茶尺蠖病毒殺蟲劑在江蘇茶區(qū)的示范應(yīng)用效果

郭華偉 王志博 唐美君 邵元海 姚惠明 周孝貴 肖強

摘要：為了更好地推廣應(yīng)用茶尺蠖核型多角體病毒，對江蘇主要產(chǎn)茶區(qū)茶尺蠖和灰茶尺蠖的分布情況進(jìn)行調(diào)查，并在主要發(fā)生區(qū)進(jìn)行茶尺蠖病毒殺蟲劑的示范應(yīng)用。結(jié)果表明，蘇州市、無錫市為茶尺蠖發(fā)生區(qū)，南京市、揚州市為灰茶尺蠖發(fā)生區(qū)，鎮(zhèn)江市、常州市為混發(fā)區(qū);在低齡幼蟲期，每667 m2茶園使用150 mL茶尺蠖病毒殺蟲劑防治灰茶尺蠖和茶尺蠖，防效分別為77.4%和77.3%;在高齡幼蟲期，采用病毒殺蟲劑與植物源農(nóng)藥混用，防效為99.6%。采用發(fā)生期預(yù)測為配套手段，在第1代孵化高峰期應(yīng)用病毒殺蟲劑，可作為茶尺蠖病毒殺蟲劑的應(yīng)用模式。

關(guān)鍵詞：茶尺蠖核型多角體病毒;應(yīng)用;效果;灰茶尺蠖;茶尺蠖

Demonstration and Application of the

Insecticide Ectropis obliqua Nucleopolyhedrovirus

in Tea Producing Area in Jiangsu

GUO Huawei1， WANG Zhibo1， TANG Meijun1*， SHAO Yuanhai2， YAO Huiming1， ZHOU Xiaogui1， XIAO Qiang1

1. Tea Research Institute of Chinese Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Tea Quality

and Safety Control， Ministry of Agriculture and Rural Affairs， Hangzhou 310008， China;

2. Tea Research Institute of Jiangsu Province，Wuxi 214125， China

Abstract：? In order to better promote the application of Ectropis obliqua Nucleopolyhedrovirus （EoNPV）， the distribution

of tea geometrid was investigated in the main tea producing areas of Jiangsu province， and the insecticide of EoNPV

was demonstrated and applied in the main occurrence areas. The results show that Ectropis obliqua was mainly

distributed in Suzhou and Wuxi; Ectropis grisescens was mainly distributed in Nanjing and Yangzhou. Zhenjiang

and Changzhou of Jiangsu province were the mixed occurrence areas. In the early larval stage， the control effects? of

EoNPV （150? mL per 667 m2） to Ectropis obliqua and Ectropis grisescens were 77.4% and 77.3%， respectively.

In mature larval stage， the control effect of the combined application of EoNPV and botanical pesticide could achieve

99.6%. Adopting the prediction of occurrence period as a supporting method， EoNPV used in the first generation

of incubation peak was proposed as an application mode.

Keywords： Ectropis obliqua nucleopolyhedrovirus， application， control effect， Ectropis grisescens， Ectropis obliqua

江蘇省茶園面積約3.4萬hm2，茶葉產(chǎn)量1.5萬 t，產(chǎn)值25.1億元[1] ，擁有洞庭碧螺春、無錫毫茶、金山翠芽、雨花茶等眾多知名品牌，是我國江南茶區(qū)的重要組成部分。江蘇茶區(qū)地處丘陵地帶，氣候溫潤，茶園病蟲害種類繁多，常發(fā)病蟲害主要有小貫小綠葉蟬、茶橙癭螨、茶尺蠖、茶毛蟲、茶刺蛾等，其中茶尺蠖為最主要的鱗翅目害蟲，常年多地局部暴發(fā)。如2016年在江蘇儀征暴發(fā)成災(zāi)，約4 hm2茶園的茶樹被吃禿;2019年在江蘇宜興、蘇州貢山島等地暴發(fā)，嚴(yán)重為害面積約20 hm2。

