不同分子量茯苓多糖抑制酪氨酸酶活性及抗炎功效的研究*

劉曉英，馬詩經(jīng)，韓 萍，林 麗，杜志云，車 飆

[1.無限極（中國）有限公司，廣東 廣州 510000；2.佛山市康伲愛倫生物技術(shù)有限公司，廣東 佛山 528200；3.廣東工業(yè)大學(xué)生物醫(yī)藥學(xué)院，廣東 廣州 510006]

作為中藥使用的茯苓，為多孔菌科（Polyporaceae） 真菌茯苓 [Poria cocos(Schw.)Wolf]的干燥菌核，常腐生或寄生于松科植物馬尾松或赤松根部，也被稱為松苓、茯兔、松柏玉等[1]，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品，也是我國藥食兩用的傳統(tǒng)中藥材，國內(nèi)云南、安徽、湖北等為其主要產(chǎn)地[2]。茯苓味甘淡，性平，歸心脾經(jīng)，具有利水祛濕、健脾安神的功效[3]。研究發(fā)現(xiàn)，茯苓中富含多種化學(xué)成分，主要有三萜類、多糖類、甾醇類、氨基酸及微量元素等，其中三萜類和多糖類化合物為茯苓的主要活性成分[4]?，F(xiàn)代藥理學(xué)表明，茯苓具有增強(qiáng)免疫力[5]、降血糖、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、抗炎等功效[6-8]，被廣泛應(yīng)用于藥品、食品及保健品領(lǐng)域中。皮膚色素主要包括黑色素、胡蘿卜素、褐色素等，目前皮膚美白主要是通過抑制黑色素的形成[9]。此外，氧自由基、皮膚炎癥及損傷也會(huì)導(dǎo)致皮膚色素增加或沉著[10]，因此抑制黑色素、褐色素的生成，以及消除皮膚自由基與炎癥是美白膚質(zhì)或降低色素沉著的有效途徑。目前應(yīng)用的美白功效成分主要包括煙酰胺、熊果苷、光甘草定、抗壞血酸、水飛薊素、白藜蘆醇等，盡管以上成分對(duì)黑色素的生成、轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝等途徑具有良好抑制作用，但存在添加量大、水溶性差以及價(jià)格昂貴等問題。因此，開發(fā)天然來源、功效明確、價(jià)格低、水溶性良好的美白因子具有重要意義。

近年來，研究揭示了茯苓中三萜類成分對(duì)酪氨酸酶具有良好的抑制作用[11-12]，而逐漸被用于開發(fā)美白護(hù)膚類化妝品，關(guān)于茯苓多糖在美白方面的功效及其作用機(jī)制研究比較少。因此，本研究對(duì)茯苓采用超微粉碎處理，再進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)常用的熱水浸提工藝，以適宜的溫度使得茯苓多糖充分溶出，進(jìn)一步將茯苓粗多糖通過醇沉、膜分離方法得到純化后茯苓多糖，并測定抗氧化活性、抗炎、抑制酪氨酸酶活性，分析不同截留相對(duì)分子質(zhì)量所得茯苓多糖對(duì)自由基清除、抑制炎癥、抑制酪氨酸酶活性的影響，以期為茯苓多糖在抗氧化、美白、消除炎癥護(hù)膚方面的研究開發(fā)提供數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1 主要材料、試劑與儀器

茯苓，佛山市康伲愛倫生物技術(shù)有限公司；葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品（純度＞99%），阿拉?。ˋladdin） 試劑公司；酪氨酸酶、二苯代苦味肼基自由基（DPPH）、脂多糖（LPS），上海西格瑪有限公司；無水乙醇、濃硫酸、苯酚等均為分析純，廣州化學(xué)試劑廠；蒸餾水，實(shí)驗(yàn)室自制。

酶標(biāo)儀1510，美國Thermo Fisher公司；UV-3600 Plus紫外可見光分光光度計(jì)，SHIMADZU公司；超微粉碎機(jī)WZJ-6B，濟(jì)南倍力粉體工程技術(shù)有限公司；電熱恒溫水浴鍋DK-S22，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；離心機(jī)Z326K，德國Hermle公司；數(shù)控超聲波清洗器KQ3200DE，昆山市超聲儀器有限公司；高速萬能粉碎機(jī)DYF-400C，上海利聞科學(xué)儀器有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 不同分子量茯苓多糖的制備

