噬菌體在治療大腸桿菌誘導的肉雞氣囊炎中的作用研究

杜新永 王立坤 劉爽 李先勝 羅成盛

摘 要：為驗證噬菌體對大腸桿菌誘導的肉雞氣囊炎的治療效果，選擇高致病性大腸桿菌采用灌服結合肌肉注射方案誘導氣囊炎模型，并采用噬菌體、抗菌肽、抗生素等方法進行治療。實驗結果表明：從剖檢結果、降低死淘率的情況來看，多西環(huán)素治療大腸桿菌性氣囊炎效果最好，噬菌體、林可霉素治療效果相當，抗菌肽效果較差，陰性對照（未治療）組死亡率最高，達71.4%。綜上所述，噬菌體制劑可用于大腸桿菌性肉雞氣囊炎的輔助性治療。

關鍵詞：白羽肉雞;氣囊炎;噬菌體;無抗養(yǎng)殖

中圖分類號：S858.31? ? ? ? 文獻標識碼：B? ? ? ? 文章編號：1673-1085（2021）6-0042-05

在白羽肉雞密集化養(yǎng)殖中，肉雞氣囊炎是常見疾病之一[1-4]，輕者造成許多肉雞到出欄時呼吸道癥狀還存在，重者不到正常出欄日齡就提前出欄了，給養(yǎng)殖戶造成很大經濟損失[5]。據報道，白羽肉雞養(yǎng)殖過程中，氣囊炎發(fā)病率高達50%～60%，嚴重影響了白羽肉雞的生產性能，造成巨大經濟損失[5，6]。氣囊炎不是指一個單獨的疾病，而是某些全身性感染的癥狀[7]。臨床上最常見的是大腸桿菌感染引起的氣囊炎，表現病雞精神沉郁、呼吸困難、有啰音、咳嗽、呼吸急促、排黃白或綠色稀糞等主要癥狀[3，8]。剖檢可見氣囊混濁，有大量混濁的滲出液;重者氣囊壁增厚，有大小不等的干酪樣凝塊[4]。

除大腸桿菌外，新城疫病毒、傳染性法氏囊炎病毒、傳染性支氣管炎病毒、傳染性鼻炎病毒、支原體（敗血支原體、滑膜支原體、毒支原體）、曲霉菌等，感染肉雞后都可以引起氣囊炎[8]。除了病原菌感染之外，環(huán)境、管理因素也極易引發(fā)肉雞的氣囊炎[1，3]。

合理用藥可以在一定程度上緩解氣囊炎的危害。由于氣囊血管少[4]，加上細菌耐藥性普遍提升等情況，養(yǎng)殖戶使用阿莫西林[9]、恩諾沙星[5]治療效果不佳。專家建議采用注射或專門的噴霧措施可有效治療雞氣囊炎[2];用藥則建議氟苯尼考、強力霉素（多西環(huán)素）或者中藥制劑[1]。

本文中，我們采用高致病性大腸桿菌對白羽肉雞進行氣囊炎造模，同時采用青島潤達生物科技有限公司提供的噬菌體進行治療，得到了較好的實驗效果，為肉雞氣囊炎無抗治療提供了一種新的選擇。

1材料與方法

1.1 實驗動物及其氣囊炎造模

實驗動物為1日齡白羽肉雞50只，攻毒病菌為高致病性大腸桿菌E6（分離自白羽肉雞病料肝臟，青島潤達生物科技有限公司提供），細菌濃度為106 cfu/mL，用量為0.8 mL/只雞，初始采用灌服（2 mL菌液/只雞）方案，雞群未出現氣囊炎相關癥狀，死淘率低。接著采用了雞腿注射（0.8 mL菌液/只雞）的方式進行造模。至11日齡時，僅剩余35只肉雞，且出現了明顯的發(fā)病癥狀，對死淘的肉雞進行剖檢，發(fā)現了氣管栓塞、有干酪樣物等典型癥狀，說明肉雞氣囊炎造模成功，接下來啟動治療過程。

1.2 噬菌體制劑

噬菌體制劑為青島潤達生物科技有限公司提供的單一噬菌體（RDP-EC-16029），體外配型實驗結果表明，該噬菌體對1.1所用的攻毒大腸桿菌E6有較好的體外裂解效果。噬菌體制劑的滴度為107 pfu/mL，治療時采用灌服，按照1 mL/只雞用量。

