HMGB1、EOS、IL?23與慢性鼻竇炎病變范圍關(guān)系及診斷價(jià)值

魏鑫鑫 許歡 閆一敏 尹中普

慢性鼻竇炎（Chronic rhinosinusitis，CRS）是以鼻塞、嗅覺(jué)減退、頭面部脹痛等為主要表現(xiàn)的鼻竇黏膜慢性炎癥類疾病，并能引起睡眠障礙、精神方面等鼻部癥狀外的不適，與哮喘、變應(yīng)性鼻炎等關(guān)系密切，嚴(yán)重降低患者生活質(zhì)量，因此早期診斷意義重大［1］。目前臨床診斷CRS 主要依據(jù)癥狀表現(xiàn)、CT 檢查、MRI 檢查等，并需排除后鼻孔息肉、鼻咽纖維血管瘤等，檢查項(xiàng)目繁瑣，不適宜于有相關(guān)癥狀人群的初步篩查，故有必要研究新的診斷方法。高遷移率族蛋白B1（High mobil ity group protein B1，HMGB1）是一種致炎介質(zhì)，在過(guò)敏性鼻炎中呈高表達(dá)，降低HMGB1 水平，則鼻部炎癥反應(yīng)被改善［2］。嗜酸性粒細(xì)胞（Eosinophils，EOS）在CRS 患者中升高，與鼻塞、流涕、頭面部脹痛及嗅覺(jué)障礙評(píng)分有關(guān)［3］。白介素?23（Inter?leukin23，IL?23）在變應(yīng)性鼻炎患者中水平升高，經(jīng)有效治療后降低，并伴有臨床癥狀和生活質(zhì)量顯著改善［4］。但現(xiàn)階段關(guān)于HMGB1、EOS、IL?23 與CRS 病變范圍關(guān)系及診斷價(jià)值的報(bào)道較少，本研究對(duì)此進(jìn)行探討，旨在為臨床診斷CRS、評(píng)估病變范圍提供參考，報(bào)告如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2019年1月至2020年12月南陽(yáng)市中心醫(yī)院收治的98 例CRS 患者（CRS 組）及體檢中心45 例健康人群作為對(duì)照組。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)，入組者充分知曉本研究，自愿簽署知情同意書(shū)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①CRS 組符合CRS 診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］；②入組前無(wú)相關(guān)治療史；③均能順利獲取鼻腔分泌物；④自愿加入本研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有鼻竇等系統(tǒng)原發(fā)性惡性腫瘤者；②）急性鼻竇炎者；③合并急性感染類疾病者。

1.2 方法

1.2.1 資料收集

收集患者年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、飲酒史、吸煙史、CRS 家族史資料，采用雙人雙錄法，并進(jìn)行數(shù)據(jù)的一致性檢驗(yàn)。

1.2.2 各指標(biāo)檢測(cè)

CRS 組于治療前，對(duì)照組于入院后清晨，在鼻道中放置無(wú)菌脫脂棉片10 min，取出后置入凍存管，壓住棉片一角后旋緊，以13.5 cm 半徑、2 000 r/min進(jìn)行10 min 離心，棄去棉片即得鼻腔分泌物，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)HMGB1、EOS、IL?23 水平，試劑盒購(gòu)于上海酶鏈生物科技有限公司，均按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行操作。

1.2.3 主觀病情與病變范圍評(píng)估［5］

采用視覺(jué)模擬評(píng)分法（Visual analogue scale，VAS）［5］評(píng)估患者主觀病情，評(píng)分范圍0～10 分，分值越高，主觀病情越嚴(yán)重；采用Lund?Mackay 評(píng)分［6］評(píng)估病變范圍，總分0～24 分，分值與病變范圍成正比。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 處理，計(jì)量資料以（±s）表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，應(yīng)用Pearson 分析各指標(biāo)與主觀病情、病變范圍關(guān)系，應(yīng)用多因素Logistic 回歸方程分析CRS 的相關(guān)影響因素，應(yīng)用受試者工作特征曲線（ROC）及ROC 下面積（AUC）分析各指標(biāo)診斷CRS 價(jià)值。P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組基線資料、各指標(biāo)比較

兩組年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、飲酒史、吸煙史比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；CRS 組CRS 家族史、HMGB1、EOS、IL?23 與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 兩組基線資料、各指標(biāo)比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of baseline data and indicators between 2 groups［（±s），n（%）］

