MCV和MCH聯(lián)合血紅蛋白電泳篩查常見地中海貧血的研究

朱瑾，劉潔，黃建成

（1.福建醫(yī)科大學附屬閩東醫(yī)院產(chǎn)前診斷實驗室，福建 福安 355000；2.福建醫(yī)科大學附屬閩東醫(yī)院檢驗科，福建 福安 355000）

近年來，地中海貧血逐漸受到臨床關注，根據(jù)基因分類，可將患者分為α-地中海貧血和β-地中海貧血。兩種貧血患者的貧血基因所在位置不同，α-地中海貧血患者的基因主要在16號染色體上，而β-地中海貧血患者的基因則在11號染色體上。臨床數(shù)據(jù)顯示[1]，超過90%的β-地中海貧血患者是由于點突變所導致的，α-地中海貧血主要的發(fā)生原因與等位基因的缺失密切相關。地中海貧血的出現(xiàn)，不僅會對患者造成較大的傷害，且易發(fā)生遺傳，需針對孕期女性加強篩查診斷。從本質上分析，地中海貧血是一種遺傳性慢性溶血性貧血病，重型地中海貧血是致死性疾病，目前在臨床上還無有效的根治方案。通過產(chǎn)前診斷避免重型地中海貧血患兒的出生是優(yōu)生方面的一個重要手段，而產(chǎn)前診斷的前提是發(fā)現(xiàn)和確診夫婦雙方為同型地中海貧血基因攜帶者。為有效降低地中海貧血的發(fā)生率，可在產(chǎn)前檢查等方面加強篩查工作，研究發(fā)現(xiàn)[2]，可通過孕期檢查查出地中海貧血，地中海貧血是一種隱性基因遺傳病，大多數(shù)人群并未表現(xiàn)出地中海貧血的癥狀，更易使基因攜帶者忽視遺傳篩查、孕期檢查等工作。一旦檢查不到位，很可能遺傳給胎兒，影響胎兒的健康成長，因此，加強孕婦地中海貧血篩查工作非常重要。本研究通過MCV、MCH聯(lián)合血紅蛋白電泳篩查常見地中海貧血，分析多種檢測方法對于常見地中海貧血篩查的應用效果，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性分析2017年1月至2018年12月于本院產(chǎn)前診斷機構進行地中海貧血篩查和診斷的4 136例為篩查對象，年齡18～45歲，平均年齡（30.6±2.1）歲。

1.2 方法 首先采集血液標本，采血過程中，選擇觀察對象體表淺靜脈作為采血部位，以肘部靜脈、手背靜脈、內踝靜脈作為首選。通常選擇肘部靜脈采血，但如果受檢者的肘部靜脈不明顯，可選擇其他部位靜脈，采血過程中，注意避開患者有紅腫、潰瘍的部位。然后對患者進行常規(guī)采血，注意不可長時間使用止血帶壓迫（＜30 s），長時間壓迫會影響實驗結果。采血時盡量選擇使用封閉式、真空的采血設備，避免血液樣本污染。對于血常規(guī)指標MCV＜82 fl，MCH＜27 pg的標本，采取血紅蛋白電泳檢查方式，使用的儀器為CAPILLARYS 2電泳儀，對所有孕婦的血液樣本進行電泳檢查，檢查過程中可根據(jù)HbA2數(shù)據(jù)判斷患者的地中海貧血類型，若HbA2水平＜2.5%，屬于α-地中海貧血，若HbA2水平≥3.5%即屬于β-地中海貧血，可對患者所攜帶的地中海貧血基因進行初步判斷。進行地中海貧血基因檢測，進一步確定地中海貧血基因的情況，首先在α-地中海貧血患者中，有3種基因缺失的情況，一種是基因缺失SEA雜合子，二是基因缺失-α3.7，還有一種屬于基因缺失-α4.2，均是α-地中海貧血的常見基因變化情況；另外還有非缺失型α-地中海貧血患者，主要是αCS，αQS以及αWS三種基因型，缺失型地中海貧血患者占α-地中海貧血總數(shù)的90%，非缺失型占10%左右；而針對β-地中海貧血患者中，由于主要的基因變化屬于突變基因型，需要對CD41-42、CD31、CD27-28等17種點突變基因進行排查，確定具體的地中海貧血類型。地中海貧血篩查步驟一般先行血常規(guī)檢測再做血紅蛋白電泳，陽性者做基因診斷確診，最后進行產(chǎn)前診斷。

1.3 篩查結果判斷標準 患者MCV＞82 fl，MCH＞27 pg，2.5＜HbA2＜3.5，HbF正常，如出現(xiàn)其他HbG等出現(xiàn)異常血紅蛋白區(qū)帶，擬為異常HbH??；MCV＜82 fl，MCH＜27 pg，HbA2＜2.5%初步判斷為ɑ-地中海貧血。MCH＜27 pg，HbA2≥3.5%，和/或HbF增高，屬于β-地中海貧血。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗，計量資料以“x±s”表示，行t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 134例地中海貧血基因結果 基因檢測陽性134例，其中β-地中海貧血56例，α-合并β-地中海貧血2例，α地中海貧血76例，基因檢測結果，見表1。

