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    生物農(nóng)藥辣椒素在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的研究進(jìn)展

    2021-11-02 12:02:30王寅敏張泗達(dá)李海蕓段???/span>吳學(xué)民徐建富
    現(xiàn)代農(nóng)藥 2021年5期
    關(guān)鍵詞:辣椒素生物農(nóng)藥乳油

    王寅敏,徐 勇,張泗達(dá),李海蕓,段福俊,吳學(xué)民*,徐建富*

    (1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院,北京100193;2.國(guó)民核生化災(zāi)害防護(hù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京102205)

    農(nóng)藥作為重要的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料,在農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)以及林業(yè)、草原和衛(wèi)生害蟲防控等方面發(fā)揮著重大作用,尤其是化學(xué)農(nóng)藥,其具有見(jiàn)效快,防效高等特點(diǎn),在防治病蟲草鼠害中被廣泛使用,但由于其過(guò)量使用所導(dǎo)致的問(wèn)題越來(lái)越突出,如農(nóng)藥殘留超標(biāo)、產(chǎn)生抗藥性、殺傷有益生物等。二十一世紀(jì)以來(lái),隨著全球?qū)Νh(huán)境保護(hù)和農(nóng)產(chǎn)品安全的日益關(guān)注以及可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略的興起,利用對(duì)環(huán)境友好、生態(tài)和諧和有利食品安全等措施來(lái)防控農(nóng)作物病蟲害已經(jīng)成為了世界農(nóng)業(yè)發(fā)展的新趨勢(shì),這就要求農(nóng)藥必須向低毒、無(wú)公害方向發(fā)展。生物農(nóng)藥正是這樣一類既滿足上述要求又與環(huán)境相容的綠色農(nóng)藥。與化學(xué)農(nóng)藥相比,其具有選擇性強(qiáng)、無(wú)污染、不易產(chǎn)生抗藥性、不破壞生態(tài)環(huán)境且生產(chǎn)原料廣泛等特點(diǎn),應(yīng)用前景廣闊。

    1 生物農(nóng)藥及辣椒素簡(jiǎn)介

    1.1 生物農(nóng)藥簡(jiǎn)介

    1.1.1 生物農(nóng)藥定義

    目前,對(duì)于生物農(nóng)藥或者生物源農(nóng)藥沒(méi)有相對(duì)統(tǒng)一的定義。學(xué)術(shù)界普遍認(rèn)為廣義的生物農(nóng)藥是指直接利用生物活體或生物代謝過(guò)程產(chǎn)生的具有生物活性的物質(zhì),或從生物體提取的物質(zhì),以及人工合成的與天然化合物結(jié)構(gòu)相同的物質(zhì),作為防治農(nóng)林作物病、蟲、草、鼠害的農(nóng)藥[1]。我國(guó)并沒(méi)有明確生物源農(nóng)藥或生物農(nóng)藥的定義[2]。根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部種植業(yè)管理司對(duì)十三屆全國(guó)人大二次會(huì)議第6733號(hào)建議的答復(fù),我國(guó)將生物農(nóng)藥分為3類:生物化學(xué)農(nóng)藥、微生物農(nóng)藥和植物源農(nóng)藥,農(nóng)用抗生素不包括在內(nèi)[3]。對(duì)于這3類生物農(nóng)藥,我國(guó)在2017年實(shí)施的《農(nóng)藥登記資料要求》中分別進(jìn)行了定義。生物化學(xué)農(nóng)藥是指同時(shí)滿足下列2個(gè)條件的農(nóng)藥:一是對(duì)防治對(duì)象沒(méi)有直接毒性,而只有調(diào)節(jié)生長(zhǎng)、干擾交配或引誘等特殊作用;二是天然化合物,如果是人工合成的,其結(jié)構(gòu)應(yīng)與天然化合物相同(允許異構(gòu)體比例的差異)。微生物農(nóng)藥是指以細(xì)菌、真菌、病毒和原生動(dòng)物或基因修飾的微生物等活體為有效成分的農(nóng)藥。植物源農(nóng)藥是指有效成分直接來(lái)源于植物體的農(nóng)藥。

