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    肺心病患者肺部感染的病原菌分布特征及IL-6基因-572C/G多態(tài)性的研究

    2021-10-11 02:51:20肖月梅董錦華于波
    貴州醫(yī)藥 2021年9期
    關(guān)鍵詞:耐藥

    肖月梅 董錦華 于波

    (1.榆林市第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科,陜西 榆林 719000;2.寶雞市陳倉醫(yī)院內(nèi)科,陜西 寶雞 721300)

    慢性肺源性心臟病簡稱肺心病,患者由于病程長,導(dǎo)致肺臟結(jié)構(gòu)和生理功能退行性改變,呼吸道免疫防御功能及機體抵抗力下降,易并發(fā)肺部感染[1]。近年來,由于抗生素的大范圍應(yīng)用,耐藥菌株逐年增多,增加肺部感染的治療難度。研究[2]發(fā)現(xiàn),IL-6基因多態(tài)性影響血清IL-6水平,與慢性阻塞性肺疾病、肺結(jié)核等肺部感染性疾病以及全身炎性反應(yīng)綜合征的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。其中臨床上研究最多的是IL-6基因-572C/G多態(tài)性,但其在肺心病合并肺部感染患者中的研究鮮有發(fā)表。本研究主要探討肺心病患者肺部感染的病原菌分布特征,分析IL-6基因-572C/G多態(tài)性與肺部感染的相關(guān)性。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 2018年1月至2019年4月我院收治的肺心病住院患者80例作為研究對象。根據(jù)是否合并肺部感染,將患者分為肺部感染組31例和非感染組49例。其中肺部感染組男20例、女11例,年齡42~83歲,平均(58.3±3.5)歲,病程7~24年,平均(10.6±3.4)年。非感染組男31例、女18例,年齡44~82歲,平均(58.1±3.7)歲,病程8~23年,平均(10.4±3.2)年。納入患者病情均符合中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會(2011年)制定的肺心病診斷標(biāo)準(zhǔn)[3],肺部感染診斷參照美國胸科學(xué)會與感染病學(xué)會2005年制定的《醫(yī)院獲得性肺炎治療指南》[4]。已排除患有腫瘤、呼吸道以外部位感染、合并其他嚴(yán)重內(nèi)科疾病的患者。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性?;颊呒凹覍倬橥狻?/p>

    1.2方法 兩組均抽取5 mL空腹外周靜脈血,置于含EDTA 的抗凝管中,置于-80℃保存待檢?;颊叱科鹗褂眉尤?%雙氧水的生理鹽水漱口后,用力咳痰,取痰液樣本置于無菌容器保存。取部分痰液樣本,行細(xì)菌接種及分離培養(yǎng),操作按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》(第3版)進行,采用Phoenix TM全自動微生物鑒定系統(tǒng)(BD公司)進行細(xì)菌鑒定,采用紙片擴散法(K-B法)行藥敏試驗,參照美國臨床試驗標(biāo)準(zhǔn)研究所(2016版)判定標(biāo)準(zhǔn)。取部分血液樣本,離心取上清,采用Elisa法檢測血清IL-6水平,試劑盒購自美國RD工程有限公司。取部分血液樣本,使用人全血DNA 提取試劑盒提取全血基因組,試劑盒購自無錫百泰克生物技術(shù)有限公司。IL-6基因-572C/G多態(tài)性采用PCR-RFLP檢測。取5μL PCR擴增產(chǎn)物,過柱純化,37℃MbiI內(nèi)切酶消化4 h,反應(yīng)結(jié)束后行2%瓊脂糖凝膠電泳,根據(jù)電泳結(jié)果判斷基因型。PCR擴增條件見表1。

    表1 PCR擴增條件

    1.3統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析,采用WH0NET5.6軟件行細(xì)菌耐藥分析,正態(tài)計量數(shù)據(jù)用(Mean±SD)表示,行t檢驗,計數(shù)資料采用n,%,行χ2檢驗,采用Hardy-Weinberg平衡檢驗基因多態(tài)性頻率分布,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1肺部感染病原菌分布及構(gòu)成比 31例肺心病合并肺部感染患者共檢出病原菌46株,其中,革蘭陰性菌32株(69.57%),主要為銅綠假單胞菌;革蘭陽性菌14株(30.43%),主要為金黃色葡萄球菌。見表2。

    表2 肺部感染病原菌分布及構(gòu)成比[n(%)]

    2.2主要病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析銅綠假單胞菌對左氧氟沙星最耐藥、對亞胺培南最敏感,金黃色葡萄球菌對青霉素G最耐藥、對萬古霉素最敏感。見表3。