表1 兩組基線資料、各指標(biāo)比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of baseline data and indicators between 2 groups［（±s），n（%）］

資料年齡（歲）性別CRS 組（n=98）40.25±12.05對(duì)照組（n=45）38.79±10.86 t/χ2值0.694 P 值0.489男女42（42.86）56（57.14）25（55.56）20（44.44）1.520 0.218體質(zhì)量指數(shù)（kg/m2）偏瘦正常超重肥胖飲酒史吸煙史CRS 家族史HMGB1（ng/mL）EOS（%）IL?23（pg/mL）6（6.12）65（66.33）18（18.37）9（9.18）64（65.31）37（37.76）27（27.55）150.68±49.19 4.64±1.49 340.68±83.57 3（6.67）26（57.78）11（24.44）5（11.11）32（71.11）13（28.89）4（8.89）95.87±30.02 2.03±0.66 254.48±71.49 1.047 0.790 0.471 1.066 6.326 6.900 11.239 5.984 0.493 0.302 0.012<0.001<0.001<0.001

2.2 各指標(biāo)不同表達(dá)水平者主觀病情、病變范圍比較

以CRS 組各指標(biāo)均值為分界，將CRS 組分為HMGB1、EOS、IL?23 高水平與低水平者，結(jié)果顯 示，HMGB1、EOS、IL?23 高水平者VAS 評(píng)分、Lund?Mackay 評(píng)分高于低水平者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 各指標(biāo)不同表達(dá)水平者主觀病情、病變范圍比較（±s）Table 2 Comparison of the subjective condition and range of lesions in patients with different expression levels of various indicators（±s）

表2 各指標(biāo)不同表達(dá)水平者主觀病情、病變范圍比較（±s）Table 2 Comparison of the subjective condition and range of lesions in patients with different expression levels of various indicators（±s）

指標(biāo)HMGB1 n t 值8.646 P 值<0.001 t 值9.249 P 值<0.001 EOS 5.611<0.001 13.156<0.001 IL?23組別高水平低水平高水平低水平高水平低水平39 59 32 66 44 54 VAS 評(píng)分（分）5.26±1.35 3.07±1.14 5.11±1.97 3.37±1.10 4.97±1.22 3.10±1.08 8.043<0.001 Lund?Mackay 評(píng)分（分）11.54±3.09 6.22±2.57 11.83±3.35 5.50±1.42 10.61±3.14 6.49±2.25 7.555<0.001

2.3 各指標(biāo)與主觀病情、病變范圍關(guān)系

以CRS 組各指標(biāo)為源數(shù)據(jù)，應(yīng)用Pearson 進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，HMGB1（r=0.705）、EOS（r=0.768）、IL?23（r=0.679）與VAS 評(píng)分呈正相關(guān)，HMGB1（r=0.711）、EOS（r=0.804）、IL?23（r=0.662）與Lund?Mackay 評(píng)分呈正相關(guān)（P<0.05）。

2.4 多因素Logistic 回歸方程分析

以是否有CRS 為因變量（無(wú)賦值0，有賦值1），納入兩組比較P<0.05 的因素作為自變量（無(wú)CRS 家族史賦值0，有CRS 家族史賦值1；HMGB1、EOS、IL?23 低水平賦值1，高水平賦值1），應(yīng)用多因素Logistic 回歸方程分析，結(jié)果顯示，將CRS 家族史控制后，HMGB1、EOS、IL?23 仍是CRS 的相關(guān)危險(xiǎn)因素（P<0.05）。見(jiàn)表3。

表3 多因素Logistic 回歸方程分析Table 3 Multivariate logistic regression equation analysis

2.5 各指標(biāo)對(duì)CRS 診斷價(jià)值

以CRS 組為陽(yáng)性樣本，以對(duì)照組為陰性樣本，繪制ROC 曲線結(jié)果顯示，HMGB1、EOS 聯(lián)合IL?23的AUC 為0.951，高于HMGB1 的0.818、EOS 的0.856、IL?23 的0.803。見(jiàn)表4、圖1。

表4 ROC 分析結(jié)果Table 4 ROC analysis results

圖1 各指標(biāo)對(duì)CRS 診斷價(jià)值Figure 1 The diagnostic value of various indicators for CRS

