• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    植物CDPK信號轉(zhuǎn)導途徑及其互作組分的功能研究進展?

    2021-11-30 04:53:08周子馨蘭海燕
    關鍵詞:酰化激酶底物

    周子馨,蘭海燕

    (新疆大學 生命科學與技術學院 新疆生物資源基因工程重點實驗室,新疆 烏魯木齊 830017)

    0 引言

    鈣離子作為植物信號轉(zhuǎn)導途徑中的第二信使,其游離態(tài)幾乎參與植物的所有生長發(fā)育過程[1].而作為鈣離子信號響應元件的CDPK是一類鈣依賴的蛋白激酶,它通過磷酸化作用將信號傳遞給下游組分并引起相關基因的表達,在植物生長發(fā)育以及多種脅迫響應過程中發(fā)揮積極作用[2].CDPK信號途徑與逆境應答密切相關,目前對CDPK基因和蛋白的研究較為深入,但對其互作組分及功能的研究比較有限.本文基于前人的相關研究進展,對植物CDPK信號途徑及其互作組分的生物學功能進行綜述,以期為相關研究提供借鑒.

    1 CDPK信號轉(zhuǎn)導途徑

    1.1 CDPK是重要的Ca2+感受器

    植物細胞中的多種信號轉(zhuǎn)導途徑均依賴信號分子進行信息交流,包括鈣離子、脂質(zhì)小分子、cAMP(cyclic adenosine monophosphate)、cGMP(cyclic guanosine monophosphate)等,其中游離的鈣離子作用范圍最廣[3].Williamson和Ashley[4]對海藻細胞內(nèi)鈣信號的研究首次發(fā)現(xiàn)胞內(nèi)游離的Ca2+可能對細胞功能的調(diào)節(jié)具有重要作用.植物細胞內(nèi)的鈣離子濃度受到多種鈣結合蛋白的調(diào)控,如鈣調(diào)素(Calmodulin,CaM)、類鈣調(diào)神經(jīng)素B亞基蛋白(Calcineurin B-like Proteins,CBLs)、CDPKs等[5].CaM是最典型的鈣結合蛋白,它作為鈣信號的“應答感受器”能迅速響應胞質(zhì)中鈣離子濃度變化,并維持胞內(nèi)鈣離子的穩(wěn)態(tài)[6].CaM和CBL以無激酶活性的形式存在,只在結合Ca2+后被激活進而與靶蛋白相互作用并使其磷酸化,從而調(diào)控植物生長發(fā)育或響應逆境脅迫[7?8].CBL能與其特定的作用底物CIPKs(CBL-interacting protein kinases)形成CBL-CIPKs信號系統(tǒng),在Ca2+信號轉(zhuǎn)導通路中發(fā)揮重要作用[8].

    CDPKs是最具特點的新型Ca2+傳感器,同時具有Ca2+結合活性和激酶活性[5],能夠直接結合胞質(zhì)中的Ca2+,將鈣信號轉(zhuǎn)化為磷酸化反應[5,9].外源添加Ca2+時,擬南芥AtCPK12能夠磷酸化轉(zhuǎn)錄因子ABF1(ABA-responsive element-binding factor 1)、ABF4以及蛋白磷酸酶2C(PP2C),而無外源Ca2+時則不發(fā)生磷酸化作用[10].CDPK信號通路在植物生長發(fā)育過程中參與多種細胞活動,包括初級代謝、次級代謝、應激反應、離子和水的運輸以及轉(zhuǎn)錄和信號轉(zhuǎn)導等過程[11],但不同CDPK具有不同的內(nèi)源底物,因而在信號傳遞過程中發(fā)揮不同的生物學功能.

    1.2 CDPK通過磷酸化傳遞信號

    在外界信號刺激下,植物胞質(zhì)游離Ca2+濃度變化激活CDPKs,將鈣信號級聯(lián)放大并作用于下游組分,經(jīng)磷酸化或自磷酸化作用使植物產(chǎn)生各種生理響應[12].大量實驗證明CDPK的N端可變區(qū)存在許多自磷酸化位點[13],對其在細胞內(nèi)的定位、底物特異性結合以及蛋白質(zhì)之間的相互作用有重要影響[14].煙草NtCDPK1的N端可變區(qū)6Ser和21Thr的自磷酸化可降低其結合并進一步磷酸化底物RSG(repression of shoot growth)的能力[15].CDPKs的自磷酸化除了作用于Ser/Thr殘基,也存在于酪氨酸殘基上.在大豆GmCDPKβ中首次發(fā)現(xiàn)24Tyr的自磷酸化降低了該蛋白激酶的活性[16].CDPKs的非自磷酸化作用更為普遍,AtCPK12通過磷酸化轉(zhuǎn)錄因子ABI2進而調(diào)控下游組分[10].Lee等發(fā)現(xiàn)NtCDPK1在體內(nèi)磷酸化26S蛋白酶體的調(diào)節(jié)亞基NtRpn3,從而響應激素信號并共同參與細胞分裂、分化及凋亡等過程[17].此外,CDPKs還受到上游激酶的調(diào)控,AtCPK11在體外能夠磷酸化AtCPK24,因此,推斷AtCPK11/24可能與MAPKs(mitogen-activated protein kinase)一樣在磷酸化級聯(lián)反應中發(fā)揮作用[18],類似的還有NtCDPK2/3[19].

