微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室菌種使用保存與管理方法研究

李卓

摘要：做好對(duì)菌種的保護(hù)與管理工作，主要目的在于保護(hù)菌株，并保留其自身具備的遺傳性特點(diǎn)。本文以微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室菌種使用保存與管理為探討主題，從建立菌種登記和管理程度、嚴(yán)格管控菌種傳代、運(yùn)用科學(xué)方法保存常用菌種等方面分析實(shí)施使用管理與保護(hù)工作的具體方法，總結(jié)菌種管理工作的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，為微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室菌種保管工作的優(yōu)化發(fā)展提供有效參考。

關(guān)鍵詞：微生物學(xué);菌種;使用

1建立菌種登記和管理程序

在保存與應(yīng)用菌種時(shí)，工作人員應(yīng)全面了解并掌握材料的來(lái)源情況，明確其適應(yīng)的存儲(chǔ)方法，按照微生物實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范要求做好菌種的管理工作，確保提升其在整個(gè)保存過(guò)程中的穩(wěn)定性。首先，管理人員應(yīng)準(zhǔn)確詳細(xì)地登記菌種的具體來(lái)源，著重研究材料的溯源問(wèn)題，規(guī)范整個(gè)管理程序，對(duì)于每個(gè)菌種，為其設(shè)定獨(dú)有的編號(hào)，在將其正式納入到保存系統(tǒng)前，需初步記載菌種的各項(xiàng)基本信息。其次，加強(qiáng)管理菌種的接收工作，選用科學(xué)合理的方式保存菌種。對(duì)于普通的原始菌種，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室使用的是玻璃瓶裝的凍干粉，且附帶有相應(yīng)的資料信息。在購(gòu)買完所需的菌種后，工作人員應(yīng)嚴(yán)格記錄瓶的數(shù)量，以及上方標(biāo)識(shí)的名稱等關(guān)鍵信息，在適宜的位置上粘貼標(biāo)簽，然后將其直接放置于溫度適宜的容器內(nèi)，進(jìn)行保存處理。在需要使用時(shí)，再將其及時(shí)取出即可。通常情況下，普通瓶裝凍干粉的使用期限在五年左右。最后，是復(fù)活菌種環(huán)節(jié)，在應(yīng)用原始菌種材料時(shí)，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)該預(yù)先復(fù)活處理凍干的菌種，其涉及到的作業(yè)流程主要包括以下幾部分：在初始階段需要做好復(fù)活的準(zhǔn)備工作，采用無(wú)菌習(xí)慣，吸取適量的也，然后將其置于安瓶環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)，通過(guò)輕輕旋轉(zhuǎn)，有效地融入液體與凍干粉，確保完全溶解菌種，接下來(lái)，將其向試管中進(jìn)行轉(zhuǎn)移，參照菌種所屬的類型，以及所需的生存條件，針對(duì)性的調(diào)整其所處環(huán)境，確保菌種復(fù)活后，得到良好的培養(yǎng)條件。在菌種復(fù)活的實(shí)際生長(zhǎng)過(guò)程中，很可能會(huì)發(fā)生液體渾濁等現(xiàn)象，因而在實(shí)際培養(yǎng)的階段內(nèi)，若出現(xiàn)嚴(yán)重的感染問(wèn)題，則應(yīng)采用有效的滅菌技術(shù)處理被污染的培養(yǎng)物，明確導(dǎo)致出現(xiàn)污染現(xiàn)象的具體原因，分離菌類，重新篩選菌落[1]。

2嚴(yán)格管控菌種傳代工作

在我國(guó)有關(guān)的管理制度中，對(duì)微生物菌種傳代與保存的全流程作業(yè)規(guī)范提出了明確要求，要切實(shí)保障菌種傳代工作的順利完成，需重點(diǎn)把握以下操作要點(diǎn)：首先，是復(fù)溶與接種處理菌種，工作人員在對(duì)其進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格參照說(shuō)明書上標(biāo)明的具體要求，完成對(duì)菌種的復(fù)壯處理后，向平板上予以直接轉(zhuǎn)移，營(yíng)造適宜的室溫環(huán)境，培養(yǎng)菌種。然后，是轉(zhuǎn)移和分離單個(gè)菌落，以此形成第二代菌落。在鑒定菌種的過(guò)程中，工作人員還需運(yùn)用適宜的技術(shù)方法，在第一時(shí)間內(nèi)對(duì)菌種進(jìn)行特性鑒定，然后從中選擇出適宜的菌落，妥善轉(zhuǎn)移并放置到甘油冷凍管內(nèi)，作為工作菌種。在傳代操作的整個(gè)過(guò)程中，第二代菌種是被從正常保存的菌種，第三代菌種則為工作菌種。一般情況下，工作人員需要冷凍保存處理二代菌種，選擇并應(yīng)在適宜溫度的環(huán)境下培養(yǎng)三代菌種，并將其直接應(yīng)用到一系列的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。若是需要在低溫、冷凍等環(huán)境條件下保存第三代菌種，則應(yīng)及時(shí)滅菌處理二代菌種，并將其及時(shí)丟棄，在完成以上處理流程后，接下來(lái)培養(yǎng)第四代、第五代菌種時(shí)，均需重新開啟安瓶。對(duì)于微生物實(shí)驗(yàn)工作來(lái)說(shuō)，只有嚴(yán)格參照規(guī)范化系統(tǒng)化的菌種傳代作業(yè)流程，才能提高菌種的使用效率，確保其得到妥善科學(xué)的保存管理[2]。

