副豬嗜血桿菌研究概況

陳娟，李瀟，何菊，羅元宇，陳志

（1.六盤水市農(nóng)業(yè)科學研究院，貴州六盤水 553001；2.盤州市動物防疫監(jiān)測服務站，貴州盤州 553537；3.水城區(qū)動物疫病預防控制中心,貴州六盤水 553600；4.六盤水市畜牧水產(chǎn)業(yè)發(fā)展中心，貴州六盤水 553001）

1 病原學

HPS是具有菌毛和莢膜結構的形態(tài)多變的革蘭氏陰性菌[1]。HPS對外界環(huán)境較敏感，常規(guī)消毒便可殺死。溫度37℃、pH 7.6～7.8、CO2濃度為5%為HPS體外培養(yǎng)最佳環(huán)境，HPS存活時限與環(huán)境溫度不同有關。HPS體外分離培養(yǎng)難度系數(shù)大，需在培養(yǎng)基中加入一定濃度胎牛血清和NAD。在TSA培養(yǎng)基（含胎牛血清和NAD）上呈邊緣整齊半透明的小菌落，血平板上無溶血現(xiàn)象，可在葡萄球菌周邊生長形成衛(wèi)星現(xiàn)象。迄今為止，被發(fā)現(xiàn)的副豬嗜血桿菌血清型有15種，其中，血清1、2、3、4、5、8、10、12、13、14和15可能引起疾病或死亡為強毒株，血清6、7、9和11被認為是弱毒力的，血清4、5、13型在德、美、加、日等國最流行，血清4和5型在中國最流行[2]。

2 流行病學

HPS是1910年德國科學家Glosser發(fā)現(xiàn)的一種煙酰胺腺嘌呤二核苷酸依賴性革蘭氏陰性桿菌，不同階段豬群均可發(fā)病，帶菌豬群和發(fā)病豬群是主要傳染源，通過呼吸道、消化道和皮膚接觸等途徑傳播，以腦膜炎、關節(jié)炎等為主要發(fā)病特征。1999年在中國從疑似患HPS病感染病豬體內分離鑒定到HPS。近年來，HPS的在我國報道越來越多，呈急驟上升趨勢[3]。HPS可單獨感染豬群，也可與E.coli、APP、SS、Bb等細菌病和PCV2、CSFV、PRRSV等病毒形成單一或多重混合感染，是導致我國保育階段豬群死亡率持續(xù)性上升的主要原因，對養(yǎng)豬業(yè)危害日漸嚴重，阻礙了我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。

3 臨床癥狀及病理變化

HPS定殖豬群體內早期，一般不表現(xiàn)致病性，當斷奶、飼養(yǎng)環(huán)境改變等應激反應發(fā)生時，給HPS致病性了提供可乘之機，導致副豬嗜血桿菌病發(fā)生。HPS感染病豬后表現(xiàn)精神沉郁、體溫達41℃以上，喘氣、打噴嚏、呼吸困難、跛行、便秘、眼臉膜潮紅、臥地不起等癥狀[4]。病死豬解剖可常見胸腔積液，肺臟水腫、出血，肝臟腫大、黃染、表面有白色病灶；脾臟質地柔軟、腫大、邊緣增厚等病理變化。

4 診斷

目前，HPS呈全球性分布，全球養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟損失嚴重[5]。方法HPS體外培養(yǎng)條件嚴苛，且分離鑒定成功幾率低，HPS病急性發(fā)病期病豬病料中容易分離獲得HPS菌株。免疫組化(IHC)技術和寡核昔酸特異性捕獲圓盤雜交(OSCPH)實驗等均為當前診斷HPS的方法。Oliveira等通過16 S rRNA序列設計引物建立HPS PCR診斷方法，該方法靈敏性和特異性都很高[6]，但無法區(qū)分HPS菌株是否致病菌。迄今為止，已經(jīng)報道了HPS血清學檢測方法主要有補體結合試驗法（CF），間接血凝試驗（IHA）和酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）等。

5 耐藥性

近年來，抗菌藥物的長期不合理使用導致HPS耐藥性不斷增強，耐藥譜逐步擴大，HPS對抗菌藥物的耐藥性問題的顯著突出，HPS的耐藥性機理成為研究HPS的熱點。目前，已有多個國家（丹麥，西班牙，中國，澳大利亞等）對HPS的耐藥性進行了研究，HPS的地方差異性是導致不同地區(qū)同一血清型HPS對同一抗菌藥物的耐藥性不同的主要原因[7]。在我國，由于臨床上常濫用抗生素預防和治療HPS病，導致我國大部分省市HPS分離株對四環(huán)素、頭孢噻肟、氯霉素、慶大霉素、阿莫西林、青霉素、卡那霉素、恩諾沙星、氨芐青霉素、林可霉素等常用抗生素產(chǎn)生耐藥性[8]。HPS抗生素耐藥性在貴州報道極少。

6 防治

HPS是一種豬群體內是條件性致病常在菌，常定殖健康豬群上呼吸道黏膜上。一旦豬群抵抗力低或受到應急，HPS會大量繁殖，導致豬群發(fā)病，因此養(yǎng)豬場應對豬群加強飼養(yǎng)管理和減少各種應激。目前，疫苗接種和血清抗體（IgG或IgA）反應通常被認為是控制HPS病的有效手段。迄今為止，已經(jīng)報道了的HPS疫苗有HPS滅活疫苗，亞單位疫苗、DNA疫苗和減毒H等[9]。由于HPS具有地方特異性，導致HPS的血清型有差異，且不同血清型之間缺乏交叉免疫保護，因此在接種疫苗要對養(yǎng)殖場發(fā)病豬群血清型進行檢查，確保疫苗高效性。對養(yǎng)豬場嚴格執(zhí)行消毒制度，定期消毒，保持養(yǎng)豬場良好的衛(wèi)生環(huán)境。加強防控病毒性疫病。HPS臨床上除了與CSFV、PRRSV、PCV2、PRV等混合感染外，還常與E.coli、APP、SS、Bb等病原菌混合感染，因此合理制定CSFV、PRRSV、PCV2、PRV等病免疫程并做好免疫接種工作，也減少HPS發(fā)病的重要途經(jīng)之一。