藏藥唐古特青蘭的化學(xué)成分和生物活性研究進(jìn)展

羅建萍，劉文星,,，周 敏，趙 平 ，釧永明

(1.云南民族大學(xué) 化學(xué)與環(huán)境學(xué)院 云南省高校智能超分子化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 生物基材料綠色制備技術(shù)國(guó)家地方聯(lián)合工程中心，云南 昆明 650500;2.云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國(guó)家民族事務(wù)委員會(huì)-教育部共建重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500;3.西南林業(yè)大學(xué) 西南地區(qū)林業(yè)生物質(zhì)資源高效利用國(guó)家林業(yè)與草原局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650224)

藏藥唐古特青蘭(DracocephalumtanguticumMaxim)屬于唇形科(Labiatae)青蘭屬(Dracocephalum)的多年生草本植物，又稱(chēng)為甘青青蘭，有臭味，高35～55 cm，產(chǎn)甘肅西南，青海東部，四川西部及西藏東南部，生于海拔1 900～4 000 m 干燥河谷的河岸、田野、草灘或松林邊緣，全草可入藥，能治療胃炎、肝炎、頭暈、神疲、關(guān)節(jié)炎及癤瘡[1].根據(jù)文獻(xiàn)的報(bào)道，該植物有顯著的抗缺氧、抗心肌缺血、抗糖尿病、預(yù)防心臟毒性和抗癌等活性，到目前為止，從該植物中分離得到了55個(gè)化合物，文中就藏藥唐古特青蘭的化學(xué)成分和生物活性研究進(jìn)行綜述.

1 唐古特青蘭的化學(xué)成分

文獻(xiàn)報(bào)道唐古特青蘭(D.tanguticum，簡(jiǎn)寫(xiě)為DtM)含有黃酮、酚類(lèi)或鞣質(zhì)、香豆素與內(nèi)酯、蒽醌、甾體、三萜、強(qiáng)心苷、揮發(fā)油、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、氨基酸與多肽、皂苷、多糖及苷等化學(xué)成分[2-3].主要對(duì)唐古特青蘭的化學(xué)成分研究做簡(jiǎn)要的綜述.

1) 黃酮 DtM中的總黃酮含量約為5.66%[2]，目前已有多種黃酮提取分離和含量測(cè)定方法，如采用微波提取，在微波時(shí)間 7 min，溫度 59 ℃，乙醇體積分?jǐn)?shù)27%，液料比 25∶1(mL/g)時(shí)總黃酮實(shí)際得率為29.68%[4]，義西求吉等[5]用優(yōu)化的磁固相萃取-高效液相色譜法(MSPE-HPLC)同時(shí)測(cè)定了甘青青蘭中5種黃酮化合物的含量.目前從該植物中發(fā)現(xiàn)了22個(gè)黃酮類(lèi)天然產(chǎn)物.其中Wang等[6]從DtM全草的乙醇提取物中分離得到了17個(gè)黃酮(ladanetin-6-O-β-(6″-O-acetyl)glucoside (1)、pedalitin-3′-O-β-glucoside (2)、eriodictyol-7-O-β-D-glucopyranoside (3)、5,7,3′,5′-tetrahydroxyflavanone-7-O-β-D-glucopyranoside (4)、naringenin-7-O-β-D-glucopyranoside (5)、apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside (6)、luteolin-7-O-β-D-glucopyranoside (7)、tilianin (8)、luteolin-7-O-β-D-glucuronide ethyl ester (9)、pedaliin-6″-acetate (10)、pedalitin-6-O-glucoside (11)、ladanetin-6-O-β-D-glucopyranoside (12)、eriodictyol (13)、naringenin (14)、3′,5,5′,7-tetrahydroxyflavanone (15)、luteolin (16)和7-O-methyl-seutellarein (17)；張曉峰等[7]從DtM中得到大波斯菊苷(6)、胡麻素(18)、胡麻苷(11)、胡麻苷-6″-乙酸酯(10)；Zeng等[8]從DtM中得到pectolarigenin (19)和luteolin-7-methoxy-3′-O-(3″-O-acetyl)-β-D-glucopyranuronic acid-6″-methyl ester (20)；Ma等[9]從其中得到了5-hydroxy-4′-methoxyflavone-7-O-rutinoside (21)和narirutin (22)，見(jiàn)圖1.

