中醫(yī)正肝方治療肝癌的療效及對患者肝功能、腸道菌群和免疫功能的影響

冉云，呂錦珍，胡世平，蘇曉鵬，陳文林，李玲，周怡馳

1.北京中醫(yī)藥大學(xué)深圳醫(yī)院(龍崗)肝病科，廣東 深圳 518172； 2.北京市北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100021

肝癌是肝臟組織最常見的惡性腫瘤，其發(fā)生可能與飲酒、遺傳、病毒性肝炎、生活習(xí)慣等因素有關(guān)，患病率呈全球范圍遞增，危及患者生命安全[1]。我國為乙型肝炎的高發(fā)國家，每年新發(fā)肝癌約占病例的1/2，手術(shù)是治療肝癌的首選方法，但其早期癥狀不明顯，臨床診斷難度較大，病情進(jìn)展快，且多合并肝硬化，治療難度大[2]。數(shù)據(jù)顯示，僅2/5的患者在就診時(shí)能接受手術(shù)治療[3-4]，因此，非手術(shù)治療肝癌逐漸在臨床發(fā)展起來，中醫(yī)在肝癌的輔助治療中具有較高的應(yīng)用價(jià)值，其中中醫(yī)正肝方在肝癌治療中較常用，具有扶正祛邪、益氣扶正的功效[5]。本研究旨在分析中醫(yī)正肝方治療肝癌的效果，并探討其對患者肝功能、腸道菌群和免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年8月至2020年6月北京中醫(yī)藥大學(xué)深圳醫(yī)院門診治療的60例肝癌患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《實(shí)用內(nèi)科學(xué)》[6]中關(guān)于肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)；②能夠配合觀察治療者；③年齡45～65歲，且預(yù)計(jì)生存期＞6個(gè)月；④未接受化療、放療及免疫治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①重疊感染其他類型肝炎病毒者；②合并嚴(yán)重心腦血管、肺、腎、內(nèi)分泌和造血系統(tǒng)等原發(fā)性疾??；③精神異常，無法正常溝通交流者；④半年內(nèi)使用過干擾素抗病毒藥者；⑤并發(fā)其他惡性腫瘤疾病者；⑥同時(shí)接受其他治療，并可能會對研究結(jié)果產(chǎn)生影響者。采用隨機(jī)數(shù)表法將患者分為觀察組和對照組，每組30例。觀察組中男性18例，女性12例；年齡45～65歲，平均(54.18±2.98)歲；肝功能Child-Pugh分級[7]：A級11例，B級13例，C級6例；病程25～50 d，平均(36.19±3.98)d。對照組男性16例，女性14例；年齡45～64歲，平均(54.12±2.87)歲；肝功能Child-Pugh分級：A級13例，B級12例，C級5例；病程25～49 d，平均(36.09±3.89)d。兩組患者的基線資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究獲醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，且患者簽署知情同意書。

1.2 治療方法 對照組患者給予保肝及對癥支持治療。①保肝治療：選用谷胱甘肽注射液(生產(chǎn)廠家：山東綠葉制藥有限公司；規(guī)格：1.2 g/支；國藥準(zhǔn)字：H20041620)予患者靜脈滴注治療，1.2 g/d；②對癥治療：口服維生素E丸(生產(chǎn)廠家：山東威高藥業(yè)股份有限公司；規(guī)格：0.1 g；國藥準(zhǔn)字：H20103380)，100 mg/次，3次/d，肝安注射液(生產(chǎn)廠家：廣東彼迪藥業(yè)有限公司；規(guī)格：250 mL×20 g；國藥準(zhǔn)字：H19999253)250 mL/d，靜脈滴注治療；③抗肝纖維化：口服復(fù)方鱉甲軟肝片(生產(chǎn)廠家：內(nèi)蒙古福瑞醫(yī)療科技股份有限公司；規(guī)格：0.5 g×48片；國藥準(zhǔn)字：Z19991011)治療，1 g/次，3次/d，均治療3個(gè)月。觀察組在對照組治療基礎(chǔ)上聯(lián)合中醫(yī)正肝方治療。組方：黃芪30 g、丹參30 g、女貞子15 g、半枝蓮15 g、川穹10 g、枸杞子15 g、百花蛇舌草30 g、鱉甲15 g、靈芝20 g、茵陳20 g、赤芍10 g、白術(shù)20 g。以上藥物先加水500 mL，浸泡20 min，中煎取汁300 mL，150 mL/次，2次/d(早晚各一次)，治療3個(gè)月。

