CD64、P2X7和cMPO檢測(cè)在小兒細(xì)菌性肺炎診斷及預(yù)后中的研究

徐超 李超 蔣勇

細(xì)菌性肺炎是由肺炎球菌引起的急性肺泡炎，以起病急驟、寒戰(zhàn)、高熱、咳嗽、胸痛等臨床表現(xiàn)為主，是兒童時(shí)期好發(fā)的呼吸系統(tǒng)疾?。?］。研究表示，細(xì)菌性肺炎對(duì)兒童健康威脅性極大，不及時(shí)治療，可進(jìn)展至重癥肺炎，威脅患兒生命安危［2］。因此，如何早期及時(shí)確診細(xì)菌性肺炎，明確疾病現(xiàn)狀，是治療小兒細(xì)菌性肺炎，改善預(yù)后的關(guān)鍵［3］。多形核細(xì)胞胞漿髓過氧化物酶（Cytoplasmic myeloperoxydase，cMPO）是粒細(xì)胞內(nèi)合成中的一種血紅色蛋白酶，可靈敏反映中性粒細(xì)胞活化狀態(tài)，可較早反映機(jī)體炎癥損傷［4］。研究發(fā)現(xiàn)，P2X7 受體可通過介導(dǎo)相應(yīng)的細(xì)胞毒性及活化誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)宿主細(xì)胞凋亡與機(jī)體炎癥狀態(tài)緊密聯(lián)系［5］。CD64 是免疫球蛋白成員之一，是臨床上評(píng)價(jià)早期感染疾病的重要指標(biāo)，當(dāng)細(xì)菌感染時(shí)，其表達(dá)水平顯著升高［6］。本研究分析CD64、P2X7 受體聯(lián)合cMPO 檢測(cè)在小兒細(xì)菌性肺炎診斷、病情評(píng)估及預(yù)后指導(dǎo)中的應(yīng)用價(jià)值，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 一般資料

選取2018年11月至2019年11月本科室收治的92 例細(xì)菌性肺炎患兒作為研究組，其中男57例，女35 例，平均年齡（5.79±2.93）歲。根據(jù)小兒危重癥病例評(píng)分法［7］（pediatric critical illness score，PCIS）分為兩個(gè)亞組：將重癥肺炎患兒（PCIS 評(píng)分＜80 分）設(shè)為A 組（n=40），其中男27 例，女13 例，平均年齡（5.71±2.12）歲；將輕癥肺炎患兒（PCIS 評(píng)分≥80 分）設(shè)為B 組（n=52），其中男30 例，女22例，平均年齡（5.95±2.06）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患兒臨床癥狀及實(shí)驗(yàn)室檢查確診，符合《中華兒科雜志》診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］；②臨床資料完整；③研究均經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試者監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并先天性腎臟、心臟等疾病者；②合并全身其他組織臟器感染性疾病者；③臨床及隨訪資料不完整或缺乏準(zhǔn)確性者。

同時(shí)納入98 例同期本院接受健康體檢結(jié)果正常者作為對(duì)照組，其中男52 例，女46 例，平均年齡（5.13±2.06）歲。各組間一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 檢測(cè)方法

所有研究對(duì)象均在清晨抽取空腹靜脈血5 mL，使用乙二胺四乙酸抗凝處理后，使用3 000 r/min 離心機(jī)離心10 min，取上清液備用。使用流式細(xì)胞儀檢查cMPO，試劑盒由美國(guó)Coulter 公司提供；使用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)CD64、P2X7 受體，試劑盒由美國(guó)Beckman Coulter 公司提供。所有操作均按試劑或儀器所配套說(shuō)明書進(jìn)行，由專業(yè)人員操作。根據(jù)患兒納入研究時(shí)間起，對(duì)患者通過電話、微信等方式進(jìn)行為期1 個(gè)月隨訪，記錄患兒生存時(shí)間，截止于2020年1月。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用多元Logistic 回歸分析影響細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后的危險(xiǎn)因素；采用ROC 曲線分析CD64、P2X7、cMPO 水平對(duì)細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后生存的預(yù)測(cè)價(jià)值；計(jì)量資料以（）表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組CD64、P2X7、cMPO 水平比較

研究組患兒CD64、P2X7、cMPO 水平顯著高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 研究組與對(duì)照組CD64、P2X7、cMPO水平比較（±s）Table 1 Comparison of CD64，P2X7 and CMPO levels between study group and control group（±s）

表1 研究組與對(duì)照組CD64、P2X7、cMPO水平比較（±s）Table 1 Comparison of CD64，P2X7 and CMPO levels between study group and control group（±s）

組別研究組對(duì)照組t 值P 值n 92 98 CD64 42.83±4.53 19.62±3.09 41.476＜0.001 P2X7 受體66.82±7.03 42.16±5.27 27.466＜0.001 cMPO（%）18.65±2.85 1.76±0.71 56.828＜0.001

2.2 A、B 組CD64、P2X7、cMPO 水平比較

A 組患兒CD64、P2X7、cMPO 水平顯著高于B 組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 研究組與對(duì)照組CD64、P2X7、cMPO 水平比較（±s）Table 2 Comparison of CD64，P2X7 and CMPO levels between study group and control group（±s）

