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    曲霉型豆豉快速發(fā)酵工藝生產(chǎn)過程中的揮發(fā)性成分對比分析

    2021-08-31 07:27:32文鶴查雙龍胡祥飛張盼文楊慧林王筱蘭
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2021年16期
    關(guān)鍵詞:工藝

    文鶴,查雙龍,胡祥飛,張盼文,楊慧林,王筱蘭*

    1(江西師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,江西 南昌,330022)2(食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室(南昌大學(xué)),江西 南昌,330027)

    豆豉是我國傳統(tǒng)發(fā)酵調(diào)味食品,因其風(fēng)味獨特、營養(yǎng)豐富而廣受人們喜愛[1],與印度尼西亞天培(tempe)、日本納豆(natto)齊名[2]。豆豉一般以精選大豆為原料,通過微生物群落共同發(fā)酵而成。根據(jù)生產(chǎn)過程中優(yōu)勢微生物種類不同,可分成曲霉型、毛霉型、根霉型、細菌型和脈孢菌型豆豉五大類,其中曲霉型豆豉是我國南方地區(qū)銷售量最大、食用范圍最廣的一類豆豉[3]。

    我國豆豉生產(chǎn)多沿襲傳統(tǒng)工藝,在半開放式環(huán)境中自然發(fā)酵,后發(fā)酵時間普遍長達半個多月,如以瀏陽豆豉[4]、陽江豆豉[5]、南昌豆豉[6]為代表的曲霉型豆豉;部分甚至達到10~12個月,如以潼川豆豉[7]、永川豆豉[8]等為代表的毛霉型豆豉。傳統(tǒng)工藝中粗放的自然發(fā)酵過程極易受外界環(huán)境、溫度及微生物的影響,進而導(dǎo)致豆豉的風(fēng)味、品質(zhì)不穩(wěn)定,難以適應(yīng)消費者對食品安全及衛(wèi)生等要求[9]。曲霉型豆豉傳統(tǒng)工藝中一般還采用拌鹽發(fā)酵,長時間攝入高鹽會增加患高血壓等慢性病的風(fēng)險,不符合健康飲食的主流理念[10]。

    豆豉傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝存在一系列的缺點亟待改進,如何縮短生產(chǎn)周期、提高生產(chǎn)水平、改良產(chǎn)品品質(zhì)成為豆豉生產(chǎn)企業(yè)急需解決的難題。新型快速發(fā)酵工藝應(yīng)運而生,江西南昌稻香園調(diào)味食品有限公司曲霉型豆豉的生產(chǎn)工藝有快速工藝和傳統(tǒng)工藝2種,二者前期生產(chǎn)流程相同,盡可能保留傳統(tǒng)工藝中豆豉特有的風(fēng)味。唯一區(qū)別是在后酵階段,快速工藝曲霉型豆豉生產(chǎn)時,后酵階段不拌鹽,在發(fā)酵罐中進行控溫發(fā)酵,發(fā)酵起始溫度高達50~60 ℃,后發(fā)酵僅需7 d;傳統(tǒng)工藝在后酵階段拌鹽(6%~7%),在發(fā)酵池中自然發(fā)酵,發(fā)酵起始溫度僅35~50 ℃,后發(fā)酵時間長達21 d??焖俟に嚿a(chǎn)曲霉型豆豉不僅能克服傳統(tǒng)工藝后發(fā)酵過程中開放不可控的弊端,還能降低豆豉成品中含鹽量,大大縮短生產(chǎn)周期,為企業(yè)帶來可觀的經(jīng)濟效益。

