補(bǔ)飼對有角、無角歐拉羊血清生化指標(biāo)影響的比較

劉 夢 ，莊 蕾 ，吳 森,，余忠祥 ，閻明毅 ，張強(qiáng)龍 ，吳占月 ，韓 翠

（1.青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，青海 西寧 810016；2.青海省高原家畜遺傳資源保護(hù)與創(chuàng)新利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，青海 西寧 810016）

藏羊抗寒、抗粗飼料，對高寒草地的低壓、寒冷等自然條件和多年生宿營放牧管理模式有較強(qiáng)的適應(yīng)性[1]。歐拉羊原稱歐拉型藏羊，是在高寒缺氧的生態(tài)環(huán)境中，經(jīng)過長期的自然和人工飼養(yǎng)而培育出來的地方特色畜種，相對于其他藏羊身體大、四肢高、腰背寬而平、后軀豐滿、肉用生產(chǎn)性能好及早期生長發(fā)育快[2]。2018年7月“歐拉型藏羊”被審定列為國家畜禽遺傳資源，更名為歐拉羊。在同一畜種中，相比較于有角動(dòng)物，無角型性格溫順，攻擊性低、生產(chǎn)性能良好，且更適合現(xiàn)代集約化養(yǎng)殖。有研究指出，無角公羊的適應(yīng)性較強(qiáng)，尤其在冬季和春季，無角公羊的體況明顯優(yōu)于有角公羊[3]；無角母羊的繁殖性能優(yōu)于有角母羊，培育無角羊?qū)Πl(fā)展草原生態(tài)畜牧業(yè)具有重要的意義[4]。同時(shí)，歐拉羔羊經(jīng)短時(shí)間育肥后日增重高，接近進(jìn)口純種肉羊水平，增重速度也相當(dāng)快，適用于羊肉的工業(yè)化生產(chǎn)，具有廣闊的市場前景，是肉羊養(yǎng)殖場和專業(yè)家庭飼養(yǎng)肉羊的理想品種[5]。本研究以青海省歐拉羊主產(chǎn)區(qū)的傳統(tǒng)有角型歐拉羊及新選育出的無角型歐拉羊?yàn)檠芯繉ο?，對青海牧區(qū)傳統(tǒng)放牧養(yǎng)殖模式下的歐拉羊進(jìn)行短期精料補(bǔ)飼，并檢測血清生化指標(biāo)，以期為無角型歐拉羊生產(chǎn)性能評定及生產(chǎn)養(yǎng)殖提供理論和技術(shù)支持，同時(shí)，為未來無角型歐拉羊品種育成提供技術(shù)理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

該試驗(yàn)于2020年4～6月，在青海省黃南藏族自治州河南蒙古族自治縣開展。隨機(jī)選取有角和無角各年齡段健康且生長環(huán)境一致的歐拉羊（共48只）作為試驗(yàn)動(dòng)物，分成2組（有角型為A組，無角型為B組），每組三個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8只羊。正常放牧飼養(yǎng)，放牧后同時(shí)進(jìn)行補(bǔ)飼。預(yù)試期為10 d，正式飼喂期為60 d，試驗(yàn)共70 d。

1.2 試驗(yàn)羊的飼養(yǎng)管理

所有試驗(yàn)羊在自然放牧條件下，下午6∶00時(shí)補(bǔ)飼1次羔羊自配精補(bǔ)料，參照NRC（2004）推薦的中國肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制基礎(chǔ)飼糧。每個(gè)年齡階段的歐拉羊，在正式試驗(yàn)階段的第0～30 d補(bǔ)飼精料0.5 kg/d，第31～60 d補(bǔ)飼精料1.0 kg/d。試驗(yàn)羊在試驗(yàn)期間可自由采食和飲水，定期進(jìn)行驅(qū)蟲和疫苗防疫。

1.3 樣本采集及指標(biāo)測定方法

采集的血液樣本在青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)室內(nèi)利用“酶標(biāo)生物”的綿羊血清Elisa試劑盒進(jìn)行血清生化指標(biāo)測定，每組歐拉羊清晨空腹靜脈采血，靜置后，2500 r/min離心20 min。檢測收集的上清，保存過程中若出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

1.4 血清生化指標(biāo)測定

該試驗(yàn)檢測的血清指標(biāo)包括血清生化指標(biāo)、免疫指標(biāo)和抗氧化指標(biāo)（共計(jì)24個(gè)）。

（1）血清生化指標(biāo)：谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（Albumin）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、雌二醇（E2）、生長激素（GH）、胰島素（INS）、尿素（Urea）。

（2）免疫指標(biāo)：球蛋白（GLB）、免疫球蛋白 A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白 M（IgM）、白細(xì)胞介素 1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素 2（IL-2）、白細(xì)胞介素 4（IL-4）、白細(xì)胞介素 6（IL-6）。

