甲狀腺乳頭狀癌超聲彈性成像特征及其與實(shí)驗(yàn)室檢測指標(biāo)的相關(guān)性

鄭 輝 陳文麗 蔡 昆 張明芬 李 飛

甲狀腺癌中最常見的病理類型是甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma，PTC），高分辨率超聲是診斷甲狀腺癌最有效的檢查方法。超聲彈性成像作為一種評估組織彈性的方法，其相關(guān)參數(shù)應(yīng)變率比值（strain ratio，SR）和彈性評分對甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的鑒別診斷具有較高價(jià)值［1］。程序性細(xì)胞死亡基因4（programmed cell death gene 4，PDCD4）是一種腫瘤抑制基因，參與腫瘤的發(fā)展［2］；表沒食子兒茶素沒食子酸酯（epigallocatechin gallate，EGCG）可以調(diào)節(jié)多種細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝途徑，包括在不同的癌細(xì)胞中抑制生長、轉(zhuǎn)移、侵襲和誘導(dǎo)凋亡［3］；Xklp2靶蛋白（Xklp2 target protein，TPX2）是一種微管相關(guān)的蛋白，現(xiàn)已被證實(shí)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、凋亡周期等密切相關(guān)，在一定程度上可以抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡通路，促進(jìn)其增殖分化［4］。本研究旨在探討PTC的超聲彈性成像特征及其與PDCD4、EGCG、TPX2表達(dá)的相關(guān)性。

資料與方法

一、臨床資料

選取2018年1月至2020年10月在我院手術(shù)經(jīng)病理確診的86例甲狀腺結(jié)節(jié)患者，男34例，女52例，年齡28～69歲，平均（42.58±9.21）歲，結(jié)節(jié)直徑1.1～3.9 cm，平均（2.37±1.04）cm。所有患者均為單發(fā)病灶，其中PTC組49例，良性腫瘤組37例；良性腫瘤組中甲狀腺腺瘤25例，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫12例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均為初次發(fā)現(xiàn)甲狀腺結(jié)節(jié)；②均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)；③臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①無手術(shù)適應(yīng)證者；②合并嚴(yán)重心臟、肝腎功能不全；③有其他甲狀腺相關(guān)疾病治療史。兩組一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者均知情同意。

二、儀器與方法

1.儀器：使用邁瑞Resona 8T彩色多普勒超聲診斷儀，探頭頻率4～15 MHz；配備彈性成像技術(shù)及定量分析軟件。

2.超聲檢查：患者取仰臥位，充分暴露頸部，先常規(guī)掃查甲狀腺區(qū)域并觀察病灶，囑患者屏氣約3～5 s，切換為彈性成像模式，待圖像穩(wěn)定后在病灶區(qū)域選擇感興趣區(qū)（ROI），大小設(shè)定為病灶區(qū)域的2/3或以上。探頭適當(dāng)施壓，使顯示屏上壓力指標(biāo)穩(wěn)定在3～4。通過雙幅實(shí)時(shí)顯示功能觀察二維圖像與彈性圖像，計(jì)算結(jié)節(jié)的彈性評分和SR。所有檢查均由兩名具有10年甲狀腺超聲檢查經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師在不知病理結(jié)果的情況下完成，意見不一致時(shí)共同協(xié)商。超聲彈性評分標(biāo)準(zhǔn)［5］：①病灶顯示為紅綠藍(lán)相間記0分；②病灶與周圍組織顯示均為綠色記1分；③病灶顯示為綠色，而周圍部分組織顯示為藍(lán)色記2分；④病灶顯示為藍(lán)色，而周圍部分組織顯示為綠色，或藍(lán)綠相間，紅藍(lán)比例為1∶1記3分；⑤病灶基本顯示為藍(lán)色記4分。0～2分判為良性結(jié)節(jié)，3～4分判為惡性結(jié)節(jié)。

3.實(shí)驗(yàn)室檢查：采用瓊脂糖凝膠電泳法進(jìn)行鑒定，選擇βactin為mRNA的內(nèi)參作為對照，以PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算PDCD4、EGCG和TPX2的相對表達(dá)量。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、兩組彈性評分和SR比較

PTC組彈性評分和SR均高于良性腫瘤組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表1和圖1，2。

表1 PTC組與良性腫瘤組彈性評分、SR比較（±s）

表1 PTC組與良性腫瘤組彈性評分、SR比較（±s）

SR：應(yīng)變率比值

組別PTC組良性腫瘤組t值P值彈性評分3.56±0.57 2.11±0.23 16.151 0.000 SR 4.83±1.89 1.53±0.68 11.293 0.000

圖1 PTC組一46歲男性患者常規(guī)超聲和彈性成像圖

圖2 良性腫瘤組一35歲女性患者常規(guī)超聲和彈性成像圖

二、兩組實(shí)驗(yàn)室參數(shù)比較

PTC組PDCD4、EGCG表達(dá)均低于良性腫瘤組，TPX2表達(dá)高于良性腫瘤組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見表2。

表2 PTC組與良性腫瘤組實(shí)驗(yàn)室參數(shù)比較（±s）

表2 PTC組與良性腫瘤組實(shí)驗(yàn)室參數(shù)比較（±s）

PDCD4：程序性細(xì)胞死亡基因4；EGCG：表沒食子兒茶素沒食子酸酯；TPX2：Xklp2靶蛋白

組別PTC組良性腫瘤組t值P值PDCD4 81.35±9.12 105.26±12.97 9.569 0.000 EGCG 59.81±7.69 83.72±11.27 11.100 0.000 TPX2 98.61±12.47 71.58±8.13 12.137 0.000

