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    民族藥紅穿破石的研究現(xiàn)狀

    2021-09-14 09:10:18劉纖纖梁曉蓮李文莉劉玟君黃周艷曾水風(fēng)韋澤蕓
    湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2021年16期
    關(guān)鍵詞:核果蒽醌黃素

    劉纖纖,梁曉蓮,李文莉,陳 勇,劉玟君,黃周艷,李 媛,曾水風(fēng),韋澤蕓

    (廣西中醫(yī)藥大學(xué)科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心,南寧 530200)

    紅穿破石是指鼠李科屬植物翼核果(Ventilago leiocarpaBenth.)的根及根莖,又名鐵牛入石、血風(fēng)藤、青筋藤等,為木質(zhì)藤本,生于山間溝邊、疏林下或灌木叢。紅穿破石在廣東、廣西、福建、湖南、云南等地均有產(chǎn)出,在印度、緬甸、越南等國都有分布。紅穿破石可以清熱利濕,還可以利尿通淋,對(duì)泌尿系統(tǒng)結(jié)石具有特殊作用,可用于尿路感染、急慢性腎炎、腎結(jié)石的治療,還具有舒筋活絡(luò)、盈補(bǔ)氣血的功效,對(duì)于跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)、風(fēng)濕疼痛等癥狀都有較好的治療效果。

    民族藥想要跟上時(shí)代發(fā)展,就需要不斷地進(jìn)行深入研究,通過創(chuàng)新的研究成果推動(dòng)民族藥的發(fā)展。紅穿破石作為一種具有多種功效的民族藥,目前業(yè)界對(duì)其藥理作用以及有效物質(zhì)的深入研究鮮見報(bào)道。本研究通過對(duì)前人的文獻(xiàn)進(jìn)行整理,在此基礎(chǔ)上探究紅穿破石的藥用價(jià)值,以期對(duì)紅穿破石的開發(fā)應(yīng)用提供參考。

    1 紅穿破石化學(xué)成分的研究

    目前,翼核果的化學(xué)成分發(fā)現(xiàn)的不多,以鼠李科植物作參考,發(fā)現(xiàn)鼠李屬植物中含有豐富的黃酮類成分[1],其中以多羥基黃酮醇及其苷類居多,并證明黃酮化合物在鼠李屬植物中普遍存在,其次含量較多的是醌類物質(zhì),主要蒽醌類成分為大黃酚、大黃素、大黃素甲醚以及其苷類,此外鼠李科植物還含有萘酚類、苯酚類香豆素類物質(zhì)。

    應(yīng)百平等[2]從海南島產(chǎn)的翼核果植物根中分離得到大黃素、大黃素-6,8-二甲醚、1-羥基-6,7,8-三甲氧基-3-甲基蒽醌、翼核果醌和羽扇豆醇,其中1-羥基-6,7,8-三甲氧基-3-甲基蒽醌是首次從自然界中分離到,而翼核果醌也是一種新化合物。王雪芬等[3]對(duì)紅穿破石進(jìn)行了化學(xué)成分研究,從紅穿破石中分離到3個(gè)蒽醌成分和2個(gè)萘醌成分,其中萘醌成分中1個(gè)新的化合物被命名為翼核果素(圖1)。從目前的研究成果來看,翼核果素、翼核果醌-Ⅰ這2種成分只能通過分離紅穿破石得到。

    圖1 翼核果素、翼核果醌的分子式

    王曉煒等[4]從廣西產(chǎn)紅穿破石根莖的抗炎有效部位堿提取酸沉淀中分離得到6個(gè)化合物,其中首次分離得到大黃素-8-O-β-D-葡萄糖甙、酮類化合物(1,6-二羥基-3-甲基酮-8-羧酸)以及從本屬植物首次分離而得的異黃酮類化合物鶯尾甙元。王曉煒等[5]從紅穿破石的根莖中分離得到1個(gè)新化合物,命名為翼核酮苷,并對(duì)其抗氧化活性進(jìn)行了初步探究,為紅穿破石藥材質(zhì)量控制方面提供了依據(jù)。

    2 紅穿破石的生藥鑒定

    翼核果屬植物種類繁多,中國分布僅有翼核果、毛果翼核果(V.calyculata)、海南翼核果(V.inaequilateralis)、印度翼核果(V.maderaspatana)、臺(tái)灣翼核果(V.elegans)以及矩葉翼核果(V.oblongifolia)等少數(shù)品種[6]。此外,在翼核果屬中發(fā)現(xiàn)了2個(gè)云南新種,分別是少脈翼核果(VentilagopaucinervisC.Y.Wu ex L.L.Deng et G.S.Fan)[7]和政德翼核果(VentilagozhengdeiG.S.Fan)[8]。