    1.3 CDPK廣泛參與脅迫信號網(wǎng)絡

    生物和非生物脅迫以及一些胞內(nèi)刺激會引起胞質(zhì)Ca2+水平升高,當Ca2+傳感器識別鈣信號后進一步作用于下游互作蛋白,進而引起一系列生理響應(見圖1)[20].Ca2+傳感器(CDPKs)能夠直接或間接地調(diào)控下游重要的靶蛋白,如離子通道、轉(zhuǎn)運蛋白、轉(zhuǎn)錄因子或一些其他信號通路相關的蛋白質(zhì)[21].在擬南芥中,AtCPK4/11作為ABA信號途徑的負調(diào)控因子發(fā)揮功能,參與種子萌發(fā)、幼苗生長、氣孔運動和鹽脅迫耐受等過程[22].過表達水稻OsCDPK7/13/21后,轉(zhuǎn)基因植株對鹽、旱、冷脅迫的耐受性增強[23?25].除了目前研究較為深入的擬南芥、水稻等植物外,近期通過植物基因組學分析發(fā)現(xiàn),大部分黃麻(Chorchorus capsularis)CDPKs在鹽、旱脅迫下表達量顯著增加,表明CDPKs在植物應對不利環(huán)境的過程中發(fā)揮重要作用[26].通常多種信號途徑之間存在交叉作用,例如一些保衛(wèi)細胞信號轉(zhuǎn)導蛋白既是CDPKs的底物,又能作為SnRK2(SNF1-related kinases 2)的底物,這些轉(zhuǎn)導蛋白包括KAT1(Arabidopsis inward rectifier K+channel 1)、SLAC1(slowly activating anion channel)、RBOHs(respiratory burst oxidase homolog)、ABFs等,可能二者作用位點不同[27].CDPKs和MAPK兩種信號通路間也可能存在交互作用,當植物受到刺激后,通常CDPKs和MAPKs均能被激活.例如,當番茄(Lycopersicon esculentum)受傷時,CDPKs和MAPKs能在不同位點磷酸化番茄LeACS2(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid synthase),其結果對維持該蛋白的穩(wěn)定是必需的[28].CDPKs與其他信號途徑協(xié)同作用為植物應對外界脅迫和調(diào)節(jié)自身免疫等方面提供了更多的可能.

    圖1 植物細胞中的Ca2+信號調(diào)控網(wǎng)絡(該圖引自參考文獻[20],稍作修改)Fig 1 Ca2+ signal regulatory network in plants

    2 CDPKs的結構、分類及表達與定位

    2.1 CDPKs的結構

    典型的CDPK蛋白結構主要由四部分組成,包括N端可變區(qū)、Ser/Thr激酶域、自抑制域(連接域)以及類鈣調(diào)素結合域(見圖2A)[2,5,29].其中,N端可變區(qū)的結構域長度變化較大,同源性不高,但對底物的識別起作用,該結構對CDPKs的亞細胞定位及調(diào)控植物生長發(fā)育十分重要[5].激酶域具有典型的Ser/Thr蛋白激酶的保守催化序列,在不同物種間同源性較高,替換催化中心附近的氨基酸通常會降低激酶活性,且可能影響對底物的特異性結合[30].自抑制域具有高度保守性,大多由20~30個氨基酸殘基組成.類鈣調(diào)素結合域作為Ca2+感受器,通常具有四個EF手型,分為N端和C端兩部分,C端的鈣親和力高于N端[5,31].在Ca2+濃度較低的靜息狀態(tài)下,C端能夠結合鈣離子,并與自抑制域相互作用穩(wěn)定蛋白構象.與此同時,自抑制域上的假底物與激酶域上的活性位點結合阻止進一步識別底物[32?33].當Ca2+濃度升高時,鈣調(diào)素結構域N端也與鈣離子結合,并與自抑制域相互作用,通過蛋白構象變化使得自抑制域脫離,釋放出激酶域的活性位點[30].此時,鈣調(diào)素C端與N端可變區(qū)和激酶域的N端結合,鈣調(diào)素N端靠近激酶域的C端(見圖2B)[29].

    圖2 植物CDPKs的結構(A)和激活機制(B)(該圖引自參考文獻[29],稍作修改)Fig 2 Structures (A) and activation mechanism(B) of plant CDPKs

    2.2 CDPKs的分類

    CDPKs是多基因編碼的蛋白家族,迄今為止,在高等植物、原生動物、卵菌和綠藻中均發(fā)現(xiàn)該蛋白,但是在動物和真菌中尚未報道[34].隨著植物基因組的測序以及對CDPKs的研究不斷深入,不同植物中的CDPK家族成員組成逐漸被揭示,如擬南芥(Arabidopsis thaliana)[35]有34個CDPKs成員,水稻(Oryza sativa)[36]有31個,小麥(Triticum aestivum)[37]有20個,在煙草(Nicotiana tabacum)[38]、玉米(Zea mays)[39]、番茄(Solanum lycopersicum)[40]等植物中也陸續(xù)發(fā)現(xiàn)CDPKs.在高等植物中CDPKs分為四個主要的進化家族(I-IV),對擬南芥CDPKs基因家族的34個成員進行進化分析發(fā)現(xiàn),第IV家族最早形成一個單獨的進化枝,第III組與第I、II 組又分別形成一個進化枝,而I組和II組之間的進化關系最近(見圖3),這與Valmonte等[34]得出的結論一致.值得注意的是,Zhu等[22]發(fā)現(xiàn)第I家族中AtCPK4和AtCPK11兩個基因同源性很高,具有功能冗余現(xiàn)象.