取茯苓干制品置于60℃烘箱干燥20 min后，經(jīng)高速萬能粉碎機(jī)粉碎并過100目篩，然后用超微粉碎機(jī)進(jìn)行超微粉碎10 min，得到茯苓超微粉。參照參考文獻(xiàn)[13]的方法并進(jìn)行調(diào)整，稱取1 kg茯苓超微粉加入水，料液比為1∶30，浸泡20 min后100℃下提取2 h，經(jīng)300目過濾，濾液備用。濾渣再加入水，料液比為1∶15，按上述條件重復(fù)提取1次，合并提取液經(jīng)300目過濾后，65℃減壓濃縮至體積的1/10。經(jīng)5 000 r·min-1離心10 min，取上層清液加入4倍體積的95%乙醇進(jìn)行沉淀后減壓抽濾，沉淀物依次用無水乙醇、丙酮洗滌3次。將沉淀物冷凍干燥（-50℃，48 h）成粉末后，按照文獻(xiàn)方法進(jìn)行脫蛋白處理5次[14]，再經(jīng)冷凍干燥（-50℃，48 h），得茯苓多糖凍干粉（記為PW-P1），測定粗多糖含量。

采用醇沉、聯(lián)合膜分離工藝制備茯苓多糖[15-16]。取離心后的茯苓提取液，在0.1 MPa、30℃、截留相對(duì)分子質(zhì)量為5 kDa、10 kDa超濾膜條件下進(jìn)行超濾，分別收集截留相對(duì)分子質(zhì)量為5 kDa、10 kDa的茯苓提取液，并在65℃濃縮至提取液體積的1/10，濃縮液中加入4倍體積的無水乙醇，放置過夜后，5 000 r·min-1離心10 min，棄去上清液得沉淀，并按1.2.1項(xiàng)下方法脫蛋白后冷凍干燥（-50℃，48 h）得茯苓多糖凍干粉，分別將截留相對(duì)分子質(zhì)量為5 kDa、10 kDa超濾膜分離所得的茯苓多糖將記為PW-P2、PW-P3，進(jìn)行體外活性測試。

1.2.2 茯苓多糖含量測定

1） 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

采用苯酚硫酸法測定[17]，稱取適量葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品，置于105℃烘箱中烘至恒重后，稱取100 mg葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品，在100 mL容量瓶中用蒸餾水定容至刻度，搖勻備用。精密吸取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0、0.2 mL、0.4 mL、0.6 mL、0.8 mL、1.0 mL，置于 10 mL容量瓶中，加蒸餾水定容，配制成含葡萄糖0、0.02 mg·mL-1、0.04 mg·mL-1、0.06 mg·mL-1、0.08 mg·mL-1、0.10 mg·mL-1的系列葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別移取上述系列葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液各1 mL，置于10 mL具塞玻璃試管中，依次加入0.5 mL的5%苯酚溶液，2.5 mL濃硫酸搖勻，靜置5 min，90℃水浴加熱20 min，然后冰浴冷卻至室溫。另取1 mL蒸餾水，按照上述操作，作為空白對(duì)照。將上述溶液分別在490 nm波長處測定吸光度值，以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2）茯苓多糖含量的測定

取茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3溶于水中，并稀釋至一定質(zhì)量濃度，吸取1 mL于10 mL具塞試管中，按照1.2.2中1） 項(xiàng)的步驟進(jìn)行操作，測定吸光度值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出多糖濃度，按以下公式計(jì)算茯苓多糖含量（X，%）：

式中：C為測得茯苓多糖的濃度（mg·mL-1）；V為提取液的體積（mL）；n為稀釋倍數(shù)；0.9為葡萄糖換算成多糖的正交系數(shù)。

1.2.3 茯苓多糖DPPH自由基清除能力的測定

參照參考文獻(xiàn)[18]方法，測定茯苓多糖PWP1、PW-P2、PW-P3的DPPH自由基清除能力。分別取 1 mL 濃度為 0.01 mg·mL-1、0.05 mg·mL-1、0.10 mg·mL-1、 0.20 mg·mL-1、 0.40 mg·mL-1、 0.80 mg·mL-1的PW-P1、PW-P2、PW-P3溶液于試管中，分別加入0.1 mmol·L-1DPPH溶液1.0 mL，充分混勻后避光反應(yīng)20 min，在517 nm處測定吸光度值A(chǔ)i。VC做為陽性對(duì)照，對(duì)照組以無水乙醇代替DPPH溶液，測定吸光度值A(chǔ)j?？瞻捉M以蒸餾水代替多糖溶液，測定吸光度值為A0。DPPH自由基清除率（C，%）的計(jì)算公式為：

