基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接方法研究山花晶顆?？挂暺诘淖饔脵C(jī)制

李 蕊，趙金偉，寧停波，姚景春，梁紅寶*

基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接方法研究山花晶顆粒抗視疲勞的作用機(jī)制

李 蕊1, 2，趙金偉1, 2，寧停波1, 2，姚景春1, 2，梁紅寶1, 2*

1. 魯南制藥集團(tuán)股份有限公司 中藥制藥共性技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 臨沂 276006 2. 山東新時(shí)代藥業(yè)有限公司，山東 臨沂 276006

基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討山花晶顆?？挂暺诘淖饔脵C(jī)制。利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)分析平臺(tái)（TCMSP）和中藥分子機(jī)制的生物信息學(xué)分析工具（BATMAN）篩選山花晶顆粒的活性成分和潛在作用靶點(diǎn)，通過STRING數(shù)據(jù)庫富集信號(hào)通路；采用Cytoscape軟件分析蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)中的關(guān)鍵靶點(diǎn)，采用分子對(duì)接實(shí)驗(yàn)對(duì)主要活性成分和關(guān)鍵靶點(diǎn)的結(jié)合能力進(jìn)行驗(yàn)證。山花晶顆粒篩選出槲皮素、熊果酸、大黃素等66個(gè)主要活性成分以及多巴胺受體D2（dopamine receptor D2，DRD2）、5-羥色胺受體1A（5-hydroxytryptamine receptor 1A，HTR1A）、毒蕈堿型膽堿受體M2（cholinergic receptor muscarinic 2，CHRM2）等34個(gè)潛在作用靶點(diǎn)，富集分析出神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣信號(hào)通路、環(huán)單磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）信號(hào)通路等35條相關(guān)信號(hào)通路，分子對(duì)接結(jié)果表明主要活性成分與關(guān)鍵作用靶點(diǎn)的對(duì)接構(gòu)象合理。山花晶顆粒能夠通過“多成分-多靶點(diǎn)-多通路”抑制細(xì)胞凋亡和炎性因子的產(chǎn)生，從而減輕眼部細(xì)胞氧化和損傷，發(fā)揮抗視疲勞的作用。

山花晶顆粒；視疲勞；網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)；分子對(duì)接；山柰酚；芹菜素；槲皮素

隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快，以及手機(jī)、電腦的普及應(yīng)用，人們用眼時(shí)間不斷延長，視疲勞已成為目前眼科常見的臨床疾病之一[1]。視疲勞又稱眼疲勞，主要以視物模糊、不耐久視、干澀不適、酸脹流淚等為臨床表現(xiàn)。中醫(yī)學(xué)將視疲勞稱為肝勞，病因?yàn)檫^用目力、情志內(nèi)傷、外感濕邪、飲食偏嗜，其中以過用目力為最主要因素；病機(jī)以虛為主，虛實(shí)夾雜；常夾郁夾濕，病位以肝、腎、氣為主，證候大致可分為肝腎陰虛、肝腎陰虛夾氣滯、肝腎陰虛夾濕3型，其中以肝腎陰虛最為多見[2]。

菊花和枸杞子作為清肝明目的著名藥對(duì)，出現(xiàn)在石斛夜光丸、枸菊地黃丸等多個(gè)經(jīng)典方中[3]。菊花具有清熱解毒、去肝火的功效[4]；枸杞具有滋補(bǔ)肝腎、養(yǎng)肝明目的功效[5]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，菊花、枸杞子中含有豐富的多糖、黃酮類、葉黃素等多種活性成分，具有清除自由基、改善眼部不適的作用[6-11]。山花晶顆粒是在菊花和枸杞子的基礎(chǔ)上增加1味山楂而成，山楂具有調(diào)血脂、抗癌、抗氧化和增強(qiáng)免疫力的藥理作用[12]，且山楂與枸杞子配伍可以協(xié)同調(diào)血脂和抗氧化[13]。山花晶顆粒具有滋補(bǔ)肝腎、清肝明目的功效，臨床上主要用于治療肝腎陰虛引起的眼睛干澀、視力模糊、目赤腫痛等視疲勞癥狀，亦可用于高血壓、高血脂癥，但其抗視疲勞的藥效成分及關(guān)鍵作用靶點(diǎn)尚不清楚。本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)對(duì)山花晶顆粒中的活性成分及作用機(jī)制進(jìn)行預(yù)測，并通過分子對(duì)接方法驗(yàn)證活性成分與靶點(diǎn)的結(jié)合能力，以期為山花晶顆粒的進(jìn)一步開發(fā)及應(yīng)用提供依據(jù)。