    由于生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)地區(qū)及優(yōu)勢微生物的區(qū)別,不同類型豆豉的風(fēng)味物質(zhì)種類和含量會存在較大差異。豆豉風(fēng)味由多種揮發(fā)性成分組成,一般先采用同時蒸餾-萃取法、頂空法、超臨界流體萃取法、干餾法或固相微萃取法提取,再通過氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法分析鑒定揮發(fā)性成分[11]。傳統(tǒng)工藝下生產(chǎn)的豆豉揮發(fā)性成分變化,前人已做過大量研究,如蔣立文等[12]通過頂空固相微萃取和氣質(zhì)聯(lián)用方法鑒定出毛霉型豆豉中有68種揮發(fā)性成分;李金林等[6]通過固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(solid phase micro-extraction-GC-MS,SPME-GC-MS)鑒定出曲霉型豆豉中有50種揮發(fā)性成分;韓帥等[13]通過同時蒸餾萃取加氣-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)鑒定出瀏陽豆豉中111中揮發(fā)性成分。而快速工藝作為一種豆豉新型現(xiàn)代化生產(chǎn)工藝,相關(guān)資料較少,該工藝下豆豉揮發(fā)性成分變化未見報道。

    本研究擬采用SPME-GC-MS對快速工藝生產(chǎn)曲霉型豆豉蒸煮、制曲、洗曲及后酵4階段的揮發(fā)性成分進行萃取及鑒定,探討快速工藝曲霉型豆豉生產(chǎn)中主要風(fēng)味物質(zhì)和香味成分變化,對比之前我們課題組采用傳統(tǒng)工藝制作的曲霉型豆豉揮發(fā)性成分,為快速工藝生產(chǎn)曲霉型豆豉的標準化、工業(yè)化生產(chǎn)提供理論參考及進一步研究風(fēng)味物質(zhì)形成的機理奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    曲霉型豆豉,江西南昌稻香園調(diào)味食品有限公司;正烷烴C8~C40混合標品,美國Sigma-Aldrich公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    固相微萃取裝置和DVB/CAR/PDMS萃取頭,美國Supelco公司;7890A/5975氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,美國Agilent公司。

    1.3 實驗方法

    1.3.1 樣品制作、采集與處理

    曲霉型豆豉快速生產(chǎn)工藝流程:

    原料(黑豆)→篩選→洗滌→浸泡→瀝干→蒸煮→冷卻→制曲(溫度25~30 ℃,7 d)→洗曲→后酵(溫度:50~60 ℃,7 d)→烘干→包裝→產(chǎn)品

    樣品采集:在江西南昌稻香園調(diào)味品有限公司快速工藝曲霉型豆豉生產(chǎn)車間進行采樣,同一生產(chǎn)周期內(nèi)分批采集樣品,每次取樣時,在同一發(fā)酵罐的上、中、下3層(深度分別為5、15、25 cm)取樣,取樣后充分混勻,取經(jīng)蒸煮冷卻后的黑豆,自然制曲7 d的黑豆曲胚,洗曲堆積的坯料和后發(fā)酵7 d的豆豉樣品,每組樣品采集4份,采集后用無菌的塑封袋密封,冰袋冷藏帶回實驗室,置于實驗室-20 ℃冰箱冷藏備用。

    1.3.2 SPME萃取揮發(fā)性成分

    將DVB/CAR/PDMS萃取頭按照說明書事先進行老化備用,分別將蒸煮冷卻后黑豆、自然制曲7 d的黑豆曲坯、洗曲堆積的坯料和后發(fā)酵7 d的豆豉樣品進行研磨,過40目篩,制得樣品。參照李金林等[6]方法準稱取3.00 g樣品,加入到15 mL頂空進樣瓶中,采用恒溫水浴加熱,60 ℃平衡20 min,將SPME裝置置于頂空進樣瓶上方,60 ℃恒溫萃取30 min后取出,開展GC-MS分析(每個樣品設(shè)置3組重復(fù))。

    1.3.3 GC-MS 分析條件

    色譜條件:Agilent 19091S-433 毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);進樣口溫度250 ℃,載氣He,流速1.0 mL/min,分流進樣;升溫程序:起始40 ℃,保持5 min,5 ℃/min升至85 ℃,10 ℃/min升至250 ℃,保持5 min[14]。

