模式生物大型溞在水生生態(tài)毒理實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用

鞏寧，孟紫強(qiáng)，邵魁雙，孫野青

1. 大連海事大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，環(huán)境系統(tǒng)生物學(xué)研究所，大連 116026 2. 山西大學(xué)環(huán)境科學(xué)研究所，山西大學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)與毒理學(xué)研究所，太原 030006 3. 國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心，大連 116023

水生毒理學(xué)是生態(tài)毒理學(xué)的重要分支。而無脊椎動物是水生生態(tài)系統(tǒng)中關(guān)鍵的生物類群，基于無脊椎動物的毒理學(xué)測試方法及研究策略也成為水生生態(tài)毒理學(xué)教學(xué)和科研中必不可少的組成部分。

大型溞(Daphniamagna)是節(jié)肢動物門(Arthropoda)、甲殼綱(Crustacea)、枝角目(Cladocera)和溞科(Daphnidae)中個體最大的一種浮游動物。生長于水草繁茂、營養(yǎng)豐富的淡水水體中，在世界范圍內(nèi)廣泛分布。作為初級消費(fèi)者，大型溞是初級生產(chǎn)者和高級消費(fèi)者之間的紐帶，在水生生態(tài)系統(tǒng)中具有重要地位。由于易培養(yǎng)、繁殖快、對污染物敏感等特點(diǎn)，大型溞已經(jīng)作為水生毒理學(xué)測試和評估的模式物種，被廣泛用于各類化學(xué)品(如重金屬納米粒子、有機(jī)磷殺蟲劑和藥物等新型污染物)的水生生物毒性測試和評估中[1-3]，成為水生毒理學(xué)測試的重要組成部分。近年來，隨著溞類生態(tài)學(xué)、毒理學(xué)和生理學(xué)研究的發(fā)展，針對溞類的完整水生毒理學(xué)研究平臺逐漸發(fā)展起來[4-6]，溞類水生毒理學(xué)在生態(tài)毒理學(xué)教學(xué)中的作用也愈顯突出。在孟紫強(qiáng)教授主編的新版《生態(tài)毒理學(xué)》(中國環(huán)境出版集團(tuán)，2019)一書中，增加了“無脊椎動物毒性測試”(第九章，第四節(jié))的內(nèi)容，介紹了以大型溞或蚤狀溞(D.pulex)為受試生物進(jìn)行的急慢性毒性試驗(yàn)[7]。系統(tǒng)掌握溞類毒理學(xué)研究方法，已經(jīng)成為生態(tài)毒理學(xué)及相關(guān)學(xué)科實(shí)驗(yàn)教學(xué)中不可或缺的一部分。

本文基于已廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測和毒理學(xué)科研領(lǐng)域的大型溞毒性測試方法和研究策略，試圖構(gòu)建可應(yīng)用于本科生及研究生教學(xué)的水生生態(tài)毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，為生態(tài)毒理學(xué)的教學(xué)和人才培養(yǎng)提供參考和借鑒。

1 大型溞的生物學(xué)特性與培養(yǎng)方法(The biological characteristics and culture methods of D. magna)

1.1 大型溞的生物學(xué)特性

大型溞成體體長2～6 mm，溞體呈寬卵形，左右側(cè)扁，無頸溝。身體被兩瓣透明介殼包裹，殼面上具網(wǎng)紋，頭部有黑色復(fù)眼一個(圖1)。第一觸角小，第二觸角發(fā)達(dá)，是主要的游泳器官。大型溞雌雄異體，在不良條件下行兩性生殖，在適宜條件下可長期孤雌生殖。兩性生殖中，雌體所產(chǎn)的卵需受精，稱為冬卵。冬卵脫離母體后需經(jīng)過一定休眠時期才能發(fā)育成幼溞。孤雌生殖所產(chǎn)的卵為夏卵，不需受精即可發(fā)育成幼溞，且數(shù)量較多。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件下，多以孤雌生殖為主[8-9]。