1 方法

1.1 山花晶顆粒活性成分收集及靶點(diǎn)篩選

借助中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（TCMSP，http://tcmspw.com/tcmsp.php）[14-15]，以“菊花”“枸杞子”“山楂”為關(guān)鍵詞，以口服生物利用度≥20%、類藥性≥0.1為篩選條件[16-17]，并結(jié)合文獻(xiàn)整理菊花、枸杞子和山楂的活性成分，根據(jù)篩選后的化學(xué)成分收集對(duì)應(yīng)的藥物靶點(diǎn)；借助中藥分子機(jī)制的生物信息學(xué)分析工具（BATMAN，http://bionet.ncpsb.org/batman-tcm/）[18]，以“菊花”“枸杞子”“山楂”為關(guān)鍵詞，收集山花晶顆粒中的活性成分，以Target score≥20為篩選條件，保留符合條件的活性成分對(duì)應(yīng)的藥物靶點(diǎn)[19]。

1.2 “中藥-活性成分-藥物靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

通過TCMSP和BATMAN在線數(shù)據(jù)庫篩選藥物作用靶點(diǎn)，借助UniProt（https://www.uniprot.org/）校正靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)的基因名，限定物種為人。采用Cytoscape 3.6軟件構(gòu)建“中藥-活性成分-藥物靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖，用Network Analyzer插件分析山花晶顆粒的活性成分和藥物靶點(diǎn)。

1.3 抗視疲勞潛在作用靶點(diǎn)的獲取

由于收集到的疾病靶點(diǎn)與視疲勞的相關(guān)性較差，本研究選擇從藥物靶點(diǎn)出發(fā)，尋找潛在作用靶點(diǎn)。從TCMSP數(shù)據(jù)庫[20]中篩選出菊花、枸杞子、山楂所對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)，整合后刪除重復(fù)項(xiàng)，得到TCMSP數(shù)據(jù)庫藥物總靶點(diǎn)；從BATMAN數(shù)據(jù)庫[21]中篩選出3味藥材對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)，整合后刪除重復(fù)項(xiàng)，得到BATMAN數(shù)據(jù)庫藥物總靶點(diǎn)。為避免單個(gè)數(shù)據(jù)庫收載藥物靶點(diǎn)的偏向性，提高與抗視疲勞功效的相關(guān)性，將2個(gè)數(shù)據(jù)庫中篩選出的藥物總靶點(diǎn)同時(shí)在線導(dǎo)入Venn在線軟件作圖工具平臺(tái)進(jìn)行Venn分析，獲得的交集靶點(diǎn)即為抗視疲勞潛在作用靶點(diǎn)。

1.4 抗視疲勞潛在作用靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將抗視疲勞潛在作用靶點(diǎn)在線導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫（https://string-db.org/），限定物種為人，得到蛋白與蛋白間的相互作用信息[22-23]，將獲得的數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.6軟件，生成PPI網(wǎng)絡(luò)圖。通過CytoNCA插件對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治觯治鰞?nèi)容包括中心性（degree centrality，DC）、介度中心性（betweenness centrality，BC）、特征向量中心性（eigenvector centrality，EC）、接近中心性（closeness centrality，CC）。

1.5 關(guān)鍵靶點(diǎn)的富集分析

將關(guān)鍵靶點(diǎn)在線導(dǎo)入STRING網(wǎng)站，得到基因本體（gene ontology，GO）功能富集分析及京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路富集分析[24-25]。以＜0.01為基本標(biāo)準(zhǔn)，按由小到大的順序選擇前20條基因注釋目錄和信號(hào)通路目錄進(jìn)行分析，運(yùn)用R軟件對(duì)分析結(jié)果進(jìn)行可視化處理。