    2.1 性狀鑒別

    紅穿破石的性狀特征:根、莖均呈圓柱形,常彎曲有分支,莖表面暗棕紅色,栓皮稍松,易薄片狀剝離,除去皮層,木質(zhì)部表面有粗細(xì)不等的縱棱線,縱切面深黃色,紋理通直易劈開,外側(cè)木栓層棕紅色,易剝離,內(nèi)側(cè)有細(xì)層紋能呈片狀剝離,木質(zhì)部鮮黃色,可見導(dǎo)管孔單個(gè)或多個(gè)連結(jié)呈放射狀排列,有細(xì)密放射紋及多個(gè)年輪環(huán)紋。

    2.2 顯微鑒別

    梁超楊等[9]發(fā)現(xiàn)紅穿破石的顯微特征顯著,橫切面木栓層由10多列細(xì)胞組成,常含有棕黃色物。根皮層內(nèi)分布著單個(gè)石細(xì)胞,中柱部位明顯可見有較多呈間歇性環(huán)狀的石細(xì)胞群和纖維束。莖的韌皮部較寬,大型的分泌細(xì)胞形成層附近分散分布,而石細(xì)胞群的位置位于射線部位。藥材粉末化后還可以看見晶體石細(xì)胞。壁稍厚,皮層寬廣,薄壁細(xì)胞多個(gè)形,切線向延長,草酸鈣方晶較多,韌皮部纖維束多,排列成斷續(xù)環(huán)狀,形成層環(huán)明顯,其中可見棕黃層塊,木質(zhì)部導(dǎo)管單個(gè)或多個(gè)相連,呈放射狀排列,射線細(xì)胞近方形。薄壁細(xì)胞內(nèi)含淀粉粒。

    紅穿破石粉末產(chǎn)品中木纖維多數(shù)成束,少數(shù)散離,狹長,兩端尖,壁較厚,木化,胞腔狹線形,纖維束的外圍薄壁細(xì)胞中含有草酸鈣方晶,以晶纖維的狀態(tài)存在。草酸鈣方晶較多,易見,呈方形、斜方形。棕色塊:少數(shù),黃棕色,形狀不一。導(dǎo)管:具緣紋孔導(dǎo)管碎片多見,且較大,紋孔口橢圓形,也有少數(shù)網(wǎng)紋導(dǎo)管碎片。淀粉粒:單粒,呈現(xiàn)形狀有卵形、類球形、圓形、半圓形,臍點(diǎn)可見,呈點(diǎn)狀,短線形;復(fù)粒由單粒復(fù)合而成。木栓細(xì)胞:有時(shí)顯淡棕色,木化,其表面觀呈多角形,大小均勻,斷面觀呈狹長方形,壁較厚,有的胞腔內(nèi)有棕色物。射線細(xì)胞:徑向斷面可見,細(xì)胞呈類方形、長方形,壁稍增厚,紋孔明顯或不明顯。

    3 紅穿破石的含量測定

    農(nóng)云開等[10]采用薄層色譜法對(duì)紅穿破石中大黃素、翼核果醌進(jìn)行鑒別,結(jié)果發(fā)現(xiàn),紅穿破石中含有多種醌類成分,其中以大黃素含量高。為此,專門建立了一種薄層鑒別方法,該方法具有較高的特異性,能夠有效地把控瑤藥紅穿破石的質(zhì)量。

    黃維安等[11]采用HPLC法對(duì)紅穿破石中大黃素的含量進(jìn)行測定,色譜柱為EclipseXDB-C18色譜柱(4.6 mm×150 mm,5μm),將甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)作為流動(dòng)相,將流速控制在1.0 mL/min,把檢測波長控制為285 nm,把柱溫控制為30℃,把進(jìn)樣量控制為10μL,結(jié)果發(fā)現(xiàn),對(duì)大黃素的進(jìn)樣量進(jìn)行控制,控制其范圍在0.006 3~0.063 0μg之間時(shí),進(jìn)樣量與峰面積的比值,最終呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。

    劉歡等[12]采用Agilent TC-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm)對(duì)紅穿破石的HPLC指紋圖譜進(jìn)行研究,采用甲醇-0.1%磷酸鹽溶液進(jìn)行梯度洗脫,將流速控制為1.0 mL/min,將檢測波長控制為291 nm,最終確定了樣品溶液的制備方法,在克服各種不利因素的影響下,考察檢測波長、流動(dòng)相梯度和色譜柱對(duì)樣品色譜行為的影響,最后從中選擇最優(yōu)的紅穿破石分離條件。研究結(jié)果表明,大黃素作為紅穿破石的有效成分,在指紋圖譜中保留時(shí)間適中,含量高,穩(wěn)定性好,因此適宜以大黃素為參照峰建立紅穿破石的指紋圖譜。