圖1 大型溞外部形態(tài)Fig. 1 The morphological features of D. magna

1.2 大型溞的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

目前，針對大型溞的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)已有多種標(biāo)準(zhǔn)方法，如中國的國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 16125—2012[10]、美國材料與試驗(yàn)協(xié)會(American Society for Testing and Materials, ASTM)的ASTM 1989[11]、國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(International Organization for Standardization, ISO)的ISO 6341[12]以及經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織(Organization for Economic Co-operation and Development, OECD)的OECD 202[5]等。參照這些標(biāo)準(zhǔn)方法，各實(shí)驗(yàn)室可依據(jù)實(shí)際條件進(jìn)行培養(yǎng)方案的設(shè)定。如可設(shè)定培養(yǎng)溫度為18～22 ℃、光暗周期比為16 h∶8 h。培養(yǎng)用水為能夠保證溞類存活的天然水、人工或半人工培養(yǎng)基等。培養(yǎng)用水pH為6～9，硬度(以CaCO3計(jì))為140～250 mg·L-1，在使用前應(yīng)充分曝氣使溶氧濃度達(dá)到飽和。每48 h或72 h半量或全量更換一次培養(yǎng)液。

大型溞可以攝食粒徑范圍在0.7～70 μm的藻類[13]。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)中，常以近頭狀偽蹄形藻(Pseudokirchneriellasubcapitata)、普通小球藻(Chlorellavulgaris)和斜生柵藻(Scendesmusobliquus)等為餌料。投喂量為每只動物0.1～0.2 mg C·d-1。藻類可按照OECD推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法OECD 201[14]培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為22 ℃±2 ℃、光照4 000～8 000 lx、光暗周期比16 h∶8 h。

2 大型溞在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中的應(yīng)用(Application of D. magna in experimental teaching)

實(shí)驗(yàn)教學(xué)是培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)、研究和解決問題的有效教學(xué)手段，可分為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)及實(shí)踐性實(shí)驗(yàn)。受學(xué)時所限，基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)大多為驗(yàn)證性項(xiàng)目。一般由教師事先準(zhǔn)備好所需實(shí)驗(yàn)器材，學(xué)生按照步驟操作即可。而綜合性和實(shí)踐性實(shí)驗(yàn)教學(xué)學(xué)時較長(如連續(xù)進(jìn)行1～2周)，可安排學(xué)生進(jìn)行創(chuàng)新性設(shè)計(jì)和自主性探索，并對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析、查找出現(xiàn)錯誤或失敗的原因，更有利于學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。由于篇幅所限，下文的實(shí)驗(yàn)方案僅給出簡要描述及適用范圍，詳情可參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法。

2.1 大型溞的外部形態(tài)觀察、體長測定與生物繪圖(2～4學(xué)時)

本實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)，為后續(xù)的溞類毒理學(xué)教學(xué)提供基本形態(tài)學(xué)認(rèn)知。為此，教師在講授過程中可向?qū)W生展示大型溞的圖片或視頻，以豐富學(xué)生的感性認(rèn)識，并說明生物繪圖的基本要點(diǎn)。即強(qiáng)調(diào)顯微鏡觀察和繪制同時進(jìn)行，避免學(xué)生參照圖片“照貓畫虎”、草草了事。本實(shí)驗(yàn)適用于水生生物學(xué)、浮游動物學(xué)等本科實(shí)驗(yàn)教學(xué)，也可用于水生毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)的前期認(rèn)知觀察。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂源笮蜏袨槔?如條件允許，也可選擇多種枝角類浮游動物進(jìn)行觀察和比較)，了解枝角類浮游動物的外部形態(tài)特征(圖2)；學(xué)習(xí)使用體式顯微鏡進(jìn)行生物材料的觀測；掌握生物繪圖的基本技能。