（3）抗氧化指標(biāo)：超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、乳酸脫氫酶（LDH）、谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)資料采用Excel進(jìn)行整理，采用IBM SPSS 24.0程序軟件進(jìn)行T檢驗(yàn)比較兩組差異，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 血清生化指標(biāo)的測定

2.1.1 補(bǔ)飼對有角和無角歐拉羊血清生化指標(biāo)的影響。由表1可以看出，在6月齡歐拉羊血清樣品中B組 TP、INS含量顯著高于 A 組（P＜0.05），而 A 組 GH含量顯著高于B組（P＜0.05），其余各項(xiàng)均未呈現(xiàn)出顯著性差異 （P＞0.05）；在12月齡歐拉羊血清樣品中Urea、TC、AST、E2四項(xiàng)指標(biāo)均未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05），除 B 組 ALT 含量顯著高于 A 組（P＜0.05），其余各項(xiàng)指標(biāo)A組均顯著高于B組（P＜0.05）；在36月齡歐拉羊血清樣品中TG、ALP兩項(xiàng)指標(biāo)呈現(xiàn)顯著性差異（P＜0.05），且 A 組 TG、ALP 含量高于 B 組，其余各項(xiàng)均未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05）。

表1 補(bǔ)飼對有角、無角歐拉羊血清生化指標(biāo)的影響

2.2 血清免疫指標(biāo)的測定

2.2.1 補(bǔ)飼對有角和無角歐拉羊血清免疫指標(biāo)的影響。由表2可以看出，在6月齡羊免疫血清樣品中IgM、IL-6 兩項(xiàng)指標(biāo)呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05），其余各項(xiàng)均未呈現(xiàn)出顯著性差異 （P＞0.05）。B組中IgM、IL-2、IL-4和IL-6含量均高于A組，但I(xiàn)L-2、IL-4含量差異不顯著 （P＞0.05）；12月齡羊免疫血清樣品中IL-2、IL-4、IL-6三項(xiàng)指標(biāo)呈現(xiàn)出顯著性差異 （P＜0.05），其余各項(xiàng)未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05）。 A組IgA、GLB、IL-1、IL-2、IL-4、IL-6 含量均高于 B 組，但I(xiàn)gA、GLB、IL-1 含量差異不顯著 （P＞0.05）；36 月齡羊免疫血清樣品中 IgM、GLB、IL-2、IL-4、IL-6 五項(xiàng)指標(biāo)呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05），其余各項(xiàng)未呈現(xiàn)出顯著性差異（P＞0.05）。 B 組 IgA、IgM、IgG、GLB、IL-1、IL-2含量均高于A組，但是IgA、IgG和IL-1含量差異不顯著（P＞0.05）。

表2 補(bǔ)飼對有角、無角歐拉羊血清免疫指標(biāo)的影響

2.3 血清抗氧化指標(biāo)的測定

2.3.1 補(bǔ)飼對有角和無角歐拉羊血清抗氧化指標(biāo)的影響。由表3可以看出，在6月齡歐拉羊抗氧化血清樣品中，B組SOD、CAT含量均高于A組，但差異不顯著（P＞0.05）。而A組GSH-Px含量高于B組，但差異也不顯著（P＞0.05）；在12月齡歐拉羊抗氧化血清樣品中，SOD、CAT和GSH-Px含量均呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05）。且A組SOD、CAT含量均顯著高于B組，B組GSH-Px含量高于A組（P＜0.05）；在36月齡歐拉羊抗氧化血清樣品中，SOD、MDA含量均呈現(xiàn)出顯著性差異（P＜0.05）。且 B 組 SOD、GSH-Px含量均高于 A組，但GSH-x含量差異不顯著 （P＞0.05）。在 A組CAT、MDA含量均高于B組，但CAT含量差異不顯著（P＞0.05）。

表3 補(bǔ)飼對有角、無角歐拉羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 補(bǔ)飼對有角和無角歐拉羊血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)的變化可以評價(jià)機(jī)體的健康水平和營養(yǎng)物質(zhì)的代謝。在血清生化指標(biāo)方面，TP、ALB含量可直接反映動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)代謝水平和肝臟蛋白質(zhì)合成能力[6-7]。在該試驗(yàn)中，除12月齡外，B組TP、ALB含量高于A組，說明補(bǔ)飼能夠促進(jìn)無角型歐拉羊?qū)Φ鞍踪|(zhì)的消化吸收利用率，改善無角型歐拉羊肝臟和腎臟功能，但營養(yǎng)不良或消耗增加會(huì)導(dǎo)致TP濃度出現(xiàn)降低的現(xiàn)象[8]。血清中ALP、ALT、AST活性是機(jī)體肝功能的重要指標(biāo)[9]，AST可調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)代謝水平提高或肝功能受損時(shí)，血清中AST的活性就會(huì)升高[10]。在該試驗(yàn)中，除6月齡外，A組ALP含量顯著高于B組，說明補(bǔ)飼可增強(qiáng)無角型歐拉羊心臟功能和提高肌肉組織代謝功能，足以維持機(jī)體肝臟的正常生理功能，這與賀長青等[11]研究報(bào)道的結(jié)果一致。且隨各年齡段的增長，A組ALT、AST含量高于B組，但差異不顯著，這與李輝等[12]研究報(bào)道一致。該試驗(yàn)與黃蘭菊[13]的研究報(bào)道有相同之處，他在研究中提到，育肥羔羊在8月齡前生長較快，10月齡前后生長速度緩慢，因此8月齡前是研究產(chǎn)肉性能的重要年齡段。對應(yīng)本試驗(yàn)中6月齡歐拉羊血清生化指標(biāo)的測定結(jié)果，無角型歐拉羊在生長育肥的關(guān)鍵時(shí)期生長代謝能力要強(qiáng)于有角型歐拉羊。