茶尺蠖核型多角體病毒（Ectropis obliqua nucleopolyhedrovirus，簡稱EoNPV）是茶尺蠖的重要病原微生物[2]，茶尺蠖病毒殺蟲劑是茶園綠色防控的重要產(chǎn)品[3]。近年來研究表明，茶園“茶尺蠖”實際為2個物種[4]，分別為茶尺蠖（Ectropis obliqua Prout）和灰茶尺蠖（Ectropis grisescens Warren），茶尺蠖核型多角體病毒對這2種害蟲的致病力存在強弱差異[5]。

為了更好地發(fā)揮茶尺蠖病毒的種群控制作用，進(jìn)一步推廣茶尺蠖核型多角體病毒，筆者開展了兩方面的研究工作：一是在江蘇主要產(chǎn)茶市設(shè)點采集“茶尺蠖”，采用分子檢測的手段，結(jié)合形態(tài)鑒定方法，明確其種類，以便針對性地進(jìn)行防治;二是在不同地點進(jìn)行茶尺蠖病毒殺蟲劑的示范應(yīng)用，以明確其防治效果。本研究將對促進(jìn)茶園化學(xué)農(nóng)藥減施、促進(jìn)生態(tài)茶園建設(shè)具有重要意義。

一、材料與方法

1. 試驗藥劑

茶核·蘇云菌懸浮劑（茶尺蠖核型多角體病毒1×104 PIB/μL，蘇云金桿菌2 000 IU/μL），揚州綠源化工有限公司生產(chǎn)。0.6%苦參堿水劑，內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司生產(chǎn)。

2. 茶尺蠖和灰茶尺蠖的分布調(diào)查方法

在江蘇省6個茶葉主產(chǎn)市設(shè)點采集尺蠖樣品，每市設(shè)1～2個采樣點（表1），采集茶園里的尺蠖幼蟲或成蟲，每點采樣30頭以上。采集的樣本使用液氮處理后于-80 ℃保存，使用試劑盒提取法進(jìn)行DNA抽提。擴(kuò)增及測序使用的引物為LepF1（5'-ATTCAACCAATCATAAAGATATTGG-3'）和

Enh_LepR1（5'-CTCCWCCAGCAGGATCAAAA-3'）。

PCR使用浙江擎科生物公司的MIX試劑，PCR反應(yīng)條件為 95 ℃預(yù)變性2 min;95 ℃變性30 s，46 ℃退火1 min，72 ℃延伸30 s，5個循環(huán);95 ℃變性30 s，51 ℃退火1 min，72 ℃延伸30 s，35個循環(huán);最后72 ℃終延伸10 min。PCR產(chǎn)物用1%的瓊脂糖凝膠檢測，之后由尚亞公司的ABI3730測序儀進(jìn)行雙向測序。測序結(jié)果使用Seqman軟件進(jìn)行拼接，使用MEGA5軟件基于K2P模型計算樣品與標(biāo)準(zhǔn)茶尺蠖E. obliqua（Genebank number：KJ704354）序列之間的遺傳距離，遺傳距離大于3.2%為灰茶尺蠖，小于2.5%為茶尺蠖[6]。形態(tài)鑒別方法參考文獻(xiàn)[7]。

3. 茶尺蠖病毒殺蟲劑示范應(yīng)用的效果調(diào)查方法

分別在鎮(zhèn)江市句容市白兔鎮(zhèn)、無錫市宜興市張渚鎮(zhèn)、蘇州市虎丘區(qū)鎮(zhèn)湖街道3個點開展茶尺蠖核型多角體病毒殺蟲劑的田間示范應(yīng)用試驗，均采用電動背負(fù)式噴霧器施藥，每667 m2茶園用水量75 kg，用藥量分別為150 mL、150 mL、100 mL。虎丘區(qū)試驗點因蟲齡較大，每667 m2茶園增加了茶核·蘇云菌懸浮劑100 mL + 0.6%苦參堿水劑75 mL的處理，同時均設(shè)置空白對照處理。試驗每處理面積約60 m2，設(shè)3～4次重復(fù)。句容市試驗點和虎丘區(qū)試驗點施藥后，待藥液稍干，從對照區(qū)和處理區(qū)分別抓蟲回室內(nèi)調(diào)查幼蟲期死亡率，計算校正死亡率;宜興市試驗點采用田間調(diào)查，于藥前和藥后7 d在田間分別調(diào)查病毒防治區(qū)和空白對照區(qū)的幼蟲活蟲數(shù)，計算相對防效。