    1.1.2 生物農(nóng)藥的登記情況

    截至2020年12月,我國(guó)在登記有效期內(nèi)的生物農(nóng)藥有效成分有125個(gè),其中不包括農(nóng)用抗生素和天敵[4]。近5年來(lái),我國(guó)的生物農(nóng)藥有效成分逐漸增加(圖1),生物農(nóng)藥正在快速發(fā)展。

    圖1 2016—2020年我國(guó)生物農(nóng)藥有效成分登記數(shù)量

    作為最早使用的一類生物農(nóng)藥,植物源農(nóng)藥的有效成分多為植物在進(jìn)化中產(chǎn)生具有保護(hù)作用的次生代謝物質(zhì),這些物質(zhì)往往可以抵抗其他生物的侵害[5]。自然界中具有殺蟲或殺菌活性的植物次生代謝產(chǎn)物數(shù)量龐大、種類繁多,如萜烯類、生物堿、類黃酮、甾體、獨(dú)特的氨基酸和多糖等[6],而這些物質(zhì)對(duì)非靶標(biāo)生物毒性較低,并且易降解,不會(huì)對(duì)環(huán)境和生態(tài)系統(tǒng)造成持久性影響,安全性較高。

    截至2020年底,我國(guó)在登記有效期內(nèi)的植物源農(nóng)藥有28種,其中研究比較深入的主要有苦參堿、魚藤酮、印楝素、狼毒素、蛇床子素、除蟲菊素、煙堿等[7]。不過(guò)也有不少已成功進(jìn)入登記應(yīng)用階段的品種如羊角扭苷、辣椒堿、楝素、百部堿、莨菪堿、烏頭堿、馬錢子堿等。由于市場(chǎng)等多方面原因,在登記到期后未能延續(xù)[8]。

    1.2 辣椒素簡(jiǎn)介

    辣椒素,是一種從茄科植物辣椒的成熟果實(shí)中提取得到的有效成分,最早由Thresh[9]于1876年從辣椒果實(shí)中分離出來(lái),是辣椒辛辣味和具有藥物功能的主要來(lái)源,主要由辣椒素單體(約占68%)、二氫辣椒素單體(約占25%)和降二氫辣椒素單體(約占5%)組成。

    1.2.1 辣椒素理化性質(zhì)

    辣椒素純品化學(xué)名稱為(反)-N-[(4-羥基-3-甲氧基苯基)-甲基]-8-甲基-6-壬烯酰胺,分子式為C18H27NO3,相對(duì)分子質(zhì)量為305.41,結(jié)構(gòu)式如圖2所示。其純品為單斜長(zhǎng)方形狀無(wú)色結(jié)晶,無(wú)毒,但刺激性較強(qiáng),熔點(diǎn)為62~66℃,沸點(diǎn)為210~220℃,其化學(xué)穩(wěn)定性較高,在各種有機(jī)溶劑萃取過(guò)程中損失極小,易溶于乙醇、乙醚、苯、丙酮及氯仿中,微溶于二硫化碳,難溶于冷水,也可溶于堿性水溶液。

    圖2 辣椒素結(jié)構(gòu)式

    1.2.2 辣椒素的生物活性

    辣椒素具有止痛[10]、抗癌[11]、調(diào)節(jié)血脂[12]、抗菌消炎[13]、減肥[14]等作用,還可導(dǎo)致皮膚血管擴(kuò)張、改善微循環(huán),又能利用其刺激性辣味對(duì)人和動(dòng)物產(chǎn)生一系列生理反應(yīng)和驅(qū)避作用[15]。因此,辣椒素廣泛應(yīng)用在醫(yī)療、美容、有害生物防治、食品添加劑等領(lǐng)域。