    質(zhì)譜條件:離子源EI,電離電壓70 eV,離子源溫度230 ℃,四極桿溫度150 ℃;全掃描模式,質(zhì)量掃描范圍35~400 amu。

    1.3.4 成分鑒定及含量計算

    各組分質(zhì)譜信息采用NIST08質(zhì)譜庫檢索,根據(jù)保留時間(retention time,RT)確定豆豉樣品中揮發(fā)性成分,樣品采用C8~C40系列正烷烴混合標品分析,根據(jù)文獻[15]計算線性保留指數(shù)(linear retention indice,LRI),同時將各組分實測LRI與NIST數(shù)據(jù)庫比對,以進一步確定各組分的成分,揮發(fā)性成分的相對含量分析用峰面積歸一化法計算[14, 16]。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 曲霉型豆豉生產(chǎn)過程中揮發(fā)性成分的總離子流色譜圖

    快速工藝下曲霉型豆豉生產(chǎn)過程中揮發(fā)性成分用SPME萃取后再通過GC-MS分析,得到樣品中揮發(fā)性成分GC-MS總離子流色譜圖,由圖1可知,色譜峰較均勻分布在0~40 min,并且豐度較高,說明GC-MS條件適宜[17]。SPME是根據(jù)萃取頭極性不同,通過相似相溶原理萃取不同的物質(zhì),李金林等[6]發(fā)現(xiàn)豆豉中揮發(fā)性物質(zhì)極性成分占比較高,而DVB/CAR/PDMS萃取頭屬于中等極性,適用于萃取中等極性和極性化合物,這說明用DVB/CAR/PDMS萃取頭對豆豉樣品進行SPME萃取較為合適。

    2.2 曲霉型豆豉生產(chǎn)過程中揮發(fā)性成分種類、數(shù)量及相對含量分析

    采用NIST08質(zhì)譜庫檢索和NIST數(shù)據(jù)庫比對,進一步確定檢測到的揮發(fā)性成分,結(jié)果如表1所示。快速工藝曲霉型豆豉在蒸煮階段共檢測出67種揮發(fā)性成分,其中酯類4種、酮類9種、酚類4種、醇類13種、醛類14種、酸類7種、吡嗪6種、呋喃3種、芳香族2種、其他5種;制曲階段共檢測出70種揮發(fā)性成分,其中酯類4種、酮類5種、酚類3種、醇類13種、醛類9種、酸類10種、吡嗪9種、呋喃3種、芳香族4種、其他10種;洗曲階段共檢測出67種揮發(fā)性成分,其中酯類5種、酮類5種、酚類3種、醇類13種、醛類7種、酸類9種、吡嗪8種、呋喃3種、芳香族8種、其他6種;后酵階段共檢測出81種揮發(fā)性成分,其中酯類14種、酮類9種、酚類5種、醇類7種、醛類10種、酸類10種、吡嗪10種、呋喃3種、芳香族6種、其他7種。通過與李金林等[6]研究的傳統(tǒng)工藝曲霉型豆豉對比發(fā)現(xiàn),2種工藝在后酵階段揮發(fā)性成分種類及含量存在較大差別,傳統(tǒng)工藝后酵階段僅檢出45種揮發(fā)性成分,揮發(fā)性成分種類遠遠低于快速工藝。無論是從揮發(fā)性成分種類還是從揮發(fā)性成分含量來看,快速工藝產(chǎn)生揮發(fā)性成分的種類更多、峰值更大,而曲霉型豆豉特有的酯香、醇香、豉香和醬香是由多種揮發(fā)性成分共同造就的,說明快速工藝比傳統(tǒng)工藝在后酵階段生成更為豐富的揮發(fā)性成分,快速工藝生產(chǎn)的豆豉不僅風(fēng)味物質(zhì)高于傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝的標準,而且比傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)的豆豉香氣成分更突出,能賦予豆豉更濃郁的風(fēng)味。

    a-蒸煮階段;b-制曲階段;c-洗曲階段;d-后酵階段圖1 曲霉型豆豉生產(chǎn)過程中揮發(fā)性成分的GC-MS總離子流色譜圖Fig.1 GC-MS total ion flow chromatography of volatile components in Aspergillus-type Douchi production

