乳腺癌中p53、EGFR 表達(dá)及與病理分期、組織學(xué)分級的關(guān)系*

喬子英 蘇蔚 鐘加滕1，#

（1 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系 河南新鄉(xiāng) 453003；2 河南省開封市婦產(chǎn)醫(yī)院病理科 開封 475000；3 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院病理科 河南衛(wèi)輝 453100）

乳腺癌為女性常見惡性腫瘤，激素受體依賴性、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級等對患者的預(yù)后具有判斷價值。原癌與抑癌基因的發(fā)現(xiàn)標(biāo)志著腫瘤研究進(jìn)入新時代，從分子水平研究可更精確觀察臨床療效、監(jiān)測腫瘤發(fā)生發(fā)展與歸轉(zhuǎn)情況，進(jìn)而指導(dǎo)個體化治療[1～2]。腫瘤抑制蛋白（p53）為抑癌基因，該基因突變與乳腺癌發(fā)生、病變有密切關(guān)系。野生型p53蛋白對修復(fù)DNA、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期阻滯與細(xì)胞凋亡方面有重要作用，發(fā)生突變時有致癌風(fēng)險。表皮生長因子受體（EGFR）為酪氨酸激酶跨膜受體蛋白，可促進(jìn)癌細(xì)胞增殖、侵襲轉(zhuǎn)移與抑制細(xì)胞凋亡。EGFR為表皮生長因子受體家族成員，EGFR 突變與癌細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移、血管生成等因素有關(guān)[3]。本研究對乳腺癌患者體內(nèi)p53、EGFR 表達(dá)情況及其與病理類型、組織學(xué)分級相關(guān)性進(jìn)行分析?，F(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月～2020 年7 月開封市婦產(chǎn)醫(yī)院病理科100 例乳腺癌患者術(shù)后病理組織行免疫組化。病理類型包括：乳腺浸潤性癌非特殊類型，乳腺浸潤性癌伴基底細(xì)胞樣分化，乳腺浸潤性癌伴髓樣分化，乳腺浸潤性癌伴乳頭Paget's 病，乳腺混合型癌，高級別乳頭狀癌。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范（2015 版）》[4]相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)病理診斷確診為乳腺癌；均為女性；術(shù)前無放化療等干擾實驗結(jié)果治療；患者及其家屬簽署知情同意書。收集患者腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理類型及組織學(xué)分級等資料。

1.2 檢查方法 組織學(xué)及免疫組化：所有標(biāo)本均經(jīng)3.7%中性甲醛液固定，常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋、3 μm 切片，二甲苯和梯度乙醇脫水，蘇木精對比染色1～3 mⅠn，中性樹膠封片，光鏡觀察。采用邁新全自動免疫組織化學(xué)染色機(jī)行免疫組化（ⅠHC）染色。選用一抗包括p53、EGFR。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn) p53 位于細(xì)胞核，EGFR 位于細(xì)胞膜或細(xì)胞質(zhì)，采用相同免疫組化方式，染色結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)：陽性呈棕黃色，p53 陽性＜60%為野生型，標(biāo)記陰性（-），0/≥60%為突變型，標(biāo)記陽性（+）[5]；EGFR 陽性數(shù)＞5%為陽性（+），反之為陰性（-）[6]。見圖1～圖6。

圖1 HE 染色：乳腺浸潤性癌，非特殊類型，組織學(xué)Ⅱ級

圖2 HE 染色：乳腺浸潤性癌， 非特殊類型，組織學(xué)Ⅲ級

圖3 ⅠHC 檢查：p53 野生型

圖4 ⅠHC 檢查：p53 突變型

圖5 ⅠHC 檢查：EGFR（-）

圖6 ⅠHC 檢查：EGFR（+）

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0 軟件分析數(shù)據(jù)，p53、EGFR 表達(dá)用%表示，進(jìn)行χ2檢驗；兩變量間相關(guān)性采用Spearman 相關(guān)性分析，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 組織內(nèi)p53、EGFR 表達(dá)情況比較 患者組織內(nèi)p53 野生型表達(dá)38 例，突變型表達(dá)62 例，陽性率為62.00%；EGFR 陰性表達(dá)55 例，陽性表達(dá)45 例，陽性率為45.00%。見表1。