3.2 補(bǔ)飼對有角和無角歐拉羊血清免疫指標(biāo)的影響

在血清免疫指標(biāo)中，免疫球蛋白是由具有抗體球蛋白活性的漿細(xì)胞產(chǎn)生的，由一種高活性小分子多肽分泌的免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子合成，動(dòng)物血清中免疫球蛋白和細(xì)胞因子水平雖然低，但在機(jī)體的免疫防御系統(tǒng)中起著重要的作用[14]。其中，IgA、IgG和IgM均是動(dòng)物機(jī)體體液免疫的主要檢測指標(biāo)。在該試驗(yàn)中，除6月齡外，B組IgA、IgG和IgM含量高于A組，說明補(bǔ)飼能夠顯著改善無角型歐拉羊的免疫功能，這與胡興義等[15]報(bào)道的研究結(jié)果一致。動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞免疫的主要檢測指標(biāo)[16]是 IL－2、IL－6。 IL-2能夠刺激 T 淋巴細(xì)胞增殖，它是介導(dǎo)細(xì)胞免疫的主要細(xì)胞因子，可調(diào)節(jié)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和抗體等的產(chǎn)生，它在免疫過程中起著重要作用[17]。在該試驗(yàn)中，除12月齡外，B組IL-2含量高于A組，說明補(bǔ)飼可以提高動(dòng)物機(jī)體的免疫力。IL－6能夠誘導(dǎo)B細(xì)胞分化和分泌，它是免疫系統(tǒng)中重要的細(xì)胞因子，能促進(jìn)B細(xì)胞分化和增殖，重新產(chǎn)生免疫應(yīng)答[18]。本試驗(yàn)主要檢測IgA、IgG、IgM、GLB、IL－1、IL－2、IL－4 和 IL－6 的含量變化，同時(shí)從體液免疫和細(xì)胞免疫方面探討補(bǔ)飼對有角型和無角型歐拉羊血清免疫指標(biāo)的影響。

3.3 補(bǔ)飼對有角和無角歐拉羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

血清抗氧化指標(biāo)，由于動(dòng)物體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和消除一直處于微觀動(dòng)態(tài)平衡，當(dāng)動(dòng)物機(jī)體受到外在因素刺激后發(fā)生氧化反應(yīng)，產(chǎn)生大量自由基，且動(dòng)物體內(nèi)的SOD、CAT和GSH－Px等發(fā)生抗氧化酶還原反應(yīng)，通過酶解系統(tǒng)可以清除自由基，維持動(dòng)物體內(nèi)氧化還原的微動(dòng)力學(xué)平衡[19]。該試驗(yàn)結(jié)果顯示，在12月齡時(shí)，A組SOD、CAT含量顯著高于B組，除6月齡外，B組GSH－Px含量高于A組。說明補(bǔ)飼可以提高SOD、CAT、GSH－Px的含量，使機(jī)體免受損傷。MDA 是脂質(zhì)氧化的最終產(chǎn)物，MDA含量直接反映了動(dòng)物體內(nèi)脂質(zhì)氧化和細(xì)胞損傷的程度[20]。在該試驗(yàn)中，A組MDA含量高于B組，說明補(bǔ)飼能夠顯著改善無角型歐拉羊的抗氧化功能。這與陳浩等[21]的研究結(jié)果相同，他的研究結(jié)果中顯示，動(dòng)物體內(nèi)SOD、GSH-Px等指標(biāo)上升，而對應(yīng)的動(dòng)物體內(nèi)的MDA下降時(shí)，動(dòng)物的抗氧化能力增強(qiáng)，抗氧化水平提高。

4 結(jié)論

綜上所述，在補(bǔ)飼情況下能夠改善無角型歐拉羊的免疫水平、抗氧化能力，進(jìn)而提高血清中生長激素的含量。補(bǔ)飼對放牧條件下無角型歐拉羊生長體況的提高有促進(jìn)作用。