中草藥組方“消腐湯”防治中華蜜蜂歐洲幼蟲腐臭病試驗(yàn)研究

鄧位喜 劉廷江 馬嘯天 吳廷昌 韓建倫

摘要：歐洲幼蟲腐臭病在各養(yǎng)蜂國均常有發(fā)生。開展了中草藥復(fù)方制劑“消腐湯”及抗生素對(duì)中華蜜蜂歐洲幼蟲腐臭病防治效果試驗(yàn)。結(jié)果表明，中藥黃連和黃柏抑菌效果最為明顯，蜂房球菌對(duì)土霉素、氨芐西林和氟本尼考等抗生素均為敏感，“消腐湯”治療歐洲幼蟲腐臭病治愈率為58.82%，有效率為76.47%，死淘率為23.53%，效果顯著優(yōu)于氨芐西林、土霉素和氟本尼考（P<0.01）。

關(guān)鍵詞：歐洲幼蟲腐臭病，中華蜜蜂，中草藥，消腐湯，防治效果

中圖分類號(hào)：S895? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? 文章編號(hào)：1007-273X（2021）05-0005-03

歐洲幼蟲腐臭?。‥uropean foulbrood，EFB）簡稱歐幼病，目前在各養(yǎng)蜂國均有發(fā)生。典型臨床癥狀表現(xiàn)為“花子脾”，死亡幼蟲體表失去正常光澤，蟲尸腫脹、癱軟、蒼白，繼而轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色，呈溶解性腐敗，有酸臭味，體液黏性不大有短拉絲，干枯后呈深褐色。發(fā)病呈現(xiàn)明顯的季節(jié)性，兩個(gè)發(fā)病高峰分別在蜂群春秋兩季的繁殖高峰期。近年來遵義地區(qū)均有養(yǎng)殖場報(bào)告發(fā)生該病，多數(shù)蜂場采用抗生素進(jìn)行預(yù)防和治療，一方面產(chǎn)生耐藥性后效果不佳，另一方面給蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全帶來了隱患。筆者探索了使用中草藥預(yù)防和治療歐洲幼蟲腐臭病，以減少抗生素在養(yǎng)蜂生產(chǎn)中的使用，提升蜂產(chǎn)品質(zhì)量和安全水平。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)

遵義地區(qū)選擇發(fā)病的6個(gè)蜂場進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 臨床試驗(yàn)蜂群分組

按照中華蜜蜂歐洲幼蟲腐臭病典型臨床特征進(jìn)行初步診斷，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測確診，確定參與臨床治療的試驗(yàn)蜂群，其余受威脅蜂群作為中草藥組方預(yù)防試驗(yàn)蜂群。對(duì)發(fā)病蜂場隨機(jī)分組，分別為中草藥試驗(yàn)組和抗生素治療對(duì)照組 （抗生素分別為氨芐西林、土霉素和氟本尼考）（表1）。參與預(yù)防試驗(yàn)的蜂群隨機(jī)分為中草藥試驗(yàn)組和抗生素預(yù)防對(duì)照組（抗生素分別為氨芐西林、土霉素和氟本尼考）（表2）。

1.3 中藥組方“消腐湯”

通過征集本地蜂農(nóng)防治中華蜜蜂歐洲幼蟲腐臭病臨床有效中草藥組方，優(yōu)化組成“消腐湯”參與試驗(yàn)?！跋瘻苯M成：黃蓮18 g、黃芩15 g、黃柏15 g、穿心蓮15 g、鴨跖草12 g、如意花根15 g等，煎煮濃縮至500 mL（6脾/箱2 d的劑量），加白糖溶解攪拌均勻，至含糖量60%～65%，靜置即得“消腐湯”藥液，根據(jù)蜂群強(qiáng)弱確定藥液用量。連續(xù)使用1周為1個(gè)療程。

1.4 治療方案

1.4.1 中草藥試驗(yàn)組 按照“1.3”中“消腐湯”使用方法進(jìn)行治療，執(zhí)行“消毒隔離、棄脾斷子、關(guān)王造脾”常規(guī)處置措施。

1.4.2 抗生素治療對(duì)照組 結(jié)合查閱資料和藥敏試驗(yàn)結(jié)果，選擇氨芐西林、土霉素、氟本尼考進(jìn)行10倍稀釋，按蜂群群勢(shì)強(qiáng)弱進(jìn)行噴脾治療，執(zhí)行“消毒隔離、棄脾斷子、關(guān)王造脾”常規(guī)處置措施。

1.4.3 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 痊愈：治療3個(gè)療程（21 d）后，患病蜂群精神抖擻，幼蟲發(fā)育完全恢復(fù)正常，蜂群群勢(shì)維持在75%以上。有效：治療3個(gè)療程（21 d）后，幼蟲停止或逐漸減少死亡，病態(tài)基本消除，發(fā)育趨向恢復(fù)正常，蜂群群勢(shì)維持在50%以上。無效：治療無效果，蜂群群勢(shì)減少到50%以下（不含50%），蜂群死亡或淘汰。