式中：A0為空白組吸光度值；Ai為茯苓多糖吸光度值；Aj為對(duì)照組吸光度值。

1.2.4 茯苓多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞的作用

測定茯苓多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞的作用[19-20]。小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7在含有10%FBS胎牛血清、1%雙抗（鏈霉素100 mg·mL-1、青霉素100 U·mL-1）和90%DMEM完全培養(yǎng)基中培養(yǎng)。待細(xì)胞長滿培養(yǎng)瓶后，按體積1∶3的稀釋比對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)。在 96孔板中加入 8×103個(gè)/孔對(duì)數(shù)期生長的RAW264.7細(xì)胞，37℃、5%CO2條件下孵育過夜。加入濃度為 0～100 μg·mL-1的茯苓多糖 PW-P1、PWP2、PW-P3處理24 h，每孔中加入5 mg·mL-1MTT溶液20 μL，培養(yǎng)箱內(nèi)避光孵育4 h后棄上層培養(yǎng)基，加入100 μL DMSO解甲醛染料，避光震蕩10 min，用酶標(biāo)儀于492 nm處測定吸光度值。

1.2.5 茯苓多糖對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞NO分泌量的影響

細(xì)胞株用內(nèi)含10%FBS的DMEM高糖培養(yǎng)基于37℃、5%CO2恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，細(xì)胞呈對(duì)數(shù)生長，每24小時(shí)更換培養(yǎng)基，細(xì)胞生長至60%～70%傳代。細(xì)胞分組及干預(yù)細(xì)胞分為12組，分別為空白組、LPS模型組、PW-P1組、PW-P2組、PW-P3組。取對(duì)數(shù)生長期的RAW264.7細(xì)胞株，以2×106個(gè)/mL的密度接種于6孔板上，培養(yǎng)箱中孵育24 h后給藥?？瞻捉M加入完全培養(yǎng)基，LPS組加入使最終質(zhì)量濃度為2 μg·mL-1的LPS，給藥組分別加入使最終質(zhì)量濃度為 50 μg·mL-1、250 μg·mL-1、500 μg·mL-1、1 000 μg·mL-1的樣品和 2 μg·mL-1的 LPS，使每組的總體積為3 mL，并放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)24 h。

收集細(xì)胞上清液，嚴(yán)格按照NO檢測試劑盒說明書進(jìn)行測定。采用完全培養(yǎng)基作為稀釋液稀釋原始濃度為1 mol·L-1的標(biāo)準(zhǔn)品溶液NaNO2。按照150 μL/孔，在96孔板中加入各濃度的對(duì)照品溶液及樣品50 μL，Griess Reagent Ⅰ液及Ⅱ液各 50 μL，于 37℃培養(yǎng)箱中孵育10 min。振蕩器上震蕩5 min后于酶標(biāo)儀540 nm處測定記錄各孔吸光度值。

1.2.6 茯苓多糖對(duì)酪氨酸酶活性的抑制作用測試

研究報(bào)道酪氨酸酶可以催化L-多巴生成多巴色素，多巴色素在波長475 nm處具有最大吸收值。參照參考文獻(xiàn)[12]的方法并略作調(diào)整，酪氨酸酶活性抑制試驗(yàn)利用L-酪氨酸作為底物進(jìn)行催化反應(yīng)，用比色法于475 nm處測定吸光度變化。選擇抑制反應(yīng)試驗(yàn)條件為：溫度37℃，水浴恒溫10 min，pH6.8，再反應(yīng)時(shí)間10 min，加入L-酪氨酸的濃度為0.6 mmol·mL-1，酶液量為1.0 mL（97 IU·mL-1）。反應(yīng)中不同濃度的樣品溶液 （包括 0.5 mg·mL-1、1.0 mg·mL-1、2.0 mg·mL-1、4.0 mg·mL-1、6.0 mg·mL-1的茯苓多糖；0.1 mg·mL-1、0.2 mg·mL-1、0.3 mg·mL-1、0.4 mg·mL-1、0.5 mg·mL-1的 VC）、二甲亞砜 （DMSO）、磷酸緩沖液（PBS）、酪氨酸酶液及L-酪氨酸的添加量見表1，各比色管分別編號(hào)為1號(hào)、2號(hào)、3號(hào)、4號(hào)。將水浴鍋內(nèi)的比色管取出，快速測定其在475 nm處的吸光度值。重復(fù)以上步驟，進(jìn)行3次平行實(shí)驗(yàn)，求得平均值，按以下公式計(jì)算酪氨酸酶酶活的抑制率（IR，%）：

表1 待測液的組成Tab.1 Composition of samples prepared for test of tyrosinase activity

式中：A1為1號(hào)比色管溶液的吸光度值；A2為2號(hào)比色管溶液的吸光度值；A3為2號(hào)比色管溶液的吸光度值；A4為2號(hào)比色管溶液的吸光度值。

