低離子聚凝胺技術(shù)在臨床輸血檢驗中的應用價值

楊育芬

（云南省麗江市人民醫(yī)院輸血科，云南 麗江 674100）

輸血療法是臨床上搶救大出血患者的重要手段之一。近年來，我國的輸血風險管理工作越來越受到重視。在輸血前若出現(xiàn)交叉配血差錯，可引發(fā)急性溶血反應等嚴重輸血反應，對患者的生命安全構(gòu)成一定的威脅[1-2]。如何提高輸血治療中交叉配血試驗的準確性是目前臨床上關注的焦點之一。近年來，低離子聚凝胺技術(shù)在臨床輸血檢驗中應用越來越廣泛[3-4]。本文主要是探討低離子聚凝胺技術(shù)在臨床輸血檢驗中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2018年6月至2020年6月期間收治的82例接受輸血治療的患者作為研究對象。其納入標準是：具有進行輸血治療的指征；年齡≥18周歲；病歷資料完整；首次接受輸血治療；其本人（或其家屬）知悉本研究內(nèi)容，并簽署了自愿參與本研究的知情同意書。其排除標準是：合并有免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病、帕金森病或癲癇；存在過敏體質(zhì)；有酒精、藥物依賴史；存在嚴重的器官功能衰竭。采用雙盲隨機抽樣法將其分為對照組和觀察組，每組各有41例患者。在觀察組中，有女性17例，男性24例；其年齡為21～74歲，平均年齡為（47.62±5.47）歲；其體重為44～86 kg，平均體重為（65.92±6.44）kg；其中，因發(fā)生車禍導致大出血、胃癌導致大出血、產(chǎn)后大出血、心臟搭橋術(shù)后大出血而接受輸血治療的患者分別有12例、6例、10例、13例。在對照組中，有女性16例，男性25例；其年齡為22～73歲，平均年齡為（47.58±5.42）歲；其體重為46～85 kg，平均體重為（65.95±6.41）kg；其中，因發(fā)生車禍導致大出血、胃癌導致大出血、產(chǎn)后大出血、心臟搭橋術(shù)后大出血而接受輸血治療的患者分別有11例、8例、12例、10例。兩組患者的一般資料相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 血庫專用離心機（型號：TD4K-X；生產(chǎn)企業(yè)：長沙東旺實驗儀器有限公司）、電熱恒溫水箱（型號：K-WHS；生產(chǎn)企業(yè)：蘇州凱特爾儀器設備有限公司）、光學顯微鏡（型號：CX21；生產(chǎn)企業(yè)：浙江納德科學儀器有限公司），本研究所用的試劑均由上海懋康生物科技有限公司提供。

1.2.2 檢驗方法：1）采用常規(guī)鹽水法對對照組患者進行交叉配血試驗，方法是：抽取其靜脈血3～4 mL，以3000 r/min的速率進行10 min的離心處理，分離出血清。將血清置于-20℃的冰柜中保存待檢。采集供血者的血清，并將供血者的紅細胞配制成2%的紅細胞懸液。采集患者的靜脈血3～4 mL，對血液標本進行抗凝處理。將抗凝血進行離心、沉淀、洗滌處理，去除其中的血小板和白細胞，得到下層紅細胞。將紅細胞配制成2%的紅細胞懸液。取潔凈的小試管2支，在其中一支試管（主測管）中滴入患者的血清和供血者的紅細胞懸液，在另一支試管（次測管）中滴入供血者的血清和患者的紅細胞懸液。對兩支試管進行標記，分別將其混合搖勻，并以1000 r/min的速率進行離心處理。完成上述操作后，觀察試管的上層液是否出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。將試管傾斜，輕彈或側(cè)動試管，觀察管底的反應物是否有凝集現(xiàn)象。若主測管、次測管均未出現(xiàn)溶血、凝集現(xiàn)象，則表示檢驗結(jié)果呈陰性，配血成功；若主測管出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，次測管并未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，也未發(fā)生溶血，則表示檢驗結(jié)果呈陽性，配血失敗。2）采用低離子聚凝胺技術(shù)對觀察組患者進行交叉配血試驗，方法是：抽取其靜脈血3～4 mL，以3000 r/min的速率進行10 min的離心處理，分離出血清。將血清置于-20℃的冰柜中保存待檢。采集供血者的血清，并將供血者的紅細胞配制成3%～5%的紅細胞懸液。采集患者的靜脈血3～4 mL，對血液標本進行抗凝處理。將抗凝血進行離心、沉淀、洗滌處理，去除其中的血小板和白細胞，得到下層紅細胞。將紅細胞配制成3%～5%的紅細胞懸液。取潔凈的小試管2支，在其中一支試管中滴入2滴患者的血清，再滴入1滴供血者的紅細胞懸液。在另一支試管中滴入2滴供血者的血清，再滴入1滴患者的紅細胞懸液。在兩支試管中均添加0.65 mL的低離子介質(zhì)，混合均勻后在室溫下放置15 min。向兩支試管中分別滴入2滴聚凝胺試劑，混合搖勻后進行離心處理（離心速率為3000r/min，離心時間為15 s），棄去上層清液，留取液體0.1 mL。將解聚液分別滴入兩支試管中，輕輕搖動，若試管中液體的凝聚現(xiàn)象在1 min內(nèi)消失，則表示檢驗結(jié)果呈陰性，配血成功；若試管中液體的凝聚現(xiàn)象在1 min內(nèi)未消失，則表示檢驗結(jié)果呈陽性，配血失敗。

