噻托溴銨粉霧劑對(duì)COPD患者氣道重構(gòu)中TLR4/NF-κB/TGF-β1信號(hào)通路的影響

葛丹亙，王震

（1.溧陽(yáng)市人民醫(yī)院，江蘇 溧陽(yáng) 213300；2.江蘇省人民醫(yī)院，江蘇 南京 210029）

0 引言

慢性阻塞性肺疾?。–OPD）是一種常見(jiàn)的呼吸科疾病，病理特征主要包括氣道炎癥及氣道重構(gòu)，若未采取有效的治療，會(huì)嚴(yán)重?fù)p害患者的肺功能[1]。噻托溴銨粉霧劑是一種支氣管擴(kuò)張藥物，可改善COPD患者的相關(guān)臨床癥狀。MMP-9參與COPD的氣道炎癥，TIMP-1參與了氣道修復(fù)。相關(guān)研究證實(shí)，TLR4、NF-κB、TGF-β1水平升高與COPD患者的氣道重構(gòu)呈正相關(guān)[2]。鑒于此，本研究見(jiàn)下文。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取2018年1月至2019年4月我院呼吸科收治的60例COPD患者為研究對(duì)象，隨機(jī)分為治療組與對(duì)照組各30例。治療組男19例，女11例；年齡54～78，平均（62.39±6.23）歲。對(duì)照組男18例，女12例；年齡53～79，平均（63.08±6.27）歲。各組的一般資料比較無(wú)差異，具有可比性（P＞0.05）。入選標(biāo)準(zhǔn)：①符合COPD診斷標(biāo)準(zhǔn)；②對(duì)噻托溴銨粉霧劑無(wú)過(guò)敏者；③能夠配合治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①有嚴(yán)重全身疾病及精神異常者；②曾長(zhǎng)期使用糖皮質(zhì)激素（急性加重期不限制ICS、支氣管擴(kuò)張劑的短期使用）；③對(duì)噻托溴銨粉霧劑過(guò)敏者。

1.2 方法。對(duì)照組采取綜合治療，給予患者氧療、口服茶堿緩釋片、營(yíng)養(yǎng)支持等治療。治療組在對(duì)照組治療的基礎(chǔ)上給予噻托溴銨粉霧劑吸入治療，18 ug每吸，一日一吸，持續(xù)治療16周。TLR4、NF-κB、TGF-β1mRNA檢測(cè)：采用RT-PCR法進(jìn)行檢測(cè)。血清MMP-9、TIMP-1水平檢測(cè)：采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)血清MMP-9、TIMP-1水平。

1.3 觀察指標(biāo)。觀察指標(biāo)：比較兩組患者的肺功能指標(biāo)及TLR4、NF-κB、TGF-β1、MMP-9、TIMP-1水平。肺功能指標(biāo)：FEV1、FEV1%、FEV1/FVC。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。以SPSS 20.0軟件行數(shù)據(jù)分析，一般資料以[n（%）]形式顯示，行χ2檢驗(yàn)；肺功能指標(biāo)、TLR4、NF-κB、TGF-β1mRNA及MMP-9、TIMP-1水平以（±s）形式顯示，行t檢驗(yàn)；組間比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；P＜0.05時(shí)為組間數(shù)據(jù)對(duì)比存在顯著差異。

2 結(jié)果

2.1 兩組的肺功能指標(biāo)比較。兩組治療前的肺功能指標(biāo)比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；治療后，兩組患者的FEV1，F(xiàn)EV1%，F(xiàn)EV1/FVC均較治療前顯著上升，而且治療組患者治療后的FEV1，F(xiàn)EV1%，F(xiàn)EV1/FVC均顯著高于對(duì)照組，比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 兩組的肺功能指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組的肺功能指標(biāo)比較（±s）