    2 辣椒素在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用情況

    作為一種從植物果實(shí)中提取出來(lái)的有效成分,由于其獨(dú)特的抗蟲抑菌活性,辣椒素被認(rèn)為是一種良好的生物農(nóng)藥。美國(guó)環(huán)保局(EPA)認(rèn)為,作為一種傳統(tǒng)食物,沒(méi)有發(fā)現(xiàn)辣椒素對(duì)人體有害的證據(jù),并于1991年將辣椒素類化合物認(rèn)定為生物農(nóng)藥[16],且免除其在蔬菜、水果上殘留量的限制,應(yīng)用于生物防治領(lǐng)域。在我國(guó),辣椒素作為植物源農(nóng)藥有效成分,也已經(jīng)成功進(jìn)入登記應(yīng)用階段。

    2.1 殺蟲作用

    辣椒素類物質(zhì)對(duì)害蟲的觸殺作用明顯,害蟲與辣椒素類物質(zhì)接觸后即表現(xiàn)麻痹(不活動(dòng)、不取食)、癱瘓、最終死亡的現(xiàn)象。其對(duì)害蟲也具有胃毒作用,害蟲取食后,則抑制解毒酶系,影響消化吸收、干擾呼吸代謝,致使害蟲因正常的生理活動(dòng)受阻而引起生理病變,生長(zhǎng)發(fā)育受到抑制而死亡。

    Claros等[17]研究了辣椒素和芥子油苷對(duì)蚜蟲的殺蟲活性。室內(nèi)試驗(yàn)表明,2種活性成分對(duì)蚜蟲的毒力隨濃度的增加而逐漸增加。采用10%辣椒素、75%~100%芥子油苷或10%辣椒素和90%芥子油苷復(fù)配溶液作用于蚜蟲時(shí),蚜蟲死亡率在83%~99%;田間試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),噴灑5%辣椒素、50%芥子油苷或5%辣椒素和45%芥子油苷復(fù)配的溶液,蚜蟲死亡率達(dá)到87%~97%。劉新等[18]對(duì)辣椒素類物質(zhì)對(duì)桃蚜的生物活性及其于幾種殺蟲劑的聯(lián)合作用進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,辣椒素類物質(zhì)對(duì)桃蚜具有較強(qiáng)的毒力和良好的防效,當(dāng)辣椒素質(zhì)量濃度為20 mg/L時(shí),噴藥1 d后防效為83.8%,3 d后防效為93.6%,7 d后防效為85.6%,并且在與其他農(nóng)藥復(fù)配時(shí),辣椒素類物質(zhì)與阿維菌素和三唑磷復(fù)配增效明顯,而辣椒素類物質(zhì)與高效氯氰菊酯復(fù)配,拮抗作用明顯。Isaacs等[19]通過(guò)對(duì)辣椒堿及傳統(tǒng)的殺蟲劑,如谷硫磷、吡蟲啉等對(duì)葡萄及玫瑰害蟲的作用效果對(duì)比,發(fā)現(xiàn)辣椒堿與其他生物殺蟲劑類似,其速效性和持效性與傳統(tǒng)的高毒農(nóng)藥相比,無(wú)明顯優(yōu)勢(shì),但對(duì)環(huán)境安全。作為一種植物源殺蟲劑,辣椒素具有安全、低毒的特點(diǎn),但藥效不如化學(xué)農(nóng)藥顯著。目前文獻(xiàn)報(bào)道的大多數(shù)研究?jī)H限于辣椒粗提物或辣椒素類似物,因此有必要做進(jìn)一步的研究,驗(yàn)證辣椒素單體的殺蟲活性。