2 結(jié)果與分析

2.1 茯苓多糖的含量測定

以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液濃度（mg·mL-1）為橫坐標(biāo)，吸光度值（Abs）為縱坐標(biāo)，繪制葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

圖1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve of glucose

得到的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液線性回歸方程為：

回歸方程的相關(guān)系數(shù)R2為0.999 8，表明葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品在0～0.10 mg·mL-1內(nèi)濃度與吸光度值呈良好的線性關(guān)系。

進(jìn)一步測定茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3的粗多糖含量，見表2。

表2 茯苓多糖的粗含量Tab.2 The content of Poria Cocos(Schw.)Wolf polysaccharides

如表2所示，茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PWP3的粗多糖含量分別為96.46%、93.18%、92.25%。

2.2 茯苓多糖的DPPH自由基清除率

采用醇沉、聯(lián)合膜分離技術(shù)經(jīng)純化得到不同分子量范圍的茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3，進(jìn)一步通過體外抗氧化測試，評(píng)價(jià)其對(duì)DPPH自由基清除效果，并與VC進(jìn)行對(duì)照，對(duì)DPPH自由基清除率結(jié)果見圖2。

圖2 茯苓多糖的DPPH自由基清除率Fig.2 DPPH radical scavenging rate of Poria cocos polysaccharides

如圖2所示，在設(shè)定的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，不同分子量的茯苓多糖對(duì)DPPH自由基的清除率呈現(xiàn)出濃度依賴性，PW-P1、PW-P2、PW-P3在質(zhì)量濃度為 0.01 mg·mL-1～0.40 mg·mL-1對(duì) DPPH 自由基清除率范圍分別為3.65%～29.75%、5.92%～31.44%、7.39%～62.74%。質(zhì)量濃度為0.8 mg·mL-1時(shí)，對(duì)DPPH自由基清除率分別為39.35%、49.88%、62.74%。計(jì)算得到 PW-P3的 IC50為 0.45 mg·mL-1，而 PW-P1與PW-P2的IC50則大于0.8 mg·mL-1。在同樣濃度下，VC對(duì)DPPH自由基清除率高于PW-P1、PW-P2、PW-P3，其IC50為0.14 mg·mL-1。從以上抗氧化結(jié)果分析，對(duì)不同分離工藝獲得的茯苓多糖抗氧化功效而言，截留相對(duì)分子質(zhì)量為10 kDa的PW-P3抗氧化功效優(yōu)于截留相對(duì)分子質(zhì)量為5 kDa的PW-P2、醇沉分離的PW-P1，說明不同分離工藝影響茯苓多糖的抗氧化活性，可能與其分子量的大小有關(guān)。

2.3 茯苓多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性的影響

茯苓多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性影響的結(jié)果見表3。

表3 茯苓多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性的影響Tab.3 The effect of Poria cocos polysaccharides on RAW264.7 cell viability

如表3所示，不同濃度的茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3處理RAW 264.7細(xì)胞24 h后，使用MTT法檢測細(xì)胞活性發(fā)現(xiàn)，在濃度為1 μg·mL-1～1 000 μg·mL-1茯苓多糖作用下，RAW264.7 細(xì)胞活性均保持在93%以上。與對(duì)照組的細(xì)胞活性相比，不同工藝分離的茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3在上述劑量范圍內(nèi)對(duì)RAW264.7細(xì)胞增殖沒有明顯的抑制效果，后續(xù)采用該系列濃度進(jìn)行抑制RAW264.7細(xì)胞NO分泌的測試。

2.4 茯苓多糖對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞NO分泌的抑制作用

細(xì)菌、真菌、組織外傷、紫外線、外源性化學(xué)物質(zhì)等都有可能誘發(fā)機(jī)體炎癥，脂多糖LPS（lipopolysaccharide，LPS） 是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外壁的組成成分，作用于機(jī)體時(shí)容易引起強(qiáng)烈炎癥反應(yīng)。LPS誘發(fā)炎癥發(fā)生過程，由NO合酶（nitric oxide synthase，NOS） 催化 L-精氨酸 （L-Argine） 而生成一氧化氮（nitric oxide，NO），被LPS激活的巨噬細(xì)胞可以大量分泌NO，導(dǎo)致周圍組織的損傷[21]。采用濃度為 50 μg·mL-1～1 000 μg·mL-1的茯苓多糖 PW-P1、PW-P2、PW-P3 作用于濃度為 2 μg·mL-1LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞，考察不同分子量的茯苓多糖對(duì)RAW264.7細(xì)胞分泌NO的影響，結(jié)果詳見表4。