圖2 枝角類雌體模式圖[15]注：1.頸溝；2.吻；3.頭盔；4.殼弧；5.腹突；6.尾剛毛；7.后腹部；8.尾爪； 9.肛刺；10.殼刺；11.夏卵；12.第一觸角；13.第二觸角；14.大顎；15.上唇； 16.胸肢；17.腦；18.視神經(jīng)節(jié)；19.復(fù)眼；20.動眼??；21.單眼；22.食道； 23.中腸；24.直腸；25.盲囊；26.心臟；27.顎腺；28.卵巢；29.生殖孔。Fig. 2 The pattern diagram of female Cladocera[15]Note: 1. cervical notch; 2. mouth; 3. helmet; 4. lateral head ridges; 5. abdominal processes; 6. postabdominal setae; 7. posterior abdomen; 8. postabdominal claw; 9. anal spines; 10. shell spines; 11. embryo; 12. first antennae; 13. second antennae; 14. mandible; 15. labrum; 16. thoracic appendage; 17. brain; 18. optic ganglia; 19. compound eyes; 20. oculomotor muscle; 21. ocellus; 22. prosogaster; 23. midgut; 24. rectum; 25. caecus; 26. heart; 27. shell gland; 28. ovary; 29. genital pore.

實(shí)驗(yàn)方法簡介：準(zhǔn)備大型溞活體，置于60 mL小燒杯中，每組5～10只，肉眼(或用放大鏡)觀察大型溞在水中的運(yùn)動情況。用塑料吸管吸取1只活動正常的健康大型溞，置于載玻片中央，加少許培養(yǎng)液避免完全干燥。將載玻片放置在體式顯微鏡的載物臺上，按照操作規(guī)程觀察，并繪制大型溞外部形態(tài)圖。

2.2 理化因素對大型溞心率的影響(2～4學(xué)時)

大型溞身體透明，便于觀察及測定心率。研究表明，溞類有類似于哺乳動物的肌原性心臟組織，對能影響人類心率變化的一系列受體激動劑和拮抗劑，表現(xiàn)出相似的反應(yīng)特征[16]。多種環(huán)境污染物，如鎘離子、全氟辛烷磺酸和四氫嘧啶等，均可導(dǎo)致大型溞心率的紊亂[17-19]。因此，心率觀察可作為大型溞的一個易于觀測的生理學(xué)指標(biāo)，用于反映各種脅迫條件對水生動物的影響，并可作為反映水質(zhì)污染程度的生物學(xué)指標(biāo)。在學(xué)生實(shí)驗(yàn)中，考慮到安全性因素，可選擇1%～20%的乙醇溶液作為實(shí)驗(yàn)毒物。除此之外，重金屬離子、pH(4～11)和鹽度(1～8)的變化等也可作為脅迫因素[17]。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄克w中的化學(xué)因素(如乙醇)對大型溞的生理影響；通過劑量-效應(yīng)曲線的繪制及半數(shù)效應(yīng)濃度(effect concentration 50%, EC50)的計(jì)算，理解毒理學(xué)中的劑量-效應(yīng)關(guān)系。

實(shí)驗(yàn)方法簡介：選擇產(chǎn)自同一母體、生長狀態(tài)良好、活動正常的大型溞幼溞(<24 h)用于實(shí)驗(yàn)。乙醇測試液的濃度分別為1%、5%、10%、15%和20%，并設(shè)置空白對照組(清水)。實(shí)驗(yàn)時，取1滴清水放在載玻片中央，用吸管吸取1只大型溞放在清水里，放置在體式顯微鏡下，緩慢蓋上蓋玻片，用秒表和計(jì)數(shù)器記錄大型溞的心率(可僅記錄10 s)；用吸水紙將水吸干，滴加2～3滴1%的乙醇溶液，從蓋玻片另一側(cè)用吸水紙吸取乙醇溶液，使大型溞處于乙醇溶液中，5～10 s后，記錄大型溞的心率；重復(fù)上述步驟，分別記錄其他濃度乙醇溶液中大型溞的心率。每個濃度測量3～5只大型溞，并取平均值作為該濃度下的大型溞心率。如大型溞心率過快難以計(jì)數(shù)，可通過CCD顯微攝像等設(shè)備輔助記錄。

