李慶余, 于強(qiáng), 王義菊, 牟紅梅, 姜福東, 李元軍
(煙臺市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,山東 煙臺 265500)
由鏈格孢屬真菌侵染引起的梨黑斑病是梨樹主要的病害之一,在我國少數(shù)栽培砂梨和西洋梨的產(chǎn)區(qū)發(fā)生嚴(yán)重。梨黑斑病主要為害梨樹葉片、新梢和果實(shí),引起梨樹早期落葉和大量病果,給梨農(nóng)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]。目前,防治梨黑斑病的方法仍然是化學(xué)藥劑防控為主,長期使用化學(xué)藥劑易導(dǎo)致病原菌的抗藥性增強(qiáng),且污染環(huán)境[2]。要從根本上解決黑斑病的為害,需要篩選出品質(zhì)優(yōu)良的抗性資源,通過雜交和定向改良育種的方式,選育出優(yōu)質(zhì)抗病品種。近年來,國內(nèi)梨研究學(xué)者關(guān)于不同梨品種抗黑斑病的研究報道較多,篩選出了一批高抗黑斑病的品種,但鑒定主要集中在砂梨品種上,西洋梨品種鑒定的數(shù)量較少,不能系統(tǒng)反映西洋梨品種對黑斑病的抗性[3-8]。煙臺農(nóng)科院依托國家梨產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系煙臺綜合試驗(yàn)站、山東省良種工程項(xiàng)目,收集保存以西洋梨為主的種質(zhì)資源96個,通過對種質(zhì)資源圃葉片黑斑病田間自然發(fā)病情況的調(diào)查,期望篩選出優(yōu)良的抗性種質(zhì)資源,為下一步抗病育種提供基礎(chǔ)。
試驗(yàn)在煙臺農(nóng)科院種質(zhì)資源圃進(jìn)行。供試品種96份,于2009年在黃金梨、豐水梨、綠寶石梨樹上高接改換而來,株行距為2 m×4 m,疏散分層形管理。2019年7月調(diào)查,每品種選3株樹,在樹冠的東、南、西、北四個方向隨機(jī)取樣調(diào)查病葉率和病情指數(shù),每株樹調(diào)查100張葉片。
病情指數(shù)的計(jì)算和分級標(biāo)準(zhǔn)參照梨種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)[9]。0級為無病斑;1級為病斑占葉面積的10%以下;3級為病斑占葉面積的10%~25%;5級為病斑占葉面積的26%~40%;7級為病斑占葉面積的41%~65%;9級為病斑占葉面積的65%以上。根據(jù)受害級別,計(jì)算黑斑病病情指數(shù)。
式中:VBI為黑斑病病情指數(shù);xi為各級病葉代表級數(shù);ni為各級病葉數(shù);N為總?cè)~數(shù)。
由表1可以看出,供試96份品種間葉片發(fā)病率在0~100%之間,其中保利阿斯卡、盤克漢姆、巴梨、長把梨、雪花、早酥、金水1號、黃金、豐水、安梨、伏香等53份品種未發(fā)現(xiàn)黑斑病葉片;小伏洋梨、茄梨、金花4號、火把、紅香酥等22份品種葉片發(fā)病率較低,都在30%以下;考密斯、哈依蘭德、萊克拉克、李克特、海蘭特、阿巴特、威寧大黃7份品種葉片發(fā)病率較高,都在90%以上。表明96份梨品種梨黑斑病葉片發(fā)病率差異較大。按照病情指數(shù)標(biāo)準(zhǔn),保利阿斯卡、盤克漢姆、巴梨、長把梨、雪花、早酥、金水1號、黃金、豐水、安梨、伏香等85份梨品種病情指數(shù)都在10以下,只有考密斯、哈依蘭德、海蘭特、李克特、萊克拉克、威寧大黃等11份品種病情指數(shù)在10以上。表明96份梨品種對黑斑病的抗性表現(xiàn)不一。
表1 梨資源圃品種黑斑病的發(fā)病情況
對96份梨品種資源采用歐氏距離聚類平均法連鎖聚類分析。由圖1可以看出,當(dāng)連鎖距離為9.13時,被分為抗梨黑斑病、中抗梨黑斑病、感梨黑斑病、高感梨黑斑病4個類群。萊克拉克、威寧大黃聚為一類,病情指數(shù)最高,葉片發(fā)病率為100%,為高感梨黑斑病品種;海蘭特、阿巴特、李克特、考密斯、哈依蘭德聚為一類,病情指數(shù)24.75~32.32,葉片發(fā)病率90%以上,為感梨黑斑病品種;大巴梨、凱斯凱德、路易斯、秋洋梨、青松、綠云、spalding、保9、貴妃、碭山酥梨聚為一類,病情指數(shù)6.67~15.70,葉片發(fā)病率37.50%~73.64%,為中抗梨黑斑病品種;剩余保利阿斯卡、盤克漢姆、巴梨、長把梨、雪花、早酥、金水1號、黃金、豐水、安梨、伏香等79份梨品種聚為一類,病情指數(shù)在5.44以下,葉片發(fā)病率41.67%以下,為抗梨黑斑病品種。
圖1 不同梨品種歐氏距離聚類分析
由圖1、表2可以看出,新疆梨、秋子梨、白梨均被聚類在抗和中抗梨黑斑病品種,可能是本身抗病性較強(qiáng),也可能與調(diào)查品種較少有關(guān);83.3%的砂梨品種屬于抗性品種,尤其是日韓砂梨及近年選育的砂梨品種普遍抗性較強(qiáng),僅威寧大黃等老的砂梨品種抗性較弱;西洋梨抗性品種僅占67.5%,15%屬于感病和高感品種;砂梨抗性整體強(qiáng)于西洋梨;種間雜交品種均被聚類在抗梨黑斑病品種上,因此種間雜交是一個獲得高抗黑斑病品種的途徑。
表2 不同種類梨對黑斑病的田間抗性比較
96份梨品種黑斑病葉片發(fā)病率和病情指數(shù)差異較大。采用歐氏距離聚類平均法連鎖聚類分析被分為抗梨黑斑病、中抗梨黑斑病、感梨黑斑病、高感梨黑斑病4個類群。其中,萊克拉克、威寧大黃為高感梨黑斑病品種;海蘭特、阿巴特、李克特、考密斯、哈依蘭德為感梨黑斑病品種;大巴梨、凱斯凱德、路易斯、秋洋梨、青松、綠云、spalding、保9、貴妃、碭山酥梨為中抗梨黑斑病品種;保利阿斯卡、盤克漢姆、巴梨、長把梨、雪花、早酥、金水1號、黃金、豐水、安梨、伏香等79份梨品種為抗梨黑斑病品種。不同種類梨對黑斑病抗性也存在差異,砂梨整體抗性強(qiáng)于西洋梨,種間雜交品種表現(xiàn)出對黑斑病較高的抗性,因此,種間雜交是一個獲得高抗黑斑病品種的途徑。