圖1 唐古特青蘭中的黃酮類(lèi)化合物

2) 三萜和甾體類(lèi)化合物 李霽昕等[10]從DtM中得到了10個(gè)三萜類(lèi)化合物，分別為羽扇豆烷-20(29)-烯-28-酸-3-醇 (23)、羽扇豆烷-20(29)-烯-3,28-二醇 (24)、齊墩果酸(25)、齊墩果烷-12-烯-28-酸-3-酮 (26)、烏蘇烷-12-烯-28-酸-2α,3β-二醇 (27)、烏蘇烷-12-烯-28-酸-3β,24醇 (28)、豆甾-3-酮 (29)、β-谷甾醇-3-O-葡萄糖基(6→1)-十六烷酸苷 (30)、β-谷甾醇 (31)、β-胡蘿卜苷 (32)；張曉峰等[7]分離得到了齊墩果酸 (25)、熊果酸 (33)、β-胡蘿卜苷 (32)；周雪杉等[11]從DtM中得到了β-谷甾醇 (31)、α-香樹(shù)脂醇 (34)和羽扇豆醇 (35)；鄭洪婷等[12]發(fā)現(xiàn)了齊墩果酸 (25)、熊果酸 (33)、白樺酯醇 (24)和3β,20α-二羥基烏蘇烷-21(22)-烯-28-酸 (36)；夏青等[13]得到了β-谷甾醇 (31)、齊墩果酸 (25)和β-胡蘿卜苷 (32)，見(jiàn)圖2.

圖2 唐古特青蘭中的三萜和甾體等類(lèi)型化合物

3) 苯乙酰胺糖苷 Wang等[14]從DtM中分離了4個(gè)精胺糖苷類(lèi)化合物dracotanosides A～D (37～40)，Ma等[9]分離得到了4個(gè)苯乙酰胺糖苷類(lèi)化合物dratanguticumide B (41)、dratanguticumide C (42)、(E)4-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-rhamnopyranosyl]phenylethylcinnamamide (43)以及dratanguticumide A (44)，見(jiàn)圖3.

圖3 唐古特青蘭中的苯乙酰胺(糖苷)類(lèi)化合物

4) 其他化合物 左馬怡等[15]從DtM全草中分離得到了4個(gè)苯丙素類(lèi)化合物(迷迭香酸(45)、迷迭香酸甲酯 (46)、2,3-2H-3-羥基-咖啡酸甲酯 (47)和咖啡酸 (48))、對(duì)羥基苯甲酸 (49)和原兒茶酸 (50)；Zeng等[8]還從該植物中得到的5個(gè)苯系物，它們分別是benzyl-6-[(2E)-2-butenoate]-β-D-glucopyranoside (51)、2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-6-acetate-β-D-glucopyranoside (52)、2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-6-[(2E)-2-butenoate]-β-D-glucopyranoside(53)、 benzyl-β-D-glucopyranoside (54)和2-methoxy-4-(2-propen-1-yl)penyl-β-D-glucopyranoside (55)，見(jiàn)圖4.

圖4 唐古特青蘭中的其他類(lèi)型化合物

5) 揮發(fā)油 肖遠(yuǎn)燦等[16]對(duì)產(chǎn)自青海的DtM鮮花和新鮮枝葉的精油分析結(jié)果表明，新鮮枝葉精油含有44種成分，而鮮花精油比新鮮枝葉精油多15種成分；乙酸芳樟酯在鮮花和新鮮枝葉中含量最高，相對(duì)含量分別為31.67%和36.16%，作者認(rèn)為不同的產(chǎn)地，干燥的DtM會(huì)損失精油等原因會(huì)導(dǎo)致精油的含量不一樣.