1.3 觀察指標(biāo)和檢測方法 (1)治療3個(gè)月，比較兩組患者的治療效果。(2)比較兩組患者治療前后肝功能變化。采集治療前后空腹靜脈血5 mL，以2 500 r/min的速度離心處理10 min后分離血清，半徑為4 cm，采用釩酸鹽氧化法測定血清中TBIL含量，采用動態(tài)比色法測定ALT、AST含量，試劑盒均由深圳海信公司提供，步驟按說話書進(jìn)行。(3)比較兩組患者治療前后腸道菌群變化及改善情況。采用細(xì)菌16SrD-NA熒光定量PCR法(生產(chǎn)廠家：廣州興華科技公司)測定糞便中腸道菌群水平，具體包括雙歧桿菌、乳酸桿菌、腸桿菌，步驟按說明書進(jìn)行。(4)比較兩組患者治療前后免疫功能變化。血清采集方法同(1)，采用流式細(xì)胞儀(生產(chǎn)廠家：武漢宏盛科技公司)檢測CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+等免疫指標(biāo)，步驟按儀器說明書進(jìn)行。(5)統(tǒng)計(jì)兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 療效評定標(biāo)準(zhǔn)[8]完全緩解：已知病灶消失，且持續(xù)≥4周；部分緩解：腫瘤病灶最大單徑之和縮小＞30%，且持續(xù)≥4周；進(jìn)展：腫瘤病灶最大單徑之和增大＞20%或有新病灶出現(xiàn)；其余為穩(wěn)定?？偩徑饴?(完全緩解+部分緩解)/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的治療效果比較 觀察組患者的治療總緩解率為90.00%，明顯高于對照組66.67%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者的治療效果比較(例)

2.2 兩組患者治療前后的肝功能比較 治療前，兩組患者的肝功能比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療后，兩組患者的TBIL、AST、ALT表達(dá)水平均降低，且觀察組明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

2.3 兩組患者治療前后的腸道菌群比較 治療前，兩組患者的腸道菌群比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療后，兩組患者的雙歧桿菌、乳酸桿菌均升高，觀察組明顯高于對照組，而腸桿菌降低，觀察組明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表2 兩組患者治療前后的肝功能比較(±s)

表2 兩組患者治療前后的肝功能比較(±s)

注：與本組治療前比較，a P＜0.05。

組別觀察組對照組t值P值例數(shù)30 30治療前34.12±4.11 33.98±4.31 0.128 0.898治療后15.31±2.11a 19.87±3.09a 6.675 0.001治療前90.31±4.55 89.96±3.87 0.321 0.749治療后34.76±5.17a 50.76±6.89a 10.173 0.001治療前112.54±12.43 113.09±11.98 0.174 0.862治療后37.12±4.11a 61.32±5.67a 18.927 0.001 TBIL(μmol/L) AST(IU/L) ALT(IU/L)

表3 兩組患者治療前后的腸道菌群比較(±s，copies/g)

表3 兩組患者治療前后的腸道菌群比較(±s，copies/g)

注：與本組治療前比較，a P＜0.05。

組別觀察組對照組t值P值例數(shù)30 30治療前8.11±1.45 8.15±1.21 0.116 0.908治療后9.87±0.78a 9.21±0.66a 3.538 0.001治療前7.21±1.21 7.09±1.01 0.417 0.678治療后9.66±1.31a 8.54±1.23a 3.413 0.001治療前9.87±1.19 9.79±1.14 0.265 0.791治療后37.12±4.11a 61.32±5.67a 18.927 0.001雙歧桿菌 乳酸桿菌 腸桿菌

2.4 兩組患者治療前后的免疫功能比較 治療前，兩組患者的細(xì)胞免疫功能比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；治療后，兩組患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均升高，且觀察組明顯高于對照組，而CD8+降低，且觀察組明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表4。

表4 兩組患者治療前后的免疫功能比較(±s，%)

表4 兩組患者治療前后的免疫功能比較(±s，%)

注：與本組治療前比較，a P＜0.05。

組別觀察組對照組t值P值例數(shù)30 30治療前63.13±5.19 62.98±4.89 0.115 0.908治療后69.87±5.28a 66.12±5.61a 2.666 0.009治療前28.12±3.11 27.98±3.51 0.163 0.871治療后38.21±4.09a 34.11±3.89a 3.978 0.001治療前33.09±3.11 33.21±2.98 0.152 0.879治療后26.11±2.99a 29.87±2.18a 5.565 0.001治療前1.27±0.21 1.24±0.22 0.540 0.591治療后1.89±0.32a 1.53±0.28a 4.637 0.001 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+

2.5 兩組患者的不良反應(yīng)比較 兩組患者的不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.579，P=0.447＞0.05)，見表5。

表5 兩組患者的不良反應(yīng)比較(例)

3 討論

肝癌是常見的惡性腫瘤之一，我國肝癌的患病率占全球50%以上，給患者的身心帶來較大痛苦[9]。西醫(yī)在肝癌治療過程中雖可改善病情，但復(fù)發(fā)率高、轉(zhuǎn)移率高，總體效果不盡人意。近年來有研究表明[10]，中醫(yī)治療肝癌效果理想，可在一定程度上抑制腫瘤進(jìn)展，維護(hù)人體正氣，改善臨床癥狀，促進(jìn)疾病轉(zhuǎn)歸。