1.3 觀察指標

比較用低離子聚凝胺技術(shù)與常規(guī)鹽水法對兩組患者進行交叉配血試驗的陽性率、靈敏度、準確率及穩(wěn)定性。

1.4 統(tǒng)計學方法

用SPSS 26.0軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，計數(shù)資料用%表示，用χ2檢驗，計量資料用±s表示，用t檢驗，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 比較用兩種檢驗技術(shù)對兩組患者進行交叉配血試驗的陽性率

用低離子聚凝胺技術(shù)對觀察組患者進行交叉配血試驗的陽性率為17.07%，用常規(guī)鹽水法對對照組患者進行交叉配血試驗的陽性率為2.44%，二者相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 比較用兩種檢驗技術(shù)對兩組患者進行交叉配血試驗的陽性率[例（%）]

2.2 比較用兩種檢驗技術(shù)對兩組患者進行交叉配血試驗的靈敏度、準確率及穩(wěn)定性

與用常規(guī)鹽水法對對照組患者進行交叉配血試驗相比，用低離子聚凝胺技術(shù)對觀察組患者進行交叉配血試驗的靈敏度、準確率和穩(wěn)定性均更高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。詳見表2。

表2 比較用兩種檢驗技術(shù)對兩組患者進行交叉配血試驗的靈敏度、準確率及穩(wěn)定性[例（%）]

3 討論

交叉配血試驗主要是指將供血者的血漿、紅細胞等分別與受血者的血漿、紅細胞等混合，在混合的過程中仔細觀察有無聚集反應，進而判斷能否為受血者輸血的一種檢驗技術(shù)[5-6]。進行交叉配血試驗的穩(wěn)定性、及時性及準確性極為重要，是確保輸血治療安全、可靠的前提[7-9]。輸血反應是指在輸血過程中或結(jié)束后，因輸入血液或其制品而產(chǎn)生的不良反應，常見的輸血反應有遲發(fā)性免疫反應、急性免疫反應等[9-10]。在為患者輸血前進行有效的交叉配血試驗有助于降低患者輸血反應的發(fā)生率。過去，臨床上在對患者進行輸血前，常采用鹽水法對其實施交叉配血試驗。采用鹽水法進行交叉配血試驗具有操作簡單、檢驗成本低等優(yōu)點，但只能夠粗略地檢驗出ABO血型，難以檢驗出其他血型，無法檢測出血液中不匹配的IgG抗體，陽性檢出率及檢驗的穩(wěn)定性較低[11]。低離子聚凝胺技術(shù)是近年來臨床上用來進行交叉配血試驗的一種新技術(shù)。采用該技術(shù)進行交叉配血試驗不僅能大大縮短檢驗的用時，還能將供血者與受血者血液中不匹配的IgG抗體準確地檢測出來，進而可顯著提高輸血的安全性。聚凝胺屬于季銨鹽多聚物，具有高價陽離子，帶有正電荷，溶解后產(chǎn)生的正電荷可中和紅細胞表面的負電荷，起到聚集紅細胞的作用[12]。需要注意的是，采用低離子聚凝胺技術(shù)對患者進行交叉配血試驗的過程易受到其血液中肝素的影響，可能減弱其紅細胞的凝聚性。因此，對于使用肝素進行治療的患者，在采用該技術(shù)對其進行交叉配血試驗時需適當增加聚凝胺的用量，以確保檢驗結(jié)果的準確性。

本研究的結(jié)果證實，將低離子聚凝胺技術(shù)應用于臨床輸血檢驗中，可提高交叉配血試驗的靈敏度、準確率及穩(wěn)定性。