6) 多糖 慶易微等[17]用回流、浸漬、超聲提取法提取DtM中的多糖，得到的多糖含量分別為15.6%、10.4%和4.2%；子巴等[18]采用L9(34)正交實(shí)驗(yàn)對(duì)確定了用超聲法提取DtM多糖的最佳工藝條件是把藥材切成段狀，料液比為 1∶16，提取時(shí)間 5 h.高生英等[19]發(fā)現(xiàn)青海大通縣的DtM多糖含量最高，適宜采集期為7月中旬，他們還發(fā)現(xiàn)DtM中的多糖提取中，各提取因素對(duì)多糖提取率的影響大小為：料液比>提取時(shí)間>提取溫度.

7) 無(wú)機(jī)元素 文獻(xiàn)報(bào)道唐古特青蘭中的無(wú)機(jī)元素主要含有Ni、Cr、V、Mn、Cu、Zn、Co、Se、Fe、As、Pb、Al、Ba、Mg、K 和Ca等元素[20].

2 唐古特青蘭的活性研究

國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)DtM的藥理活性作了一系列的研究，如抗缺氧、抗菌、抗病毒、抗心肌缺血、抗氧化、抗腫瘤、抗糖尿病等活性，本部分對(duì)唐古特青蘭的活性研究做簡(jiǎn)要的綜述.

1) 抗缺氧活性 DtM的抗缺氧活性研究較多，如李永芳等[21]報(bào)道DtM能顯著降低低氧性肺動(dòng)脈高壓大鼠mPAP、RVHI 及肺組織MDA的含量，改善肺小動(dòng)脈管壁增厚和管腔狹窄，顯著升高肺組織GSH-Px和SOD活性，對(duì)低氧性肺動(dòng)脈高壓具有一定的防治作用；DtM還可通過(guò)降低ET-1(肺組織中內(nèi)皮素)的含量促進(jìn)eNOS(內(nèi)皮型一氧化氮合酶)的表達(dá)，增加NO含量，調(diào)節(jié)NO/ET-1的平衡，從而防治低氧性肺動(dòng)脈高壓[22]；DtM還可通過(guò)抑制脂質(zhì)的過(guò)氧化反應(yīng)，從而防治高原低氧所引起的肝臟損傷[23].

2) 抗菌活性 海平等[24]用Kir by-Bauers紙片擴(kuò)散法對(duì)DtM的乙醇粗提物、水煎液和揮發(fā)油進(jìn)行體外抗菌試驗(yàn)，結(jié)果認(rèn)為DtM沒(méi)有抗菌作用；而胡君茹等[25]發(fā)現(xiàn)DtM提取物對(duì)金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌有抑菌作用，對(duì)大腸桿菌和糞腸桿菌沒(méi)有抑菌作用.

3) 抗病毒活性 吉守祥等[26]用細(xì)胞病變效應(yīng)法測(cè)定32種藏藥提取物的活性，發(fā)現(xiàn)DtM具有抗HSV-1(單純皰疹病毒Ⅰ型)的活性.

4) 抗心肌缺血 劉鳳云等[27]發(fā)現(xiàn)DtM的水提液能顯著的減少大鼠急性心肌缺血的面積，可以顯著降低T波幅度，降低心肌缺血造成的心電圖ST段位移，并減少血清LDH的釋放量，證實(shí)了DtM的水溶液對(duì)該模型的急性心肌缺血有明顯的保護(hù)作用.

5) 抗氧化活性 謝建鋒等[28]使用超聲波輔助提取DtM總黃酮，發(fā)現(xiàn)該方法提取率高，提取物有明顯的抗氧化活性.

6) 抗癌活性 鄭思建等[29]通過(guò)對(duì)100種常用的藏藥提取物使用MTT法對(duì)2個(gè)肝癌細(xì)胞株HepG2和SMMC-7721進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)試，同時(shí)選用L-02細(xì)胞來(lái)評(píng)價(jià)其體外毒性，發(fā)現(xiàn)DtM的乙酸乙酯提取物能誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡，有顯著的抗腫瘤活性.

7) 抗糖尿病活性 顧健等[30]用DtM揮發(fā)油灌胃治療Ⅱ型糖尿病大鼠，有顯著治療作用，認(rèn)為其作用機(jī)制可能是DtM能夠改善胰島素受體水平、增加肝細(xì)胞膜胰島素受體數(shù)量；DtM揮發(fā)油和醇提物能明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平，有顯著的治療作用，對(duì)正常小鼠的血糖水平?jīng)]有明顯的影響[31].

