陜產(chǎn)重樓的生藥學(xué)研究

劉貴洲 劉志遠(yuǎn)

摘要：采用原植物形態(tài)、性狀、顯微、薄層鑒別等方法對(duì)陜西產(chǎn)重樓進(jìn)行生藥學(xué)鑒定， 為其更好的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。 結(jié)果表明：通過(guò)對(duì)原植物和藥材性狀的描述，顯微實(shí)驗(yàn)、理化實(shí)驗(yàn)，能夠很好的鑒定此藥材。

關(guān)鍵詞：陜產(chǎn)重樓;原植物;性狀鑒別;顯微鑒別;理化鑒別。

【中圖分類號(hào)】R93 ? ? ? ? ? ? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A ? ? ? ? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）05-142-01

重樓為百合科植物七葉一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis （Franch.） Hara及云南重樓Paris polyphylla Smith var.yunnanensis （Franch.） Hand.-Mazz的干燥根莖[1]。為常用重要中藥。在《陜西中草藥》名螺絲七、金線重樓（植物名）、七葉一枝花、定風(fēng)（洵陽(yáng)）、海螺七（平利、鎮(zhèn)坪、白河、太白山）、燈臺(tái)七、羅漢七（安康）、鐵燈臺(tái)（柞水、嵐皋）?！肚貛X植物志》第一卷，種子植物（第一冊(cè)）名重樓（種子植物名稱）、燈臺(tái)七（陜西）、螺絲七、七葉一枝花（秦嶺）。《秦嶺巴山天然植物志》名重樓、七葉一枝花、燈臺(tái)七、蚤休。在全國(guó)各省別名繁多。本品性微寒，味苦。清熱解毒，消腫止痛，熄風(fēng)定驚。應(yīng)用于癰腫疔瘡，咽喉腫痛，毒蛇咬傷;驚風(fēng)抽搐;跌打損傷?，F(xiàn)代藥理研究表明重樓含主要有效成分是甾體皂苷， 約占總化合物的80% ，其皂苷元有薯蕷皂苷元（diosgenin） ，并含有氨基酸、甾酮、蛻皮激素、黃酮苷等化合物。

我們對(duì)陜西秦嶺太白山藥用植物資源考察研究中， 對(duì)陜產(chǎn)重樓進(jìn)行了系統(tǒng)的生藥學(xué)研究。本文所指陜產(chǎn)重樓為百合科植物七葉一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis （Franch.） Hara的干燥根莖。

1 材料與方法

1.1 材料及儀器

材料來(lái)源：采于陜西秦嶺太白山，海拔2100m林下陰濕地。經(jīng)陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥教研室顏永剛教授鑒定，為陜產(chǎn)重樓Paris polyphylla Smith var.chinensis （Franch.） Hara。

儀器：石蠟切片機(jī)（YD-1508 輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)）， SONY-DSC-F828相機(jī)，SB-3200D

超聲波清洗機(jī)（上海新生芝生物技術(shù)研究所）， 生物顯微鏡（上海興行實(shí)業(yè)有限公司）。LY-WN-HPCCD萬(wàn)能視頻成像裝置（成都勵(lì)揚(yáng)精密機(jī)電有限公司）。

試劑：FAA液、番紅—固綠液、蒸餾水、水合氯醛、80%乙醇、石油醚（30-60℃）、氯仿-甲醇（95：5）、10%硫酸乙醇溶液、薯蕷皂苷元標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)生物制品生產(chǎn)批號(hào)20001201）。

1.2方法

組織特征：取重樓的根莖部位，采用石蠟切片方法（FAA固定，番紅—固綠染色，切片厚度9-13μm）制片后，在光學(xué)顯微鏡下觀察組織特征，并用數(shù)碼顯微成像技術(shù)記錄觀察結(jié)果，描述顯微特征并繪制其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖。

粉末特征：取重樓根莖，粉碎過(guò)60目篩，水及水合氯醛裝片，于顯微鏡下觀察并繪圖。

2.結(jié)果

2.1 原植物特征（圖1）

多年生草本，高50—60㎝，根狀莖橫臥而肥厚;直徑可達(dá)3㎝以上，長(zhǎng)5—7㎝;表面棕褐色，有多數(shù)環(huán)狀節(jié)紋，常可見隆起的半圓形微凹的莖痕，而明顯;節(jié)上生多數(shù)淺褐色纖維狀須根;頂端具2—3㎝的鱗片抱莖，斷面白色，味辣舌。