    圖3 擬南芥CDPKs基因家族的進化分析Fig 3 Phylogenetic analysis of CDPKs gene family in Arabidopsis thaliana

    2.3 CDPKs基因的表達模式

    CDPKs在細胞、組織、器官中具有多種表達模式,可能參與特定的信號途徑.例如,AtCPK17/34只能在花粉中表達,參與調(diào)控花粉管的生長[41?42],而AtCPK3/6在保衛(wèi)細胞中顯著表達,參與調(diào)控氣孔運動[43].馬鈴薯StCDPK1受發(fā)育過程的調(diào)控,在形成塊莖時表達[44].CDPKs在種子形成和萌發(fā)過程中也發(fā)揮重要作用,檀香木CDPKs參與胚胎發(fā)育和種子萌發(fā)過程[45],而過表達水稻OsCDPK2后會抑制種子形成,導致發(fā)育提前終止[46].擬南芥AtCPK12在根、莖、葉等多種組織中均表達,但在干種子中則不表達[10].AtCPK10在根、莖、葉、花和角果等組織或器官中表達[47].CDPKs的時空表達差異表明其可能參與植物的不同生長發(fā)育過程,在復雜的細胞調(diào)控網(wǎng)絡中發(fā)揮功能.

    2.4 CDPKs蛋白定位與功能的關系

    亞細胞定位對于CDPKs識別底物和確定作用范圍十分重要.CDPKs分布廣泛,包括胞質(zhì)、細胞核、質(zhì)膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、過氧化物酶體、脂質(zhì)體等[7,48].其中大部分定位于質(zhì)膜、液泡膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜等部位,這種膜定位是由N端可變域的豆蔻酰化位點(在N端第2位的甘氨酸殘基)和棕櫚?;稽c(在N端第4/5位的半胱氨酸殘基)的酰化作用介導的[5].煙草NtCDPK5定位于細胞膜,當單突變豆蔻酰化、棕櫚酰化位點或兩個位點雙突變后,導致膜定位功能喪失[49].水稻OsCPK18的N端豆蔻?;稽c突變后,膜定位效應喪失[50].AtCPK9蛋白定位于質(zhì)膜,當豆蔻?;稽c(在N端第2位的甘氨酸殘基)突變?yōu)楸彼岷?,該蛋白定位于細胞質(zhì)中,同樣也說明豆蔻?;稽c對膜定位的重要性[51].N端豆蔻酰化作用由翻譯后修飾完成并維持蛋白的膜定位,而半胱氨酸殘基上的棕櫚?;目赡嫘詾榈鞍踪|(zhì)在細胞膜和胞質(zhì)或細胞核之間穿梭提供了可能[7,19].AtCPK6通過作用于SLAC1調(diào)節(jié)各種刺激下的氣孔運動,當豆蔻?;妥貦磅;稽c發(fā)生突變后,其穩(wěn)定的膜定位消失,同時喪失對SLAC1的調(diào)節(jié)功能,表明AtCPK6的膜定位對其調(diào)控SLAC1是必需的[52].Kobayashi等[53]發(fā)現(xiàn)馬鈴薯StCDPK5定位于質(zhì)膜,其N端發(fā)生磷酸化作用后激活底物StRBOHB,但突變其N端的豆蔻?;妥貦磅;稽c后,StCDPK5喪失質(zhì)膜定位和體內(nèi)激活StRBOHB的能力[54],以上研究表明,CDPK的N端?;饔脤ζ淠ざㄎ患靶惺构δ苁种匾?

    3 CDPKs的互作組分及功能

    3.1 CDPKs的互作組分

    3.1.1 CDPKs對底物的特異性識別

    CDPKs對底物特異性識別受到激酶活性位點和底物磷酸化位點周圍氨基酸序列相互影響[55].煙草NtCDPK1能夠負調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子RSG,參與赤霉素的反饋調(diào)節(jié).將其N端可變區(qū)的氨基酸突變(10R-A)后,雖仍具有激酶活性,但結合RSG的能力和磷酸化作用均降低[56].此外,有研究表明自磷酸化作用可以防止底物過度磷酸化,改變CDPKs對底物的偏好.NtCDPK1的自磷酸化作用(6S和21T)降低其對RSG的親合力,同時降低了磷酸化效率[15].結構域刪除和交換實驗表明,N端可變結構域在底物特異性識別過程中具有至關重要的作用[56].替換NtCDPK1和AtCPK9(二者同源性較高)的N端可變域,發(fā)現(xiàn)NtCDPK1的N端可變域賦予AtCPK9結合RSG的能力和激酶活性[56].煙草NtCDPK2和NtCDPK3結構域交換實驗也證實,磷酸化作用僅由各自的N端可變結構域決定[19].值得注意的是,一些CDPKs及底物在細胞的不同環(huán)境下可能發(fā)揮不同的生理功能.比如AtCPK21/AtCPK23能夠激活保衛(wèi)細胞離子通道蛋白SLAC1/SLAH3從而促進氣孔關閉[57?58],但cpk21/cpk23突變體植株也表現(xiàn)出較強的干旱耐受性[59?60].CDPKs的內(nèi)源底物種類眾多,包括轉(zhuǎn)錄因子、熱激蛋白、通道蛋白以及多種酶類,底物的多樣性決定了功能的多樣性,這些底物在基因表達、酶代謝、離子和水分的跨膜運輸、細胞骨架的動態(tài)變化等方面均發(fā)揮調(diào)節(jié)作用[35],因而CDPKs在植物生長發(fā)育以及脅迫響應等過程中具有重要的生理功能(見表1).

