支原體感染和抗精子抗體類型對不育癥患者精液質(zhì)量的影響

徐安莉　　張麗蓉　　朱莉　　仇云臨　　張若鵬

[關(guān)鍵詞] 人型支原體;解脲支原體;男性不育;抗精子抗體

[中圖分類號] R256.5? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）16-0019-04

Effects of mycoplasma infection and anti-sperm antibody types on semen quality in infertile patients

XU Anli? ?ZHANG Lirong? ?ZHU Li? ?QIU Yunlin? ?ZHANG Ruopeng

First Affiliated Hospital of Dali University， Dali? ?671000， China

[Abstract] Objective To investigate whether different types of mycoplasma infection have different effects on the types of anti-sperm antibodies in infertile patients， and whether different types of anti-sperm antibodies have different effects on semen quality. Methods A total of 260 male infertility patients treated in the First Affiliated Hospital of Dali University from January to August 2019 were selected. The results of primordia， anti-sperm antibody， routine semen and other tests were sorted out and analyzed. Results The positive rate of IgA anti-sperm antibody in patients infected with Ureaplasma urealyticum was significantly higher than that in patients not infected with Ureaplasma urealyticum. In infertility patients with mycoplasma infection，the forward motility sperm rates and sperm survival rates of patients with positive IgG and IgM type anti-sperm antibodies were significantly lower than those of patients with positive IgA type anti-sperm antibodies. Conclusion The types of anti-sperm antibodies in serum of patients with different types of mycoplasma infection are different， and the effects of different types of anti-sperm antibodies on semen quality are also different.It is very necessary to carry out the detection of mycoplasma infection type and anti-sperm antibody type in clinic.

[Key words] Mycoplasma hominis （Mh）; Ureaplasma urealyticum （UU）; Male infertility; Anti-sperm antibody

支原體是原核生物中個體最小、結(jié)構(gòu)最簡單的一類致病微生物，其可定居于人類生殖道，造成生殖系統(tǒng)感染。目前從生殖道中已分離出的可能與疾病相關(guān)的8種支原體中，人型支原體（Mycoplasma hominis，MH）和解脲支原體（Ureaplasma urealyticum，UU）的感染率最高，與男性不育癥的關(guān)系最為密切[1-2]?？咕涌贵w是導致不育癥的主要免疫性因素之一，其可與不育癥患者的精子結(jié)合，破壞精子的結(jié)構(gòu)和功能，導致患者配偶不能受孕。有研究表明[3-4]，支原體感染和抗精子抗體的產(chǎn)生關(guān)系密切，故為探究支原體感染類型和抗精子抗體類型是否有關(guān)及它們對精液質(zhì)量的影響，本研究對在我科就診的260例男性不育癥患者的檢查結(jié)果進行整理分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1—8月于大理大學第一附屬醫(yī)院因男性不育癥就診的260例患者。不育組納入標準：①男性，年齡22～45歲;②排除女方因素引起的不孕，未采取避孕措施且有正常性生活1年或以上未能使女方受孕者;③其不存在射精障礙或梗阻性無精癥等取精困難的情況。排除標準：①存在男性生殖系統(tǒng)發(fā)育異常、性功能障礙、梗阻性無精癥等不能通過常規(guī)方式取精者;②泌尿生殖系存在沙眼衣原體、淋病奈瑟菌、梅毒螺旋體等非支原體類病原微生物感染者;③近1個月存在感染癥狀史或接受過抗生素治療者。

1.2 標本的采集與處理

①血標本：用加入促凝劑的采血管抽取血標本3～5 mL，待其凝固后以3500 r/min離心5 min后分離血清備用。②精液標本：禁欲3 d后，受試者按要求于取精室通過手淫法完整收集精液并存置標記過姓名的無菌取精杯中，立即送檢，鏡檢前精液存放于37℃溫箱中保存。③尿道分泌物標本：受試者用無菌棉拭子插入尿道約2～4 cm深處，旋轉(zhuǎn)1周，停留約15 s后，取出尿道分泌物置于無菌塑料試管內(nèi)，密封立即送檢。

1.3 觀察指標

1.3.1 血清抗精子抗體的檢測? 抗精子抗體（Anti-sperm antibody，AsAb）試劑盒（包括IgG、IgM、IgA三種抗體類型）使用福建省三明博峰生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒，按說明書上操作要求對血清中抗精子抗體進行膠體金法檢測。僅質(zhì)控線陽性，說明檢測結(jié)果有效，檢測線和質(zhì)控線均呈陽性表明被檢樣本血清中抗精子抗體為陽性;被檢樣本血清中抗精子抗體陰性。

1.3.2 精液常規(guī)檢測? 采用偉力WLJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)，按照WHO標準對精液標本進行密度、前向運動精子率（PR）和畸形率進行檢測，人工記錄精液的量、液化時間。同時將精液和伊紅Y染液按1∶1的比例滴于載玻片上，混勻，蓋上蓋玻片，30 s后于高倍鏡下計數(shù)著色精子數(shù)、計算精子存活率。

1.3.3 解脲支原體的檢測? 采用珠海麗珠試劑股份有限公司的人型支原體分離培養(yǎng)試劑盒和解脲支原體（又稱解脲支原體）分離培養(yǎng)試劑盒進行檢測，嚴格按照說明操作。將尿道分泌物分別接種于兩種培養(yǎng)基上，并于37℃下培養(yǎng)48 h，培養(yǎng)基內(nèi)液體顏色仍為黃色，表明該標本對應的檢測項目結(jié)果為陰性，由黃色變?yōu)榧t色或桃紅色，則表明該標本對應的檢測項目結(jié)果為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以（x±s）表示，行方差分析，計數(shù)資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 支原體感染情況與抗精子抗體類型的相關(guān)性