2.3 理化因素對大型溞攝食能力的影響(2～4學(xué)時)

水中污染物不僅會影響大型溞的心率，還可能對其攝食能力產(chǎn)生影響，進(jìn)而對動物的個體生長、繁殖造成干擾，甚至影響到種群的數(shù)量。通過對大型溞攝食率和濾水率的測定，可很好地反映其攝食能力的變化[15-16]。本實(shí)驗(yàn)可與2.2中的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容相結(jié)合，設(shè)置綜合性實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模禾骄克形廴疚飳Υ笮蜏袛z食能力的影響；掌握大型溞攝食行為的測定方法。

實(shí)驗(yàn)方法簡介：實(shí)驗(yàn)用動物與2.2相同。脅迫因素可選擇重金屬離子、有機(jī)污染物和微納米顆粒等進(jìn)行暴露處理，本文以鎘離子為例進(jìn)行介紹。在實(shí)驗(yàn)前48 h，教師應(yīng)配制質(zhì)量濃度分別為0、0.01、0.02、0.05、0.08和0.1 mg·L-1的CdCl2(CdCl2·5H2O，分析純)溶液，再將實(shí)驗(yàn)用幼溞(<24 h)隨機(jī)置于測試液中，每組加入10只幼溞。向各組中加入初始密度為5×105個·mL-1的普通小球藻(也可用近頭狀偽蹄形藻、斜生柵藻等代替)，并設(shè)置一個空白對照組(僅有數(shù)量相同的藻類但無大型溞)。實(shí)驗(yàn)開始時，指導(dǎo)學(xué)生從各組中移取一定數(shù)量大型溞培養(yǎng)液，根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件，選用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法或光密度法測定小球藻的密度。并參考如下公式計(jì)算大型溞的濾水率(F)和攝食率(G)：

F=V/N(lnCt-lnCtf)/t

(1)

G=V/N(lnCt-lnCtf)/t·(Ctf-C0)/(lnCtf-lnC0)

(2)

式中：F為濾水率(mL·只-1·h-1)，即單個大型溞單位時間過濾的食物溶液體積；G為攝食率(個·只-1·h-1)，即單個大型溞單位時間攝入的藻細(xì)胞數(shù)量；V為食物溶液體積(mL)；N為大型溞的數(shù)量(只)；C0為起始小球藻濃度(個·mL-1)；Ct為對照組中最終小球藻濃度(個·mL-1)；Ctf為試驗(yàn)組中剩余小球藻濃度(個·mL-1)；t為攝食時間(h)。

指導(dǎo)學(xué)生對獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，利用統(tǒng)計(jì)軟件獲得鎘離子對大型溞濾水率和攝食率的EC50。

2.4 大型溞活動抑制實(shí)驗(yàn)(48 h急性毒性實(shí)驗(yàn))

本實(shí)驗(yàn)適用于檢測水中化合物的急性毒性。毒理學(xué)終點(diǎn)為大型溞的活動抑制(包括死亡)。該實(shí)驗(yàn)耗時較長，適用于本科生的綜合性和實(shí)踐性教學(xué)。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂阅挲g<24 h的幼溞為實(shí)驗(yàn)動物，通過48 h的急性暴露，得到相應(yīng)時間點(diǎn)的半數(shù)致死濃度(lethal concentration 50%, LC50)；掌握大型溞活動抑制的實(shí)驗(yàn)方法。

