對(duì)30例外周血染色體異常核型患者的檢測(cè)分析

鄔麗紅 劉運(yùn)華

（河源市婦幼保健院 廣東河源 517000）

1 前言

染色體異常核型是指染色體結(jié)構(gòu)或數(shù)目異常，一種是遺傳物質(zhì)的缺失或增加，這種通常會(huì)引起嚴(yán)重的遺傳疾病。另一種是平衡攜帶者，患者本身一般沒(méi)有臨床表現(xiàn)，但是在孕育下一代的時(shí)候，會(huì)有不良的妊娠結(jié)局。目前醫(yī)學(xué)上對(duì)染色體病尚無(wú)有效的臨床治療，因此，對(duì)個(gè)體進(jìn)行染色體檢查并進(jìn)一步指導(dǎo)臨床干預(yù)和優(yōu)生優(yōu)育具有重要的實(shí)際意義[1]。近年來(lái)，各地隨著產(chǎn)前診斷中心的逐漸成立以及遺傳咨詢(xún)門(mén)診的開(kāi)診，外周血染色體核型分析成為對(duì)成人染色體病診斷的重要分析方法[2]。本研究對(duì)我院接診的30例外周血染色體異?；颊哌M(jìn)行回顧性分析，觀察染色體異常核型與生殖遺傳效應(yīng)的關(guān)系。

2 資料與方法

2.1 臨床資料

回顧性分析2016年3月—2020年3月在我院就診的30例外周血染色體異常核型患者臨床資料，其中男性11例，女性19例，年齡（22-43）歲，平均（30.63±5.73）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床表現(xiàn)主要包括不良孕史、復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)、不孕不育、少精弱精等；②受檢者簽署知情同意書(shū)；③均進(jìn)行外周血染色體核型分析檢查；④臨床資料齊全。

2.2 檢測(cè)方法

抽取患者1～2 ml肝素抗凝外周血，用5 ml注射器分別滴加30滴血置于拜迪淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基中，將其置于兩線獨(dú)立的37℃培養(yǎng)箱并培養(yǎng)大約72 h，然后收獲前3 h加2滴20μg/ml的秋水仙素終止培養(yǎng)，經(jīng)過(guò)KCl低滲、冰醋酸與甲醇（1∶3）固定收獲細(xì)胞再進(jìn)行滴片、胰蛋白酶消化、吉姆薩染色終形成基礎(chǔ)G顯帶，然后上徠卡GSL120自動(dòng)分析儀掃片，正常情況下，挑選20個(gè)中期分裂相，分析5個(gè)分散、顯帶較好的核型，嵌合體加數(shù)至60個(gè)分裂相，同時(shí)分析5個(gè)核型。核型分析參照ISCN進(jìn)行，異常者必要時(shí)加做N顯帶與C顯帶進(jìn)行檢測(cè)[3]。

2.3 觀察指標(biāo)

本研究采用WHONET5.6軟件進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)，統(tǒng)計(jì)異常染色體核型的分布情況，并觀察異常染色體核型患者的生殖效應(yīng)表現(xiàn)。

3 結(jié)果

在30例外周血染色體異常核型患者中，染色體結(jié)構(gòu)異常12例（倒位5例，羅伯遜易位3例，平衡易位4例），占比40%；染色體多態(tài)性11例，占比36.7%；染色體數(shù)目異常7例，占比23.3%。生殖效應(yīng)表現(xiàn)為流產(chǎn)的有17例，胎停的有5例，不良孕史6例，弱精癥2例，詳情見(jiàn)表1。

表1 30例患者外周血染色體異常核型分布與生殖效應(yīng)

4 討論

4.1 染色體結(jié)構(gòu)異常與生殖效應(yīng)異常的關(guān)系

染色體結(jié)構(gòu)異常主要是指染色體或染色單體經(jīng)斷裂-重?fù)Q或互換而導(dǎo)致的染色體畸變或染色單體畸變，包括缺失、重復(fù)、倒位、易位等。染色體倒位是由于染色體有兩處斷裂點(diǎn)并發(fā)生180°旋轉(zhuǎn)重新形成新的重排染色體，一般分為臂內(nèi)倒位和臂間倒位[4]。本研究有5例染色體倒位，其中男性3例，妻子均表現(xiàn)為自然流產(chǎn)或胎停，2例女性也表現(xiàn)為自然流產(chǎn)，這是因?yàn)椋喝旧w倒位在遺傳表現(xiàn)中，生殖細(xì)胞通過(guò)減數(shù)分裂分為四種染色體配子，包括正常染色體、倒位染色體、部分重復(fù)染色體和部分缺失染色體，也就是說(shuō)染色體倒位攜帶者中2/4關(guān)于遺傳物質(zhì)的增減變化，這種發(fā)生了染色體改變的異常配子與正常配子結(jié)合后產(chǎn)生的新個(gè)體，大多難以正常發(fā)育，出現(xiàn)流產(chǎn)、胎停等生殖異常。

