抗著絲點抗體陽性患者臨床診斷研究

張若冰，陳福軍，郝武常，武 易

（1. 陜西省新藥審評中心，陜西 西安 710065； 2. 遼寧省檢驗檢測認證中心認證審評院，遼寧 沈陽 110003；3. 中國人民解放軍空軍第986 醫(yī)院檢驗科，陜西 西安 710054）

抗著絲點抗體（ACA）為針對著絲粒蛋白（Cen P）抗原的自身抗體。自1980 年被發(fā)現(xiàn)以來，一直認為ACA 是治療系統(tǒng)性動脈硬化癥的特異性抗體，尤其是局限型系統(tǒng)性CREST 綜合征診斷的標志性抗體［1］。隨著臨床研究的深入，發(fā)現(xiàn)在其他多種自身免疫性疾病中也出現(xiàn)ACA 陽性，如類風濕關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等［2－3］，但大部分研究著重探討的是 ACA 在某種自身免疫性疾病中的表達情況和臨床意義。本研究中回顧性分析了ACA 陽性患者的臨床資料，總結(jié)了ACA 的疾病分布，以及與其他自身抗體的關(guān)系?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取中國人民解放軍第986 醫(yī)院檢驗科實驗室信息管理系統(tǒng)中2012 年3 月至2018 年3 月收治的抗核抗體（ANA）和 ACA 均呈陽性的患者 146 例。其中，男10 例，平均年齡 （56.42 ± 7.33）歲；女 136 例，平均年齡（52.71 ±10.25）歲。所有患者臨床診斷均符合標準，均簽署知情同意書，一般臨床資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P ＞ 0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集患者血清，采用線性免疫印跡（LIA）法測定ACA 活性，同時檢測抗組蛋白、抗核小體、抗RNP／Sm、抗 Ro（SSA）抗體、抗 La（SSB）抗體、抗 Scl－70、抗 Jo－l、抗AMA 抗體、抗 AECA 抗體和抗 Ro52 抗體活性。以 LIA 法和酶聯(lián)免疫吸附法測定，檢測試劑盒購于歐蒙醫(yī)學診斷（中國）有限公司。檢測步驟嚴格按試劑盒使用說明書進行。以免疫比濁法檢測類風濕因子（RF）水平，以酶聯(lián)免疫吸附半定量法檢測抗雙鏈DNA 抗體（dsDNA）活性，操作步驟同ACA 活性檢測。采用邁瑞B(yǎng)C－6800 型血細胞分析儀進行ACA 陽性患者血常規(guī)分析，以及邁瑞B(yǎng)S－600型全自動分析儀檢測ACA 陽性患者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平，儀器均購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司；采用XC－A30 型全自動血沉動態(tài)分析儀（深圳市凱特生物醫(yī)療電子科技有限公司）檢測ACA 陽性患者紅細胞沉降率（簡稱血沉）。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計學軟件分析。正態(tài)分布的連續(xù)變量采用表示，行 t 檢驗（正態(tài)分布）或 Mann －Whitney U 檢驗（非正態(tài)分布）；分類變量采用率（%）表示，行 χ2檢驗或 Fisher 精確檢驗。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 ACA 陽性患者疾病分布

146 例ACA 陽性患者中，自身免疫性疾病患者83例（56.85%），非自身免疫性疾病患者63 例。詳見表1。

表1 146 例ACA 陽性患者疾病分布（n ＝146）Tab.1 The disease distribution of 146 ACA －positive patients（n ＝146）

2.2 ACA 與其他自身抗體的關(guān)系

146 例ACA 陽性患者中，同時伴有SSA 陽性、AMA陽性、Ro52 陽性、RF 陽性、Sm 陽性的情況見表 2。

表2 146 例ACA 陽性患者中其他抗體陽性檢出情況（n ＝146）Tab.2 Positive rate of other antibodies in 146 ACA －positive patients（n ＝ 146）

2.3 相關(guān)實驗室檢查

146 例 ACA 陽性患者中，貧血癥患者 80 例（54.79%），肝功能異常（主要是 ALT 和 AST 異常）患者 62 例（42.47%），血沉異?；颊?44 例（30.14%）。

3 討論

ACA 是人類抗核抗體的一種，是針對著絲點結(jié)構(gòu)抗原而產(chǎn)生的自身靶定位抗體，其靶定位抗原為著絲點結(jié)構(gòu)的相關(guān)蛋白，其結(jié)構(gòu)可細分為3 種不同的靶定位蛋白質(zhì)：CenP－A （著絲點分子量 17 000）、CenP－B（著絲點分子量 80 000）、CenP－C（著絲點分子量140 000），其中主要靶定位抗原是CenP－B，它能與血液中含有各種著絲點結(jié)構(gòu)抗體的血清相互反應(yīng)［4－5］。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，146 例ACA 陽性患者中，女性患者顯著多于同齡男性，且發(fā)病年齡較輕。其原因可能與機體雌激素分泌水平降低，對長期處于大范圍絕經(jīng)期婦女的神經(jīng)刺激抑制作用減弱，使女性疾病的發(fā)展較慢有關(guān)［5］。多數(shù)女性疾病患者在絕經(jīng)期病情穩(wěn)定，較易得到控制，是預后良好的重要原因之一［6－7］。