    表1 曲霉型豆豉生產(chǎn)不同階段樣品主要揮發(fā)性成分Table 1 The main flavor compounds identified in samples from different process of Aspergillus-type Douchi production

    續(xù)表1

    由圖2可知,從揮發(fā)性成分種類來看,快速工藝下曲霉型豆豉在蒸煮、制曲和洗曲3階段揮發(fā)性成分種類分別為67、70、67種,種類上并沒有太大變化,而到后酵階段揮發(fā)性成分數(shù)量開始攀升至81種。從揮發(fā)性成分含量來看,快速工藝下曲霉型豆豉在制曲階段僅形成少量揮發(fā)性成分,揮發(fā)性成分主要在后酵階段形成,這與李金林等[6]傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)曲霉型豆豉的研究結(jié)果一致。蒸煮階段揮發(fā)性成分種類前3的分別是醇、酚和醛;制曲階段揮發(fā)性成分種類前4的分別是醇、芳香族、酸和呋喃;洗曲階段揮發(fā)性成分種類前4的分別是酸、醇、芳香族和呋喃;后酵階段揮發(fā)性成分種類前4的分別是醛、酸、酚和吡嗪類,后發(fā)酵階段,在微生物的作用下產(chǎn)生了大量醛類化合物。

    a-揮發(fā)性成分數(shù)量變化;b-揮發(fā)性成分含量變化圖2 曲霉型豆豉生產(chǎn)過程中揮發(fā)性成分種類、數(shù)量及含量變化Fig.2 Chang in species, amount, and content of volatile compounds in Aspergillus-type Douchi production

    2.3 曲霉型豆豉生產(chǎn)過程中揮發(fā)性成分對比分析

    在生產(chǎn)過程中,原料經(jīng)過浸泡,吸收水分后(吸水率67%~95%)變得松軟,蒸煮時原料中的蛋白質(zhì)(含量約為40%)能迅速變性,淀粉(含量約為30%)易糊化。同時溶解出制曲階段霉菌所需要的營養(yǎng)成分,并提供霉菌生長所必需的水分;蒸煮階段主要目的是破壞大豆內(nèi)部分子結(jié)構(gòu),主要進行蛋白質(zhì)變性和淀粉糊化等反應(yīng),同時起到滅菌的作用;制曲階段主要是在曲房中自然制曲,空氣中霉菌孢子通過自然附著接種,該階段優(yōu)勢微生物主要為曲霉和橫梗霉[18],通過霉菌產(chǎn)生復(fù)雜的酶類(如蛋白酶、纖維素酶、脂肪酶、淀粉酶等)水解蛋白質(zhì)、淀粉、脂質(zhì)等大分子物質(zhì),產(chǎn)生氨基酸、脂肪酸、甘油和糖類等風(fēng)味前體物質(zhì)。洗曲階段主要是通過水洗去除制曲過程中豆豉表面附著的孢子、菌絲和部分酶,因為孢子呈苦澀味,部分蛋白酶水解會產(chǎn)生苦味肽,水洗可降低苦味和澀味等不良風(fēng)味[19]??焖俟に囋诤蠼碗A段發(fā)酵起始溫度高達50~60 ℃,后發(fā)酵僅7 d,而傳統(tǒng)工藝在后酵階段發(fā)酵起始溫度只有35~50 ℃,后發(fā)酵時間長達21 d。有研究表明中高溫發(fā)酵通??商嵘黝惿磻?yīng)的反應(yīng)速率進而達到縮短發(fā)酵周期的目的[20]。

