驗(yàn)聯(lián)合T-SPOT.TB 試驗(yàn)診斷中老年活動(dòng)性肺結(jié)核的敏感度和特異度較高。