三、相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)分析顯示，PTC組彈性評分、SR與PDCD4、EGCG表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05），與TPX2表達(dá)均呈正相關(guān)（均P＜0.05）。見表3。

表3 PTC組彈性評分、SR與PDCD4、EGCG、TPX2表達(dá)的相關(guān)性

討 論

PTC是甲狀腺癌中最常見的一種，其總體預(yù)后良好，患者術(shù)后10年平均生存率為93%［6］。二維超聲可區(qū)分囊性結(jié)節(jié)與實(shí)性結(jié)節(jié)，能觀察結(jié)節(jié)形態(tài)，但其準(zhǔn)確鑒別良惡性結(jié)節(jié)仍有局限［7］。組織彈性是評估惡性腫瘤風(fēng)險(xiǎn)的一項(xiàng)重要指標(biāo)，超聲彈性成像可以估測組織彈性，并比較不同組織的硬度。與軟結(jié)節(jié)相比，硬結(jié)節(jié)在施加壓力時(shí)不易變形（即彈性較?。Ｅc良性結(jié)節(jié)比較，惡性結(jié)節(jié)較硬，故其彈性較低。因此，超聲彈性成像不僅可提供常規(guī)超聲的圖像特征，還能通過測組織彈性對甲狀腺結(jié)節(jié)的良惡性進(jìn)行鑒別診斷。

本研究結(jié)果顯示，PTC組彈性評分、SR均高于良性腫瘤組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），導(dǎo)致這一結(jié)果的最重要因素是結(jié)節(jié)中基質(zhì)成分不同。研究［1］表明，基質(zhì)中的膠原蛋白越多，SR越高。PTC中具有侵襲性行為的腫瘤細(xì)胞會導(dǎo)致更復(fù)雜的基質(zhì)反應(yīng)，而基質(zhì)反應(yīng)會導(dǎo)致膠原蛋白重構(gòu)，將正常的柔性纖維轉(zhuǎn)變?yōu)楦唢L(fēng)險(xiǎn)的硬質(zhì)對齊的膠原蛋白，可能使結(jié)節(jié)較硬。與PTC相比，甲狀腺腺瘤和結(jié)節(jié)性甲狀腺腫基質(zhì)中的膠原蛋白表達(dá)少，且大多良性結(jié)節(jié)生長緩慢，組織細(xì)胞無侵襲性，故基質(zhì)反應(yīng)弱，結(jié)節(jié)較軟。另一原因?yàn)镻TC可以包含許多膠原蛋白軸，可能使結(jié)節(jié)變硬。另外，鈣化也是彈性成像的重要影響因素，在具有不同鈣化類型的PTC中，存在基質(zhì)鈣化結(jié)節(jié)的SR更高。

本研究結(jié)果還顯示，PTC組與良性腫瘤組的相關(guān)增殖基因表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。PDCD4與腫瘤發(fā)生和進(jìn)展相關(guān)，在肺癌小鼠模型中，PDCD4的升高可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制細(xì)胞增殖和腫瘤血管生成［8］。另有研究［9］表明，腫瘤抑制蛋白PDCD4通過與翻譯起始因子4A結(jié)合，抑制其RNA解旋酶活性，從而抑制蛋白的翻譯。表明PDCD4作為一種腫瘤抑制基因，在PTC的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮抑制作用。同樣，EGCG是綠茶中含量最豐富、最具生物活性的兒茶素，可抑制多種類型癌細(xì)胞的生長、轉(zhuǎn)移、侵襲和誘導(dǎo)凋亡，能抑制人PTC細(xì)胞株的增殖和活性［10］。本研究結(jié)果證實(shí)了PDCD4和EGCG在PTC中呈低表達(dá)。相反，TPX2屬于一種微管相關(guān)蛋白，其表達(dá)水平可提示PTC細(xì)胞的增殖能力，在一定程度上反映細(xì)胞分化與凋亡的失衡，進(jìn)一步促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展；此外，TPX2也能抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡通路，使腫瘤細(xì)胞的凋亡受阻。本研究結(jié)果也證實(shí)TPX2在PTC中呈高表達(dá)。

本研究還對PTC患者彈性評分、SR與PDCD4、EGCG、TPX2表達(dá)的相關(guān)性進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)彈性評分、SR與PDCD4、EGCG表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)，與TPX2表達(dá)均呈正相關(guān)（均P＜0.05），說明PTC彈性評分、SR與甲狀腺結(jié)節(jié)的惡性增殖具有一定關(guān)系。因此，通過測量PTC的彈性評分和SR可在一定程度上反映細(xì)胞惡性增殖的生物學(xué)行為，進(jìn)一步說明超聲彈性成像對甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性的鑒別診斷具有一定價(jià)值。

本研究局限性：①僅選取甲狀腺良惡性結(jié)節(jié)的相關(guān)增殖基因；②樣本量較少，今后需增加樣本量及其他相關(guān)指標(biāo)進(jìn)一步分析。

綜上所述，PTC與甲狀腺良性腫瘤的彈性評分和SR有顯著差異，PTC彈性評分和SR與PDCD4、EGCG、TPX2的表達(dá)均相關(guān)，可在一定程度上反映PTC的惡性生物學(xué)行為，對臨床鑒別診斷甲狀腺結(jié)節(jié)良惡性有重要價(jià)值。