    結(jié)合表1和圖2可知,曲霉型豆豉在蒸煮階段揮發(fā)性成分主要為醇、酚和醛,分別占該階段總揮發(fā)性成分的70.57%、11.27%和9.43%,三者之和占總揮發(fā)性成分的91.72%。其中醇類化合物中1-辛烯-3-醇占蒸煮階段總揮發(fā)性成分的43.11%,該化合物又名蘑菇醇,具有蘑菇和泥土似的清香,是蒸煮階段豆腥味的主要來源[21]。在經(jīng)過制曲階段后,1-辛烯-3-醇仍占制曲階段總揮發(fā)性成分的46.42%,而經(jīng)過洗曲階段后,其相對含量下降到14.69%,到后酵階段1-辛烯-3-醇不再被檢測到,說明其對豆豉風(fēng)味的貢獻度不大,范琳等[21]在研究曲霉型豆豉時也有此發(fā)現(xiàn)。正己醇占蒸煮階段總揮發(fā)性成分的18.36%,具有酒香、果香和脂肪香等美好風(fēng)味,其經(jīng)過制曲、洗曲和后酵階段后逐漸減少到最后不再被檢出,推測可能是與其他物質(zhì)反應(yīng)生成酯類或醛類風(fēng)味物質(zhì)。甲基麥芽酚占蒸煮階段總揮發(fā)性成分的11.27%,具有甜香、漿果香和脂肪香等美好風(fēng)味,在后酵階段其相對含量仍占6.51%,是豆豉特殊風(fēng)味的來源之一。這3種揮發(fā)性成分之和占蒸煮階段總揮發(fā)性成分的72.74%,是該階段風(fēng)味的主要來源。

    在制曲階段揮發(fā)性成分主要是醇、芳香族、酸和呋喃,分別占該階段總揮發(fā)性成分的54.51%、7.09%、6.57%和5.43%。在蒸煮階段產(chǎn)生的1-辛烯-3-醇仍占總揮發(fā)性成分的46.42%,表明該階段仍以豆腥味為主。值得注意的是酸、芳香族、呋喃、吡嗪類化合物的相對含量開始攀升,酸類化合物峰面積由蒸煮階段的(32.1±1.95)×105mAu·min增長至(151.24±3.34)×105mAu·min。這可能是制曲階段優(yōu)勢微生物(曲霉、芽孢桿菌及葡萄球菌等)產(chǎn)生的脂肪酶水解大豆中豐富的脂肪(含量約為20%)生成脂肪酸和甘油,甘油再轉(zhuǎn)化為有機酸造成的[20]。醇類物質(zhì)可由羰基化合物通過還原作用或微生物代謝生成,大量酸類物質(zhì)的存在可以和醇類化合物通過酯化反應(yīng)形成酯類化合物[21],這可能是蒸煮階段產(chǎn)生的正己醇在制曲階段快速下降的原因。2-正戊基呋喃的含量快速累積,該化合物是一種帶有清香、果香、焦糖味的食品用香料,呋喃和吡嗪是典型的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物,美拉德反應(yīng)是由羰基化合物(如還原糖、脂質(zhì)等)和氨基化合物(如蛋白質(zhì)、氨基酸等)反應(yīng)產(chǎn)生的非酶褐變現(xiàn)象[20]。但呋喃和吡嗪的峰面積均較小,說明快速工藝下曲霉型豆豉在制曲階段僅進行輕度的美拉德反應(yīng),這與傳統(tǒng)工藝一致。

    在洗曲階段揮發(fā)性成分主要為酸、醇、芳香族、呋喃,分別占總揮發(fā)性成分的33.24%、20.36%、11.90%和6.10%。該階段揮發(fā)性成分除1-辛烯-3-醇外基本沒有大的變動,1-辛烯-3-醇峰面積由制曲階段的(1 069.38±6.59)×105mAu·min銳減至(462.87±11.81)×105mAu·min,其他揮發(fā)性成分相對含量發(fā)生變化可能是由于大量1-辛烯-3-醇被水洗掉所導(dǎo)致的。

