石莼多酚的提取工藝、組成成分分析及生物活性評價的研究進展

曾媛媛，仝 濤,2, ，黃昆侖,2,

（1.中國農(nóng)業(yè)大學食品科學與營養(yǎng)工程學院，北京 100083；2.北京食品營養(yǎng)與人類健康高精尖創(chuàng)新中心（中國農(nóng)業(yè)大學），北京 100083）

石莼（Ulva lactuca）又名海萵苣、海白菜等，是一類屬于綠藻門石莼科石莼屬的大型海洋經(jīng)濟藻類，廣泛分布于溫帶及亞熱帶海洋中，在我國主要分布于浙江至廣東、海南沿岸。作為海洋資源中發(fā)展?jié)摿薮蟮囊环N，石莼的野生生物量超過50萬噸[1]。當適應海洋中的新環(huán)境時，它會產(chǎn)生多種次級代謝產(chǎn)物，如石莼多酚、多糖等物質(zhì)，來保護自身不受氧化應激的損傷[2?5]。這些次級代謝產(chǎn)物大多都具有生理功效，成為可應用于食品、化妝品和藥物中的潛在成分[6]。從石莼中分離出來的多酚主要有黃酮類和酚酸類，用來讓海藻免受植食者的傷害[7]。除此之外，它們被認為具有很好的抗氧化活性，在降膽固醇、抗癌細胞等方面也有一定的作用。目前，海藻研究主要是褐藻與紅藻，對綠藻的研究較少，而對石莼的研究主要集中在食用及飼料方面[8]，對其組分的研究主要集中在它的多糖提取物方面[9]。本文主要對近些年來國內(nèi)外有關(guān)石莼多酚的提取工藝、組成成分分析以及生物活性評價方面的研究進展進行了綜述與討論，以期為石莼多酚的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1 石莼多酚的提取方法

藻類中提取出的多酚的含量和生物學活性不僅取決于海藻的種類、生長環(huán)境，還取決于提取溶劑、方法和操作條件。石莼多酚組成成分復雜、易氧化[10]；如表1所示，常規(guī)提取法中的水提法、有機溶劑提取法以及使用超聲輔助提取的方法已在石莼多酚提取的研究中廣泛應用。

表1 石莼多酚的組成成分分析Table 1 Analysis of components of Ulva lactuca polyphenols

1.1 常規(guī)提取法

常規(guī)提取法是最古老、經(jīng)典的一種提取酚類物質(zhì)的方法，其原理是利用植物中的化合物在不同溶劑中的溶解度不同進行提取分離。因為避免了有機溶劑對多酚提取物的毒害作用，水提法是目前最安全可靠的一種常規(guī)提取法。

Essa等[11]分別在室溫、24 h和80 ℃、2 h的條件下使用蒸餾水提取石莼中的多酚組分，結(jié)果顯示在后者條件下提取出的總酚含量大約是前者的2倍，這可能是高溫條件下一部分酚類化合物的溶出導致的。但溫度過高有可能會造成一部分多酚類物質(zhì)的提前氧化，對測定結(jié)果和后續(xù)實驗造成影響。

有機溶劑提取法中大多使用的是一定濃度的乙醇水溶液，通常，70%~96%的高濃度乙醇是最常用的有機溶劑提取劑。Farvin等[12]分別使用蒸餾水和96%的乙醇溶液提取丹麥海岸采集的16種海藻粉末的多酚組分并收集上清液，其中石莼的水提率和醇提率分別為33.2%和9.4%，水提法相比于醇提法提取率大幅增加，表明石莼中存在一些可用水萃取的化合物，在極性更大的蒸餾水中被萃取了出來。通過福林酚法測得提取物總酚含量分別為224.2 mg/100 g干海藻和236.5 mg/100 g干海藻，水提法總酚含量相比醇提法略有減少，說明水提法提取出的多酚純度低于醇提法，一些雜質(zhì)被提取了出來。通常，有機溶劑提取法相對于水提法提取出的總酚含量更高，這是由于不同體積分數(shù)的有機溶劑能夠調(diào)整極性從而萃取出特定的化合物，而一定比例的有機溶劑中的水成分還能夠促進外來水分和海藻中的許多黏性物質(zhì)互溶形成膠團，從而提高海藻多酚得率。但體積分數(shù)過大或純的有機溶劑揮發(fā)性較大，使提取液極性降低又會降低多酚得率[13]。但也并非所有的海藻都遵循這個規(guī)律，例如在該實驗中測定的褐藻鈍馬尾藻（Sargassum muticum）的水提物的總酚含量約為醇提物的兩倍。