3 討論

HMGB1 系高度保守核蛋白之一，是一種致炎因子，可在白介素?1、腫瘤壞死因子?α 等刺激下合成分泌。本研究顯示，CRS 患者HMGB1 高于健康對(duì)照者，且HMGB1 水平越高，患者主觀病情越嚴(yán)重，病變范圍越廣，是CRS 的相關(guān)危險(xiǎn)因素，提示檢測(cè)HMGB1 水平可用于CRS 診斷、主觀病情、病變范圍評(píng)估。Taziki MH 等［7］報(bào)道，CRS 患者鼻腔粘膜HMGB1 水平升高，與CRS 發(fā)病有關(guān)，本研究觀點(diǎn)與之相似。HMGB1 一方面能直接對(duì)鼻黏膜、鼻腔組織造成炎性損傷，另一方面能通過(guò)與核因子?kB、TOLL 樣受體等轉(zhuǎn)錄因子相互作用，調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄、炎癥細(xì)胞因子合成分泌和增殖、活化，在啟動(dòng)炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)中具有重要作用，從而引起鼻腔炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、黏液腺體增生、膠原沉積、鱗狀上皮化生等，參與CRS發(fā)病與進(jìn)展［8］。

EOS 來(lái)源于骨髓的造血干細(xì)胞，可殺傷細(xì)菌、寄生蟲(chóng)，是過(guò)敏反應(yīng)、免疫反應(yīng)過(guò)程中一種重要細(xì)胞［9］。王佳慧等［10］報(bào)道，CRS 患者EOS 水平較高，在CRS 發(fā)病中扮演重要角色，本研究觀點(diǎn)與之一致。同時(shí)本研究還發(fā)現(xiàn)，EOS 與VAS 評(píng)分、Lund?Mackay 評(píng)分呈正相關(guān)，將CRS 家族史控制后，EOS 仍是CRS 的相關(guān)危險(xiǎn)因素。EOS 在鼻腔鼻竇黏膜內(nèi)募集和激活主要依賴于：①上皮細(xì)胞、其他細(xì)胞表達(dá)吸引EOS 的趨化因子；②鼻腔鼻竇黏膜內(nèi)粒細(xì)胞?巨噬細(xì)胞集落刺激因子；③內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子促進(jìn)EOS 進(jìn)入黏膜固有層［11］。EOS 在鼻腔鼻竇黏膜出現(xiàn)并激活后，通過(guò)釋放顆粒中的內(nèi)容物，引起上皮細(xì)胞脫落和組織水腫，減少纖毛數(shù)量，促進(jìn)炎癥進(jìn)展，直接或間接影響CRS 的發(fā)生發(fā)展。近年來(lái)有研究［12］提出，以EOS 對(duì)ERS 進(jìn)行分型，分為嗜EOS 和非嗜EOS，與非嗜EOS 患者相比，嗜EOS 患者主觀病情、病變范圍通常較嚴(yán)重，哮喘、鼻息肉等發(fā)生率較高，因此臨床應(yīng)加強(qiáng)對(duì)EOS 水平較高患者管理和干預(yù)，以改善患者預(yù)后。

IL?23 屬于白介素?12 家族成員，包括IL?23 特異性p19 亞單位和IL?12 共享的p40 亞單位，主要表達(dá)在自然殺傷T 細(xì)胞、樹(shù)突細(xì)胞、單核細(xì)胞等［13］。本研究顯示，CRS 患者IL?23 高于健康人群，與主觀病情、病變范圍有關(guān)，并是CRS 發(fā)病相關(guān)獨(dú)立影響因素，可作為診斷CRS 的生物標(biāo)志物。王敏等［14］研究顯示，IL?23 在CRS 鼻黏膜中水平高于正常鼻黏膜，佐證了IL?23 與CRS 有關(guān)。IL?23可促進(jìn)白介素?17、白介素?1 合成和分泌，并能獨(dú)立于白介素?17 募集中性粒細(xì)胞至炎性損傷部位，推進(jìn)鼻腔鼻竇炎癥反應(yīng)，從而參與CRS 發(fā)?。?5］。同時(shí)本研究結(jié)果顯示，HMGB1、EOS 聯(lián)合IL?23 診斷CRS 的AUC 大于任一單一指標(biāo)，故建議聯(lián)合檢測(cè)三者對(duì)受檢者CRS 風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行初步評(píng)估，為臨床診斷CRS 提供更可靠參考。

綜上，CRS 患者HMGB1、EOS、IL?23 較正常人群升高，與主觀病情、病變范圍有關(guān)，可作為診斷CRS 生物標(biāo)志物，從而為臨床診治提供參考信息。