    在后酵階段揮發(fā)性成分主要為醛、酸、酚、吡嗪,分別占該階段總揮發(fā)性成分的34.33%、29.85%、11.07%和7.28%??焖俟に嚭蠼碗A段的總峰面積高達(8 525.21±31.8)×105mAu·min,而傳統(tǒng)工藝后酵階段揮發(fā)性成分主要是醛、酯、醇和酚,后酵階段的總峰面積僅為(1 130.64±1.78)×104mAu·min,酯類是傳統(tǒng)工藝下后酵階段形成最多的一類物質(zhì),而醛類是快速工藝下該階段形成最多的一類物質(zhì)。這說明快速工藝生產(chǎn)的曲霉型豆豉多層次風(fēng)味得到加強,風(fēng)味物質(zhì)主要組成也發(fā)生很大的變化,快速工藝在生產(chǎn)豆豉上存在較大優(yōu)勢,賦予豆豉花香、甜香、脂香、堅果香等美好風(fēng)味。快速工藝在后酵階段共檢測出20種新的揮發(fā)性成分,絕大多數(shù)在制曲階段形成的揮發(fā)性成分都得到加強,其中比較突出的代表有苯甲醛、可卡醛、愈創(chuàng)木酚、2,5-二甲基吡嗪、2-甲基吡嗪、苯乙醛、異戊酸、甲基麥芽酚、4-甲基戊酸、2-乙酰基吡咯等。但作為豆腥味主要來源的1-辛烯-3-醇不再被檢測到,說明其對豆豉風(fēng)味的貢獻度不大,范琳等[21]在研究曲霉型豆豉也有此發(fā)現(xiàn)。苯甲醛在蒸煮、制曲和洗曲階段含量并不突出,卻是后酵階段含量增長最多的化合物,相對含量占該階段總揮發(fā)性成分的17.82%。它是一種工業(yè)上常用的芳香醛,具有強烈的杏仁氣味,同時具有甜香、堅果香和櫻桃味等良好風(fēng)味,是豆豉中重要的呈香物質(zhì)[22]。而可卡醛是僅在后酵階段才檢測到的揮發(fā)性成分,主要在后酵階段由微生物代謝生成,相對含量占該階段總揮發(fā)性成分的11.63%,具有甜香、可可香、堅果香等良好風(fēng)味[23]。異戊酸是酸類化合物中的主要成分,占總揮發(fā)性成分的18.77%,常用于香料生產(chǎn),具有酸味,奶油味,甜味,漿果味等風(fēng)味[24]。愈創(chuàng)木酚是酚類化合物中形成最多的物質(zhì),賦予豆豉木香、果香、熏肉香、焦糖香、漿果香等風(fēng)味。2,5-二甲基吡嗪、2-甲基吡嗪是吡嗪類化合物迅速增長的代表,而吡嗪是典型的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物,美拉德反應(yīng)貢獻主要表現(xiàn)在豆豉顏色變化、滋味提升及風(fēng)味物質(zhì)的形成等方面,直接影響豆豉酚、醛、呋喃、吡嗪等風(fēng)味物質(zhì)或前體物質(zhì)的形成,類黑精的產(chǎn)生能賦予豆豉黑色的外形。隨著發(fā)酵進行,快速工藝的發(fā)酵罐生物熱累積,溫度由制曲階段的25~30 ℃上升到后酵階段的50~60 ℃[25],而溫度是影響美拉德反應(yīng)的主要原因,一般每相差10 ℃,反應(yīng)速度相差3~5倍。且吡嗪和呋喃類揮發(fā)性成分含量升高,說明快速工藝后酵階段美拉德反應(yīng)更為劇烈。