    表3 主要病原菌對常用抗菌藥物的耐藥性分析(n,%)

    2.3血清IL-6水平比較 肺部感染組的血清IL-6水平(291.35±86.42)ng/L顯著高于非感染組的(106.28±61.89)ng/L(t=11.152,P<0.05)。

    2.4IL-6基因-572C/G位點基因型分布比較 經(jīng)Hardy-Weinberg平衡檢驗,兩組群體基因遺傳平衡,樣本資料具有群體代表性(P=0.734、0.691)。兩組的CC、CG、GG基因型頻率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表4。

    表4 IL-6基因-572C/G位點基因型分布比較[n(%)]

    2.5IL-6基因-572C/G位點基因型頻率分布比較 的C/G等位基因頻率分別66.13%(41例)、33.87%(21例),與非感染組的65.31%(64例)、34.69%(34例)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.011,P>0.05)。

    3 討 論

    肺心病患者由于病程持續(xù)時間長,呼吸道黏膜防御功能下降,導(dǎo)致全身系統(tǒng)發(fā)生退行性病變,機體抵抗力下降,易發(fā)生肺部感染[5]。本研究中,31例肺部感染組共檢出病原菌46株,其中,革蘭陰性菌32株(69.57%),主要為銅綠假單胞菌;革蘭陽性菌14株(30.43%),主要為金黃色葡萄球菌;銅綠假單胞菌對左氧氟沙星最耐藥、對亞胺培南最敏感,金黃色葡萄球菌對青霉素G最耐藥、對萬古霉素最敏感。細(xì)菌產(chǎn)生抗生素耐藥性的主要機理為誘導(dǎo)產(chǎn)生修飾酶,改變抗生素靶位及胞漿膜通透性,傳播耐藥基因等??股厥褂妙l率增加是細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性的主要原因[6]。肺心病患者由于自身抵抗力下降,易發(fā)反復(fù)感染,抗生素使用頻繁,容易產(chǎn)生耐藥菌。因此,肺心病患者并發(fā)肺部感染時,盡快進行病原學(xué)診斷,根據(jù)藥敏結(jié)果選擇敏感抗生素治療,不僅能保證療效,還有助于減少耐藥菌的產(chǎn)生幾率。

    IL-6是由活化的單核細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等分泌的一類細(xì)胞因子,具有刺激淋巴細(xì)胞增殖、巨核細(xì)胞分化,促進B細(xì)胞分泌免疫球蛋白的功能[7]。IL-6在炎癥急性期作為非特異性炎癥因子參與肺部炎癥反應(yīng)過程。細(xì)菌進入肺部后,其分泌的內(nèi)毒素激活肺部上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞,使IL-1β、IL-6、TNF-α分泌增加[8]。本研究中,肺部感染組的血清IL-6水平顯著高于非感染組(P<0.05),提示IL-6在肺炎感染的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

    研究單個基因多態(tài)性對肺部感染的影響,易受外界環(huán)境、樣本納入方式及數(shù)量、基因突變頻率低等外界因素影響[9]。此外,位于第7號染色體上的IL-6基因,全長5kb,具有5個外顯子及4個內(nèi)含子,IL-6基因多態(tài)性存在區(qū)域主要集中于啟動子區(qū),包括-174 G/C、-373 AnTn、-572 G/C、-597 G/A[10]。上述4個多態(tài)性位點都可能是基因結(jié)合序列,一旦發(fā)生基因突變,均會影響IL-6基因調(diào)控和表達,與多種疾病患者體內(nèi)的IL-6水平特征性升高有關(guān)[11]。本研究中,肺部感染組的CC、CG、GG基因型頻率和C/G等位基因頻率與非感染組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),提示IL-6水平上升可能與IL-6 基因啟動子區(qū)其他位點,以及肺部感染加劇患者體內(nèi)水平炎癥反應(yīng),導(dǎo)致IL-6大量分泌有關(guān)。研究[12]發(fā)現(xiàn),除了IL-6基因-572位點C/G多態(tài)性之外,-174位點多態(tài)性也與炎癥性疾病易感性有關(guān)。因此,本研究具有一定局限性,下一步應(yīng)增加樣本量,聯(lián)合相關(guān)基因同時分析,進一步驗證研究。

    綜上所述,本院肺心病合并肺部感染以革蘭陰性菌為主,對抗菌藥物表現(xiàn)不同程度耐藥性,應(yīng)結(jié)合藥敏試驗結(jié)果選擇抗菌藥物治療。IL-6基因啟動子區(qū)-572C/G基因多態(tài)性可能與肺心病患者肺部感染易感性無關(guān)。

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