子宮內(nèi)膜炎患者解脲支原體感染檢測的臨床應(yīng)用研究

朱翠蓮，蔡海容，李紹持，馮廣革，覃春玲，張瑜

(玉林市中醫(yī)院，廣西 玉林 537000)

0 引言

解脲脲原體(UU)是女性泌尿生殖道感染的重要病原體之一，可引起女性非淋菌性尿道炎、輸卵管炎、腎盂腎炎、子宮內(nèi)膜炎、盆腔炎等，并可引起反復(fù)流產(chǎn)、產(chǎn)后發(fā)熱、不孕不育。近年來，它的發(fā)病率呈上升趨勢。由于缺乏細(xì)胞壁的支原體抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的合成B -內(nèi)酰胺抗生素如青霉素和頭孢菌素類的自然抗卡那霉素、鏈霉素和其他氨基糖苷類抗生素藥物和其他抗菌藥物容易出現(xiàn)耐藥，再次與臨床抗生素的廣泛應(yīng)用和不合理用藥，導(dǎo)致增加的阻力。因此，應(yīng)重視支原體培養(yǎng)和耐藥檢測，以更好地指導(dǎo)臨床合理用藥。

為進(jìn)一步了解女性生殖道解脲脲原體對(duì)抗菌藥物的敏感性和耐藥性，對(duì)2020年1月至2020年8月我院收治的300例子宮內(nèi)膜炎患者進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，并對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。情況報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

在本課題中，我們計(jì)劃選取2020年1月至2020年8月我院收治的子宮內(nèi)膜炎患者300例作為研究組。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)一周內(nèi)出現(xiàn)新發(fā)下腹痛、白帶增加及性質(zhì)改變、月經(jīng)不調(diào)等癥狀，有或無發(fā)熱；(2)體格檢查子宮壓痛、頸椎升降痛；(3)外周血白細(xì)胞升高或不升高；排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)生殖系統(tǒng)惡性腫瘤；(2)最近兩周使用了抗支原體藥物。同時(shí)收集我院體檢中心100名健康女性的宮頸分泌物作為對(duì)照組。兩組基本信息差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 檢測方法

1.2.1 標(biāo)本采集

所有患者1周內(nèi)未使用抗菌藥物，常規(guī)消毒外陰，清除陰道口分泌物，將無菌棉拭子置入宮頸管內(nèi)1~2cm，輕輕旋轉(zhuǎn)1周后停留10~30s取出，放入無菌試管中送檢，立即送檢。

1.2.2 檢測

取200μL棉拭子洗滌液并加入到尿素培養(yǎng)基中將其充分混合均勻，放置于37℃恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)48h，根據(jù)其是否產(chǎn)尿素酶來檢測，指示劑采用酚紅，每個(gè)孔加有青霉素抑制雜菌生長，如果解脲脲原體孔變紅則為解脲脲原體生長。

1.2.3 藥敏培養(yǎng)方法

在無菌條件下，對(duì)樣品進(jìn)行藥物敏感性測試。試劑盒由珠海麗珠試劑有限公司生產(chǎn)。具體操作和解釋方法嚴(yán)格按照說明進(jìn)行。該試劑盒一共包含9種抗生素的藥敏試驗(yàn)，包括美滿霉素、羅紅霉素、左旋氧氟沙星、阿奇霉素、強(qiáng)力霉素、交沙霉素、氧氟沙星、克拉霉素、司帕沙星。在藥敏孔中，有高低兩個(gè)抑菌濃度，如果高低孔都出現(xiàn)顏色說明都耐藥，如果低濃度孔有顏色，高濃度孔沒顏色就是中介，高低孔都木有顏色就是敏感。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)兩組人群中Uu陽性檢出率。研究組患者接受廣譜抗生素治療，療程結(jié)束后統(tǒng)計(jì)Uu感染情況，并分析其與患者耐藥性之間的關(guān)系。

