CLIA在乙型肝炎患者病毒血清學標志物檢驗中的效果和符合率評價

陳國華

（泰州市第三人民醫(yī)院 檢驗科，江蘇 泰州 225321）

0 引言

近年來隨著人們生活方式的改變，以及飲食方式的調整，也提高了一些傳染疾病的發(fā)病率，乙型肝炎就是其中較為常見的一種。乙肝病毒易傳染，具有一定的進展性，會逐漸惡化至肝硬化等疾病降低患者生命質量。做好患者病毒標志物檢測可幫助醫(yī)師準確了解患者病毒感染、攜帶情況，及時制定治療對策[1-2]?；诖?，本文將探討CLIA在乙型肝炎患者病毒血清學標志物檢驗中的效果和符合率。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選擇2019年3月至2020年10月在我院接受治療的150名乙型肝炎患者為研究對象，分為常規(guī)組75例，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），研究組75例，采用化學發(fā)光免疫分析法（CLIA）。常規(guī)組男44例，女31例，年齡29～61歲，平均（45.66±3.17）歲，研究組男44例，女31例，年齡29～61歲，平均（45.66±3.17）歲。納入標準：①所有患者均符合《乙型病毒性肝炎診斷標準》（WS299-2008）中的診斷標準，且病例資料比較完整；②患者近期內未接受過抗病毒治療；③意識清醒了解研究內容，并愿意參與配合，已在醫(yī)護人員指導下簽寫知情協(xié)議。排除標準：①患者患有其他嚴重的臟器系統(tǒng)疾病或合并其他甲型、丙型、丁型、戊型肝炎病毒；②女性患者在妊娠期或哺乳期。

1.2 方法。統(tǒng)一對選取的150例乙型肝炎感染患者進行健康宣教，向其說明檢測方法與配合注意事項。接下來進行肘部靜脈血樣采集，取患者晨起空腹狀態(tài)的靜脈血3～5 mL，室溫放置1～2 h，待樣本充分凝集后使用醫(yī)用離心機以3000 r/min的轉速進行分離，離心時間15 min，將分離出的上清液血清吸出置于一次性血清樣品保存管內于-20℃醫(yī)用冰箱中冰凍保存待用。先使用上?？迫A生物酶聯(lián)免疫吸附法的檢測試劑進行檢驗，嚴格按照試劑盒所提供的說明書，根據(jù)sop操作程序，對乙肝5項血清學標志物進行檢驗，使用酶標免疫分析儀（深圳雷杜生命科學股份有限公司生產，型號：RT-6100）讀取OD值，判斷陰性陽性，并將檢驗數(shù)據(jù)結果自動傳輸入東軟lis系統(tǒng)里保存。再應用全自動化學發(fā)光免疫分析儀（北京科美生物技術有限公司生產，型號：lica800）根據(jù)sop操作程序對患者血清樣本進行CLIA法檢測，檢測試劑為其配套試劑，檢測乙肝5項血清學標志物，并將檢驗數(shù)據(jù)結果自動傳輸入東軟lis系統(tǒng)里保存。

1.3 觀察指標

1.3.1 各項指標的檢出率：通過臨床觀察，分析兩組患者在HBsAb（乙型肝炎表面抗體）、HBsAg（乙型肝炎表面抗原）、HBeAg（乙型肝炎e抗原）、HBcAb（乙型肝炎核心抗體）、HBeAb（乙型肝炎e抗體）5項方面的檢出率。陽性判斷標準：HBsAb（乙型肝炎表面抗體）超過10.0 mIU/mL為陽性，HBsAg（乙型肝炎表面抗原）超過0.05 IU/mL為陽性，HBeAg（乙型肝炎e抗原）超過0.7 PEI/mL為陽性、HBcAb（肝炎核心抗體）超過5.3 PEI/mL為陽性、HBeAb（乙型肝炎 e 抗體）超過3 PEI/mL為陽性。

1.3.2 低水平乙型肝炎表面抗原的檢查結果；通過臨床觀察統(tǒng)計兩組在低水平乙型肝炎表面抗原方面的檢查敏感度。

1.4 統(tǒng)計學分析。以SPSS 19.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（±s）表示，χ2，t檢驗。統(tǒng)計值有統(tǒng)計學差異的判定標準為P≤0.05。

2 結果

2.1 兩組指標檢出率比較。兩組在HBsAb、HBcAb方面檢出無明顯差異，但研究組在HBsAg、HBeAg、HBeAb的檢出方面要明顯優(yōu)于常規(guī)組，P≤0.05差異有統(tǒng)計學意義，見表1。