    蒙毅等[13]采用HPLC法對(duì)紅穿破石中大黃素和大黃素甲醚的含量進(jìn)行測定,通過正交試驗(yàn)、對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果得知,當(dāng)將乙醇體積分?jǐn)?shù)控制在60%,液料比控制為8∶1,每次時(shí)間控制在2 h,提取頻率為4次時(shí),可以達(dá)到紅穿破石中總皂苷的最佳提取率。

    胡筱希等[14]采用HPLC法對(duì)紅穿破石藥材中的翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量進(jìn)行測定,建立了紅穿破石中的翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量測定方法。同時(shí),通過測定翼核果素及翼核果醌-Ⅰ對(duì)DPPH自由基的清除能力,以半數(shù)清除濃度(IC50)值作為評(píng)價(jià)清除DPPH自由基能力的指標(biāo),并證明了紅穿破石藥材中翼核果素及翼核果醌-Ⅰ的含量分別為0.56%、0.10%,2種成分清除DPPH自由基的IC50分別為1.13、1.63 mg/mL。胡筱希等[15]利用HPLC法測定翼核果和翼核果醌-Ⅰ的含量,采用響應(yīng)曲面法控制相關(guān)變量,考察提取的次數(shù)、提取的時(shí)間及料液比對(duì)提取效果的影響,測得翼核果的最佳提取條件是料液比1∶25,提取次數(shù)3.98次,提取時(shí)間24.98 min,翼核果醌-Ⅰ的最佳提取條件是料液比1.00∶24.78,提取次數(shù)2.38次,提取時(shí)間20.05 min,這可以為紅穿破石藥材中的翼核果和翼核果醌-Ⅰ的提取工藝提供依據(jù)。

    4 紅穿破石藥理作用研究

    4.1 抗肝損作用

    現(xiàn)代藥理學(xué)證明,紅穿破石及其提取物在一定的條件下作用于小鼠,有減輕乙醇致小鼠急性肝損傷的作用,進(jìn)一步研究可知,其醇提取物能夠明顯降低乙醇誘導(dǎo)小鼠中的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶升高,與此同時(shí),提高肝臟的過氧化氫酶和總的抗氧化能力,最終達(dá)到明顯減輕肝組織病理改變的效果[16]。黃健等[16]探究其急性毒性試驗(yàn),提示紅穿破石醇提物毒性低,未出現(xiàn)死亡及明顯的毒性反應(yīng),對(duì)乙醇肝損傷有防治作用,其機(jī)制或與增強(qiáng)肝臟抗氧化功能有關(guān),但抗肝損活性部位尚需進(jìn)一步研究。

    4.2 抗氧化作用

    胡筱希等[14]以DPPH作為一種穩(wěn)定的以氮為中心的自由基,當(dāng)有抗氧化劑存在時(shí),其吸收消失或減弱,且吸光度變小的程度與自由基被清除的程度呈定量關(guān)系,可通過檢測其吸光度來評(píng)價(jià)樣品的抗氧化性。其研究結(jié)果得到,紅穿破石提取物具有抗氧化活性,由于翼核果素的抗氧化活性和含量均大于翼核果醌-Ⅰ,可以推測翼核果素為紅穿破石提取物抗氧化活性的主要貢獻(xiàn)者。

    據(jù)《中國瑤藥學(xué)》[17]記載,民間可用于治療慢性肝炎以及肝硬化,抗氧化能力是有效反映肝損傷與肝再生失衡狀態(tài)評(píng)價(jià)的重要因素,紅穿破石中的特征成分翼核果素及翼核果醌-Ⅰ具有一定的清除自由基能力。紅穿破石化學(xué)成分中含有抗氧化物質(zhì),對(duì)紅穿破石高抗氧化進(jìn)行基礎(chǔ)性的研究,可為抗氧化產(chǎn)品提供理論依據(jù)??寡趸涂寡鬃饔孟嚓P(guān),因此,對(duì)紅穿破石兩者關(guān)系進(jìn)行研究具有理論與現(xiàn)實(shí)的意義。

    4.3 抗癌作用

    紅穿破石具有養(yǎng)血祛風(fēng)、固腎益精、舒筋活絡(luò)等功效,可以用于貧血頭暈、急慢性肝炎、跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)痛、內(nèi)傷等疾病的治療。經(jīng)臨床試驗(yàn),服用紅穿破石被證明有升高白血球的作用,特別對(duì)婦科癌癥治療期間出現(xiàn)的白細(xì)胞減少癥有較好的療效[18]。