表1 組織內(nèi)p53、EGFR 表達(dá)情況比較

2.2 p53、EGFR 表達(dá)與病理指標(biāo)關(guān)系 乳腺癌患者p53、EGFR 陽性表達(dá)與病理類型無顯著關(guān)系（P＞0.05），與腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移、病理組織學(xué)分級有關(guān)（P＜0.05）。見表2。

表2 p53、EGFR 表達(dá)與病理指標(biāo)關(guān)系（例）

2.3 相關(guān)性分析 經(jīng)Spearman 相關(guān)性分析顯示，p53 陽性、EGFR 陽性表達(dá)與腫瘤大小、淋巴轉(zhuǎn)移、病理組織學(xué)分級呈正相關(guān)（P＜0.05）。見表3。

表3 相關(guān)性分析

3 討論

乳腺癌為女性多發(fā)惡性腫瘤，隨著臨床對腫瘤基因?qū)W等研究不斷深入，分子病理診斷對癌癥早期診斷、預(yù)后評估具有重要價值。p53 為乳腺癌的抑癌基因，與細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞凋亡與DNA 修復(fù)等密切相關(guān)。通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯，提高DNA 修復(fù)力并抑制新生血管形成發(fā)揮增殖抑制作用。該基因在突變時對細(xì)胞失去監(jiān)視功能，抑制細(xì)胞凋亡，對機(jī)體有致瘤作用，為乳腺癌發(fā)生發(fā)展的常見突變基因[7]。野生型p53 為抑癌基因，等位基因發(fā)生突變可形成突變型p53，對細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化有促進(jìn)作用。p53 在正常細(xì)胞中含量極低，但突變型p53 產(chǎn)生蛋白的半衰期較長，免疫組化中可被檢測，認(rèn)為p53 過度表達(dá)提示原癌基因擴(kuò)增，導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移與浸潤，腫瘤惡性程度高、預(yù)后差。EGFR 為人表皮生長因子受體家族成員，未激活時以單體形式存在，為糖蛋白，位于細(xì)胞膜中，為原癌基因表達(dá)產(chǎn)物。EGFR 信號通路為整合素、細(xì)胞因子受體、G 蛋白等多信號通路交匯處，活化可介導(dǎo)細(xì)胞生長增殖分化等，對機(jī)體具有重要作用。EGFR 基因過度表達(dá)與細(xì)胞惡變密切相關(guān)，宋成等[8]研究中發(fā)現(xiàn)EGFR 高表達(dá)患者易發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移，且復(fù)發(fā)率高、存活率低。劉現(xiàn)義等[9]發(fā)現(xiàn)乳腺癌中EGFR 陽性表達(dá)率為70%，陽性表達(dá)者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高且生存率低。EGFR 與乳腺癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，從作用機(jī)制方面看，可能與EGFR 作用有關(guān)，EGFR 過度表達(dá)能抑制細(xì)胞凋亡，且促進(jìn)腫瘤血管生成，故EGFR能促進(jìn)癌癥發(fā)生發(fā)展、浸潤轉(zhuǎn)移情況[10～11]。

綜上所述，p53、EGFR 在乳腺癌中呈高表達(dá)，與患者病理分期、組織學(xué)分級等病理特征呈正相關(guān)，對患者預(yù)后提供一定判斷并指導(dǎo)治療。當(dāng)p53 突變和/或EGFR 陽性時，乳腺癌病理分級多為高級別，且更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，預(yù)后相對較差。近年來，針對該類型的靶向治療藥物逐漸成熟，特別是對EGFR受體靶向藥物的研究，對提高該類抗體陽性的乳腺癌患者，特別是激素受體陰性或三陰型乳腺癌的臨床治療及預(yù)后提供了更廣泛的診療途徑和方向。