實(shí)驗(yàn)方法簡介：實(shí)驗(yàn)方案可參考標(biāo)準(zhǔn)測試方法[5,10-12]。仍以鎘離子為受試化合物進(jìn)行介紹。在實(shí)驗(yàn)開始前，授課教師需進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)或查閱相關(guān)文獻(xiàn)，確定正式試驗(yàn)的濃度范圍。為了得到相對完整的劑量-效應(yīng)曲線，正式實(shí)驗(yàn)時可按等比間距設(shè)置5個以上鎘離子濃度。暴露實(shí)驗(yàn)可用小燒杯或六孔板為實(shí)驗(yàn)容器。每個濃度設(shè)置3個平行，每個平行5只大型溞，暴露溶液至少20 mL，實(shí)驗(yàn)期間不喂食。在暴露實(shí)驗(yàn)中，每天定時檢查大型溞的狀況，記錄出現(xiàn)的異常情況。在暴露終點(diǎn)(24 h或48 h)，計(jì)數(shù)活動能力受到抑制(包括死亡)的大型溞數(shù)量，計(jì)算24 h或48 h的EC50。判斷大型溞活動抑制(immobilization)的方法為：輕輕搖動實(shí)驗(yàn)容器，如果15 s之內(nèi)大型溞不能游動，認(rèn)為其運(yùn)動能力受到抑制。進(jìn)一步可通過觀察活動抑制個體的心跳，判斷大型溞是否死亡。指導(dǎo)學(xué)生依據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

2.5 大型溞繁殖抑制實(shí)驗(yàn)(21 d慢性毒性實(shí)驗(yàn))

在溞類毒理學(xué)測試中，如果急性毒性測試確定某測試物具有顯著性抑制作用，將進(jìn)行繁殖抑制實(shí)驗(yàn)以確定該測試物的慢性毒性。該實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)關(guān)注以大型溞的繁殖能力為指標(biāo)的亞致死效應(yīng)，同樣可參照標(biāo)準(zhǔn)測試方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)[6,20]。在這些標(biāo)準(zhǔn)方法中，以21 d為一個周期的慢性毒性測試最為常用。如前所述，枝角類的生活史由交替進(jìn)行的孤雌生殖世代和兩性生殖世代組成，在正常的生活環(huán)境下以孤雌生殖為主。只有當(dāng)環(huán)境惡化，如溫度變化、食物匱乏或密度過大時，大型溞才會形成冬卵以度過不良環(huán)境[9]。本實(shí)驗(yàn)室前期研究也表明(未發(fā)表數(shù)據(jù))，健康幼溞(< 24 h)經(jīng)過21 d培養(yǎng)，可產(chǎn)生10～30只后代(3～7 d繁殖一次)。因此，在進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)前，教師應(yīng)檢查實(shí)驗(yàn)用大型溞的培養(yǎng)條件(可參見前文)，保證有足夠健康幼溞用于測試。

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂阅挲g<24 h的幼溞為實(shí)驗(yàn)動物，通過21 d的慢性暴露，得到引起大型溞繁殖抑制的EC50；掌握大型溞繁殖抑制的實(shí)驗(yàn)方法。

實(shí)驗(yàn)方法簡介：所用測試物的濃度將依據(jù)已得到的急性測試的半數(shù)效應(yīng)濃度來設(shè)置，一般在EC50值以下，按照等比間距設(shè)置5個以上濃度。實(shí)驗(yàn)用溞仍為來自于同一親體，溞齡<24 h的幼溞(親溞)。隨機(jī)選擇健康幼溞，暴露于一定濃度范圍的測試溶液中，每只一個容器，實(shí)驗(yàn)周期為21 d，暴露期間投喂適量的食物以保證大型溞的生存和繁殖?？瞻讓φ战M和各濃度測試組均設(shè)置10個平行，每個平行1只親溞，置于玻璃燒杯或六孔板中。每日檢查每個容器中的親溞存活狀態(tài)及是否有幼溞產(chǎn)生，將幼溞挑出并計(jì)數(shù)，清理容器中的殘餌和蛻皮。試驗(yàn)結(jié)束時(21 d)，對每只存活親溞繁殖的存活幼溞的總數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)(不包括試驗(yàn)期間死亡的幼溞)。還可對其他終點(diǎn)指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)以表示親溞的繁殖量，如每只親溞的繁殖次數(shù)、親溞的頭胎產(chǎn)溞時間和實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)親溞的體長等。最后，通過對暴露于受試物中的親溞繁殖量與對照組的比較，確定EC50值或最低可觀察效應(yīng)濃度(lowest observed effect concentration, LOEC)和無可觀察效應(yīng)濃度(no observed effect concentration, NOEC)，并指導(dǎo)學(xué)生撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