表1 134例地中海貧血基因檢查結果

2.2 地中海貧血患者MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較 電泳4 135例，異常1 655例，基因檢測陽性134例，篩查的敏感度較高，且常見地中海貧血患者的MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 地中海貧血患者MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較（±s）

表2 地中海貧血患者MCV、MCH及血紅蛋白水平與正常值比較（±s）

注：MCV，平均紅細胞體積；MCH，平均紅細胞血紅蛋白；HbA2，血紅蛋白水平

組別地中海貧血陽性患者正常值t值P值MCV 74.3±2.8 85.8±3.1 6.229 5＜0.05 MCH 30.8±2.1 24.5±1.9 7.674 8＜0.05 HbA2 2.88±0.46 3.91±0.72 6.304 6＜0.05

3 討論

地中海貧血最早發(fā)現(xiàn)于地中海地區(qū)，而地中海貧血又分為α-地中海貧血和β-地中海貧血。α-地中海貧血靜止型的患者無明顯的臨床癥狀，甚至無貧血的現(xiàn)象，患者的紅細胞形態(tài)也較為正常，而發(fā)展為標準型的患者，會有輕度貧血的情況，這類患者的紅細胞滲透性也稍有降低；若患者表現(xiàn)為輕度或中度貧血的情況，會影響到其他臟器健康，并引起肝脾腫大、黃疸等現(xiàn)象，若妊娠期女性出現(xiàn)上述情況，會產(chǎn)生更大危害，導致胎兒水腫、死胎等，十分危險[3-4]。β-地中海貧血靜止型患者癥狀不明顯，也不會表現(xiàn)出明顯的貧血現(xiàn)象，但可從患者的血片中觀察到少量的靶形紅細胞；輕度性貧血的患者HbA2增高，發(fā)展至中度時，患者的脾臟會表現(xiàn)出輕度腫大的情況，且網(wǎng)織紅細胞可達到5%左右，患者的紅細胞滲透脆性也明顯降低[5]。輕癥的地中海貧血，也就是雜合子/地中海貧血基因攜帶者，如–α/αα、--/αα等，一般情況下無生命危險，但這類群體的紅細胞的攜氧能力更差[6]。按照貧血嚴重程度，地中海貧血一般分為輕型、中間型和重型。輕型一般為地中海貧血攜帶者，兩個等位基因中一個有問題，一般無明顯臨床特征或只有輕微貧血；中間型地中海貧血的機制比較復雜，如地中海貧血的基因均發(fā)生突變，但某個突變發(fā)生在啟動子區(qū)域，因此，基因還保留部分活性。地中海貧血的發(fā)生，會對患者身體造成較大危害，做好相關診斷工作非常重要。

加強地中海貧血的產(chǎn)前篩查非常重要，超聲檢測胎兒大腦中動脈血流頻譜也可及早發(fā)現(xiàn)“巴氏水腫胎”[7]。地中海貧血是一種隱性基因遺傳病。多數(shù)人只是攜帶地中海貧血基因而不表現(xiàn)出任何貧血癥狀，地中海貧血只會遺傳，不會傳染[5]。假如父母中有一個人攜帶地中海貧血基因，子女就可能會遺傳到地中海貧血基因。中間型地中海貧血是從臨床癥狀的嚴重程度進行劃分，按照貧血嚴重程度，地中海貧血一般分為輕型、中間型和重型。輕型一般為地中海貧血攜帶者，兩個等位基因一個有問題，一般無臨床特征或只有輕微貧血。中間型地中海貧血的機制較復雜。

本研究結果表明，地中海貧血患者的血常規(guī)（紅細胞、白細胞、血小板、血紅蛋白等）檢測結果與正常值比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），可作為臨床診斷地中海貧血的重要指標。對孕期女性進行地中海貧血的篩查工作是實現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育的重要步驟，目前國家對于孕檢地中海貧血的篩查也非常重視，并對一些較為貧困的地區(qū)實施免費孕期地中海貧血篩查措施，孕婦在接受地中海篩查貧血時也需積極配合孕檢要求，仔細檢查孕期Hb、HbA2等的水平，一般女性在懷孕12周后即可進行地中海貧血篩查，通過抽取靜脈血液檢查基因狀況，一旦確診也不可過于緊張焦慮，及時進行治療和病情控制，需注意，此病與缺鐵性貧血有很大差異，不可隨意補充鐵元素，可適當調理膳食結構，多飲水與配合運動鍛煉，保持良好的心情狀態(tài)，可有效改善病情帶來的影響。

綜上所述，對地中海貧血患者使用MCV、MCH結合血紅蛋白電泳進行篩查檢驗，可及時了解患者的血液情況，有助于提高地中海貧血的診斷準確率。利用MCV、MCH及血紅蛋白電泳聯(lián)合篩查可排除大部分的假陽性，減輕患者負擔，篩查和診斷意義較大，是比較經(jīng)濟、簡便、安全的一種檢測手段。地中海貧血的產(chǎn)前篩查診斷工作，對于避免地中海貧血患兒的出生及產(chǎn)科急危重并發(fā)癥的發(fā)生，優(yōu)生優(yōu)育有較高的價值。