除此之外，通過高效液相色譜檢測，F(xiàn)arvin等[12]還發(fā)現(xiàn)相比于其醇提物，石莼的水提物含有低濃度但更多種類的酚類物質(zhì)，且水提物的DPPH清除活性、亞鐵離子螯合活性、還原能力和抑制脂質(zhì)過氧化的能力均高于醇提物，所以選擇水提法還是醇提法，需要根據(jù)具體的實驗內(nèi)容綜合考慮。

除了高濃度的乙醇溶液，甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有機溶劑也常用于提取海藻多酚。Kosanic等[14]在料液比為1:5的條件下使用丙酮從石莼中提取出的酚類物質(zhì)含量為58.15 μg鄰苯二酚當量（PE）/mg提取物，并進行了一系列抗氧化實驗，并與其他人的研究對比得出結(jié)論：丙酮提取物具有相對于乙醇和甲醇較強的抗氧化能力。但有機溶劑提取法不環(huán)保，如果沒有將提取溶劑揮發(fā)清理干凈，可能會對后續(xù)的抑菌試驗和動物實驗等造成影響。

1.2 超聲輔助提取法

超聲波的高頻震動可以產(chǎn)生很大能量并破壞細胞壁，使溶劑與植物體中的有效成分充分接觸，促使有效成分盡可能地向溶劑中轉(zhuǎn)移，強化細胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴散和溶解[15]。為了更有效地提取多酚類化合物，許多研究者在常規(guī)提取法的基礎上采用超聲波震動輔助的方法，以提高多酚的提取效率。

Essa等[11]在60 ℃，超聲4 h的條件下的提取石莼中的多酚，發(fā)現(xiàn)提取的總酚含量遠高于在室溫下使用蒸餾水提取24 h的提取物，但略低于在80 ℃的條件下使用水提法提取2 h的提取物。在后續(xù)實驗中發(fā)現(xiàn)，超聲提取物的DPPH清除能力也略高于其他兩種方法?？紤]到時間成本以及80 ℃的高溫可能會對多酚造成氧化損傷，超聲輔助提取法顯然是較為理想的方法。曾惠[16]使用超聲提取與醇提法相結(jié)合的方法，并與單純的水提法進行了對比，結(jié)果證明前者的石莼多酚提取物比后者具有更高的抑菌活性。

然而，盡管超聲輔助提取相比常規(guī)提取技術(shù)有更多的優(yōu)勢，還是有實驗證據(jù)表明，超聲波輔助提取引起了被提物中某些化合物的降解以及理化性質(zhì)的改變[17]。隨著科技的進步，有許多超聲提取與其他新型提取方法聯(lián)合的技術(shù)也應用到了實驗和生產(chǎn)中，例如超聲輔助的索氏萃取儀、超聲輔助的Clevenger蒸餾裝置等[18]。但由于這些創(chuàng)新技術(shù)還沒有大面積普及，在石莼多酚的提取實驗中還未見到有關(guān)報道。

2 石莼多酚的組成成分

海藻中的酚類化合物都是以間苯三酚為基本的結(jié)構(gòu)單元，但受海藻種類、地理位置、生長環(huán)境和季節(jié)因素等的影響，間苯三酚的數(shù)量和連接方式不同，因此構(gòu)成了復雜多樣的海藻多酚類化合物。根據(jù)苯環(huán)的連接方式與取代基類型的不同，海藻多酚類化合物又可分為酚酸類、黃酮類、鹵代酚類等幾種。在目前有關(guān)石莼多酚提取物組成成分分析的相關(guān)研究報道中，大多為酚酸類和黃酮類化合物的報道。