中國醫(yī)學(xué)將肝癌歸屬于“臌脹”、“黃疸”、“脾積”、“肝積”等范疇，多因毒邪遷延留滯、七情郁結(jié)、飲食內(nèi)傷所致，病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)、因虛致病，對患者的生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響[11-12]。針對肝癌中醫(yī)病因病機(jī)，本研究采用中醫(yī)正肝方對肝癌患者進(jìn)行治療。結(jié)果顯示中醫(yī)正肝方，聯(lián)合治療的總緩解率為90.00%，顯著高于常規(guī)西醫(yī)治療的66.67%，表明在常規(guī)西醫(yī)治療基礎(chǔ)上聯(lián)合中醫(yī)正肝方治療肝癌可明顯提高治療效果。中醫(yī)正肝方中靈芝具有扶正益氣的作用，白術(shù)具有健脾化濕的作用，丹參具有止痛活血的作用，半蓮枝、白花蛇舌草具有清熱解毒利濕的作用，茵陳具有利濕清熱的作用，同時(shí)也具有利膽、保肝、抗病毒、抗腫瘤的作用，川穹具有活血化瘀的作用，黃芪、女貞子、枸杞子具有補(bǔ)虛扶正的作用[13]。全方共奏活血軟堅(jiān)、益氣養(yǎng)陰、清熱解毒、益氣扶正的功效[14]。本研究表明經(jīng)聯(lián)合治療的患者，其肝功能改善效果明顯優(yōu)于常規(guī)西醫(yī)治療。分析原因?yàn)橐痍惥哂斜８?、利膽的作用，而丹參具有活血止痛、改善肝臟微循環(huán)障礙的的作用，有效促進(jìn)肝細(xì)胞再生。

正常情況下，肝臟組織能夠清除來自腸道的腸源性細(xì)菌和真菌，若肝臟組織受損，可累及腸道微生態(tài)出現(xiàn)異常，進(jìn)而導(dǎo)致腸道屏障功能受損，進(jìn)一步誘導(dǎo)腸道細(xì)菌及其各種代謝產(chǎn)物大量進(jìn)入腸外器官，過度激活機(jī)體免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致肝細(xì)胞出現(xiàn)凋亡或壞死[15]。近年來，關(guān)于腸道微生態(tài)平衡與肝病之間關(guān)系的研究越來越受到醫(yī)學(xué)研究者的重視。本次研究也重點(diǎn)分析了中醫(yī)正肝方對肝癌患者腸道菌群的影響，研究結(jié)果顯示，中醫(yī)肝正方聯(lián)合西藥治療患者的雙歧桿菌、乳酸桿菌明顯升高，而腸桿菌降低，效果優(yōu)于常規(guī)西醫(yī)治療患者，表明中醫(yī)正肝方可有效調(diào)節(jié)腸道菌群。分析原因?yàn)辄S芪、丹參具有扶植有益菌、抑制有害菌的作用，進(jìn)而改善患者肝功能，促進(jìn)疾病好轉(zhuǎn)。

資料表明，在正常情況下，機(jī)體血腫T淋巴細(xì)胞亞群能夠維持機(jī)體正常的免疫功能，CD8+T細(xì)胞具有抑制作用，CD3+T細(xì)胞代表總的T細(xì)胞數(shù)量，CD4+T細(xì)胞具有殺滅腫瘤細(xì)胞的作用，三者之間具有協(xié)調(diào)制衡的作用，共同參與了對機(jī)體免疫調(diào)節(jié)，維護(hù)機(jī)體正常所需[16-17]。本研究表明，聯(lián)合治療后患者的T淋巴細(xì)胞改善情況明顯優(yōu)于常規(guī)西醫(yī)治療患者，表明中醫(yī)正肝方能夠有效改善提高患者的免疫功能。分析原因?yàn)橹嗅t(yī)正肝方能夠最大限度的殺死腫瘤細(xì)胞后有效修復(fù)患者的免疫功能，讓機(jī)體正常的免疫細(xì)胞殺滅殘存的腫瘤細(xì)胞，提高機(jī)體抗癌能力，從而達(dá)到治愈腫瘤的目的，體現(xiàn)了中醫(yī)治療肝癌的獨(dú)特優(yōu)勢[18]。從安全性方面看，兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較無明顯差異，提示中醫(yī)正肝方治療肝癌不會增加不良反應(yīng)，具有較高的安全性。

綜上所述，中醫(yī)肝正方治療肝癌效果顯著，可有效改善患者的肝功能，調(diào)節(jié)腸道菌群變化，提高免疫功能，安全性高，可在臨床推廣運(yùn)用。