二、結(jié)果與分析

1. 江蘇茶區(qū)茶尺蠖和灰茶尺蠖的分布情況

在江蘇省6個茶葉主產(chǎn)市設(shè)點采樣，共10個樣點。通過形態(tài)和分子鑒定，初步明確了江蘇茶區(qū)茶尺蠖和灰茶尺蠖的分布情況。結(jié)果表明，茶尺蠖分布在蘇州市和無錫市茶區(qū)，灰茶尺蠖分布在南京市、揚州市茶區(qū)，鎮(zhèn)江市和常州市茶區(qū)為2種尺蠖的混發(fā)區(qū)。

2. 茶尺蠖病毒殺蟲劑示范應(yīng)用效果

茶尺蠖病毒對灰茶尺蠖和茶尺蠖的致病力有差異，因而在田間使用病毒殺蟲劑時需根據(jù)不同的靶標(biāo)對象采用不同的劑量。參考室內(nèi)預(yù)試驗結(jié)果，每667 m2茶園采用150～200 mL的劑量防治灰茶尺蠖，采用100～150 mL的劑量防治茶尺蠖進(jìn)行示范應(yīng)用。

試驗結(jié)果表明，在1～2齡幼蟲期施用茶尺蠖病毒殺蟲劑，田間示范應(yīng)用效果較好，對灰茶尺蠖和茶尺蠖的防效分別達(dá)77.4%和77.3%（表2、表3）;在高齡幼蟲期（3～4齡），單獨施用病毒殺蟲劑則防效較低，與植物源農(nóng)藥混用后防效較高，可達(dá)99.6%（表4）。

三、討論

基于江蘇茶區(qū)茶尺蠖和灰茶尺蠖分布的調(diào)查，初步明確了茶尺蠖和灰茶尺蠖在江蘇茶區(qū)的分布概況，為茶尺蠖病毒的應(yīng)用打好基礎(chǔ)。根據(jù)本研究結(jié)果，在茶尺蠖發(fā)生區(qū)，如蘇州、無錫等地茶園，每667 m2可采用茶尺蠖病毒殺蟲劑100～150 mL進(jìn)行防治;在灰茶尺蠖發(fā)生區(qū)或混發(fā)區(qū)，可采用茶尺蠖病毒殺蟲劑150～200 mL進(jìn)行防治，且應(yīng)在低齡幼蟲期使用，高齡幼蟲期宜和植物源農(nóng)藥配伍使用。

茶尺蠖和灰茶尺蠖年發(fā)生5～6代，茶尺蠖病毒使用的最佳時期是第一代和第二代幼蟲期，最適施藥時間是初孵幼蟲至2齡幼蟲期[8-9]。但大多數(shù)情況下，茶農(nóng)都是在田間出現(xiàn)明顯被取食癥狀后才能發(fā)現(xiàn)，此時茶尺蠖或灰茶尺蠖幼蟲通常已發(fā)育至3齡，由于蟲齡偏大，導(dǎo)致病毒防治的效果不理想。筆者在鎮(zhèn)江市句容江蘇茶博園“雙減”課題綜合示范區(qū)開展了“性誘+病毒防治”防控灰茶尺蠖的集成應(yīng)用，具體做法是：早春3月，在茶園安置灰茶尺蠖性信息素誘捕器，誘集、監(jiān)測灰茶尺蠖越冬代成蟲的數(shù)量，統(tǒng)計發(fā)蛾高峰日，預(yù)測第一代卵孵化高峰日，并在該高峰日前后每667 m2茶園噴施茶尺蠖病毒殺蟲劑150 mL以壓制全年蟲口基數(shù)。示范試驗地塊噴施病毒后，灰茶尺蠖全年蟲口密度降低，一直未達(dá)到防治指標(biāo)，取得了和周邊噴施化學(xué)農(nóng)藥同樣的防治效果。該模式通過可見的成蟲發(fā)生動態(tài)來預(yù)測“不可見”的低齡幼蟲期，解決了茶農(nóng)適時噴藥的問題，可作為病毒殺蟲劑的使用模式，值得大面積推廣。

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