侯俊 徐春曉
關(guān)鍵詞:抗原;分離;獸用疫苗;純化;技術(shù)
相較于一些西方發(fā)達(dá)國(guó)家而言,我國(guó)獸用疫苗的研制水平和相關(guān)技術(shù)應(yīng)用還存在一定的差距,難以滿足畜禽養(yǎng)殖業(yè)迅猛發(fā)展的需求,亟待加強(qiáng)相關(guān)技術(shù)研究與宣傳推廣力度,不斷完善獸用疫苗體系建設(shè),持續(xù)提升免疫效果和疫苗質(zhì)量。其中,抗原的分離純化技術(shù)占據(jù)重要地位,直接影響著獸用疫苗的運(yùn)用價(jià)值,所以獸用疫苗抗原分離純化技術(shù)要點(diǎn)非常必要。
研究國(guó)內(nèi)獸用疫苗市場(chǎng)現(xiàn)狀可以發(fā)現(xiàn),國(guó)外企業(yè)投放了大量的獸用疫苗產(chǎn)品,且處于銷量持續(xù)增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì),由于其疫苗產(chǎn)品具有高效、安全、形狀穩(wěn)定等優(yōu)勢(shì),所以給國(guó)內(nèi)獸用疫苗企業(yè)和產(chǎn)品生存帶來(lái)極大壓力以及挑戰(zhàn)。最近兩年,國(guó)內(nèi)獸用疫苗企業(yè)積極學(xué)習(xí)借鑒國(guó)外先進(jìn)技術(shù)、經(jīng)驗(yàn),在疫苗抗原處理技術(shù)上獲取了很多新突破與新成就,不過(guò)受生產(chǎn)條件有限、基礎(chǔ)設(shè)施不完善、管理模式傳統(tǒng)單一等諸多因素影響,獸用疫苗產(chǎn)品依舊存在著過(guò)于同質(zhì)化、結(jié)構(gòu)不合理等問(wèn)題,難以將疫苗中雜蛋白含量降低,抗原有效含量也無(wú)法有效提高,純化工藝落后,這些都是國(guó)內(nèi)獸用疫苗抗原分離純化技術(shù)發(fā)展面臨的亟待解決的問(wèn)題。
(一)提前處理獸用抗原的要點(diǎn)
想要將獸用疫苗產(chǎn)品中的蛋白分離純化出來(lái),就要做好提前處理獸用抗原工作,此過(guò)程既要將原有活性保持住,也要按照目標(biāo)料液自身的性質(zhì)差異,選擇適合的處理技術(shù)。常見(jiàn)的處理技術(shù)包括酶處理、高壓擠壓處理、研磨處理、超聲波振蕩處理、反復(fù)凍融處理、滲透破碎處理、機(jī)械破碎處理等,在達(dá)到破碎目標(biāo)后,蛋白提取需通過(guò)相應(yīng)緩沖系統(tǒng)進(jìn)行,運(yùn)用微濾、過(guò)濾、離心等技術(shù)清除其中的不溶物大顆粒。
(二)分離純化獸用抗原的要點(diǎn)
分離純化技術(shù)可按照分子大小差異開(kāi)展,為了將其他物質(zhì)和蛋白質(zhì)分開(kāi),實(shí)現(xiàn)分離效果,可采取凝膠過(guò)濾、密度梯度離心、超濾、透析等技術(shù)。
凝膠過(guò)濾法,其應(yīng)用原理為大小不同分子在凝膠作用下進(jìn)行有效分離的過(guò)程,現(xiàn)階段常見(jiàn)的凝膠包括瓊脂糖凝膠、交聯(lián)葡聚糖凝膠等,此技術(shù)在國(guó)內(nèi)獸用疫苗生產(chǎn)中尚未達(dá)到普及應(yīng)用狀態(tài),目前在人用疫苗領(lǐng)域的應(yīng)用相對(duì)更多。
密度梯度離心法,其應(yīng)用原理為借助離心力場(chǎng)和重力作用分離、分層細(xì)胞的過(guò)程。該技術(shù)包括密度沉降平衡與速度沉降技術(shù),多聚蔗糖、蔗糖、氯化銫是常見(jiàn)的密度梯度離心技術(shù)應(yīng)用介質(zhì),經(jīng)過(guò)此技術(shù)處理的山羊痘病毒純化效果非常好,具有完整顆粒。
超濾法,其應(yīng)用原理為小分子溶劑與溶質(zhì)在相應(yīng)壓力作用下被膜隔住進(jìn)而純化出大分子的過(guò)程。相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明,此技術(shù)可以去除90%的雜蛋白。
透析法,其應(yīng)用原理為在透析袋內(nèi)分離混合物的過(guò)程,是最為常見(jiàn)的分離技術(shù)。
為了增強(qiáng)分離純化效果,還可采取以下四種分離純化方法。其一,分離純化按照不同溶解度進(jìn)行;其二,分離純化按照不同電荷進(jìn)行;其三,分離純化按照蛋白質(zhì)吸附情況進(jìn)行;其四,分離純化按照分子親和力特異性進(jìn)行。
總而言之,雖然我國(guó)獸用疫苗產(chǎn)業(yè)整體上呈現(xiàn)出良好發(fā)展的積極態(tài)勢(shì),不過(guò)依舊存在生產(chǎn)力有待提升、技術(shù)水平有待提高、疫苗質(zhì)量參差不齊等問(wèn)題,動(dòng)物接種疫苗后難以形成充足抗體,獲取的免疫保護(hù)效果不強(qiáng),疫苗抗原性較低,具有較高蛋白質(zhì),應(yīng)不斷優(yōu)化疫苗產(chǎn)業(yè),與時(shí)俱進(jìn)開(kāi)展獸用疫苗抗原分離純化技術(shù)要點(diǎn)的探究工作,不斷積累實(shí)踐經(jīng)驗(yàn),采用科學(xué)可行的純化步驟和分離手段,推進(jìn)我國(guó)畜禽養(yǎng)殖業(yè)的健康前進(jìn)。