表4 茯苓多糖對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞NO分泌的抑制作用Tab.4 Inhibitory effect of Poria cocos polysaccharides on NO secretion induced by LPS in RAW264.7 cells

由表4可知，與空白組相比，LPS干預(yù)后的RAW264.7細(xì)胞模型組分泌的NO顯著升高（P＜0.001），說明了在此濃度下的LPS對(duì)RAW264.7細(xì)胞造成了顯著的炎癥性反應(yīng)。與模型組相比，茯苓多糖 PW-P2、PW-P3 在濃度為 50 μg·mL-1～1 000 μg·mL-1對(duì)LPS誘導(dǎo)NO的分泌具有顯著的抑制作用（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001），茯苓多糖 PW-P1 則在濃度為 250 μg·mL-1～1 000 μg·mL-1時(shí)能顯著降低NO的分泌 （P＜0.05，P＜0.01），且呈濃度依賴性。與PW-P1相比，經(jīng)過超濾截留收集所得相對(duì)分子量較為集中的茯苓多糖PW-P2、PW-P3，在低濃度時(shí)顯效抑制LPS誘導(dǎo)產(chǎn)生NO，初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果與劉曉菲等[22]采用經(jīng)純化后羧甲基茯苓多糖對(duì)對(duì)脂多糖（LPS） 誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7有一定抑制作用的結(jié)果一致。

2.5 茯苓多糖對(duì)酪氨酸酶活性的影響

在人體皮膚黑色素合成的過程中，酪氨酸酶及其活性起著關(guān)鍵作用[23]，目前評(píng)價(jià)中草藥提取物美白功效的體外常用方法為抑制酪氨酸酶活性試驗(yàn)[24]。研究證實(shí)茯苓中三萜類物質(zhì)對(duì)酪氨酸酶具有抑制作用[11-12]，但茯苓多糖對(duì)酪氨酸酶的活性影響卻鮮有報(bào)道。為了分析茯苓多糖對(duì)酪氨酸酶活性的影響，采用濃度為 0.5 mg·mL-1～6.0 mg·mL-1茯苓多糖PWP1、PW-P2、PW-P3，以及濃度為 0.1 mg·mL-1～0.5 mg·mL-1VC測定酪氨酸酶的抑制率，結(jié)果見表5。

表5 茯苓多糖對(duì)酪氨酸酶的抑制率Tab.5 Tyrosinase inhibition rate of Poria cocos polysaccharides

由表5可知，在濃度0.5 mg·mL-1～6.0 mg·mL-1范圍內(nèi)的茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3對(duì)酪氨酸酶活性有一定的抑制作用，并且隨著質(zhì)量濃度的增加抑制作用逐漸增強(qiáng)，在濃度為6.0 mg·mL-1時(shí)，茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3對(duì)酪氨酸酶活性的最大抑制率分別為24.21%、35.39%、38.11%，也進(jìn)一步說明不同分離工藝影響茯苓多糖的抑制酪氨酸酶活性，其可能與茯苓多糖的分子量大小有關(guān)。VC在濃度為0.5 mg·mL-1時(shí)對(duì)酪氨酸酶活性抑制率為69.47%，其IC50為0.39 mg·mL-1。盡管在設(shè)定濃度范圍內(nèi)，茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3均未達(dá)到酪氨酸酶IC50抑制率，但仍能夠有效地抑制酪氨酸酶活性，由此可見，茯苓多糖PW-P1、PWP2、PW-P3可作為一種天然美白活性成分應(yīng)用于美白類化妝品。

3 結(jié)論

本研究采用超微粉碎預(yù)處理熱水浸提法提取茯苓多糖，通過醇沉、聯(lián)合膜分離的不同分離方法制備茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3，其粗多糖含量分別為96.46%、93.18%、92.25%。進(jìn)一步測定茯苓多糖PW-P1、PW-P2、PW-P3的DPPH自由基清除率、LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞NO分泌的抑制率及酪氨酸酶活性抑制率，均呈現(xiàn)出良好的量效關(guān)系，同時(shí)試驗(yàn)初步證實(shí)在此工藝條件下制得的茯苓多糖，具有一定的抗炎及抑制酪氨酸酶的活性，且與茯苓多糖不同分子量分布有關(guān)，而茯苓多糖的抗炎、美白活性及其作用機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。這為茯苓多糖的體內(nèi)抗炎及美白研究提供了理論依據(jù)，為茯苓的精深加工應(yīng)用提供了參考。