    2.2 殺菌作用

    辣椒素不僅具有強(qiáng)烈的刺激性,也是一種高活性的抑菌劑。Soetarno等[20]通過(guò)對(duì)辣椒乙醇提取物的抑菌實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),雖然不同種類辣椒中,其辣椒素含量不同,但是對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、酵母以及霉菌均有抑制效果,并且通過(guò)生物自顯影法測(cè)定,確定該提取物中的主要抑菌成分為辣椒素。王建明等[21]發(fā)現(xiàn)辣椒素在3.57~50 μg/mL質(zhì)量濃度時(shí)對(duì)辣椒枯萎病菌有明顯抑制生長(zhǎng)作用,20 μg/mL時(shí)對(duì)番茄葉霉病菌、番茄灰霉病菌、洋蔥灰霉病菌等都有強(qiáng)烈的抑制作用。魏玉西等[22]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),辣椒堿對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、普通變形桿菌、四連球菌、痢疾志賀氏菌等細(xì)菌有較強(qiáng)抑制活性,但對(duì)芒果灰斑病菌、番茄灰霉病菌等霉菌的抑制作用弱。同時(shí),辣椒堿的抑制細(xì)菌作用受其濃度的影響,質(zhì)量濃度在0.012 5 mg/mL以下無(wú)抑菌活性;在較高質(zhì)量濃度(≥0.05 mg/mL)時(shí),辣椒堿對(duì)革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌都有較強(qiáng)的抑制作用,但濃度的變化對(duì)霉菌的抑制效果變化并不明顯。

    關(guān)于辣椒堿抑菌作用的早期文獻(xiàn)所采用的辣椒堿樣品大多是辣椒堿的粗制品或提取液,樣品中的辣椒堿含量較低,不能證明是辣椒堿的抑菌作用。因此為了確證辣椒堿的抑菌效果,劉可春等[23]采用純化后的辣椒堿樣品對(duì)大腸桿菌、綠膿桿菌、金黃葡菌、乙型溶血性鏈球菌、白色葡萄球菌、白色念珠菌等6種菌進(jìn)行了抑菌試驗(yàn),辣椒堿對(duì)乙型溶血性鏈球菌和白色念珠菌的最低抑菌濃度(MIC)分別為37.5~50 mg/L和75~100 mg/L,而對(duì)其他試驗(yàn)菌沒(méi)有抑菌效果,高于此濃度范圍則對(duì)實(shí)驗(yàn)菌均有明顯抑制效果。吳影等[24]以7種實(shí)驗(yàn)菌種生長(zhǎng)情況為依據(jù),認(rèn)為辣椒堿對(duì)7種菌株的抑菌作用依次為金黃色葡萄球菌>枯草芽孢桿菌>大腸桿菌>啤酒酵母菌>葡萄酒酵母>黑曲霉>青霉,對(duì)前5種菌株的抑菌效果較明顯。王夢(mèng)等[25]研究了辣椒素單體、二氫辣椒素單體、降二氫辣椒素單體及辣椒素對(duì)細(xì)菌和真菌的抑制效果,其結(jié)果表明,辣椒堿單體具有明顯的抑菌作用,抑菌效果明顯好于二氫辣椒堿單體、降二氫辣椒堿單體和辣椒素。進(jìn)一步比較發(fā)現(xiàn),辣椒堿單體對(duì)5種菌株抑菌效果由大到小依次為金黃色葡萄球菌>大腸桿菌>銅綠假單胞菌>白色念珠菌>黑曲霉菌??偟膩?lái)說(shuō),辣椒素對(duì)球菌、桿菌、弧菌(螺旋菌)具有良好的抑制作用,對(duì)霉菌、酵母也有一定抑制作用。

    2.3 趨避作用

    除了殺蟲和抑菌作用,辣椒素還具有驅(qū)避作用。辣椒素具有強(qiáng)烈的刺激性,可以用作鳥類、動(dòng)物和昆蟲的驅(qū)避劑,其特點(diǎn)是藥效高、持效長(zhǎng)、可降解,而且不會(huì)對(duì)哺乳動(dòng)物造成持久性的傷害,是一種新型的生物農(nóng)藥[26]。