    徐綏緒等[19]從紅穿破石的莖中分離得到2種微量的新化合物,并且通過采用合理的研究方法,將這2種新的化合物作用于人體慢性髓樣白血病細(xì)胞K562,測定這2種新的化合物對(duì)該種類細(xì)胞抑制生長作用的強(qiáng)弱。徐宏等[20]研究發(fā)現(xiàn),翼核果素能夠?qū)θ烁伟┘?xì)胞HepG2裸鼠移植瘤生長產(chǎn)生抑制作用,其機(jī)制可能與MAPK、p53和TNF信號(hào)通路有關(guān)。

    4.4 對(duì)T細(xì)胞和B細(xì)胞增殖的抑制作用

    在尋找自然界免疫抑制物質(zhì)的過程中,Wang等[21]采用乙醇提取物和所有分離化合物體外對(duì)小鼠脾臟細(xì)胞的細(xì)胞毒性、對(duì)Concanavalin A(ConA)誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖和脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的B細(xì)胞增殖的抑制活性進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn)紅穿破石粗提物對(duì)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞增殖有較強(qiáng)的體外抑制作用。

    4.5 其他作用

    陶濤等[22]用原子吸收分光光度法及電感禍合等離子體發(fā)射光譜法測定紅穿破石粉末中20種元素的含量,其分析結(jié)果表明,紅穿破石含有多種人體必需的微量元素,其中Fe、Zn、Cu、Mn、Cr、Co等元素的含量及比例對(duì)其功效有一定的關(guān)聯(lián)。鐵是生物體內(nèi)非常重要的微量元素,而紅穿破石中含有大量的Fe,故其與補(bǔ)血功能有一定的關(guān)聯(lián)。除此之外,紅穿破石還在調(diào)節(jié)人體鉻含量中具有一定作用。

    5 紅穿破石的應(yīng)用及展望

    在紅穿破石的應(yīng)用中,常見的含有紅穿破石的單驗(yàn)方可用于治療風(fēng)濕性腰腿痛、慢性肝炎、風(fēng)濕痹癥、癱瘓、跌打損傷。如用于治療風(fēng)濕性腰腿痛可取紅穿破石根、穿山龍、釘?shù)馗?、雞骨香、軟枝杜、半楓荷,浸酒,常飲。含有紅穿破石藥材的復(fù)方中成藥治療腎結(jié)石、尿道結(jié)石、膀胱結(jié)石等結(jié)石病癥的效果比較好,用于治療跌打損傷也可以取得明顯的效果,其使用安全系數(shù)很高,且單驗(yàn)方藥材購買價(jià)格不高,值得研究和倡導(dǎo)應(yīng)用。

    紅穿破石中含有豐富的大黃素等蒽醌類成分,大黃素等蒽醌類成分都具有抗炎、抗菌、利尿、止咳以及降血壓等多種功能,考慮加強(qiáng)紅穿破石在實(shí)際過程中的應(yīng)用,可以將此作為出發(fā)點(diǎn)對(duì)其藥理作用進(jìn)行更加針對(duì)性的研究分析。醌類化合物大多具有較好的生物活性,研究表明,蒽醌類的抗腫瘤藥物具有抗菌譜廣的特點(diǎn),即蒽醌類的抗腫瘤藥物的治療限制性較弱,適用性比較好。臨床應(yīng)用表明,蒽醌類的抗腫瘤藥物不僅可用于實(shí)體瘤治療,也可用于非實(shí)體瘤的治療,比如乳腺癌、惡性淋巴瘤和急慢性白血病等。

    紅穿破石藥材在實(shí)際生活中的作用廣泛,并且效果顯著,因此,在科技發(fā)展迅猛的今天,更加深入研究紅穿破石的成分,通過發(fā)現(xiàn)新的活性成分,提高紅穿破石的應(yīng)用效率,讓紅穿破石能夠在抗腫瘤、消炎、利尿以及治療結(jié)石等方面都可以有更進(jìn)一步的應(yīng)用發(fā)展。

    6 小結(jié)

    民族藥紅穿破石是民間常用的藥材,獲得九牛美稱中的“紫金?!?,多種藥方將其應(yīng)用在實(shí)際臨床中,治療跌打損傷、風(fēng)濕、利尿通淋等,有重要的臨床意義。本研究對(duì)紅穿破石化學(xué)成分、鑒別特征、含量測定及藥理作用進(jìn)行總結(jié),但其總化學(xué)成分仍不全面,相應(yīng)的黃酮類、蒽醌類成分目前發(fā)現(xiàn)較少,紅穿破石的藥理作用僅有抗氧化、抗肝損等研究進(jìn)展,尚缺乏對(duì)紅穿破石抗炎鎮(zhèn)痛、利尿通淋等作用的研究,明確其藥理機(jī)制,將來可以作為新藥運(yùn)用于臨床,擴(kuò)大其藥效作用。

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