1.4 檢測原理

利用培養(yǎng)與生化反應(yīng)相結(jié)合的原理對(duì)這些標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)、鑒定、計(jì)數(shù)和藥敏測定。解脲脲原體中含有脲酶，它能分解尿素產(chǎn)生的NH3，NH3可引起酸堿指示劑的顏色發(fā)生變化，根據(jù)酸堿指示劑顏色的變化對(duì)解脲脲原體的耐藥性進(jìn)行判定。藥敏實(shí)驗(yàn)板上的包被有9種抗生素，若所測的病原體對(duì)包被的抗生素敏感，則其酶的活性受到抑制，不會(huì)發(fā)生顏色的變化。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究使用Excel數(shù)據(jù)檢查的輸入，使用生物學(xué)SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，測量數(shù)據(jù)結(jié)果使用比例統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表示，根據(jù)不同的數(shù)據(jù)類型和檢查目的t檢驗(yàn)和卡方檢驗(yàn)和等級(jí)測試，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

400 例支原體陽性標(biāo)本對(duì)9種抗菌藥物耐藥性，可見對(duì)照組對(duì)抗生素的敏感率比研究組高，耐藥率比研究組低。見表1。

表1 400例支原體陽性標(biāo)本對(duì)9種抗菌藥物耐藥性

3 討論

支原體是一種缺乏細(xì)胞壁，被三層單位膜結(jié)構(gòu)所取代的原核微生物，具有高度的多形性、可塑性、溶解度，并能通過細(xì)菌過濾器。支原體的基因組是一種典型的原核生物類型，由一個(gè)環(huán)狀雙鏈DNA組成。支原體對(duì)宿主器官和組織具有高度的特殊親和力。Uu是泌尿生殖道感染的重要病原體。其特殊的頂端結(jié)構(gòu)使其能牢固地粘附在靶細(xì)胞表面，引起非特異性尿道炎、宮頸炎和輸卵管炎。Uu除了通過生殖道感染外，還可引起胎兒宮內(nèi)感染。導(dǎo)致女性泌尿生殖道感染的重要病原體是UU，這與相關(guān)報(bào)道一致。近年來，支原體混合感染已成為女性泌尿生殖道感染的新特點(diǎn)。藥物敏感結(jié)果表明，氧氟沙星(79%)UU電阻率最高，這可能是由于近年來喹諾酮類藥物的廣泛使用，導(dǎo)致支原體染色體上旋轉(zhuǎn)酶基因位于染色體的支原體和改變了支原體染色體旋轉(zhuǎn)酶基因的靶點(diǎn)，從而減少喹諾酮類的能力阻止DNA復(fù)制在支原體。支原體DNA轉(zhuǎn)酶由A亞基和B亞基組成。一個(gè)亞基的結(jié)構(gòu)是喹諾酮類化合物和配合物結(jié)合的決定性因素，其63~106位氨基酸是喹諾酮類化合物結(jié)合的關(guān)鍵。其次，主動(dòng)泵送系統(tǒng)也起了作用。Uu敏感率最高的是美滿霉素(85%)，其次為交沙霉素(84%)、強(qiáng)力霉素(79%)，它們可作為Uu感染治療的首選藥物。交沙霉素是一種16環(huán)非誘導(dǎo)大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物，它與支原體核蛋白的50亞基結(jié)合，抑制氨基酸- trna和肽-trna之間形成肽鍵，導(dǎo)致蛋白質(zhì)合成紊亂和細(xì)菌死亡。這種藥有廣泛的抗菌譜，而且很有效。

子宮內(nèi)膜炎的病原體是可以在人工培養(yǎng)基上生長的最小和最簡單的原核生物。解脲支原體屬于支原體科脲原體屬。解脲脲原體是引起非淋菌性尿道炎(宮頸炎)等泌尿生殖系統(tǒng)疾病的主要病原體，已被列為性傳播疾病的主要病原體。性活躍的子宮內(nèi)膜炎患者解脲支原體感染的發(fā)生率較高，檢出率在40~95%。美滿霉素和強(qiáng)力霉素可作為治療子宮內(nèi)膜炎患者解脲支原體感染的首選抗生素，交沙霉素可作為治療子宮內(nèi)膜炎患者解脲支原體感染的經(jīng)驗(yàn)。