2.1 酚酸類化合物

酚酸類化合物除了含有酚羥基外，芳環(huán)上還有羧基取代。研究表明酚酸類化合物是莽草酸途徑的代謝產(chǎn)物，不僅具有很好的自由基清除能力，還能夠抑制鐵離子誘導的脂質(zhì)體氧化[19]。Farvin等[12]通過高效液相色譜鑒定了16種海藻的酚酸類化合物組成，其中石莼多酚的水提物中含有沒食子酸、水楊酸、原兒茶酸、龍膽酸、羥基苯甲酸、綠原酸、香豆酸、香草酸、丁香酸、咖啡酸等10種酚酸類物質(zhì)，且與同一實驗中其他15種海藻多酚提取物進行對比時，發(fā)現(xiàn)香豆酸僅在石莼中微量存在。但在石莼96%乙醇提取物中只鑒定出了沒食子酸、原兒茶酸和龍膽酸。另外，Intissar等[20]通過液相色譜-質(zhì)譜串聯(lián)分析，在突尼斯南部海岸附近采集到的石莼的70%乙醇提取物中也鑒定出了香草酸這一酚酸類化合物。Tanna等[21]在阿拉伯海灣附近采集了綠藻石莼，通過高效液相色譜鑒定出其70%甲醇提取物中含有原兒茶酸，除此之外還有屬于多酚類化合物的二酮類物質(zhì)姜黃素。但沒有鑒定出沒食子酸、香草酸、表兒茶素、丁香酸這幾類物質(zhì)。以上實驗表明，使用不同的提取溶劑提取不同產(chǎn)地的石莼多酚，其提取出的種類也有差別。

2.2 黃酮類化合物

在上述實驗中，Intissar等[20]還鑒定出了槲皮素-3-O-葡萄糖苷、木犀草素衍生物、異鼠李素、異鼠李素衍生物這四種黃酮類化合物。黃酮類化合物的基本單位為15個碳原子，由三個環(huán)組成，中間是雜環(huán)，兩邊是苯環(huán)，其生物合成的主要途徑是苯丙烷的代謝。大部分黃酮類化合物主要存在于陸生植物中，但近年來有研究發(fā)現(xiàn)海藻中也存在著黃酮類化合物。因為黃酮類化合物能將氫原子供給自由基，所以具有清除DPPH自由基、超氧陰離子等自由基的能力[22]。曾惠[16]使用高效液相色譜在石莼的85%乙醇提取物中鑒定出了黃酮類化合物桑色素。

Farvin等[12]的研究報道說明相比于甲醇和乙醇溶液，蒸餾水可以提取出種類更多的多酚類物質(zhì)，這種提取出的多酚種類的差別可能還與藻體生長情況等內(nèi)在因素[23]以及光照、鹽度、溫度等外部環(huán)境因素[24]有關(guān)。這些外在和內(nèi)在的因素都可能會影響到石莼中酚類代謝表達的調(diào)節(jié)。隨著現(xiàn)化提取和檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，未來石莼中多酚類物質(zhì)的鑒定將會更加準確。

3 石莼多酚的生物活性

由于海洋環(huán)境和條件的千變?nèi)f化，海藻會遭遇到各種生物和非生物的脅迫，如植食性動物的攝食、溫度和濕度的影響等。為了應對這些風險，它們自身形成了強大的防御系統(tǒng)，并產(chǎn)生了多種次級代謝產(chǎn)物。從海藻中提取出的許多代謝物已被廣泛用于食品工業(yè)，其中就包括多酚類物質(zhì)。石莼多酚含量高、種類多，因而具有非常廣泛的生物活性。最常見的有抗氧化活性、抑菌活性、抗炎活性和抗凋亡活性等，以及由這些生物活性延伸出的降血脂、保護肝臟、減少心臟損傷、抗癌抗腫瘤等功效。

3.1 抗氧化活性

在動植物的生理過程中會產(chǎn)生活性氧（ROS）的變化，活性氧是一系列含氧化合物，對生物大分子具有很強的攻擊性，并對細胞的完整性構(gòu)成威脅[25]?；钚匝踔饕ê踝杂苫头亲杂苫苌?，而這些衍生物最終也會轉(zhuǎn)化成自由基或氧化劑[26]。過多的活性氧自由基會誘導過度氧化應激反應，破壞生物分子和DNA結(jié)構(gòu)，最終造成基因突變或細胞死亡[27]。