    表1 高等植物中部分CDPKs的作用底物及功能Tab 1 Substrates of some CDPKs and its functions in higher plants

    3.1.2 互作的實質(zhì)及生物學意義

    CDPKs通過磷酸化調(diào)節(jié)不同底物蛋白的活性,進而調(diào)控基因表達、維持離子平衡和ROS穩(wěn)態(tài)[74].磷酸化是一種普遍的翻譯后修飾,其可直接或間接激活胞質(zhì)內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子,轉(zhuǎn)位進入細胞核發(fā)揮作用[55].BZR1(brassinazole resistant1)是BR(brassinolide)信號轉(zhuǎn)導途徑中重要的轉(zhuǎn)錄因子,其定位與磷酸化狀態(tài)緊密相關.GSK3-like蛋白激酶(glycogen synthase kinase-3-like kinase)BIN2通過調(diào)節(jié)BZR1與14-3-3蛋白的相互作用,誘導BZR1從細胞核進入細胞質(zhì),且隨后保留在細胞質(zhì)中,這一過程受BIN2磷酸化的直接調(diào)節(jié)[75].BR處理或BZR1的磷酸化位點和14-3-3蛋白的識別位點發(fā)生突變后促使BZR1轉(zhuǎn)位至細胞核,進而調(diào)控下游BR響應基因的表達[75].煙草NtCDPK1磷酸化轉(zhuǎn)錄因子RSG第114位絲氨酸,促進14-3-3蛋白結合RSG[76],這種相互作用負調(diào)控RSG,將其限制在細胞質(zhì)而不能進入細胞核調(diào)控靶基因.當NtCDPK1表達被抑制后,其磷酸化作用以及從細胞核到細胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位均受到影響[77?78].AtCPK32能夠在體外磷酸化ABF4,其磷酸化位點(110S)對二者之間的相互作用是必需的,過表達AtCPK32能通過影響ABF4進而調(diào)控ABA響應基因的表達[63].灰綠藜CgCDPK與轉(zhuǎn)錄因子CgbHLH001能在細胞膜上發(fā)生相互作用,且體外條件下前者使后者發(fā)生磷酸化,當CgbHLH001上預測的磷酸化位點(96S)發(fā)生突變后二者相互作用消失,推測CgCDPK可能通過對CgbHLH001的磷酸化促使其轉(zhuǎn)位到細胞核,從而調(diào)控下游基因的表達[67?68].以上研究表明,CDPKs的磷酸化對其相互作用及發(fā)揮生物學功能具有重要意義,因此深入研究CDPKs底物的特異性及互作的分子機制對于闡明CDPK信號途徑十分必要.

    3.2 互作組分的生物學功能

    3.2.1 參與非生物脅迫的響應

    CDPKs在響應鹽、旱、冷等非生物脅迫過程中發(fā)揮重要作用,常涉及ABA信號途徑以及ROS清除等過程[36].ABA作為植物中的主要激素之一,廣泛參與植物生長發(fā)育及各種脅迫響應過程.植物細胞在不利環(huán)境下ABA含量增多,促使植物感知并應對外界刺激.干旱脅迫下ABA依賴的氣孔關閉是防止水分損失的重要機制,許多CDPKs參與調(diào)節(jié)氣孔運動.AtCPK10與HSP1相互作用,參與ABA/Ca2+信號對氣孔保衛(wèi)細胞內(nèi)向整流型K+通道的調(diào)控[47].AtCPK8通過AtCAT3抑制保衛(wèi)細胞的內(nèi)向整流型K+通道而參與ABA/Ca2+調(diào)控的氣孔關閉作用[73].AtCPK13通過調(diào)節(jié)保衛(wèi)細胞通道蛋白KAT1和KAT2的表達減小氣孔開度[79].過表達AtCPK32后植株對ABA信號更加敏感,導致種子萌發(fā)率降低[63].當植物受到脅迫后會誘導ROS產(chǎn)生,低濃度的ROS能夠作為信號分子介導多種反應,而過量的ROS則會對細胞造成氧化損傷.NADPH氧化酶廣泛參與ABA誘導的ROS產(chǎn)生和ABA誘導的氣孔關閉[48].馬鈴薯StCDPK4/5通過磷酸化NADPH氧化酶促進ROS的產(chǎn)生[80],擬南芥AtCPK5/6以及AtCPK4/11也具有類似的功能[81].油菜BnaCPK2與NADPH氧化酶RbohD相互作用,共同參與ROS產(chǎn)生并調(diào)控細胞死亡過程,過表達BnaCPK2導致ROS過量積累和細胞死亡[82].在擬南芥中過表達AtCPK1后導致NADPH氧化酶Rboh的活性升高[83],其轉(zhuǎn)基因株系對鹽、旱脅迫的耐受性增強[84],并通過對底物ORE1(oresara1,衰老的主要調(diào)控因子)的直接磷酸化作用調(diào)控細胞死亡[85].