    3 結(jié)論

    本實驗采用SPME-GC-MS對曲霉型豆豉快速工藝生產(chǎn)過程中的蒸煮、制曲、洗曲及后酵4階段揮發(fā)性成分進行鑒定,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在蒸煮階段共檢出67種揮發(fā)性成分;制曲階段共檢出70種揮發(fā)性成分;洗曲階段共檢出67種揮發(fā)性成分;后酵階段共檢出81種揮發(fā)性成分。從揮發(fā)性成分種類和含量來看,曲霉型豆豉快速工藝在制曲階段僅形成少量揮發(fā)性成分,揮發(fā)性成分主要在后酵階段形成。在蒸煮階段揮發(fā)性成分主要為醇、酚和醛,分別占該階段總揮發(fā)性成分的70.57%、11.27%和9.43%,三者之和占總揮發(fā)性成分的91.72%,1-辛烯-3-醇、正己醇、甲基麥芽酚是蒸煮階段主要的揮發(fā)性成分,其中1-辛烯-3-醇是豆腥味的主要來源。在制曲階段揮發(fā)性成分主要是醇、芳香族、酸和呋喃,分別占該階段總揮發(fā)性成分的54.51%、7.09%、6.57%和5.43%。在蒸煮階段產(chǎn)生的1-辛烯-3-醇仍占總揮發(fā)性成分的46.42%,該階段仍以豆腥味為主。值得注意的是該階段已經(jīng)發(fā)生輕度的美拉德反應(yīng),酸、芳香族、呋喃、吡嗪類化合物的相對含量開始攀升,主要的揮發(fā)性成分分別是1-辛烯-3-醇、苯乙烯、2-正戊基呋喃,大量酸類化合物和醇類化合物通過酯化反應(yīng)形成酯類化合物。在洗曲階段揮發(fā)性成分主要為酸、醇、芳香族和呋喃,分別占總揮發(fā)性成分的33.24%、20.36%、11.90%和6.10%。該階段大量1-辛烯-3-醇被水洗掉,其他揮發(fā)性成分基本沒有大的變動。

    在后酵階段揮發(fā)性成分主要為醛、酸、酚和吡嗪,分別占該階段總揮發(fā)性成分的34.33%、29.85%、11.07%和7.28%,共檢測出20種新的揮發(fā)性成分,醛是曲霉型豆豉快速工藝后發(fā)酵階段形成最多的一類物質(zhì),絕大多數(shù)在制曲階段形成的揮發(fā)性成分都得到加強,其中比較突出的代表有苯甲醛、可卡醛、愈創(chuàng)木酚、2,5-二甲基吡嗪、2-甲基吡嗪、苯乙醛、異戊酸、甲基麥芽酚、4-甲基戊酸、2-乙?;量┑?。其中苯甲醛在蒸煮、制曲和洗曲3階段含量并不突出,卻是后酵階段含量增長最多的化合物;可卡醛、4-甲基戊酸、2-乙?;量┦莾H在后酵階段才檢測到的揮發(fā)性成分;作為豆腥味主要來源的1-辛烯-3-醇不再被檢測到,說明其對豆豉風(fēng)味的貢獻度不大??焖俟に嚭蠼碗A段美拉德反應(yīng)劇烈,形成了大量的美拉德反應(yīng)產(chǎn)物,如吡嗪、呋喃等??焖俟に囋谏a(chǎn)曲霉型豆豉上存在較大優(yōu)勢,快速工藝比傳統(tǒng)工藝形成的揮發(fā)性成分種類更多、峰值更大,豆豉多層次的風(fēng)味得到加強,賦予豆豉更濃郁的花香、甜香、脂香、堅果香、熏肉香等美好風(fēng)味。無論是從揮發(fā)性成分的種類還是從含量來看,后酵階段是豆豉揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)形成的主要階段。而曲霉型豆豉風(fēng)味物質(zhì)形成是多種微生物互相作用的結(jié)果,相關(guān)風(fēng)味物質(zhì)形成與功能微生物之間的關(guān)聯(lián)還需要進一步探究。

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