由于潮汐作用，綠藻石莼經(jīng)常暴露在光照水平和氧氣含量的高度變化下，這會導致它們產(chǎn)生強氧化劑[28]。但在石莼的生長過程中，幾乎沒有受到氧化破壞，這是因為它們具有保護自身免受氧化應激的機制[29]。石莼中的酚類化合物和類黃酮可作用于氧化性物質(zhì)來終止反應，避免細胞和關(guān)鍵大分子受損。它們的抗氧化能力歸因于各類反應和機理，例如自由基清除、還原能力以及與過渡金屬離子催化劑的結(jié)合等[30]。

3.1.1 自由基清除能力 生物體過多地形成活性氧，如羥自由基（·OH）、超氧陰離子過氧化氫（H2O2）等會造成細胞膜、DNA、蛋白質(zhì)和其他細胞成分的降解，進而引發(fā)衰老、癌癥、白內(nèi)障、動脈粥樣硬化的發(fā)生[31]，而抗氧化劑可以減少活性氧的生成。

Intissar等[20]研究了富含多酚的石莼乙醇提取物的體外DPPH自由基清除活性，結(jié)果顯示：相比于BHT（丁羥基甲苯），石莼的多酚提取物具有更顯著的抗自由基活性。且隨著提取物濃度的增加，DPPH的清除活性增強。Khairy等[20]分別在春、夏、秋三個季節(jié)采集了埃及亞歷山大港灣附近的石莼，季節(jié)性地評估了它的總酚含量和DPPH自由基清除活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)在夏季采集的石莼總酚含量最高，其酚類提取物也具有最高的DPPH自由基清除活性。這說明在不同的季節(jié)，石莼中多酚類物質(zhì)的組成和比例可能不同，才有了不同的DPPH自由基清除活性。

除了DPPH，研究人員還對其他自由基的清除能力進行了研究，Kosanic等[14]研究發(fā)現(xiàn)使用丙酮提取的石莼多酚的·清除能力略低于DPPH·，且對兩種自由基的清除能力都遠低于抗氧化劑參照物抗壞血酸，但略高于綠藻腸滸苔（Ulva intestinalis）。陳雨晴等[32]分別測定了富含多酚的石莼乙醇粗提物和純化后的多酚提取物對·OH、ABTS+·和DPPH·三種自由基的清除能力，結(jié)果顯示在試驗濃度范圍內(nèi)，粗提物樣液對·OH、ABTS+·和DPPH·的清除能力呈極顯著（P<0.01）的劑量效應且隨質(zhì)量濃度的增加而增強，但明顯低于提純后的石莼多酚樣液，而提純后的樣液隨著質(zhì)量濃度的增加，對三種自由基的清除率均趨于穩(wěn)定，且與對照組抗壞血酸標品無顯著（P>0.05）差異。相同條件下提純物對·OH、ABTS+·和DPPH·的清除能力分別是粗提物的11.70、5.12、8.35倍,石莼多酚提取物對三種自由基的清除能力大小為·OH>DPPH·>ABTS+·。自由基可以在鏈反應中的每個步驟中產(chǎn)生，海藻多酚的抗氧化性是由于其分子上的酚羥基基團能捕獲并清除活性能力極高且瞬間消失的自由基。因此，許多重要的抗氧化劑是通過清除自由基來防止鏈引發(fā)步驟的[33]。

3.1.2 Fe3+還原能力 在上文中Farvin等[12]的還原能力實驗表明：使用蒸餾水提取出的多酚對Fe3+的還原能力高于醇提物，但兩種提取物的還原能力都取決于總酚含量，并隨著總酚含量的增加而增加，這說明石莼中的多酚類物質(zhì)參與了還原反應，而水提物中存在的一些親水的酚類化合物其還原能力更高。與同一實驗中的其他15種海藻多酚提取物相比，石莼多酚的還原能力處在較低水平。與此實驗結(jié)果類似，Kosanic等[14]采用丙酮提取石莼中的多酚類物質(zhì)，證明其還原能力約為抗壞血酸的1/5左右。根據(jù)Farvin等[12]的報道，咖啡酸具有很好的三價鐵還原能力，而石莼多酚僅在其水提物中鑒定到微量咖啡酸，這表明石莼中可能缺少一些類似咖啡酸這種還原能力較高的酚類物質(zhì)。此外，有對其他海藻的實驗研究表明，海藻多糖可能對海藻的高還原性起主要作用[34]。