    3.2.2 參與生物脅迫的響應

    植物除了應對多種非生物脅迫,還要防御病蟲害等生物脅迫侵害.大量研究表明,在各種植物/病原體互作系統(tǒng)中胞質(zhì)Ca2+流入是病原菌誘導信號轉(zhuǎn)導途徑的關鍵早期步驟.植物對病原體的響應通常受病原體編碼的激發(fā)子(如枝孢霉Avr9)和植物編碼的受體(如番茄Cf-9抗性蛋白)之間的相互識別所激活.Romeis等[38,86]在Cf-9轉(zhuǎn)基因煙草中發(fā)現(xiàn),當Cf-9與Avr9互作后激活了CDPK的表達,并作為抗原誘導反應中重要的鈣傳感器發(fā)揮功能.將CDPK基因沉默后發(fā)現(xiàn)植物喪失Cf-Avr誘導的特異性超敏反應,表明CDPK對于介導Cf-9/Avr9誘導的植物防御體系不可或缺[38].AtCPK5/6還通過調(diào)控乙烯生物合成酶ACS基因的表達來調(diào)節(jié)乙烯的產(chǎn)生,從而應對灰霉病感染[87?88].在擬南芥葉細胞中,細菌激發(fā)子flg22(a 22 amino acid peptide of flagellin)能夠瞬時激活多個CDPKs的活性,如AtCPK4、AtCPK5、AtCPK6 和AtCPK11,它們可作為早期轉(zhuǎn)錄過程的信號調(diào)節(jié)器[81].突變其中某些基因后(如cpk5 cpk6雙突變體;cpk5 cpk6 cpk11三突變體;cpk4 cpk5 cpk6 cpk11四突變體),早期ROS產(chǎn)生減少,表明這4個基因共同調(diào)控flg22介導的ROS損傷及對病原菌的防御,提示CDPKs在PAMP(pathogenassociated molecular patterns)信號途徑中起重要作用[81].對17個擬南芥CPK單突變體進行遺傳篩選發(fā)現(xiàn),cpk3和cpk13突變體中草食動物誘導的植物防御素基因PDF1.2的表達量顯著降低;CPK3/13在體外能夠磷酸化轉(zhuǎn)錄因子HSFB2a,且在煙草葉片中瞬時表達后能進一步激活PDF1.2的表達[65].不僅如此,AtCPK3還參與多種防御途徑,是植物響應真菌及其他病害的必需組分[89],如激活狀態(tài)下的AtCPK3通過磷酸化Rem1.3(Remorins)上的74S/86T/91S位點抑制病毒PVX(potato virus X)的細胞增殖[90].

    4 展望

    CDPKs作為植物中重要的蛋白激酶,在識別Ca2+信號后通過對底物的磷酸化參與多種信號途徑的調(diào)節(jié),從而發(fā)揮重要的生物學功能.本文從CDPKs對Ca2+信號的敏感性、結構和分類、表達模式和亞細胞定位以及互作蛋白的功能等不同方面,綜述了CDPKs通過蛋白磷酸化傳遞Ca2+信號從而調(diào)控植物細胞代謝并響應環(huán)境脅迫的機制.盡管很多CDPKs在體外能磷酸化各種蛋白底物,但CDPKs磷酸化作用的具體機制,包括CDPKs與其底物相互作用的實質(zhì)及生物學意義、磷酸化與信號轉(zhuǎn)導的相關性等方面還有待深入探索.鑒定植物CDPKs的內(nèi)源底物并分析其特異的調(diào)控功能將為研究CDPKs信號途徑的作用機制提供新的證據(jù),并為改良農(nóng)作物奠定科學理論基礎.