1.3 治療方案

造模成功后（實驗肉雞出現死亡，解剖有較典型的氣囊炎癥狀），將存活的剩余35只雞，隨機分成5組（陰性對照組、噬菌體組、抗菌肽組、林可霉素治療組和多西環(huán)素治療組），每組7只，進行氣囊炎治療。其中，陰性對照組為不治療組，陽性對照組為抗生素治療組（林可霉素治療組和多西環(huán)素治療組）。具體治療情況見表1。

1.4 數據分析

本文主要依據肉雞生長情況、剖檢癥狀等進行分析，對于死淘數，采用SPSS進行方差分析及圖形繪制，F值表示不同數據之間的顯著性差異，F值越大說明差異越明顯;P值表示假設性檢驗，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結果與分析

2.1 實驗雞群狀況

使用高致病性大腸桿菌攻毒后3 d，雞群出現明顯的趴臥、聚堆、精神不振的狀況，采食、飲水量下降，同時出現大量死淘。個別雞甩鼻、腫眼、流淚（圖1）。通過對各造模過程中死亡的肉雞進行解剖，剖檢后發(fā)現典型的氣囊污濁、有干酪樣沉積物，全都出現了氣囊炎、包心包肝的癥狀。

治療4 d后，雞群陰性對照組（1組）持續(xù)死亡，只剩2只;其他組情況均有所好轉，趴臥、流淚等癥狀基本消失。

其中，第5組多西環(huán)素（強力霉素）實驗雞群迅速恢復健康。而且，從臨床表現上，第5組雞群精神狀況恢復快，羽翅明亮，采食積極，效果最好。其他實驗組中，噬菌體組（2組）、林可霉素組（4組）、抗菌肽組（3組）的雞群死亡率大大下降（死亡數分別為1、2、3只），采食、飲水增加，腿、嘴部破潰逐漸好轉（圖2）。

2.2 剖檢狀況

給藥10 d之后，對不同實驗組的肉雞進行解剖，觀察氣囊炎的治療效果，見圖3。

陰性對照組（1組）包心現象明顯，氣囊仍有許多干酪樣分泌物，說明雞只雖然成活，卻依然有氣囊炎癥狀;而其他組均沒再發(fā)現氣囊炎癥狀。多西環(huán)素（強力霉素，5組）組表現最好，氣囊清亮，沒有渾濁;而噬菌體組（2組）、抗菌肽組（3組）、林可霉素組（4組）氣囊癥狀明顯減輕，氣囊基本明亮，基本無渾濁。

2.3 死淘情況及存活率統(tǒng)計分析

雞群生存曲線見圖4。

從生存曲線圖（圖4）中可以明顯看出，陰性對照組死淘較快，第4天時，僅存活2只雞;而抗菌肽組在第2天死亡3只，此后死淘不再增加;而林可霉素組第3天死亡2只后，死淘不再增加;噬菌體組給藥后次日死亡1只，之后死淘不再增加。表現最好的是多西環(huán)素組，無死淘，存活率達100%。

結合體外藥敏試驗，本次實驗所用的噬菌體、抗菌肽、抗生素（多西環(huán)素、林可霉素）均有體外抑菌的效果，而動物試驗結果表明，采用上述試劑治療，能夠有效控制死淘，保證雞群的健康。

為了分析各實驗組之間的數據是否具有統(tǒng)計學上的顯著性差異，我們利用SPSS 26對實驗數據進行了方差分析，結果見表2所示。

從表2（實驗中沒有交互作用）分析中可以看出，各實驗分組之間F值為24.406，P < 0.01，說明各實驗組間結果差異極顯著，通過LSD對各組數據進行兩兩比較，其中，多西環(huán)素實驗效果好，優(yōu)于其他組;林可霉素組、噬菌體組相互之間無顯著性差異;抗菌肽組優(yōu)于陰性對照組。

3 結論

從上述結果分析可以看出，肉雞氣囊炎（大腸桿菌攻毒所致）可導致明顯的氣囊阻塞、有干酪樣沉積物等癥狀，同時，雞群死淘率上升，對于肉雞養(yǎng)殖造成較大的損失。

本文采用噬菌體對肉雞氣囊炎進行治療，取得了較好的效果，但考慮到氣囊炎發(fā)病機制復雜，給藥困難等，建議：①采用噬菌體與抗生素復合治療，起效快，效果更佳;②考慮采用噴霧給藥，結合雞舍消毒等，能夠更好地預防、治療肉雞氣囊炎。

參考文獻：

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[2] 高洪敏，宋光宇.淺析肉雞氣囊炎發(fā)病及防治[J].中國畜禽種業(yè)，2020，16（2）：175.

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