1.6 活性成分與靶點(diǎn)的分子對(duì)接驗(yàn)證

選擇PPI網(wǎng)絡(luò)中度值排名靠前的5個(gè)靶點(diǎn)作為關(guān)鍵靶點(diǎn)，將整理的所有活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)進(jìn)行對(duì)接。從TCMSP數(shù)據(jù)庫下載活性成分的分子結(jié)構(gòu)，導(dǎo)入Sybyl-X 2.0軟件，運(yùn)用Minimize模塊進(jìn)行能量優(yōu)化，獲得穩(wěn)定的分子構(gòu)象，mol2格式輸出保存。通過蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫（https://www.rcsb.org/）[26]下載靶點(diǎn)的結(jié)晶復(fù)合物，格式選擇pdb，采用Sybyl-X 2.0軟件的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)接模塊進(jìn)行分子對(duì)接，刪除靶點(diǎn)內(nèi)的水分子，添加非極性氫原子，抽取蛋白原配體，以便生成對(duì)接位點(diǎn)空腔進(jìn)行對(duì)接。對(duì)接完成后，根據(jù)低能量和構(gòu)象合理的原則選擇最佳對(duì)接構(gòu)象。

1.7 中藥-歸經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

通過檢索《中國藥典》2020年版[27]，獲得山花晶顆粒中山楂、菊花、枸杞子3味中藥的歸經(jīng)，構(gòu)建山花晶顆粒中藥-歸經(jīng)網(wǎng)絡(luò)。

2 結(jié)果

2.1 山花晶顆?；钚猿煞质占鞍悬c(diǎn)篩選

通過數(shù)據(jù)庫檢索以及文獻(xiàn)查閱[28-31]，共得到66個(gè)活性成分見表1，其中山楂有15個(gè)、菊花36個(gè)、枸杞子24個(gè)，有7個(gè)重復(fù)活性成分，有2個(gè)活性成分存在于3味藥材中。

表1 山花晶顆粒中的活性成分

續(xù)表1

編號(hào)活性成分CAS號(hào)來源 MOL53異葒草素4261-42-1山楂 MOL54長葉蒎烯5989-08-2菊花 MOL55γ-廣藿香508-55-4菊花 MOL56羊毛甾醇79-63-0枸杞子 MOL57膽固醇57-88-5枸杞子 MOL58落花生油酸2416-19-5枸杞子 MOL59野芝麻新苷27934-98-1枸杞子 MOL60巖皂甾醇17605-67-3枸杞子 MOL61二氫膽固醇29466-38-4枸杞子 MOL62鈍葉醇16910-32-0枸杞子 MOL63亞油酸乙酯544-35-4枸杞子 MOL64禾本甾醇1176-52-9枸杞子 MOL6524-乙基膽甾-4-烯-3-酮67392-96-5山楂 MOL66維生素B283-88-5菊花

2.2 “中藥-活性成分-藥物靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

“中藥-活性成分-藥物靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)見圖1，包含303個(gè)節(jié)點(diǎn)和1062條邊。通過Network Analyzer插件分析網(wǎng)絡(luò)的拓?fù)鋵W(xué)性質(zhì)，BC、CC和DC均較大的活性成分為槲皮素、芹菜素、山柰酚、木犀草素、β-谷甾醇，分別對(duì)應(yīng)147、63、60、50、43個(gè)靶點(diǎn)，為網(wǎng)絡(luò)的中心節(jié)點(diǎn)，表明這些活性成分與靶點(diǎn)的相互作用在網(wǎng)絡(luò)中起到了關(guān)鍵作用，不同活性成分作用于多個(gè)不同靶點(diǎn)，同一靶點(diǎn)也對(duì)應(yīng)不同活性成分，體現(xiàn)出山花晶顆粒是多成分、多靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)體系。