表1 兩組患者檢測質量比較[n（%）]

2.2 兩組HBsAg檢查結果比較。研究組在0.02～0.06（ng/ mL）檢出方面明顯優(yōu)于常規(guī)組，檢查敏感度更高，P≤0.05差異有統(tǒng)計學意義，見表2。

表2 兩組HBsAg檢查低水平比較（±s）

表2 兩組HBsAg檢查低水平比較（±s）

組別 例數(shù) 0.02～0.06（ng/mL）0.051～1.00（ng/mL）0.021～0.05（ng/mL）1.01～3.00（ng/mL）常規(guī)組 75 10（13.33） 22（29.33） 12（16.00） 8（10.67）研究組 75 20（26.67） 28（37.33） 12（16.00） 8（10.67）χ2 - 4.16 1.08 - -P - 0.04 0.30 - -

3 討論

乙型肝炎是一項較受全世界關注的健康難題，具有轉播感染率高，患病人群多的特點，是現(xiàn)階段健康危害性較高的一種傳染疾病[3]。就近年來的研究數(shù)據(jù)表明乙肝病毒患者中超過70%的患者均為慢性感染患者，該類患者疾病具有可持續(xù)發(fā)展性，若不及時進行控制干預，會進一步提高疾病危害程度，演化至肝硬化甚至肝癌疾病，提高患者病死風險。乙肝病毒的傳播與患者自身免疫力低下、家族傳播等均有關系，及時了解患者患病情況，改善肝臟組織學，對提高患者疾病抵抗力，徹底清除體內病毒有積極意義，因此臨床上比較重視患者病毒血清學標志物檢驗[4]。近年來，隨現(xiàn)代醫(yī)學技術的進步，化學發(fā)光免疫測定技術、酶聯(lián)免疫吸附技術在臨床醫(yī)學中的應用也變得更加廣泛[5]。在以往的臨床診斷過程中，常采用酶聯(lián)免疫吸附法進行診斷，該方法雖然具有一定的靈敏度與特異性，但在假陽性與假陰性的檢出方面還是存在些許不足，會對醫(yī)師評估病情產生不良影響。采用化學發(fā)光免疫測定技術進行檢測，不但有助于簡化操作流程，其還可以直觀的反應患者病情變化，具有定量檢測優(yōu)勢。

在本次研究中，對150例患者依次采用酶聯(lián)免疫吸附法、化學發(fā)光免疫分析法進行檢查，發(fā)現(xiàn)后者的檢查符合率更高，單獨觀察兩種檢測方法在HBsAg水平的檢出方面，發(fā)現(xiàn)HBsAg水平處于0.02～0.06（ng/mL）階段時，化學發(fā)光免疫分析法的檢出率更高，說明其檢查敏感度更高?；瘜W發(fā)光免疫檢測法的使用原理與光輻射反應有關，被分為發(fā)光物免疫測定、發(fā)光輔助因子免疫測定、發(fā)光酶免疫測定三種，這三種技術都是通過采用發(fā)光物質對抗體進行標記，來計算需檢測物質的濃度水平。與酶聯(lián)免疫法相比化學發(fā)光免疫分析法具有以下優(yōu)勢。首先是檢查質量優(yōu)勢，在檢測過程中，化學發(fā)光系統(tǒng)會借助一些催化劑提高發(fā)光性能，釋放更多的光信號，屬于一種免疫標志檢測技術，所以在HBsAg、HBeAb等血清標志物檢出方面較為敏感。第二在利用該技術進行檢查時不會受到變異抗體的干擾，其檢查結果的穩(wěn)定性也比較高。第三在本次研究中我科室使用的科美全自動化學發(fā)光儀lica800，是利用光激化學發(fā)光法進行檢測，其反應體系為均相反應，具有反應充分、反應時間短、反應體系溫度均一性好的優(yōu)點，此方法具有很高的精密度；由于在均相中反應，免清洗加上其獨特的檢測原理“結合則發(fā)光”，因此檢測過程無須進行洗滌分離，從而減少了因清洗造成檢測過程中的隨機誤差和交叉污染，最大限度地提高檢測結果的準確度和分析精密度。

綜上所述，在乙型肝炎患者病毒血清學標志物檢驗中，采用化學發(fā)光免疫分析法對提高檢查符合率有積極影響。