該實(shí)驗(yàn)周期長，統(tǒng)計(jì)指標(biāo)多。適合有研究生參與(助課)下的本科生實(shí)踐教學(xué)。通過該實(shí)驗(yàn)，可對學(xué)生進(jìn)行完整實(shí)驗(yàn)周期的訓(xùn)練，如文獻(xiàn)查閱、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、測試液的配制、暴露實(shí)驗(yàn)的開展、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的記錄、整理和統(tǒng)計(jì)等。還可結(jié)合2.4中的大型溞活動抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果，訓(xùn)練學(xué)生在實(shí)驗(yàn)報(bào)告的基礎(chǔ)上進(jìn)行學(xué)術(shù)論文的撰寫。通過訓(xùn)練，不僅可鞏固學(xué)生對所學(xué)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)、方法及原理的掌握，還可以培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性思維及獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究的能力。

3 展望(Perspective)

本文僅從形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和毒性測試角度對以大型溞為實(shí)驗(yàn)動物的教學(xué)方案進(jìn)行了設(shè)置。但近年來，隨著水蚤分子毒理學(xué)的建立和發(fā)展，大型溞的分子毒理學(xué)及組學(xué)研究也取得了長足的進(jìn)步。人們可以利用大型溞的基因組、轉(zhuǎn)錄組等信息，對污染物的毒性作用靶點(diǎn)和關(guān)鍵信號通路進(jìn)行分析，以揭示污染物的損傷作用及毒性機(jī)理[21-22]。此外，還可利用表觀遺傳組學(xué)技術(shù)，對污染物的代際傳遞效應(yīng)進(jìn)行探討，進(jìn)而從種群水平對污染物的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評估[23]。上述研究成果均可豐富到實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系中來。例如，可根據(jù)研究目的，選擇不同的目標(biāo)分子設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，在轉(zhuǎn)錄水平、蛋白表達(dá)水平或酶的活性水平上進(jìn)行測試(如膽堿酯酶活性可作為神經(jīng)毒性測試的分子標(biāo)志物)，訓(xùn)練學(xué)生將分子指標(biāo)的改變與毒理學(xué)、生理學(xué)測試結(jié)果相結(jié)合，進(jìn)行測試物生物毒性的綜合評價。這些綜合性的創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)將有利于培養(yǎng)高級應(yīng)用型人才，推動生態(tài)毒理學(xué)教學(xué)的發(fā)展。

總之，大型溞作為水生無脊椎動物中的模式物種，可為毒理學(xué)測試提供準(zhǔn)確有效的毒性數(shù)據(jù)，成為水生毒理學(xué)研究中不可缺少的環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是培養(yǎng)學(xué)生動手能力、創(chuàng)新意識和創(chuàng)造性思維的重要平臺，在生物學(xué)、環(huán)境學(xué)和生態(tài)學(xué)等相關(guān)專業(yè)的學(xué)生實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)節(jié)中，引入和建立以大型溞為實(shí)驗(yàn)材料的實(shí)驗(yàn)教學(xué)體系，是可行并且必要的。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的編排上，可本著由易而難的原則，兼顧基礎(chǔ)和前沿，根據(jù)課時要求對上述實(shí)驗(yàn)內(nèi)容酌情增減，以滿足不同程度學(xué)生的教學(xué)需求。