“SHJ”表示山花晶顆粒；橘色橢圓形表示枸杞子，綠色橢圓形表示山楂，藍(lán)色橢圓形表示菊花；紅色菱形表示共有成分，橘色菱形表示枸杞子活性成分，綠色菱形表示山楂活性成分，藍(lán)色菱形表示菊花活性成分；粉色長方形表示靶點(diǎn)

2.3 作用靶點(diǎn)的Venn分析

將TCMSP和BATMAN數(shù)據(jù)庫中共有的藥物靶點(diǎn)作為潛在作用靶點(diǎn)，即233個(gè)藥物靶點(diǎn)和528個(gè)藥物靶點(diǎn)同時(shí)在線導(dǎo)入Venn在線軟件作圖工具平臺(tái)進(jìn)行Venn分析，獲得交集靶點(diǎn)68個(gè)見圖2，即可能為山花晶顆?？挂暺诘臐撛谧饔冒悬c(diǎn)。

圖2 TCMSP與BATMAN數(shù)據(jù)庫藥物靶點(diǎn)交集分析

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將68個(gè)交集靶點(diǎn)在線導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫，得到蛋白間的相互作用信息和KEGG信號(hào)通路，在逐個(gè)篩查前30條中，找到4條與肝臟、眼睛相關(guān)的信號(hào)通路。將此4條通路上的靶點(diǎn)進(jìn)行富集，得到34個(gè)靶點(diǎn)，導(dǎo)入STRING數(shù)據(jù)庫得到蛋白間相互作用信息，運(yùn)用Cytoscape 3.6軟件，通過插件cytoNCA對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?，?jì)算得到DC、BC、EC、CC的中位數(shù)分別為7、21.994 42、0.117 226 253、0.488 915 71。根據(jù)大于中位數(shù)的篩選標(biāo)準(zhǔn)，選出13個(gè)關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，對(duì)PPI進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)清晰化，見圖3。越靠近中心區(qū)域的靶點(diǎn)相互作用越強(qiáng)，最內(nèi)圈的多巴胺D2受體（dopamine receptor D2，DRD2）、5-羥色胺受體1A（5-hydroxytryptamine receptor 1A，HTR1A）、膽堿能毒蕈堿受體2（muscarinic acetylcholine receptors，CHRM2）、一氧化氮合成酶3（nitric oxide synthase 3，NOS3）、毒蕈堿型膽堿受體M1（cholinergic receptor muscarinic 1，CHRM1）、μ-阿片受體（μ-opioid receptor，OPRM1）、腎上腺素能受體α2a（adrenergic receptor α2a，ADRA2A）、谷氨酸受體2（glutamate receptor 2，GRIA2）、ADRA2C、ADRA2B、γ-氨基丁酸A受體α1（gamma aminobutyric acid A receptor α1，GABRA1）、腎上腺素能受體β2（adrenergic receptor β2，ADRB2）、GABRA2為山花晶顆?？挂暺诘臐撛谧饔冒悬c(diǎn)。

圖3 34個(gè)富集靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)

2.5 GO功能及KEGG通路富集分析

將34個(gè)靶點(diǎn)在線導(dǎo)入STRING網(wǎng)站，得到GO和KEGG富集分析數(shù)據(jù)。GO功能注釋包括細(xì)胞組分、分子功能和生物過程3個(gè)方面，分別得到42、58、437個(gè)目錄，細(xì)胞組分主要涉及質(zhì)膜組成、突觸后膜和γ-氨基丁酸-α受體復(fù)合物；分子功能主要與G蛋白偶聯(lián)胺受體活性、神經(jīng)遞質(zhì)受體活性、跨膜信號(hào)受體活性、信號(hào)受體活性、腎上腺素能受體活性等相關(guān)；山花晶顆粒的生物過程主要涉及腺苷酸環(huán)化酶調(diào)節(jié)G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路、管徑調(diào)節(jié)、血管直徑的調(diào)節(jié)、磷脂酶C激活G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路、血液循環(huán)、系統(tǒng)過程調(diào)節(jié)、腺苷酸環(huán)化酶激活G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路、平滑肌收縮的調(diào)節(jié)。KEGG富集分析有60個(gè)目錄，以＜0.01為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行富集分析，主要涉及到神經(jīng)活性配體-受體相互作用、鈣信號(hào)通路、環(huán)單磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）信號(hào)通路、環(huán)磷酸鳥苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）-cGMP依賴性蛋白激酶（cGMP-dependent protein kinase，PKG）信號(hào)通路、膽堿能突觸、糖尿病并發(fā)癥中的年齡-晚期糖基化終產(chǎn)物受體（receptor of advanced glycosylation end-products，RAGE）信號(hào)通路、心肌細(xì)胞中的腎上腺素能信號(hào)、逆行內(nèi)源性大麻素信號(hào)、γ-氨基丁酸能突觸、多巴胺能突觸、缺氧誘導(dǎo)因子-1信號(hào)通路、肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的調(diào)節(jié)等信號(hào)通路。GO和KEGG前20條目錄見圖4、5。