3運(yùn)用科學(xué)方法保存常用菌種

保存處理微生物菌種，營(yíng)造適宜的存儲(chǔ)環(huán)境，需要把握以下基本準(zhǔn)則：（1）保持環(huán)境不變的情況下，科學(xué)有效地保護(hù)菌種，避免其形態(tài)發(fā)生改變。（2）當(dāng)菌種處于不死狀態(tài)下時(shí)，應(yīng)確保其仍然可以保持自身的生存活力，避免其出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。（3）為菌種的純潔性提供可靠保障，避免外部環(huán)境、人為操作等因素污染菌種，亦或是使其活性受到不利影響。（3）菌種所屬的類型不同，其對(duì)環(huán)境提出的條件與要求也會(huì)存在較大差異，通常情況下，工作人員需結(jié)合實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的實(shí)際環(huán)境條件，了解并把握不同類型菌種的生長(zhǎng)特點(diǎn)，以及對(duì)應(yīng)的適宜有效的保存方式，做好對(duì)常用菌種的保存與管理工作，提高各項(xiàng)保管與存放方法的實(shí)效性[3]。

測(cè)定并識(shí)別菌落，根據(jù)所檢測(cè)菌種的技術(shù)資料，每個(gè)稀釋度取不同類型的代表菌落，通過(guò)涂片、染色、鏡檢等技術(shù)手段，確認(rèn)有效菌。計(jì)算菌落，以出現(xiàn)20-300個(gè)菌落數(shù)的稀釋度的平板為計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，分別統(tǒng)計(jì)有效活菌數(shù)目和雜菌數(shù)目。

4總結(jié)菌種管理工作經(jīng)驗(yàn)

無(wú)論是在實(shí)驗(yàn)活動(dòng)過(guò)程中使用菌種，還是對(duì)其實(shí)施系統(tǒng)化的管理與保護(hù)，均需要對(duì)質(zhì)量檢驗(yàn)工作的貫徹落實(shí)提高重視，對(duì)于管理人員而言，不僅需要明確具體的項(xiàng)目目標(biāo)與實(shí)踐方案，還需深入掌握完善化的作業(yè)規(guī)程，在完成一系列的使用、保存與管理工作后，及時(shí)地總結(jié)在自身實(shí)踐操作過(guò)程中的經(jīng)驗(yàn)，以及存在的不足，這是全面提升微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室管理工作水平的有效措施，也是切實(shí)推動(dòng)菌種使用保存與管理工作高效發(fā)展的必要路徑。在正式實(shí)施各環(huán)節(jié)的管理工作時(shí)，工作人員應(yīng)著重加強(qiáng)對(duì)有效期的把握，針對(duì)性地提高各環(huán)節(jié)的作業(yè)效率。通過(guò)實(shí)踐調(diào)研以及研究各項(xiàng)數(shù)據(jù)資料可以分析，甘油冷凍管的最佳冷凍時(shí)間在兩年左右，因此需結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況，以每?jī)赡隇榛鶞?zhǔn)，對(duì)其進(jìn)行一次轉(zhuǎn)接計(jì)算。要完成第四代的轉(zhuǎn)接工作，工作人員需要采用正確的方法長(zhǎng)期保存一支凍干管。當(dāng)前，此種方法被廣泛應(yīng)用于酵母菌、細(xì)菌等菌種的傳代處理中，要實(shí)現(xiàn)對(duì)真菌等其他類型細(xì)菌的科學(xué)傳代管理，還需積極引入并應(yīng)用其他有效方法。

與其他微生物相比，菌種是一種特殊標(biāo)準(zhǔn)品，且在大部分標(biāo)準(zhǔn)說(shuō)明下，許多品種的菌種被歸納為病原菌，因此，在實(shí)驗(yàn)室處理此類特殊菌種時(shí)，需注重區(qū)分這些菌種和其他品種。例如，根據(jù)菌株對(duì)其他動(dòng)物的傳染力度、致病力等為參照點(diǎn)，劃分并分類處理菌種，然后依托于專業(yè)的機(jī)構(gòu)給予的技術(shù)幫助，提高對(duì)菌種的保存與管理成效。在正常環(huán)境下，實(shí)驗(yàn)人員需在生物安全柜中運(yùn)用專業(yè)的技術(shù)手段操作處理裸露在外的菌種，并做好有關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的記錄工作。

結(jié)束語(yǔ)：深入研究菌種的使用保存與管理方法，是全面提高微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)管理工作水平的必要路徑。在現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)創(chuàng)新發(fā)展的時(shí)代背景下，微生物處理技術(shù)獲得有利的發(fā)展契機(jī)，推動(dòng)菌種保管工作的規(guī)范化、流程化發(fā)展，意在貼合當(dāng)前技術(shù)進(jìn)步的發(fā)展趨勢(shì)，穩(wěn)定優(yōu)化微生物研究工作質(zhì)量，助力我國(guó)科學(xué)研究工作的現(xiàn)代化發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]呂曉寧，段夢(mèng)媛.淺析城市級(jí)公共空間設(shè)計(jì)對(duì)提升城市品質(zhì)的重要作用——以大校場(chǎng)機(jī)場(chǎng)跑道公園方案征集活動(dòng)為例[J].城市環(huán)境設(shè)計(jì)，2020（06）：224-227.

[2]王瑤.人工智能背景下交互設(shè)計(jì)在城市公共空間中的應(yīng)用研究[J].居舍，2020（36）：69-72.