8) 藥物代謝研究 廖敬禮等[32]通過(guò)HPLC測(cè)定DtM醇提取物中的齊墩果酸的藥代動(dòng)力學(xué)規(guī)律，發(fā)現(xiàn)齊墩果酸在大鼠體內(nèi)的代謝符合一室模型，吸收快，消除快.

9) 唐古特青蘭中得到的化合物的活性研究 Zeng等[8]對(duì)從該植物中得到的7個(gè)化合物進(jìn)行了對(duì)LPS誘導(dǎo)原代264.7巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO抑制活性研究，發(fā)現(xiàn)化合物(19)和(20)對(duì)NO產(chǎn)生的抑制率IC50值分別為64.33和 48.02 μmol/L，而化合物51～55沒(méi)有明顯的活性.Ma等[9]對(duì)從中分離得到的3個(gè)苯乙酰胺糖苷類(lèi)化合物(41～43)進(jìn)行了抗高血糖和抗真菌(白色念珠菌)活性測(cè)試，發(fā)現(xiàn)它們對(duì)3T3-L1脂肪細(xì)胞葡萄糖的消耗率分別為(20.80 ± 1.47)%,(21.48 ± 2.44)%和(21.57 ± 1.35)%，但它們沒(méi)有明顯的抗真菌活性.化合物37～40對(duì)K562 和 K562/A02細(xì)胞株沒(méi)有明顯的細(xì)胞毒活性[14].Wang等[6]對(duì)化合物1～17進(jìn)行了細(xì)胞保護(hù)和系統(tǒng)的抗氧化活性研究，并對(duì)化合物7進(jìn)行了對(duì)阿霉素(DOX)誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用、對(duì)DOX引起Ca2+的濃度的影響和對(duì)DOX抗腫瘤活性的影響.他們發(fā)現(xiàn)DtM中的黃酮如果B環(huán)的3′、4′位含有羥基，C-2和C-3之間有雙鍵(如化合物7、9和16)有很強(qiáng)的細(xì)胞保護(hù)活性；不同濃度的化合物7預(yù)處理后可降低DOX的細(xì)胞毒性；化合物7預(yù)處理H9c2細(xì)胞后，在DOX誘導(dǎo)的形態(tài)學(xué)變化中得到了明顯保護(hù)；化合物7預(yù)處理后顯著抑制了細(xì)胞內(nèi)DOX誘發(fā)的細(xì)胞內(nèi)活性氧化物(ROS)的濃度；在正常細(xì)胞中，Ca2+的含量很低，而DOX會(huì)增加Ca2+的含量，經(jīng)過(guò)化合物7預(yù)處理后則會(huì)抑制DOX引起的Ca2+升高；此外，還發(fā)現(xiàn)化合物7預(yù)處理后不會(huì)降低DOX抗腫瘤活性；研究者認(rèn)為化合物7很有可能成為一個(gè)能預(yù)防心臟毒性的藥物.

3 結(jié)語(yǔ)

藏藥唐古特青蘭有顯著的生物活性和多種化學(xué)成分，具有很好的研究?jī)r(jià)值和廣闊的應(yīng)用前景.近年來(lái)，隨著天然藥物化學(xué)研究手段的發(fā)展，對(duì)唐古特青蘭的化學(xué)成分和生物活性研究也不斷深入.雖然該植物中發(fā)現(xiàn)的化合物種類(lèi)較多，但總數(shù)仍然不夠多，還需進(jìn)一步研究以發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)更新穎，且具有更好活性的化合物；該植物的部分黃酮已經(jīng)有了初步的構(gòu)效關(guān)系研究，發(fā)現(xiàn)了1個(gè)有潛力成為預(yù)防心臟毒性藥物的化合物，但仍需深入研究；此外，該植物中其他結(jié)構(gòu)類(lèi)型的化合物的活性還需要進(jìn)一步研究，以更好的研究開(kāi)發(fā)藏藥唐古特青蘭.