本研究中不育癥患者人型支原體的感染率為33.1%（86/260），解脲支原體的感染率為46.2%（120/260）。根據(jù)支原體感染情況可將患者分為4組，MH+UU-組（人型支原體陽性、解脲支原體陰性）、MH-UU+組（人型支原體陰性、解脲支原體陽性）、MH+UU+組（人型支原體和解脲支原體均陽性）、MH-UU-組（人型支原體和解脲支原體均陰性），各組三種血清抗精子抗體陽性率見表1。經(jīng)χ2檢驗，四組數(shù)據(jù)AsAb-IgG和AsAb-IgM的陽性率比較，差異無統(tǒng)計學意義（IgG：χ2=1.352，P=0.717;IgM：χ2=0.272，P=0.965）;而感染UU組（MH-UU+組和MH+UU+組）患者的AsAb-IgA陽性率明顯高于未感染UU組（MH+UU-組和MH-UU-組）的患者（χ2=21.481，P<0.001）。

2.2 不同類型抗精子抗體對支原體感染患者精液質(zhì)量的影響

為探討不同類型抗精子抗體對支原體感染患者精液質(zhì)量是否存在不同的影響，根據(jù)抗精子抗體類型將支原體感染（MH、UU一種或兩種均陽性者）和抗精子抗體均為陽性的患者分成三組，并對其精液常規(guī)結(jié)果進行分析。從表2中可知，除IgG+組和IgM+組的前向運動精子率和精子存活率明顯低于IgA+組外，在精液體積、精液液化時間、精子密度和精子畸形率方面三組比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

3 討論

目前有大量研究表明，支原體的感染和抗精子抗體的產(chǎn)生有密切的關(guān)系，但其具體機制尚不完全清楚[5-6]，而且各型抗精子抗體對精液質(zhì)量影響的報道也較少。本研究中不育癥患者的支原體感染率為59.2%（154/260）和抗精子抗體陽性率為46.5%（121/260），與以往的研究結(jié)果基本一致。同時本研究發(fā)現(xiàn)人型支原體感染患者血清中的抗精子抗體以IgG和IgM為主，解脲支原體感染時除IgG和IgM型抗精子抗體外，IgA型抗精子抗體的陽性率也顯著升高。并且各類型抗精子抗體對精液質(zhì)量的影響也不相同。

3.1 人型支原體與AsAb-IgG、AsAb-IgM

人型支原體是非淋球菌性尿道炎的一種常見致病微生物，其特點是生長時需要類固醇物質(zhì)。人型支原體的潛伏期通常為1～3周，由于其急性期癥狀和非淋球菌性尿道炎十分相似，亞急性期又常伴前列腺感染，因此易漏診或誤診造成長期或反復感染[7]。當發(fā)生人型支原體感染、血睪屏障遭到破壞時，精子的漏出和巨噬細胞的進入[8-9]均可導致精子與巨噬細胞接觸，繼而將精子作為抗原提呈，激活體液免疫和細胞免疫，活化B淋巴細胞和T淋巴細胞?；罨腂淋巴細胞可以分化為漿細胞合成和分泌抗精子抗體，初次體液免疫應答血清中主要產(chǎn)生IgM，隨后B細胞的IgC基因區(qū)可發(fā)生重排導致分泌的Ig類型變成IgG，再次應答時血清中主要產(chǎn)生高親和力的IgG[10-11]。同時活化的致敏T細胞則可對抗原（精子和人型支原體）起到直接殺傷作用，并通過釋放細胞因子和趨化因子等引起白細胞的聚集起到協(xié)同殺傷作用，所以人型支原體感染常會合并白細胞精子癥，且伴有精子的損傷和死亡[12-13]，導致本研究中出現(xiàn)的前向運動精子率和精子存活率降低的情況。

3.2 解脲支原體與AsAb-IgA

解脲支原體可分為T960和parvo兩大生物群，兩群均定植于泌尿生殖道黏膜表面，parvo生物群主要是不致病的定植菌群，而T960生物群則會在機體免疫力降低時侵犯黏膜引起泌尿生殖系感染[14-15]。故解脲支原體感染時首先激活的是黏膜免疫系統(tǒng)導致黏膜免疫應答的主力軍IgA分泌的局部增加[16]，此時精子作為抗原物質(zhì)與抗原呈遞細胞接觸，自然也會誘導黏膜免疫系統(tǒng)產(chǎn)生IgA型的抗精子抗體。在清除解脲支原體方面IgA可以抑制其在黏膜表面粘附，還可以與之結(jié)合阻止其破壞細胞[17]。在對抗被識別為抗原的精子方面，IgA類抗體通常不激活補體途徑，僅通過特異性結(jié)合、減弱其活動力、抑制頂體反應等非炎癥性方式導致精子生理功能的減弱，而不是精子的嚴重損傷或死亡[18-19]。

綜上所述，盡管目前支原體感染與抗精子抗體產(chǎn)生的相關(guān)性尚未完全闡明，但不同類型支原體感染時，患者血清中的抗精子抗體類型確實也有差別，而且不同類型抗精子抗體對精液質(zhì)量的影響也不相同。故在臨床上開展支原體感染類型和抗精子抗體類型的檢查是有十分重要意義的。同時由于IgG、IgM類抗體主要分布于循環(huán)血清，而IgA類抗體主要分布于泌尿系黏膜局部，因此精漿和泌尿系局部組織中抗精子抗體類型和分布情況可能成為今后免疫性不育的一個研究方向[20-22]。

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（收稿日期：2020-12-25）