莖單一，直立，圓柱形，光滑無(wú)毛，基部常帶紫紅色。葉片通常9—11片輪生，窄卵形或倒披針形，長(zhǎng)8—13㎝，寬2—3㎝，先端漸尖或急尖，基部楔形，全緣，有短柄或近無(wú)柄。花梗通常長(zhǎng)達(dá)10㎝左右;外輪花被片4—6（8）枚，卵狀披針形，綠色，具3脈，先端尖，長(zhǎng)4—6㎝;內(nèi)輪花被黃綠色，線性，與外被片同數(shù)，近等長(zhǎng);雄蕊8—10，花約長(zhǎng)于花絲，藥隔不伸出藥之上方;子房近球形，具棱，花柱3—5，子房頂部與花柱呈紫色，種子多數(shù)，紅色.花期5—6月，果期8—9月。 [2]

2.2 藥材性狀

藥材呈結(jié)節(jié)狀扁圓柱形，略彎曲，長(zhǎng)5—12㎝，直徑1—4.5㎝。表面黃棕色或灰棕色，外皮脫落處呈白色;密生成狀凸起的粗環(huán)紋，一面結(jié)節(jié)明顯，具橢圓形凹陷莖痕;另一面有疏生的須根或疣狀須根痕;頂端具鱗葉及莖的殘基。質(zhì)堅(jiān)實(shí)斷面平坦，白色至淺棕色，粉性。[3]

2.3顯微

2.3.1根莖組織 ?分為表皮、皮層、內(nèi)皮層、中柱。如圖（2）。皮層與中柱比約為1：1（指皮層寬度與中柱半徑比值）。表皮：由一列木栓細(xì)胞組成，壁厚，淡黃棕色，切向長(zhǎng)25--110μm，徑向25--100μm，類圓形、多角形。皮層：根基維管束和葉跡維管束多，2—7個(gè);細(xì)胞類圓形，類園多角形或不規(guī)則形，長(zhǎng)徑70--135μm，短徑50--89μm，細(xì)胞中充滿淀粉粒。粘液細(xì)胞眾多，類圓形或長(zhǎng)圓形（針晶束大多軸向排列）直徑約150μm，長(zhǎng)100--350μm，針晶束眾多長(zhǎng)60--300μm，寬22--99μm。內(nèi)皮層：細(xì)胞斷續(xù)較小而扁平，排列稍整齊。中柱：維管束20—30個(gè)，約環(huán)狀排列，外側(cè)維管束較密，向內(nèi)減少，中央為薄壁細(xì)胞。維管束周木型，類圓形或長(zhǎng)圓形，木質(zhì)部導(dǎo)管呈多角形，直徑40μm左右，壁厚，木化，連續(xù)或斷續(xù)環(huán)列于韌皮部的周圍，韌皮部細(xì)胞較小，常被擠壓，中主內(nèi)亦有較多粘液細(xì)胞。

2.3.2根莖粉末（顏色為淺灰白色）。如圖（3）。

重樓根莖粉末 ?淀粉粒：極多，均為單粒，呈不規(guī)則橢圓形、長(zhǎng)圓形、少數(shù)為類三角形、類圓形、菱形、或不規(guī)則形，直徑2--20μm，長(zhǎng)3--26μm，臍點(diǎn)少數(shù)可見，為點(diǎn)狀，短弧狀或縫狀，多位于中央，層紋不明顯。針晶束：多破碎，單獨(dú)離散或成束，有完整的在橢圓形粘液細(xì)胞中。導(dǎo)管：螺旋形多見，少梯紋，直徑8--60

μm。薄壁細(xì)胞：類多角形，長(zhǎng)方形或條形，直徑65--200μm。木栓細(xì)胞：表面觀呈長(zhǎng)多角形，類多角形或近條形，直徑達(dá)190μm，細(xì)胞外壁增厚。