    猜你喜歡
    ?;?/a>激酶底物
    兩種品牌大腸菌群酶底物法檢測試劑性能的比較
    云南化工(2021年6期)2021-12-21 07:30:56
    蚓激酶對UUO大鼠腎組織NOX4、FAK、Src的影響
    蚓激酶的藥理作用研究進展
    解析參與植物脅迫應答的蛋白激酶—底物網(wǎng)絡
    科學(2020年2期)2020-08-24 07:57:00
    黏著斑激酶和踝蛋白在黏著斑合成代謝中的作用
    內(nèi)源信號肽DSE4介導頭孢菌素C酰化酶在畢赤酵母中的分泌表達
    促酰化蛋白對3T3-L1脂肪細胞炎性反應的影響
    泛素連接酶-底物選擇關系的研究進展
    云南中醫(yī)學院學報(2014年2期)2014-11-07 02:48:12
    Doublecortin樣激酶-1在胃癌組織中的表達及其與預后關系
    精品久久国产蜜桃| 中国美女看黄片| 高清日韩中文字幕在线| 人人妻人人澡欧美一区二区| 人妻少妇偷人精品九色| 99精品久久久久人妻精品| a在线观看视频网站| 一区福利在线观看| 免费高清视频大片| 一个人免费在线观看电影| 男人和女人高潮做爰伦理| 美女cb高潮喷水在线观看| 成年版毛片免费区| 久久久久久久精品吃奶| 免费高清视频大片| 午夜福利欧美成人| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品久久视频播放| 成人国产一区最新在线观看| 日韩亚洲欧美综合| 91精品国产九色| 婷婷色综合大香蕉| 精品久久久久久久久久久久久| 搡老妇女老女人老熟妇| 久久久久久久亚洲中文字幕| 18+在线观看网站| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲在线观看片| 一级黄片播放器| 国产精品爽爽va在线观看网站| 日本精品一区二区三区蜜桃| 日本 av在线| 伦理电影大哥的女人| 国产成人av教育| 最近最新免费中文字幕在线| 国产成人福利小说| 国产精品人妻久久久久久| 中文字幕高清在线视频| 久久久久性生活片| 麻豆成人午夜福利视频| 日本爱情动作片www.在线观看 | 三级国产精品欧美在线观看| 成人美女网站在线观看视频| 99久久成人亚洲精品观看| 久久久久久久精品吃奶| 国产一区二区在线av高清观看| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产在视频线在精品| 精品久久久久久久末码| 少妇被粗大猛烈的视频| 99精品在免费线老司机午夜| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 亚洲一区高清亚洲精品| 熟女人妻精品中文字幕| 日韩欧美免费精品| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产真实乱freesex| 精品午夜福利在线看| 亚洲自拍偷在线| 国产高潮美女av| 窝窝影院91人妻| 精品人妻偷拍中文字幕| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 乱码一卡2卡4卡精品| 可以在线观看毛片的网站| 成人综合一区亚洲| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 伦理电影大哥的女人| 韩国av一区二区三区四区| 精品一区二区三区av网在线观看| 18+在线观看网站| 精品99又大又爽又粗少妇毛片 | 嫩草影院精品99| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 最近在线观看免费完整版| 国产美女午夜福利| 欧美成人a在线观看| 免费人成视频x8x8入口观看| 床上黄色一级片| 色哟哟·www| 深爱激情五月婷婷| 搡老岳熟女国产| 久久精品人妻少妇| 永久网站在线| 精品一区二区三区av网在线观看| 在线免费十八禁| 成人特级av手机在线观看| 国产精品,欧美在线| 男人舔女人下体高潮全视频| 在线观看66精品国产| 一本久久中文字幕| 国产成人福利小说| 97超视频在线观看视频| 色在线成人网| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 日本成人三级电影网站| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 国产高清视频在线播放一区| 婷婷色综合大香蕉| 他把我摸到了高潮在线观看| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 免费av观看视频| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲黑人精品在线| 一个人观看的视频www高清免费观看| 最后的刺客免费高清国语| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 亚洲av.av天堂| 久久人人精品亚洲av| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 成人国产综合亚洲| 少妇高潮的动态图| 婷婷精品国产亚洲av| 成人特级黄色片久久久久久久| av.在线天堂| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 夜夜爽天天搞| 两个人视频免费观看高清| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 性插视频无遮挡在线免费观看| 免费大片18禁| 18禁在线播放成人免费| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 99久久精品热视频| 极品教师在线视频| 午夜福利视频1000在线观看| eeuss影院久久| 日本色播在线视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 黄色女人牲交| 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美日韩乱码在线| 日韩强制内射视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 长腿黑丝高跟| 2021天堂中文幕一二区在线观| 99久久九九国产精品国产免费| 伊人久久精品亚洲午夜| 男女那种视频在线观看| 性欧美人与动物交配| 在线免费观看不下载黄p国产 | 少妇被粗大猛烈的视频| 精品乱码久久久久久99久播| 啪啪无遮挡十八禁网站| 日韩欧美精品免费久久| 日本爱情动作片www.在线观看 | 日日摸夜夜添夜夜添小说| av中文乱码字幕在线| 欧美成人性av电影在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲精品成人久久久久久| 精品久久久久久久末码| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久精品国产清高在天天线| 成年免费大片在线观看| 一区二区三区激情视频| 免费观看人在逋| av黄色大香蕉| av天堂在线播放| 男女视频在线观看网站免费| 久久久国产成人精品二区| 精品久久久久久成人av| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品永久免费网站| 99热这里只有是精品50| 毛片女人毛片| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 一区二区三区四区激情视频 | 日韩欧美国产一区二区入口| 日韩中字成人| 国产亚洲91精品色在线| 亚洲性夜色夜夜综合| 日日干狠狠操夜夜爽| 热99re8久久精品国产| 黄色欧美视频在线观看| 成人特级黄色片久久久久久久| 精品一区二区免费观看| 男女视频在线观看网站免费| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲成av人片在线播放无| 精品人妻偷拍中文字幕| 99在线人妻在线中文字幕| 亚洲欧美清纯卡通| 高清在线国产一区| 少妇熟女aⅴ在线视频| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲精品国产成人久久av| 