表2 研究組與對(duì)照組CD64、P2X7、cMPO 水平比較（±s）Table 2 Comparison of CD64，P2X7 and CMPO levels between study group and control group（±s）

組別A 組B 組t 值P 值n 40 52 CD64 44.12±3.24 35.11±3.19 13.338＜0.001 P2X7 受體68.57±5.28 52.13±7.66 11.610＜0.001 cMPO（%）15.95±5.55 13.14±2.66 3.207 0.001

2.3 92 例細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后情況

本研究對(duì)92 例細(xì)菌性肺炎患兒進(jìn)行預(yù)后隨訪顯示，8 例患兒死亡，死亡率為8.69%。

2.4 影響細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后生存的單因素和多因素分析

CRP≥100 mg/L、WBC≥12×109/L、PCT≥0.5 μg/mL、CD64、P2X7、cMPO 異常升高與細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后生存呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表3。

表3 影響細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后生存的單因素和多因素分析Table 3 univariate and multivariate analysis of prognosis and survival in children with bacterial pneumonia

2.5 CD64、P2X7、cMPO 水平對(duì)細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后生存的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC 曲線分析顯示：CD64、P2X7、cMPO 及三者聯(lián)合下面積為0.806、0.781、0.800、0.969，以聯(lián)合檢測(cè)下面積值最大。見表4、圖1。

圖1 ROC 曲線Figure 1 ROC curve

表4 CD64、P2X7、cMPO 水平對(duì)細(xì)菌性肺炎患兒預(yù)后生存的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 4 predictive value of CD64，P2X7 and CMPO levels on prognosis and survival of children with bacterial pneumonia

3 討論

細(xì)菌性肺炎是兒童常見的感染性疾病，也是導(dǎo)致兒童死亡的重要原因之一［8］。細(xì)菌性肺炎早期臨床癥狀隱匿，易貽誤病情并影響患兒最終的治療結(jié)局。尋找早期診斷細(xì)菌性肺炎的敏感指標(biāo)是疾病治療的關(guān)鍵［9］。

P2X7 受體位于染色體12q24，由595 個(gè)氨基酸組成，臨床認(rèn)為是ATP 的結(jié)合位點(diǎn)。P2X7 受體可誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生炎癥因子，激活T 細(xì)胞，誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞形成膜泡等多種生物功能［10］。P2X7 受體通過促使單核細(xì)胞使血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子釋放，并依賴Ca2+內(nèi)流及活性氧參與機(jī)體炎癥反應(yīng)［11］。目前已有研究證實(shí)P2X7 受體在多種真菌感染、慢性阻塞性肺病、炎癥性神經(jīng)痛、高血壓中扮演重要角色［12］。CD64 是臨床新發(fā)現(xiàn)的炎癥指標(biāo)，系免疫球蛋白超家族的成員，主要分布在巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞及樹突狀細(xì)胞表面，與體液免疫和細(xì)胞免疫密切相關(guān)［13］。CD64 在正常狀態(tài)下呈低表達(dá)狀態(tài)，但當(dāng)細(xì)菌感染后，其水平濃度顯著上升，且隨著感染嚴(yán)重程度增加而升高［14］。相關(guān)新生兒敗血癥患兒研究發(fā)現(xiàn)，24 h 后CD64 指數(shù)的敏感性及特異性明顯高于敗血癥初期，且當(dāng)患兒治療好轉(zhuǎn)后，CD64 指數(shù)可明顯下降，考慮CD64 指數(shù)對(duì)病情判斷、評(píng)估預(yù)后價(jià)值高［15］。此外，研究發(fā)現(xiàn)cMPO是過氧化物酶家族中的重要成員，其水平及活性變化代表著嗜中性多形核白細(xì)胞功能及活性狀態(tài)，已被臨床公認(rèn)為評(píng)價(jià)炎癥嚴(yán)重程度的一個(gè)指標(biāo)［16］。本研究結(jié)果說(shuō)明CD64、P2X7 受體及cMPO 水平參與細(xì)菌性肺炎疾病進(jìn)展。這與Brooks 等學(xué)者［17］對(duì)細(xì)菌性肺炎患者CD64、P2X7 受體研究一致。提示臨床需加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌性肺炎患兒CD64、P2X7 受體、cMPO 的監(jiān)測(cè)，以提高臨床生存率。

此外采用ROC 曲線研究發(fā)現(xiàn)，CD64、P2X7 受體、cMPO 聯(lián)合檢測(cè)下面積最大，特異、敏感度高。進(jìn)一步提示聯(lián)合檢測(cè)對(duì)細(xì)菌性肺炎具有重要意義，臨床可通過聯(lián)合檢測(cè)多項(xiàng)指標(biāo)提高對(duì)細(xì)菌性肺炎患兒的評(píng)估價(jià)值。

綜上所述，CD64、P2X7 聯(lián)合cMPO 檢測(cè)細(xì)菌性肺炎患兒診斷價(jià)值高，其水平變化與患兒預(yù)后密切相關(guān)，臨床工作者應(yīng)加強(qiáng)對(duì)其指標(biāo)檢測(cè)具有重要意義。