    陳渠玲等[27]對(duì)湖南省望城縣農(nóng)村的老鼠進(jìn)行了密度調(diào)查和鼠種分類,并展開(kāi)以辣椒素為主要成分的農(nóng)村儲(chǔ)糧害鼠防制劑的研究。試驗(yàn)結(jié)果表明,辣椒素對(duì)儲(chǔ)糧害鼠有良好的驅(qū)避效果。使用0.2%辣椒素對(duì)農(nóng)村儲(chǔ)糧害鼠防護(hù)期超過(guò)349 d。楊衛(wèi)東等[28]通過(guò)將辣椒素混合明膠等多糖后涂覆于聚乙稀薄膜袋外的試驗(yàn)證明,辣椒素對(duì)小鼠具有驅(qū)避性質(zhì),且在濃度低至1%時(shí),驅(qū)避效果仍然顯著,并且能夠維持效果長(zhǎng)達(dá)一周。

    3 辣椒素的農(nóng)藥劑型

    辣椒素因其獨(dú)特的殺蟲抑菌和驅(qū)避作用,在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用前景。目前,僅有辣椒素乳油、微乳劑等劑型被開(kāi)發(fā),這極大地限制了辣椒素在農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用,因此需要開(kāi)發(fā)更加高效環(huán)保的辣椒素制劑,擴(kuò)展辣椒素在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用。辣椒素化學(xué)穩(wěn)定性較好,可溶于大部分有機(jī)溶劑,難溶于水,可以開(kāi)發(fā)乳油、微膠囊懸浮劑等常規(guī)農(nóng)藥劑型,也可以開(kāi)發(fā)納米乳、納米分散體等納米農(nóng)藥劑型。

    3.1 常規(guī)農(nóng)藥劑型

    3.1.1 乳油

    乳油因加工工藝簡(jiǎn)單,產(chǎn)品穩(wěn)定性好,使用方便,生物活性高等優(yōu)點(diǎn),一直以來(lái)都是農(nóng)藥制劑的注藥劑型之一。辣椒素易溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑,且化學(xué)穩(wěn)定性好,因此可以采用環(huán)保溶劑來(lái)開(kāi)發(fā)辣椒素乳油制劑,避免使用有害溶劑,降低乳油中有機(jī)溶劑對(duì)人體健康、安全和環(huán)境的危害??刹捎玫木G色環(huán)保溶劑主要有3類:一是生物源溶劑,主要包括大豆油,玉米油、生物柴油、植物精油、松脂基植物油等。這些溶劑主要是從動(dòng)植物中提取的低毒類天然產(chǎn)物,可生物降解,對(duì)環(huán)境污染較小,并且對(duì)大多數(shù)疏水性的農(nóng)藥原藥有良好的溶解性;二是礦物源溶劑,主要為飽和的環(huán)烷烴與鏈烷烴混合物,如埃森克美孚公司生產(chǎn)的高沸點(diǎn)重芳烴溶劑油Solvesso-100(S-100)、Solvesso-150(S-150)和Solvesso-200(S-200)等系列溶劑,其毒性比甲苯、二甲苯低,且對(duì)多種農(nóng)藥具有較好的溶解性能,而人工合成溶劑,如乙酸仲丁酯、乙二醇二乙酸酯(EGDA)等,其毒性也比甲苯、二甲苯低,對(duì)大多數(shù)農(nóng)藥的溶解性和其成本均比生物源溶劑和礦物源溶劑更有優(yōu)勢(shì)[29]。因此,利用這些環(huán)保溶劑,開(kāi)發(fā)環(huán)境友好型辣椒素乳油具有良好的前景。

    3.1.2 微膠囊懸浮劑

    微膠囊技術(shù)是一種用成膜材料把固體或液體包覆形成微小粒子的技術(shù),大小一般在微米級(jí)范圍(1~400 μm),而辣椒素本身具有強(qiáng)烈的刺激性,因此可以利用一些天然高分子材料,如環(huán)糊精、殼聚糖、海藻酸鈉等,將辣椒素包覆,制備辣椒素微膠囊,以降低其刺激性,延長(zhǎng)其持效期,從而可減少施藥的數(shù)量和頻率。此外,天然的高分子材料具有無(wú)毒、可降解等特性,有利于生態(tài)和環(huán)境保護(hù),這對(duì)于農(nóng)藥低毒、無(wú)毒化發(fā)展具有重要意義。