免费在线观看成人毛片| 免费一级毛片在线播放高清视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 成人精品一区二区免费| 日韩欧美三级三区| 成年女人毛片免费观看观看9| 亚洲av五月六月丁香网| 国产精品av视频在线免费观看| 黄色视频,在线免费观看| 久99久视频精品免费| 久久久久精品国产欧美久久久| 中文字幕av在线有码专区| 12—13女人毛片做爰片一| 久久精品影院6| 一边摸一边抽搐一进一小说| 精品人妻一区二区三区麻豆 | 九九爱精品视频在线观看| 网址你懂的国产日韩在线| 日日啪夜夜撸| av在线天堂中文字幕| 色视频www国产| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 一级黄片播放器| 国产午夜精品论理片| 久久国产乱子免费精品| 久久6这里有精品| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美日本亚洲视频在线播放| 午夜精品在线福利| 国产乱人伦免费视频| 亚洲精品国产成人久久av| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 波多野结衣高清无吗| 中国美女看黄片| 国产精品人妻久久久久久| 99热网站在线观看| 久久久久性生活片| 午夜福利高清视频| 久久午夜福利片| 色5月婷婷丁香| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 人妻久久中文字幕网| 欧美一区二区精品小视频在线| av视频在线观看入口| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲综合色惰| 人妻久久中文字幕网| 日韩一本色道免费dvd| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 老师上课跳d突然被开到最大视频| 99国产极品粉嫩在线观看| 午夜老司机福利剧场| 尾随美女入室| 久久久久久大精品| 日韩大尺度精品在线看网址| 美女黄网站色视频| 色av中文字幕| 日韩精品青青久久久久久| 真实男女啪啪啪动态图| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 日本免费a在线| 国内精品久久久久精免费| 久久久午夜欧美精品| 国产亚洲精品久久久com| 国产精品99久久久久久久久| 国产亚洲91精品色在线| 亚洲国产精品久久男人天堂| 无遮挡黄片免费观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美日韩国产亚洲二区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲美女黄片视频| 免费在线观看成人毛片| 免费在线观看影片大全网站| 高清毛片免费观看视频网站| 白带黄色成豆腐渣| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产av麻豆久久久久久久| 国产精品久久久久久精品电影| 亚洲成a人片在线一区二区| 欧美三级亚洲精品| 一本久久中文字幕| 国产老妇女一区| 狠狠狠狠99中文字幕| 人人妻人人看人人澡| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 成熟少妇高潮喷水视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲中文字幕日韩| www.www免费av| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 久久久精品欧美日韩精品| 免费观看精品视频网站| 美女免费视频网站| 最近最新免费中文字幕在线| 综合色av麻豆| 亚洲av.av天堂| 一边摸一边抽搐一进一小说| 韩国av一区二区三区四区| 亚洲美女视频黄频| 51国产日韩欧美| 一个人看视频在线观看www免费| 亚洲精品在线观看二区| a在线观看视频网站| 搞女人的毛片| 99热只有精品国产| 夜夜夜夜夜久久久久| 搡老熟女国产l中国老女人| avwww免费| 亚洲七黄色美女视频| 老女人水多毛片| 我的老师免费观看完整版| 听说在线观看完整版免费高清| 99热这里只有精品一区| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 久久精品影院6| 性欧美人与动物交配| 国产精品久久久久久久电影| 亚洲无线在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 两个人的视频大全免费| 观看美女的网站| 又爽又黄a免费视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 天美传媒精品一区二区| 十八禁国产超污无遮挡网站| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产高清有码在线观看视频| 精品久久久久久久久久免费视频| 日韩一本色道免费dvd| 国产黄色小视频在线观看| 免费观看精品视频网站| 九色成人免费人妻av| 天堂影院成人在线观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品无大码| 国产真实乱freesex| 不卡一级毛片| 日本欧美国产在线视频| 亚洲电影在线观看av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲中文日韩欧美视频| 有码 亚洲区| 99热精品在线国产| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 直男gayav资源| 成人国产麻豆网| 欧美极品一区二区三区四区| 国产乱人视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 日本免费一区二区三区高清不卡| 午夜爱爱视频在线播放| 男人舔奶头视频| 久99久视频精品免费| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产黄片美女视频| 性色avwww在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 国产亚洲精品久久久com| 国产精品久久久久久久电影| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 久久人人爽人人爽人人片va| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲国产欧美人成| 中文字幕高清在线视频| 免费看美女性在线毛片视频| 成人永久免费在线观看视频| 俄罗斯特黄特色一大片| 欧美日本视频| 制服丝袜大香蕉在线| 91狼人影院| 舔av片在线| 18+在线观看网站| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 尾随美女入室| 免费大片18禁| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 女人十人毛片免费观看3o分钟| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 免费搜索国产男女视频| 国产精品亚洲一级av第二区| 精品欧美国产一区二区三| 免费在线观看影片大全网站| 在线免费观看不下载黄p国产 | 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 我的女老师完整版在线观看| 国产成人a区在线观看| 波多野结衣高清作品| 亚洲在线自拍视频| 国产成人福利小说| 欧美日本视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 婷婷精品国产亚洲av| 国模一区二区三区四区视频| 日本黄大片高清| 国产真实乱freesex| 日韩一本色道免费dvd| x7x7x7水蜜桃| 日韩欧美精品v在线| 精品午夜福利视频在线观看一区| 久久久成人免费电影| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚州av有码| 啦啦啦韩国在线观看视频| 久久久久久久午夜电影| 