慢性傷口細(xì)菌檢測(cè)鑒定和藥敏試驗(yàn)的臨床應(yīng)用研究

江帆，劉紅梅，孟子朝，陳發(fā)國(guó)，李醫(yī)，曹莉

(新疆維吾爾自治區(qū)第三人民醫(yī)院，新疆 烏魯木齊 830002)

0 引言

隨著中國(guó)步入老齡化社會(huì)的速度越來(lái)越快，一方面心腦血管意外和/或腦腫瘤術(shù)后、跌倒車(chē)禍所致顱腦脊髓損傷致癱瘓壓瘡患者增多；另一方面，飲食結(jié)構(gòu)不合理導(dǎo)致糖尿病、肥胖患者增多引起糖尿病足、下肢靜脈潰瘍患者增多。慢性傷口主要是指壓瘡、糖尿病足、下肢潰瘍等。慢性傷口容易合并感染，反過(guò)來(lái)感染又容易導(dǎo)致慢性傷口擴(kuò)大加深，Sato等1學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)壓瘡潰瘍傷口肉芽組織中的細(xì)菌數(shù)量與傷口細(xì)胞增殖呈負(fù)相關(guān)，減少傷口細(xì)菌量有利于傷口肉芽組織的生長(zhǎng)。多種細(xì)菌的感染是導(dǎo)致傷口慢性化的重要因素，Craig等2研究證實(shí)慢性傷口的感染細(xì)菌并非一直不變，在不同時(shí)間傷口檢測(cè)的細(xì)菌發(fā)生了很大的變化，菌種的一致率不到50%。我們研究通過(guò)從傷口取材，希望能夠探索出快速、準(zhǔn)確地確定慢性傷口的感染細(xì)菌種類(lèi)及敏感藥物，為臨床醫(yī)生的治療提供可靠的依據(jù)，是我們本次研究的主要內(nèi)容。

1 臨床資料

1.1 一般資料

本組患者81人次，均自2016年至2020.2新疆維吾爾自治區(qū)第三人民醫(yī)院收治患者，其中男性48例，女性33例，年齡52.6歲，慢性傷口病程均超過(guò)30天。

2 方法

2.1 研究方法

我們給予同一慢性傷口，給予規(guī)范碘伏消毒，生理鹽水沖洗，然后采用AB兩種檢查方法3，A通過(guò)棉簽拭子蘸取分泌物給予涂片檢查細(xì)菌、B通過(guò)拭子棉簽蘸取分泌物給予細(xì)菌培養(yǎng)后檢查細(xì)菌，通過(guò)這兩種不同檢查的方法，比較細(xì)菌檢測(cè)的結(jié)果，同時(shí)行傷口分泌物細(xì)菌培養(yǎng)，得到細(xì)菌藥敏結(jié)果，為臨床醫(yī)師的治療提供很好的參考依據(jù)。

2.2 觀察指標(biāo)

排除標(biāo)本污染，取材當(dāng)天可以得到A分泌物涂片的細(xì)菌鑒定結(jié)果，取材三天后得到B方法細(xì)菌鑒定的結(jié)果，我們比較A、B兩種方法的檢查細(xì)菌陽(yáng)性率、檢測(cè)細(xì)菌菌種一致性，同時(shí)統(tǒng)計(jì)分析前兩種G+球菌和G-桿菌藥物敏感情況。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)或百分比表示，采用卡方檢驗(yàn)，均以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 慢性傷口分泌物涂片與分泌物細(xì)菌培養(yǎng)的細(xì)菌陽(yáng)性率比較

本組病例共81人次同步進(jìn)行慢性傷口分泌物的涂片與細(xì)菌培養(yǎng)，結(jié)果顯示細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于分泌物涂片細(xì)菌檢出的陽(yáng)性率，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1。

表1 81例次慢性傷口細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果(例)

χ2=31.088P<0.05，且在同時(shí)為陽(yáng)性的檢查結(jié)果中，分泌物涂片于分泌物細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果一致率29/40=72.5%

3.2 慢性傷口分泌物培養(yǎng)普通細(xì)菌與多重耐藥菌檢查結(jié)果比較

本組病例檢出72枚菌株，進(jìn)行普通細(xì)菌與多重耐藥菌株檢出率的比較，P>0.05，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 分泌物細(xì)菌培養(yǎng)多重耐藥菌朱的結(jié)果(例)

χ2=0.666P>0.05，多重耐藥菌株的分泌物培養(yǎng)檢出率28/72=39%

3 討論

健康人群的傷口愈合分為炎癥、增生和重塑三個(gè)階段，傷口愈合通常從炎癥期開(kāi)始，到重塑期結(jié)束，但是慢性傷口由于一些特殊的原因，仍然處于炎癥期，經(jīng)久不愈。Kashif等4認(rèn)為，致病菌在慢性傷口部位的定植與傷口的慢性化有關(guān)。大多數(shù)慢性傷口感染不止一種細(xì)菌，多種細(xì)菌產(chǎn)生協(xié)同作用，導(dǎo)致以前的非毒性細(xì)菌變得有毒性，對(duì)傷口造成損害。