圖4 山花晶顆粒GO功能富集分析

圖5 山花晶顆粒KEGG通路富集分析

2.6 分子對(duì)接驗(yàn)證

以靶蛋白結(jié)構(gòu)內(nèi)的原配體作為對(duì)照，將篩選出的所有活性成分與5個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)（DRD2、HTR1A、CHRM2、NOS3、CHRM1）對(duì)應(yīng)的活性位點(diǎn)（6CM4、5V54、5YC8、1M9J、5CXV）進(jìn)行分子對(duì)接，結(jié)果見表2。小分子與受體結(jié)合時(shí)的能量越低、構(gòu)象形狀匹配度越高，則對(duì)接打分值越高，表明小分子具有的潛在作用活性越強(qiáng)。3個(gè)小分子對(duì)比原配體，對(duì)接打分值十分接近，表明篩選出的活性成分具有與原配體相當(dāng)?shù)淖饔没钚浴?/p>

表2 山花晶顆粒主要活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)的分子對(duì)接

選取度值排名靠前的活性成分槲皮素、芹菜素和山柰酚進(jìn)行結(jié)果展示見圖6，槲皮素、芹菜素和山柰酚在DRD2、HTR1A、CHRM2、NOS3和CHRM1靶點(diǎn)蛋白活性位點(diǎn)內(nèi)的對(duì)接構(gòu)象穩(wěn)定、匹配度良好，均可與靶蛋白形成氫鍵作用，結(jié)合活性良好。

粉色棍狀結(jié)構(gòu)代表槲皮素，綠色棍狀結(jié)構(gòu)代表芹菜素，黃色棍狀結(jié)構(gòu)代表山柰酚，白色彩帶表示靶點(diǎn)蛋白結(jié)構(gòu)，黃色虛線表示氫鍵相互作用

2.7 中藥-歸經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的分析

如圖7所示，中藥-歸經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中肝經(jīng)的連接數(shù)為3，其余腎經(jīng)、肺經(jīng)、胃經(jīng)、脾經(jīng)的連接數(shù)均為1，可見山花晶顆粒的主要作用部位在肝。

圖7 中藥-歸經(jīng)網(wǎng)絡(luò)

3 討論

早在2000年前，《黃帝內(nèi)經(jīng)》就論述了肝與目的關(guān)系，其后又得到了歷代醫(yī)家的補(bǔ)充和臨床驗(yàn)證?！饵S帝內(nèi)經(jīng)》曰：“肝氣通于目，肝和則目能辨五色矣”；明·繆希雍《本草經(jīng)疏·卷二》云：“肝虛十證……目光短屬肝血虛腎水真陰不足”；清·林之翰《四診抉微》亦有云：“眼赤多淚積熱，頭眩不能俯視肝火……羞明怕日，肝腎并見”；由此可見中醫(yī)講眼病從肝治的道理所在。通過中藥-歸經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的分析結(jié)果可知，山花晶顆粒中3味藥材均入肝經(jīng)，枸杞、菊花滋補(bǔ)肝腎、清熱解毒，山楂健脾消食、酸甘化陰，3藥合用，則可發(fā)揮養(yǎng)肝、瀉火、明目之功效。與臨床上治療肝腎陰虛引起的眼睛干澀、視力模糊、目赤腫痛等視疲勞癥的功效基本吻合。