3.1.3 Fe2+螯合活性 多酚類物質(zhì)可以通過與亞鐵離子的強結(jié)合能力，將亞鐵離子包合到化合物內(nèi)部，變成穩(wěn)定的、分子量更大的化合物，從而阻止亞鐵離子對氧化反應的催化作用。Farvin等[12]在實驗中發(fā)現(xiàn)蒸餾水提取的石莼多酚相較于乙醇提取物表現(xiàn)出了更高的亞鐵離子螯合活性，其EC50（螯合50%亞鐵離子所需要的濃度）的值約為醇提物的一半，且兩類提取物的螯合活性都隨著其中多酚濃度的增加而增大。有對其他種類海藻的研究證明海藻中的膳食纖維[35]、海藻多糖[36]和蛋白質(zhì)[37]等對亞鐵離子也有一定的螯合作用，所以石莼多酚水提物的活性較高可能是由于它與其他種類的物質(zhì)共同作用，這與先前水提物提取率高但多酚含量低的實驗結(jié)果一致。但有關(guān)多酚的金屬螯合活性存在著一些爭議。有研究表明，海藻多酚可以有效螯合亞鐵離子，但也有研究認為相比于其他抗氧化活性，多酚對金屬離子的螯合能力并不顯著。有研究表明多酚提取物確實可以促進亞鐵離子的螯合活性，且極性較高的水提物的活性更顯著[12]。盡管與亞鐵離子最佳螯合劑之一的EDTA相比，多酚提取物的活性相對較低，但隨著研究深入，多酚或多酚與其他物質(zhì)的混合物也有可能成為新型的天然金屬螯合劑。

3.1.4 抑制脂質(zhì)過氧化能力 抗氧化劑作為電子的給體，可以減少脂質(zhì)過氧化過程中的氧化中間體，從而起到抑制脂質(zhì)過氧化的作用。有研究評估了石莼多酚在魚油中抑制脂質(zhì)過氧化的有效性[12]。結(jié)果顯示，含BHT的魚油氧化穩(wěn)定性最高，其氧氣壓力下降時間約為純魚油對照組的兩倍，添加醇提物組比純魚油對照組氧氣壓力下降時間多12%，說明石莼多酚有抑制魚油中脂質(zhì)過氧化的作用，但效果與BHT相比較差。已有報道稱多酚類物質(zhì)在具有高含量多不飽和脂肪酸的脂質(zhì)體中是有效的抗氧化劑，因為多酚可以將氫原子轉(zhuǎn)移至脂質(zhì)過氧自由基（LOO），并形成芳氧基（ArO），而芳氧基在過程中可以充當鏈載體，與另一個自由基偶聯(lián)，從而終止自由基反應過程[38]。

以上研究表明，石莼多酚提取物具有多種抗氧化特性。提取劑的種類不僅對總酚含量有影響，對提取物的抗氧化活性也有很大的影響。提取劑的極性不同會改變其提取特定種類的多酚，因此影響提取物的抗氧化特性。各種抗氧化活性都顯示出了對多酚濃度的依賴性，這表明石莼多酚是這些提取物中的抗氧化活性成分之一。除此之外，也有研究表明石莼中的其他提取物也參與了抗氧化過程，例如色素、低分子量多糖等[39]。

3.2 抑菌活性

大多數(shù)海藻多酚提取物都有抑菌能力，且在一定的濃度范圍內(nèi)不會影響動物細胞的正常生長。有研究表明，海藻多酚中的酚羥基可以促進多酚通過細菌細胞膜，增強對細胞膜結(jié)構(gòu)和功能的干擾，破壞細胞膜完整性，發(fā)揮抗菌作用[40]。