我們的研究結(jié)果顯示，分泌物涂片細(xì)菌檢測(cè)與分泌物細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性結(jié)果的一致率高達(dá)72.5%，這個(gè)結(jié)果給予臨床醫(yī)師的提示，分泌物細(xì)菌涂片結(jié)果可以快速報(bào)告，可以作為臨床醫(yī)師一個(gè)快速了解慢性傷口感染G+球菌、G-桿菌菌種大類(lèi)別的檢測(cè)方法；分泌物培養(yǎng)細(xì)菌培養(yǎng)的陽(yáng)性率高于分泌物涂片細(xì)菌檢測(cè)的陽(yáng)性率，具有很好的準(zhǔn)確性，分泌物細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果報(bào)告遲于涂片，但是陽(yáng)性率、準(zhǔn)確率更高，且可行抗生素敏感試驗(yàn)，做為臨床醫(yī)生重要的檢驗(yàn)手段。這兩種慢性傷口檢測(cè)方法都可以作為臨床醫(yī)生常用的細(xì)菌檢測(cè)方法，各有裨益。

在本組研究中發(fā)現(xiàn)，慢性傷口監(jiān)測(cè)的細(xì)菌菌株以大腸埃希氏菌、奇異變形菌、金黃色葡萄球菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、表皮葡萄球菌、陰溝腸桿菌、銅綠假單胞菌多見(jiàn)，與Kashif等4、陳文海5、蔣琪霞6研究結(jié)果相似，但是各種細(xì)菌的構(gòu)成比略微有所不同，顯示出各家醫(yī)院相應(yīng)病區(qū)感染的菌種有所不同。

值得注意的是，多重耐藥菌的分泌物培養(yǎng)檢出率高達(dá)39%，同時(shí)也檢測(cè)出幾種罕見(jiàn)菌種，如檢出斯氏普羅威登斯菌、彭氏變形菌、毗鄰顆粒鏈菌及耐萬(wàn)古霉素金黃色葡萄球菌菌株一枚，耐萬(wàn)古霉素糞腸球菌菌株一枚。本組研究表3、表4顯示檢出最多菌株的抗生素耐藥(≥50%)情況有，大腸埃希氏菌：氨芐西林、頭孢唑林、頭孢曲松、復(fù)方新諾明、氨曲南、環(huán)丙沙星、妥布霉素、左氧氟沙星、呋喃妥因、米諾環(huán)素；奇異變形菌：氨芐西林、復(fù)方新諾明、環(huán)丙沙星、頭孢唑林、妥布霉素、慶大霉素、頭孢曲松、左氧氟沙星、頭孢他啶、頭孢吡肟、米諾環(huán)素；金黃色葡萄球菌：替考拉寧、青霉素、紅霉素、克林霉素；表皮葡萄球菌：青霉素、苯唑西林、呋喃妥因、復(fù)方新諾明、紅霉素、克林霉素、環(huán)丙沙星、莫西沙星、替考拉寧、左氧氟沙星。這為臨床醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)用藥提供了可靠的參考依據(jù)。最新的研究4證實(shí)慢性傷口中的細(xì)菌會(huì)形成生物膜，由于成熟的生物膜形成，細(xì)菌缺乏營(yíng)養(yǎng)而生長(zhǎng)緩慢，導(dǎo)致細(xì)菌對(duì)抗生素產(chǎn)生耐藥和慢性傷口遷延不愈，如何杜絕或者減少細(xì)菌生物膜形成以及抗生素破壞或者穿透生物膜可能將是未來(lái)慢性傷口感染的研究重點(diǎn)。

表4 排序前二的革蘭氏陽(yáng)性菌對(duì)抗菌藥物的敏感率和耐藥率(%)

慢性傷口已經(jīng)成為全球的熱點(diǎn)問(wèn)題之一，給社會(huì)、醫(yī)保、家庭造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。慢性傷口的治療首先是要改善患者的全身狀況，控制血糖，加強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)，改善全身和/或局部血液循環(huán)和氧供，長(zhǎng)期臥床者勤于翻身，預(yù)防下肢血栓形成等；其次局部傷口要積極清創(chuàng)，換藥，改善傷口局部條件，采用VSD、游離皮片移植或皮瓣移植，盡快修復(fù)傷口；一旦形成慢性傷口，長(zhǎng)期不愈，要及時(shí)、隨時(shí)了解傷口有無(wú)感染、感染菌種、敏感藥物，采用傷口分泌物涂片和細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)合，快速、準(zhǔn)確了解感染菌種和敏感藥物，尤其是日益增多的慢性傷口多重耐藥菌的感染要給予高度重視，加強(qiáng)手衛(wèi)生，有效病區(qū)隔離，根據(jù)敏感抗生素結(jié)果，給予全身用藥和/或傷口局部用藥治療，為盡快修復(fù)傷口創(chuàng)造良好的條件。