本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法對(duì)山花晶顆粒所含成分及靶點(diǎn)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)3味藥材共含66個(gè)活性成分，作用于233個(gè)藥物靶點(diǎn)；其中篩選出34個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)，具有多成分、多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮作用的特點(diǎn)。GO功能及KEGG通路富集分析可知，山花晶顆?？赡芡ㄟ^激活鈣信號(hào)通路和cAMP信號(hào)通路等激活下游磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）信號(hào)通路，調(diào)控凋亡通路，抑制各種凋亡蛋白，減少細(xì)胞凋亡，并抑制炎性因子白細(xì)胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）等的產(chǎn)生，減輕眼部細(xì)胞的氧化和損傷，保護(hù)視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，與目前研究所證實(shí)的車前子、青葙子、熟地等歸肝經(jīng)中藥發(fā)揮明目功效的作用機(jī)制基本相符[32-36]。分子對(duì)接結(jié)果表明，來自于山楂、菊花和枸杞子中度值較高的山柰酚、芹菜素和槲皮素3種黃酮成分與關(guān)鍵作用靶點(diǎn)蛋白匹配良好，提示該類化合物可能為核心活性成分群。

本研究應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接的方法，對(duì)山花晶顆粒的多成分-多靶點(diǎn)與抗視疲勞靶點(diǎn)之間復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)關(guān)系進(jìn)行探究及驗(yàn)證，初步闡釋了基于炎性細(xì)胞因子信號(hào)通路發(fā)揮抗視疲勞功效的作用機(jī)制，充分體現(xiàn)了中藥多組分、多靶點(diǎn)、多層次的整體調(diào)節(jié)作用，為進(jìn)一步深入探討其作用機(jī)制奠定了基礎(chǔ)，為探索抗視疲勞的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制提供了方向，同時(shí)為山花晶顆粒的進(jìn)一步開發(fā)及應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ)。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Mechanism of Shanhuajing Granules on reliving visual fatigue based on network pharmacology and molecular docking method

LI Rui1, 2, ZHAO Jin-wei1, 2, NING Ting-bo1, 2, YAO Jing-chun1, 2, LIANG Hong-bao1, 2

1. State Key Laboratory of Generic Manufacture Technology of Chinese Traditional Medicine, Lunan Pharmaceutical Group Co., Ltd., Linyi 276006, China 2. Shandong New Time Pharmaceutical Co., Ltd., Linyi 276006, China

To investigate the mechanism of Shanhuajing Granules (山花晶顆粒) on reliving visual fatigue based on network pharmacology.TCMSP and BATMAN databases were used to obtain the active components and potential action targets, STRING database was utilized to gain interaction network information. The key targets of protein-protein interaction (PPI) network were analyzed by Cytoscape software, molecular docking was used to identify the binding ability between main active components and key targets.A total of 66 main active components such as quercetin, ursolic acid and emodin, 34 potential targets such as dopamine receptor D2 (DRD2), 5-hydroxytryptamine receptor 1 (AHTR1A), cholinergic receptor muscarinic 2 (CHRM2) and 35 related signaling pathways such as neuroactive ligand-receptor interaction, calcium signaling pathway, cyclic adenosine monophosphate (cAMP) signaling pathway were obtained. Molecular docking results showed that the main active components docked into key targets.Shanhuajing Granules may inhibits cells apoptosis and production of inflammatory factors, reduce the oxidation and injury of eye cells by “multi-ingredient-multi-target-multi-pathway” mode, thereby relive visual fatigue.

Shanhuajing Granules; visual fatigue; network pharmacology; molecular docking; kaempferol; apigenin; quercetin

R285.5

A

0253 - 2670(2021)16 - 4921 - 10

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.16.017

2021-02-01

國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)（2018ZX09201010）

李 蕊（1992—），女，碩士，從事天然產(chǎn)物的提取研究。Tel: 18560512583 E-mail: yuxuanliunian928@163.com

梁紅寶，碩士，高級(jí)工程師，從事中藥的研究與開發(fā)。E-mail: lianghongbao1985@163.com

[責(zé)任編輯 李亞楠]