Kosanic等[14]發(fā)現(xiàn)富含多酚的石莼丙酮提取物對幾種篩選出的細菌和真菌都具有抑制活性。劉尊英等[41]為了篩選出海藻多酚中的細菌群體感應抑制劑，采用紫色桿菌Chromobacterium violaceumCV026瓊膠擴散法檢測25種海藻多酚提取物的抑菌活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)有12種海藻多酚提取物具有細菌群體感應抑制活性，其中石莼多酚的抑菌活性最強，在其乙醇提取物的濃度達到1.0 mg/mL時，形成的抑菌圈直徑為25.18 mm，且石莼多酚的抑菌活性呈現(xiàn)出濃度依賴性，在0.1~0.5 mg/ml的濃度范圍內(nèi)，隨著石莼多酚濃度提高，其抑菌圈直徑也增大。Kim等[42]研究了石莼多酚對革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌和真菌的體外抗菌活性，發(fā)現(xiàn)其乙醚提取物表現(xiàn)出廣譜的抗菌活性，但是對真菌白念珠菌沒有抗菌活性，對細菌金黃色葡萄球菌具有強抑制活性。

石莼多酚提取物已被證實對大多細菌和真菌都具有較強的抑制能力，因此是其中的哪一類或哪幾類多酚物質(zhì)具有抑菌活性，還需要進一步的實驗研究。以上結(jié)果表明，石莼多酚提取物具有很大的抗菌類功效的潛力，而石莼生長范圍廣、面積大，是海洋中的重要資源，值得進一步的研究，有望開發(fā)成為新型細菌群體感應抑制劑。

3.3 保肝、降膽固醇作用

肝臟是人和動物體內(nèi)不可缺少的器官，承擔著外源性生物、藥物、酒精、病毒感染和內(nèi)源性膽汁、色素等物質(zhì)的排毒工作。有研究發(fā)現(xiàn)肝損傷在大多數(shù)情況下涉及體內(nèi)的氧化應激反應，其特征是從脂肪變性到慢性肝炎、纖維化、肝硬化到肝細胞癌變的逐步發(fā)展，因此人們提出使用抗氧化物質(zhì)來治療或預防肝損傷。

Ravindran等[43]研究了石莼多酚在保護肝損傷中的作用。實驗向小鼠的飲水中添加引起肝臟疾病的對乙酰氨基酚（paracetamol），通過檢測血液的各項生化指標發(fā)現(xiàn)，五種血清標志物酶在添加了保肝藥物和一系列濃度梯度的石莼多酚提取物組的水平顯著降低，且呈濃度依賴性，高濃度提取物組小鼠的其中三種血清標志物酶指標甚至降低到與參考藥物組接近的程度。因為這些標志物酶在肝細胞質(zhì)膜受損時，會被釋放到血液中，因此其可以用來評估肝細胞的損傷程度。除此之外，總蛋白的水平在藥物治療組和多酚提取物治療組中顯著增加，因為低蛋白血癥在晚期肝病中十分常見，因此，高總蛋白含量可被認為是肝臟健康的重要標志之一。這項研究可以說明，石莼多酚提取物對對乙酰氨基酚誘導的肝損傷具有保護作用。

除保肝功能外，還有研究人員[20]發(fā)現(xiàn)石莼多酚提取物對高膽固醇血癥小鼠的降血脂作用，其研究結(jié)果顯示高膽固醇血癥未治療組小鼠的血漿總膽固醇含量相比于健康組提高了222%，但在飲水中添加了石莼多酚提取物的高膽固醇血癥組將這個參數(shù)降低到了25%，可以看出石莼多酚提取物有明顯的降膽固醇作用。研究還發(fā)現(xiàn)內(nèi)源性細胞氧化還原調(diào)節(jié)酶如SOD（超氧化物歧化酶）和GPx（谷胱甘肽過氧化物酶）的活力也有所提高，這說明石莼多酚對血脂的保護作用與其抗氧化活性也有關(guān)聯(lián)。

