韓 波, 高政平
(徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學院, 江蘇 徐州 221006)
隨著生態(tài)文明建設的深入,需要大量優(yōu)新園林植物資源,特別是觀賞蕨類植物,已成為當今風景園林建設中的新寵兒。蕨類植物因其獨特的美化、綠化、彩化和凈化等功能,令人耳目一新的格調(diào),受到人們越來越多的青睞和欣賞[1]。蕨類植物的孢子繁殖是一種快速繁育種苗的捷徑,它具有繁殖量大、成本低廉、簡單易行等諸多優(yōu)勢,是蕨類繁殖的最主要方式[2]。關于漸尖毛蕨的研究主要集中在孢子形態(tài)學特征、遺傳多樣性和配子體發(fā)育等方面[3]。本研究采用漸尖毛蕨孢子為試驗材料,探索其孢子萌發(fā)因素、幼孢子體形成和孢子體幼苗后期生長發(fā)育,為進一步開發(fā)徐州地區(qū)蕨類資源、探索適合蕨類植物人工繁殖和規(guī)?;a(chǎn)提供理論依據(jù)和技術(shù)指導。
漸尖毛蕨(Cyclosorusacuminatus(Houtt.) Nakai)別名金星草、小葉鳳凰尾巴草、小水花蕨、牛肋巴、黑舒筋、舒筋草,為金星蕨科植物漸尖毛蕨的根莖或全草。株高0.8~1.5 m,根莖長而橫生,葉柄長0.3~0.6 m,深禾稈色,葉片厚紙質(zhì),披針形,長0.6~1.0 m,寬0.15~0.3 m;羽片15~20對,互生,無柄,線狀披針形,先端漸尖,基部截形,羽狀淺裂至半裂。入藥有清熱解毒,祛風除濕,健脾之功效。孢子深褐色,兩側(cè)對稱,單裂縫,極面觀為橢圓形,赤道面觀為半圓形,外壁具顆粒,周壁兩層,外層向外隆起形成孢子紋飾,呈雞冠狀[4];孢子囊群圓形,背生于側(cè)脈中部稍上處,囊群蓋大,圓腎形,棕色,膜質(zhì),最后卷縮,密生柔毛。
孢子采集時間為7—11月。剪取帶有外觀呈棕褐色孢子囊未開裂的孢子囊群的羽片,放于室內(nèi),下鋪報紙進行自然干燥,3~5 d孢子囊開裂,約1周后,輕輕拍打干燥后的孢子葉,使孢子自然散落,用硫酸紙收集孢子。置于冰箱2~4 ℃的條件下保存。
將漸尖毛蕨孢子用濾紙包好,用棉線扎緊,先在75%的酒精中浸泡15~20 s,然后再放入5%NaClO溶液浸泡5~8 min殺菌、消毒,用無菌水反復沖洗3~5次。在無菌培養(yǎng)皿中小心打開紙包,用少量無菌水將濾紙上的孢子沖入培養(yǎng)皿中,再將孢子懸浮液倒入已高壓滅菌的三角燒瓶中,并用少量無菌水沖洗培養(yǎng)皿后一并倒入三角瓶,用封口膜封好三角瓶備用[5]。
2.2.1混合基質(zhì)
漸尖毛蕨在徐州地區(qū)最適宜培養(yǎng)的是營養(yǎng)土∶沙壤土=1∶1混合基質(zhì)。苗床長寬可以結(jié)合溫室大棚尺寸而定。為了保證肥料的長效供應,床土施肥應采取基肥為主、化肥為輔的原則,用量為有機肥30 t·hm-2,氮肥0.3 t·hm-2,磷肥0.35 t·hm-2,鉀肥0.1 t·hm-2。基質(zhì)要嚴格過篩、加濕。
2.2.2土壤殺菌殺蟲
1) 高溫消毒法。在夏季高溫時,用麥秸或稻草15 t·hm-2,鍘成5 cm長短,均勻撒在地面上,再用石灰0.3 t·hm-2均勻施撒,翻地、藻水、鋪膜,密閉大棚溫室15~20 d,當土壤溫度提升至60~70 ℃時能有效殺死土壤中的病菌和線蟲[6]。