    3.2 納米農(nóng)藥劑型

    3.2.1 納米乳劑

    納米乳是由水、油、表面活性劑和助表面活性劑等形成的粒徑在20~200 nm的透明或半透明且熱力學(xué)相對(duì)穩(wěn)定的均相分散體系[30]。辣椒素單體化學(xué)穩(wěn)定性較高,在極性溶劑中溶解度較好,因此可利用環(huán)保型溶劑和易生物降解的表面活性劑來(lái)開(kāi)發(fā)辣椒素納米乳。與乳油相比,其不僅可以降低其溶劑和乳化劑的使用量,更加安全環(huán)保,而且由于其較小的液徑,藥效也將進(jìn)一步提高。開(kāi)發(fā)辣椒素納米乳,有助于提高這類生物農(nóng)藥的藥效以及擴(kuò)展其使用農(nóng)藥劑型和使用場(chǎng)景。

    3.2.2 納米分散體

    納米分散體是將難溶于水的有機(jī)農(nóng)藥化合物,利用研磨、熔融乳化法、微沉淀法、溶劑揮發(fā)法結(jié)合噴霧干燥、冷凍干燥等方法直接加工成納米顆粒的粉劑,或分散于水中形成納米混懸劑,其顆粒粒徑通常在50~200 nm[31]。辣椒素單體熔點(diǎn)較低、穩(wěn)定性好,可應(yīng)用熔融乳化法結(jié)合冷凍干燥法制備其固體納米分散體。這種方法不僅可以提高其藥效,還可以提高在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過(guò)程中的穩(wěn)定性和安全性。此外,固體納米分散體還可以通過(guò)直接噴粉施藥對(duì)溫室大棚中的病蟲害進(jìn)行防治,避免由噴霧施藥引起的大棚濕度增加而導(dǎo)致病蟲害嚴(yán)重化。

    辣椒素由于具有良好的抑菌抗蟲作用,開(kāi)發(fā)適合的劑型是辣椒素在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中應(yīng)用的關(guān)鍵環(huán)節(jié),尤其是在細(xì)菌病害的防治和糧食儲(chǔ)藏安全等方面。乳油和微膠囊懸浮劑屬于常規(guī)尺寸制劑。乳油加工工藝簡(jiǎn)單,使用方便。微膠囊化可以使辣椒素控制釋放,增加其持效期,降低其刺激性。納米乳和納米分散體屬于納米制劑,由于具有更小的粒徑,可以更好地發(fā)揮其藥效,從而能降低辣椒素的施藥量,達(dá)到減量增效的目的。

    4 展 望

    隨著人們健康環(huán)保意識(shí)的加強(qiáng),低殘留、高效的綠色環(huán)保型農(nóng)藥越來(lái)越受關(guān)注。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出農(nóng)藥使用量要達(dá)到零增長(zhǎng),倡導(dǎo)建立資源節(jié)約型和環(huán)境友好型的生態(tài)文明和綠色生產(chǎn)。生物農(nóng)藥由于其選擇性強(qiáng),對(duì)環(huán)境危害小,原料廣泛等特點(diǎn),將會(huì)在未來(lái)的有害生物防治中扮演越來(lái)越重要的角色。辣椒素對(duì)害蟲具有良好的觸殺與驅(qū)避作用,并且對(duì)多種真菌和細(xì)菌都具有較好的抑菌作用,是一種良好的植物源農(nóng)藥。其低毒性、易降解的優(yōu)點(diǎn),在有害生物的生物防治領(lǐng)域具有廣闊開(kāi)發(fā)前景。因此,針對(duì)辣椒素這類天然的植物源農(nóng)藥活性成分,開(kāi)發(fā)其適合的劑型,擴(kuò)展其在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用場(chǎng)景,將有助于農(nóng)藥的低毒、低殘留化以及推動(dòng)生態(tài)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

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