3.4 抗炎活性

各種流行病學調(diào)查結(jié)果顯示，炎癥反應一直是伴隨機體的常見疾病，心臟的炎癥反應是心血管疾病的危險警告，而促炎性細胞因子在心臟中的表達可能會引起心臟內(nèi)細胞的凋亡。Intissar等[20]的研究中還采集了高膽固醇血癥未治療組和石莼多酚治療組小鼠的心肌樣本，發(fā)現(xiàn)腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白細胞介素6（IL-6）和白細胞介素1（IL-1）三種促炎性細胞因子在未治療組中高度表達，但前兩種細胞因子在治療組的基因表達水平顯著降低，這說明石莼多酚可以抑制小鼠心臟中的炎癥作用。除此之外，有研究發(fā)現(xiàn)巨噬細胞是外源病原體誘導的炎癥反應的主要介質(zhì)[44]，它產(chǎn)生的一氧化氮是一種促炎分子。Tong等[45]研究發(fā)現(xiàn)，使用石莼多酚提取物處理巨噬細胞會導致其一氧化氮生成量減少。當ROS大量攻擊抗氧化防御系統(tǒng)時，就會發(fā)生氧化應激反應，導致內(nèi)源性抗氧化劑含量減少，如超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）等。先前有報道稱氧化應激對促炎性細胞因子具有刺激作用，會導致心肌抑制，進而引起心臟的損傷[46]，因此石莼多酚提取物的這種抗炎活性有可能是因為其含有豐富的抗氧化活性物質(zhì)，如在前文提到的酚酸類、黃酮類化合物等。

3.5 抗癌活性

相較于石莼多酚的抗氧化活性、抑菌活性等方面的研究，有關(guān)其抗癌活性的研究信息十分有限。Kosanic等[14]通過丙酮提取石莼中的多酚，并研究其體外抗癌細胞活性。實驗采用人結(jié)腸癌細胞LS174、人肺癌細胞A549、惡性黑色素瘤細胞Fem-x和慢性髓系白血病細胞K562進行體外培養(yǎng)，在70%~80%的細胞達到融合時進行細胞毒性檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)石莼丙酮提取物對惡性黑色毒瘤細胞Fem-x和慢性髓系白血病細胞K562具有弱活性，對人結(jié)腸癌細胞LS174和人肺癌細胞A549則未檢測到活性。通過分析幾種癌細胞的細胞周期發(fā)現(xiàn)，相比于未處理組，處理組亞G1期的細胞比例有所增加，G1期細胞比例減少，這說明石莼多酚提取物對部分癌細胞具有一定的體外抗增殖活性。還有研究發(fā)現(xiàn)石莼的乙醇提取物對血液癌細胞系（MOLT-3）具有較強的體外抑制作用，且很可能是由于提取物中的多酚類化合物和類黃酮含量較高[47]。已有研究證明石莼多糖也具有抗癌活性[48]，由于提取技術(shù)的限制，很難確定各組分對抗癌作用的貢獻大小，但一般都是多種組分協(xié)同作用的結(jié)果。通過與其他海藻多酚的體外抗癌細胞活性實驗進行對比，該實驗中的石莼多酚具有中等強度的抗癌活性，可進一步進行分離，研究其在體內(nèi)的抗癌抗腫瘤活性。

4 總結(jié)與展望

從研究方面看，通過對相關(guān)文獻和研究的深入了解，可以發(fā)現(xiàn)對不同地區(qū)、不同時期的石莼進行的實驗研究中，即使是相似的實驗方案也可能得到差別很大的實驗結(jié)果。這說明對于不同生長環(huán)境中的石莼，其內(nèi)部的結(jié)構(gòu)差異還很巨大，而石莼多酚提取物中還有許多我們未曾研究甚至還未被發(fā)現(xiàn)的組分，因此，這一領(lǐng)域仍需要更多科學依據(jù)和理論基礎。

石莼多酚被認為是生物活性化合物中很有價值的一類，在食品、制藥和化妝品工業(yè)中有許多潛在的應用，尤其是其中可能有許多陸生植物中未發(fā)現(xiàn)的酚基。因此在未來的研究中，相比于提取分離技術(shù)，對單一多酚化合物的化學結(jié)構(gòu)和生物活性的研究將會是新的趨勢。而相對于較為成熟的體外抗氧化活性、抗癌活性實驗，研究石莼多酚在體內(nèi)的作用機理的實驗研究還較少，因此可以與動物實驗和臨床研究相結(jié)合，研究其在體內(nèi)的作用機理、藥物活性、生物利用能力等模型。石莼多酚作為一類儲量豐富、可再生的綠色資源，必將成為人類可以利用的重要的海洋資源寶庫。