亚洲无线观看免费| 免费搜索国产男女视频| 欧美三级亚洲精品| 亚洲人与动物交配视频| 国产 一区精品| 特大巨黑吊av在线直播| 久久久久久伊人网av| 99热这里只有是精品50| 欧美性猛交黑人性爽| 韩国av一区二区三区四区| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲专区国产一区二区| 99久久精品国产国产毛片| 日韩欧美 国产精品| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 午夜福利在线在线| 老司机午夜福利在线观看视频| 五月伊人婷婷丁香| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲18禁久久av| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 一夜夜www| 国产乱人伦免费视频| 午夜免费激情av| 亚洲一区二区三区色噜噜| 国产麻豆成人av免费视频| 在线观看av片永久免费下载| x7x7x7水蜜桃| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产在视频线在精品| 欧美精品国产亚洲| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美成人性av电影在线观看| 在线a可以看的网站| 久久午夜亚洲精品久久| 国产乱人视频| 特大巨黑吊av在线直播| 精品乱码久久久久久99久播| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 国产精品久久久久久久久免| 亚洲av.av天堂| 联通29元200g的流量卡| 日韩欧美免费精品| 国产高清不卡午夜福利| 人妻少妇偷人精品九色| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 97超视频在线观看视频| 在线国产一区二区在线| 69人妻影院| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲美女黄片视频| 精品久久久久久久久久久久久| 亚洲成人免费电影在线观看| 久久午夜亚洲精品久久| 免费看a级黄色片| 精品久久久久久成人av| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片 | 99久久久亚洲精品蜜臀av| xxxwww97欧美| 精品国产三级普通话版| 亚洲在线自拍视频| 男女边吃奶边做爰视频| 色5月婷婷丁香| 日本 欧美在线| 我的老师免费观看完整版| 亚洲成a人片在线一区二区| 男女下面进入的视频免费午夜| 日本一本二区三区精品| 听说在线观看完整版免费高清| 成年版毛片免费区| 久9热在线精品视频| 波多野结衣高清无吗| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产精品亚洲美女久久久| 午夜福利在线观看吧| 日韩中文字幕欧美一区二区| bbb黄色大片| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久国产精品人妻蜜桃| 欧美性猛交黑人性爽| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲欧美日韩高清专用| 国产精品福利在线免费观看| 天堂影院成人在线观看| 亚洲最大成人av| 又黄又爽又免费观看的视频| 1024手机看黄色片| 亚洲美女黄片视频| 观看免费一级毛片| 淫秽高清视频在线观看| 欧美最新免费一区二区三区| 日韩 亚洲 欧美在线| 12—13女人毛片做爰片一| 国产单亲对白刺激| 国产精品人妻久久久影院| 色5月婷婷丁香| 色精品久久人妻99蜜桃| 欧美一区二区精品小视频在线| 中出人妻视频一区二区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产免费男女视频| 成人无遮挡网站| 日韩欧美国产一区二区入口| 直男gayav资源| 亚洲18禁久久av| 国产精品99久久久久久久久| 国产亚洲av嫩草精品影院| 2021天堂中文幕一二区在线观| 日本在线视频免费播放| 天堂动漫精品| 久久久久久久久久成人| 日本欧美国产在线视频| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 日本一本二区三区精品| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产视频一区二区在线看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 丝袜美腿在线中文| 国产乱人视频| 亚洲第一电影网av| 最近视频中文字幕2019在线8| h日本视频在线播放| 欧美色视频一区免费| 日韩精品青青久久久久久| 国产精品永久免费网站| 最近视频中文字幕2019在线8| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲成人久久爱视频| 成人国产麻豆网| 成人精品一区二区免费| 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产男靠女视频免费网站| 中文在线观看免费www的网站| 欧美性猛交黑人性爽| 在线a可以看的网站| 少妇人妻精品综合一区二区 | 看免费成人av毛片| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲自拍偷在线| 天堂网av新在线| 亚洲av熟女| 在线观看av片永久免费下载| 直男gayav资源| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产精品久久久久久久电影| 一级av片app| 久久精品影院6| 亚洲av五月六月丁香网| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 少妇被粗大猛烈的视频| 午夜视频国产福利| 99riav亚洲国产免费| 无遮挡黄片免费观看| 中文字幕久久专区| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产精品综合久久久久久久免费| 日本三级黄在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 又爽又黄无遮挡网站| 少妇的逼好多水| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 亚洲欧美激情综合另类| 88av欧美| 99久久九九国产精品国产免费| 99riav亚洲国产免费| 少妇人妻一区二区三区视频| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲国产精品成人综合色| 日韩一本色道免费dvd| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 综合色av麻豆| 亚洲第一区二区三区不卡| 午夜福利成人在线免费观看| 91久久精品国产一区二区三区| 全区人妻精品视频| 男人狂女人下面高潮的视频| 色哟哟·www| 欧美日韩综合久久久久久 | ponron亚洲| 级片在线观看| а√天堂www在线а√下载| 日韩一本色道免费dvd| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 日本a在线网址| 欧美+亚洲+日韩+国产| 国产色爽女视频免费观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 97碰自拍视频| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美日韩乱码在线| 国产乱人视频| 国产高清三级在线| 啪啪无遮挡十八禁网站| 国产三级在线视频| 黄色欧美视频在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 亚洲在线观看片| 欧美在线一区亚洲| 欧美又色又爽又黄视频| 欧美一级a爱片免费观看看| 色播亚洲综合网| 精品人妻1区二区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 97热精品久久久久久|