2) 藥液消毒法。用50%多菌靈可濕性粉劑,加50%辛硫磷乳油或5%阿維菌素、40%辛硫磷劑噴灑于土壤表層,經(jīng)翻耕、灌水、使藥液滲入土中,能有效殺死土壤中的病菌及蟲類。
在溫室大棚中,一年四季均可以播種。結(jié)合徐州地區(qū)的環(huán)境條件,適宜的漸尖毛蕨孢子播種時間在3月上、中旬。
將處理過的漸尖毛蕨孢子均勻地撒播在苗床上,用噴霧器噴透水后,及時蓋上薄膜。
春天播種后,溫室大棚上蓋遮陽網(wǎng),透光率40%左右,5月初揭開大棚薄膜,遮陽網(wǎng)繼續(xù)蓋上,至11月中旬揭去遮陽網(wǎng)。
播種后最初的一段時間不必澆水,1周后揭開薄膜,每天噴霧1~2次,再蓋上薄膜,保持空氣濕度70%~90%。特別在60 d左右原葉體轉(zhuǎn)幼孢子體期間,為有效促進精子移動,務必保證基質(zhì)和原葉體表面濕潤,應視濕度情況加強噴霧,保持空氣濕度80%~100%,滿足精卵結(jié)合所需要的水分條件。
孢子在適宜的條件下萌發(fā)生長為微小的配子體稱原葉體,一般需經(jīng)60 d左右成熟,當原葉體直徑達0.3~0.5 cm時精子器和頸卵器發(fā)育成熟,精子器產(chǎn)生精子要以水為載體進行運動,以達到頸卵器與卵子結(jié)合完成受精過程形成合子,進一步發(fā)育成胚,進一步分化出蕨類植物的根、莖、葉。當觀察到綠色原葉體,葉片2張,長度0.5 cm開始移植,移植前可以用竹簽在苗床做穴,尺寸為直徑0.8 cm、深0.5 cm,保持適宜穴距。移栽時用鑷子輕輕夾取根部帶土漸尖毛蕨孢子體,放置于每穴中央,輕壓覆土,保持漸尖毛蕨孢子體根系與苗床基質(zhì)充分接觸。移植后隨即用小孔噴霧器進行噴霧,每天3次,保持空氣濕度≥80%、溫度25 ℃左右,及時覆蓋薄膜,適宜光照。小苗移栽后1周,為保證其快速生長,每周澆1~2次水,每2周噴施1次N、P、K三元復合肥(17-17-17)2 000倍液,保持環(huán)境通風良好和充足光照。
徐州地區(qū)漸尖毛蕨繁殖過程中主要的病害有赤霉病、白粉病、銹病,蟲害有蚜蟲、地下害蟲、介殼蟲,雜草有馬唐、稗草、狗尾草、千金子及部分尖葉雜草和闊葉類雜草。具體防治方法如下:赤霉病用50%多菌靈可濕性粉劑1.5 kg·hm-2加水噴霧;白粉病、銹病用12.5%禾果利可濕性粉劑0.3~0.45 kg·hm-2,或15%粉銹寧可濕性粉劑0.75~1.5 kg·hm-2加水噴霧,間隔7~10 d噴一次,連防2~3次。蚜蟲用40%氧樂果乳油1.5 kg·hm-2加水噴霧;地下害蟲用40%辛硫磷乳油0.75~1.5 kg·hm-2拌炒香的麥麩45~60 kg,于傍晚撒于地面;介殼蟲可采取釋放瓢蟲等捕食性天敵有效生物防治,也可選用低毒的選擇性殺蟲劑“邯科140”1 000倍液、毒死蜱600倍液等化學防治。禾本科雜草的馬唐、稗草、狗尾草、千金子等,用精喹禾靈300 mL·hm-2兌水15 kg均勻噴施;對于尖葉雜草和闊葉類雜草混雜,可以選擇甜菜安寧+高效氟吡甲禾靈。在使用除草劑時注意選擇晴朗無風天氣、盡量避開中午高溫時段用藥,嚴格按使用說明進行用藥,不可隨意增加或減少用藥量。