2.4 理化

顏色反應(yīng)：樣品制備：取本品重樓粉末1g加入100ml燒瓶中，加入60%稀乙醇 ?50ml，入超聲器超聲提取30分鐘，提取液回收溶劑后，加水后用飽和正丁醇萃取，得粗皂苷樣品備用。

Lieberman-Burchard反應(yīng)，將樣品少量溶于氯仿，滴加硫酸-乙酐（1：20）幾滴，產(chǎn)生紅-紫-污綠顏色，最后退色。（檢查甾體皂苷）[4]

薄層色譜：取重樓粗粉0.5g，加80%乙醇30ml，回流提取2h，濾過(guò)，取濾液蒸去乙醇后，加2mol/L鹽酸回流水解2h，水解液用石油醚提取3次，每次10ml，石油醚液合并，用10ml水洗1次，石油醚液蒸干后，加入氯仿溶解制成樣品液，點(diǎn)于硅膠薄層板上，以薯蕷皂苷元為對(duì)照品，以氯仿—甲醇（95：5）展開，10%硫酸乙醇液噴霧，110℃烤10min，觀察樣品液色譜與對(duì)照品液色譜斑點(diǎn)的位置及顏色：陜產(chǎn)重樓的樣品液色譜，與薯蕷皂苷元標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品液色譜相應(yīng)位置上，有相同的粉紅色斑點(diǎn)。表明陜產(chǎn)重樓提取物酸水解液中含有薯蕷皂苷元。

3 結(jié)論

本文對(duì)陜產(chǎn)重樓采用原植物、性狀、顯微、薄層鑒別方法對(duì)陜產(chǎn)重樓進(jìn)行系統(tǒng)的生藥學(xué)鑒定， 為其鑒別及應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。結(jié)果表明：通過(guò)原植物、性狀鑒別、顯微鑒別、薄層色譜鑒別能夠很好的鑒定原植物。本文陜產(chǎn)重樓為百合科植物七葉一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis （Franch.） Hara的干燥根莖。

4 討論

藥典對(duì)重樓藥材的性狀描述為：本品呈結(jié)節(jié)狀扁圓柱形，略彎曲，長(zhǎng)5～12cm， 直徑1 0～4 5cm。表面黃棕色或灰棕色，外皮脫落處呈白 色;密具層狀突起的粗環(huán)紋，一面結(jié)節(jié)明顯，結(jié)節(jié)上具橢圓形 凹陷莖痕，另一面有疏生的須根或疣狀須根痕。頂端具鱗葉 和莖的殘基。質(zhì)堅(jiān)實(shí)，斷面平坦，白色至淺棕色，粉性或角質(zhì)。 氣微，味微苦、麻。[5]

對(duì)陜產(chǎn)重樓采用的生藥學(xué)研究，還有要對(duì)照藥典以上標(biāo)準(zhǔn)，本文雖然能為其鑒定及應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，能夠很好的鑒定該藥物，但還缺乏其他鑒定方法如：掃描電鏡應(yīng)用，化學(xué)成分的量化，有害物質(zhì)的測(cè)量，其他色譜和光譜的應(yīng)用，指紋圖譜應(yīng)用等。這些新技術(shù)新方法還有待于以后對(duì)陜產(chǎn)重樓進(jìn)行研究與探討。

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì). 中華人民共和國(guó)藥典[S]. 2020版第一部.中國(guó)醫(yī)藥科技出版社， 2020：271-272.

[2]李世全，秦嶺巴山天然植物志[M].陜西：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，1987：353-354.

[3]康廷國(guó)，閻玉凝，吳德康，等.中藥鑒定學(xué)[M]. 北京： 中國(guó)中醫(yī)藥出版社， 2005：223.

[4]匡海學(xué)，董小萍，石任兵，等.中藥化學(xué)[M]. 北京： 中國(guó)中醫(yī)藥出版社， 2004：294-296.

【基金項(xiàng)目】國(guó)家級(jí)項(xiàng)目：全國(guó)中藥特色技術(shù)傳承人才培訓(xùn)（項(xiàng)目編號(hào)：T20184828005）

【作者簡(jiǎn)介】劉貴洲（1973---），男，漢，山東青島人，中藥鑒定碩士，主管中藥師。