平衡易位在染色體結(jié)構(gòu)異常中較為常見(jiàn)，本研究中4例平衡易位攜帶者中，1例表現(xiàn)自然流產(chǎn)，1例表現(xiàn)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，2例表現(xiàn)為妻子胎停。在遺傳表現(xiàn)中，染色體平衡易位攜帶者的生殖細(xì)胞在減數(shù)分裂中可產(chǎn)生18種類(lèi)型的配子，理論上有1/18可生育正常后代，1/18可生育相同染色體平衡易位的后代，而16/18可能導(dǎo)致流產(chǎn)、胎?；虺錾毕輀5]。由于染色體平衡易位攜帶者并無(wú)遺傳物質(zhì)的丟失，大部分患者在臨床表現(xiàn)和智力發(fā)育方面與正常人無(wú)異，可正常生育或攜帶配子，但有流產(chǎn)史患者需做流產(chǎn)絨毛染色體檢測(cè)以及外周血染色體核型分析以排除遺傳學(xué)因素[6]。另外，本研究有3例為羅伯遜易位，生殖效應(yīng)均表現(xiàn)為流產(chǎn)。羅伯遜易位又稱(chēng)著絲粒融合，主要發(fā)生在D、G組染色體之間，包括13、14、15、21、22號(hào)染色體，在人群中的總發(fā)生率約為1/1000[7]。在非同源性羅伯遜易位中，由于短臂小，遺傳基因少，因此導(dǎo)致的生殖遺傳效應(yīng)不明顯。但是同源性羅伯遜易位與正常配子結(jié)合后，可形成單體或三體型合子，導(dǎo)致流產(chǎn)、胎死腹中或畸形胎兒。

4.2 染色體多態(tài)性與生殖效應(yīng)異常的關(guān)系

本研究中一共檢出有11例染色體多態(tài)性，占比36.7%，主要表現(xiàn)在1、9、16、Y異染色質(zhì)增加或減少、D/G組隨體柄增長(zhǎng)、雙隨體等。既往認(rèn)為，由于染色體多態(tài)性一般分布在基因編碼少、無(wú)轉(zhuǎn)錄活性、含高度重復(fù)序列的染色質(zhì)區(qū)，因此不會(huì)出現(xiàn)臨床癥狀或生殖異常。但是，近年來(lái)已有研究證實(shí)[8]，染色質(zhì)在著絲粒功能方面，以及進(jìn)行姐妹染色單體結(jié)合和染色體分離所起的作用至關(guān)重要，這就導(dǎo)致異常染色質(zhì)可能影響減數(shù)分裂時(shí)染色體的配對(duì)聯(lián)合以及配子的形成，進(jìn)而導(dǎo)致生殖遺傳效應(yīng)異常。吳亞敏[9]對(duì)75例不孕不育和75例自然流產(chǎn)的患者進(jìn)行體外周淋巴細(xì)胞培養(yǎng)、G顯帶及核型分析發(fā)現(xiàn)，染色體異常率高達(dá)16.7%，顯著高于正常人群，并指出染色體多態(tài)性與不孕不育、自然流產(chǎn)具有較高的關(guān)聯(lián)性。本次研究11例染色體多態(tài)性攜帶者生殖效應(yīng)，其中流產(chǎn)6例，胎停1例，弱精癥2例，不良孕史2例。目前國(guó)內(nèi)各遺傳中心對(duì)染色體多態(tài)性沒(méi)有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，但是有不少研究報(bào)道染色體多態(tài)性在臨床上與生殖異常有一定的相關(guān)性[10]，加之染色體多態(tài)性在人群中攜帶率較高，因此在遺傳咨詢(xún)中應(yīng)重視染色體多態(tài)性。

4.3 染色體數(shù)目異常與生殖效應(yīng)異常的關(guān)系

在減數(shù)分裂過(guò)程中，由于染色體不能平均分配或分裂受阻，均可導(dǎo)致染色體數(shù)目異常，以三體的非整倍體形式最常見(jiàn)。這是由于生殖細(xì)胞在減數(shù)分裂過(guò)程中，有一對(duì)染色體沒(méi)有分開(kāi)而導(dǎo)致一個(gè)配子多一條染色體，一個(gè)配子少一條染色體，多一條染色體的配子與正常配子結(jié)合后形成了三體。本研究中有7例染色體數(shù)目異常，占比23.3%。生殖效應(yīng)表現(xiàn)方面，出現(xiàn)不良孕史4例，流產(chǎn)2例，胎停1例，這說(shuō)明了染色體數(shù)目異常與生殖效應(yīng)異常密切相關(guān)，也說(shuō)明了有不良孕史或流產(chǎn)史的女性不僅需要關(guān)注其自身相關(guān)因素，同時(shí)要注重遺傳學(xué)篩查。

綜上所述，染色體結(jié)構(gòu)異常、染色體多態(tài)性、染色體數(shù)目異常與生殖效應(yīng)異常密切相關(guān)，是導(dǎo)致流產(chǎn)、胎停等不良妊娠結(jié)局的重要因素，對(duì)高危人群進(jìn)行外周血染色體檢查具有重要的臨床意義。