ACA 被認為是自身系統(tǒng)性動脈硬化病CREST 亞型的特異性抗體，與雷諾綜合征的臨床診斷和治療關(guān)系密切［8－9］。本研究中發(fā)現(xiàn)，ACA 陽性患者患雷諾綜合征僅1 例，且雷諾綜合征占自身免疫性疾病患者死亡總?cè)藬?shù)的1.20%。83 例ACA 陽性的自身免疫性疾病患者中，患自身免疫性乙型肝炎的人數(shù)最多（40.96%），其次為混合肝病和結(jié)締組織性疾?。?8.07%）。ACA 在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風濕關(guān)節(jié)炎等多種自身免疫性疾病中均呈高表達，但上述疾病的陽性患者平均人數(shù)無顯著差異（P ＞ 0.5），與文獻［2，10］報道結(jié)果基本一致?？梢?，證明ACA 為某一種疾病的患者具有特征性抗體尚缺乏統(tǒng)計學依據(jù)。此外，自身免疫性疾病患者的人數(shù)顯著高于非自身免疫性疾病的患者（P ＜ 0.01），說明 ACA 雖然同時可在多種疾病中顯陽性，但對自身免疫性特征性疾病中的分布差異顯著。63 例非自身免疫性疾病患者中，患有血液系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)疾病陽性患者的人數(shù)相對較多，尤其是冠狀動脈粥樣硬化等多發(fā)性心臟病患者多達29 例，占非自身抗體免疫感染性疾病肺癌患者數(shù)的22.22%，但尚未見具體機制的報道。此外，值得注意的是，ACA 陽性非自身抗體免疫感染患者中，出現(xiàn)了某些惡性腫瘤患者，包括原發(fā)性白血病、肺癌、鼻咽癌。其具體作用機制可能與生物腫瘤抗體細胞的無限合成和增殖特性有關(guān)，提示生物抗體合成及增殖過程中靶抗原可能是自身抗體細胞中相應(yīng)的靶抗原［11－12］。

146 例ACA 陽性患者中，同時伴有抗SSA 抗體患者34 例，抗AMA 抗體患者33 例，抗Ro52 抗體患者30例，RF 患者 21 例，抗 Sm 患者抗體 12 例，抗 RNP 抗體患者11 例，抗AECA 抗體患者9 例，提示ACA 可能與多種其他自身抗體同時出現(xiàn)。

與核膜型ACA 同時出現(xiàn)的陰性抗AMA 陽性患者的人數(shù)相對較多，且其中AMA 可能是原發(fā)性肝硬化的重要標志性抗體［13］。ACA 在肝硬化患者血液中的熒光檢出陽性率一般為10% ～50%，其熒光檢測模式多見著絲點型、核膜型和陰性核點型［14］。由表 1 可知，ACA陽性自身免疫性疾病的患者中，自身免疫性肝病核點型患者的人數(shù)最多。進一步分析了肝硬化患者抗體AMA 與核膜型ACA 的相關(guān)性。結(jié)果顯示，核膜型ACA 滴度與核膜型AMA 抗體滴度之間無明顯相關(guān)性。隨后，選取22 例本研究中發(fā)現(xiàn)的ACA 陽性患者和AMA 陰性經(jīng)臨床病理學診斷確診的ACA 陽性和肝硬化患者，發(fā)現(xiàn)其自身的抗體以核膜型ACA 為主，少數(shù)患者伴有陽性核膜型和陰性核點型。結(jié)果顯示，ACA 可能對AMA 陰性的肝硬化患者具有一定的病理學診斷意義，但還需深入研究。經(jīng)常規(guī)實驗室檢查發(fā)現(xiàn)，部分高滴度ACA 陽性患者可能伴有急性貧血、肝功異常及血沉升高的臨床癥狀。結(jié)合高滴度ACA 的肝臟功能疾病類型分布，發(fā)現(xiàn)具有以下特點：1）ACA 陽性患者可同時出現(xiàn)在多種肝病中，其中在病毒性肝炎、酒精性肝病、藥物性肝損傷等多種肝病中均可同時檢出；2）高滴度ACA 表現(xiàn)陽性的患者中，肝硬化期陽性患者的比例更高，高滴度ACA 表現(xiàn)陽性患者多見于肝硬化期，包括高滴度肝硬化患者在內(nèi)的由于各種原因肝炎引起的病毒性肝硬化患者。推測貧血現(xiàn)象可能與ACA 陽性患者肝硬化有關(guān)，導致血沉升高，但其具體作用機制尚不清楚。

綜上所述，ACA 對自身免疫功能性疾病的臨床診斷和治療均有一定特異性，且與自身免疫性肝病聯(lián)系緊密。但ACA 與自身免疫性肝病的相關(guān)性，仍需大量臨床數(shù)據(jù)進行深入研究。