1.5 預(yù)防處理方案

1.5.1 中草藥試驗(yàn)組 中草藥組方預(yù)防用藥2個(gè)療程，并執(zhí)行“消毒、隔離、強(qiáng)群”的常規(guī)處置措施。

1.5.2 抗生素預(yù)防對(duì)照組 選擇氨芐西林、土霉素、氟本尼考進(jìn)行10倍稀釋，按蜂群群勢(shì)強(qiáng)弱進(jìn)行噴脾治療，并作“消毒、隔離、強(qiáng)群”的常規(guī)處置進(jìn)行處理。

1.5.3 效果觀察 按照中華蜜蜂歐洲幼蟲腐臭病臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行蜂群觀察，確定是否發(fā)病。

1.6 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，選擇Duncan′S方法進(jìn)行組間多重比較，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 治療試驗(yàn)效果

由表3可見，通過中草藥組方“消腐湯”治療3個(gè)療程（21 d）后，痊愈20箱、有效26箱、無效8箱，治愈率58.82%、有效率76.47%、死淘率23.53%;氨芐西林對(duì)照組痊愈11箱、有效20箱、無效14箱，治愈率32.35%、有效率58.82%、死淘率41.18%;土霉素對(duì)照組痊愈13箱、有效19箱、無效15箱，治愈率38.24%、有效率55.88%、死淘率44.12%;氟本尼考對(duì)照組痊愈16箱、有效25箱、無效9箱，治愈率47.06%、有效率73.53%、死淘率26.47%。將中草藥試驗(yàn)組和抗生素治療對(duì)照組的效果進(jìn)行比較，中草藥試驗(yàn)組治療效果極顯著優(yōu)于3個(gè)抗生素治療對(duì)照組（P<0.01）。

2.2 預(yù)防試驗(yàn)效果

由表4可見，采用中草藥組方“消腐湯”預(yù)防性用藥2個(gè)療程，第21天觀察，中草藥試驗(yàn)組發(fā)病12箱，發(fā)病率11.65%;氨芐西林對(duì)照組發(fā)病31箱，發(fā)病率30.10%;土霉素對(duì)照組發(fā)病38箱，發(fā)病率36.89%;氟本尼考對(duì)照組發(fā)病12箱，發(fā)病率11.65%。將中草藥試驗(yàn)組和抗生素對(duì)照組的預(yù)防效果進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)中草藥試驗(yàn)組和氟本尼考對(duì)照組預(yù)防效果相當(dāng)，兩者均極顯著優(yōu)于氨芐西林和土霉素對(duì)照組（P<0.01）。

3 小結(jié)與討論

（1）歐洲幼蟲腐臭病（EFB）是以蜂房蜜蜂球菌（Melissococcus plutonius）為主要致病菌的一種危害嚴(yán)重的傳染病[1]。Belloy 等[2]研究表明，歐洲幼蟲腐臭病主要發(fā)生于幼蜂階段，成年工蜂可攜帶蜂房蜜蜂球菌，導(dǎo)致歐洲幼蟲腐臭病在蜂群內(nèi)甚至是不同蜂群和蜂場間傳播。歐洲幼蟲腐臭病長期以來給遵義地區(qū)蜂農(nóng)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，但目前沒有較為快速有效的鑒定手段和預(yù)警機(jī)制。

（2）防治歐洲幼蟲腐臭病常用藥物有青霉素、土霉素等，但長期使用抗生素會(huì)造成耐藥性，治療效果降低，同時(shí)也給蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全造成較大影響。通過征集當(dāng)?shù)胤滢r(nóng)防治中華蜜蜂歐洲幼蟲腐臭病臨床有效中草藥組方，優(yōu)化組成中草藥復(fù)方制劑“消腐湯”，由黃連、黃芩、黃柏、穿心蓮、鴨跖草、如意花根等中草藥組成。其中黃連味苦性寒，具有清熱解毒，瀉火燥濕的功效，含有黃酮、生物堿、萜類、揮發(fā)油、有機(jī)酸、香豆素等多種化學(xué)成分，可抗菌、抗病毒、抗腫瘤、降血糖、抗氧化等[3-5];黃芩含有黃酮類、木脂素和揮發(fā)油等多種成分，具有抗炎、抗腫瘤等多種藥理活性[6];黃柏主要成份有黃柏苷、異黃柏苷、槲皮素、黃柏酮等，具有燥濕清熱、解毒瀉火、去腐消腫的功效[7]。通過臨床試驗(yàn)取得較好防治效果，為歐洲幼蟲腐臭病防治建立了綠色防治方案。

（3）蜜蜂傳染病暴發(fā)不僅與食物、水、空間不足等群體壓力有關(guān)，還受遺傳因素、氣候及地理環(huán)境等因素影響[8]。因此，針對(duì)遵義地區(qū)中華蜜蜂歐洲幼蟲腐臭病發(fā)病特點(diǎn)及流行現(xiàn)狀，應(yīng)采取“以防為主，防治結(jié)合”的防控方針，嚴(yán)格執(zhí)行“消毒、隔離、強(qiáng)群”處置措施[1，8，9]，為中華蜜蜂產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展、蜂產(chǎn)品質(zhì)量安全提供技術(shù)保障。

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