組別 例數(shù) FEV1（L） FEV1/FVC FEV1%治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后治療組 30 1.48±0.26 1.67±0.21 50.16±6.31 62.98±7.31 45.15±5.86 56.76±6.92對(duì)照組 30 1.47±0.25 1.50±0.20 50.21±6.34 55.35±6.76 45.18±5.87 50.23±6.14 t-0.298 3.211 0.037 4.197 0.020 3.8863 P-0.767 0.002 0.971 0.001 0.984 0.001

2.2 兩組的TLR4、NF-κB、TGF-β1mRNA水平比較。兩組治療前的TLR4、NF-κB、TGF-β1mRNA比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；治療后，治療組的TLR4、NFκB、TGF-β1mRNA低于治療前和對(duì)照組，比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 兩組的TLR4、NF-κB、TGF-β1mRNA水平比較（±s）

表2 兩組的TLR4、NF-κB、TGF-β1mRNA水平比較（±s）

組別 例數(shù) TLR4mRNA NF-κBmRNA TGF-β1mRNA治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后治療組 30 0.29±0.03 0.10±0.01 0.12±0.02 0.03±0.01 0.24±0.03 0.07±0.01對(duì)照組 30 0.27±0.03 0.16±0.02 0.13±0.02 0.04±0.01 0.25±0.03 0.13±0.02 t-1.291 14.697 1.936 3.873 1.291 14.697 P-0.202 0.001 0.058 0.001 0.202 0.001

2.3 兩組的MMP-9、TIMP-1水平比較。兩組治療前的MMP-9、TIMP-1比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；治療后，治療組的MMP-9水平低于治療前和對(duì)照組，TIMP-1水平高于治療前和對(duì)照組，比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 兩組的MMP-9、TIMP-1水平比較（±s）

表3 兩組的MMP-9、TIMP-1水平比較（±s）

組別 例數(shù) MMP-9（pg/mL） TIMP-1（pg/mL）治療前 治療后 治療前 治療后治療組 30 2375.15±105.72 857.83±33.35 10.09±1.06 28.15±2.67對(duì)照組 30 2388.42±106.14 1476.01±60.31 10.12±1.09 20.32±2.31 t-0.485 49.130 0.108 12.147 P-0.629 0.001 0.914 0.001

3 討論

COPD的發(fā)病機(jī)制主要為炎癥介質(zhì)破壞肺結(jié)構(gòu)、蛋白酶和抗蛋白酶的失衡，主要臨床特征為氣道氣流受限，若長(zhǎng)期發(fā)展會(huì)使氣道結(jié)構(gòu)被破壞，并發(fā)生重塑。研究表明，氣道重塑與NF-κB/TGF-β1信號(hào)通路有關(guān)[3]。TGF-β1是纖維化中的細(xì)胞因子，其能夠促使氣道平滑肌上的纖維結(jié)合蛋白發(fā)生沉積，導(dǎo)致氣道管壁出現(xiàn)增厚，從而導(dǎo)致氣道重塑。氣道重建與NF-κB密切相關(guān)，且病情進(jìn)展與NF-κB所致的炎癥因子過(guò)度表達(dá)相關(guān)。而TLR4激活能夠促進(jìn)氣道平滑肌分泌大量炎癥因子，促使氣道炎癥的發(fā)生。噻托溴銨是一種常用的抗膽堿能藥物，通過(guò)對(duì)氣道和支氣管進(jìn)行擴(kuò)張，改善患者COPD癥狀。現(xiàn)隨著對(duì)噻托溴銨的深化研究，越來(lái)越多證據(jù)表明噻托溴銨還可以通過(guò)抑制炎性反應(yīng)，改善氣道重塑來(lái)發(fā)揮治療COPD的作用[4]。Ohta等[5]研究發(fā)現(xiàn)，噻托溴銨能降低支氣管肺泡灌洗液中TGF-β1的水平，從而抑制慢阻肺的氣道重塑。李莉芳等研究發(fā)現(xiàn)，噻托溴銨對(duì)慢阻肺大鼠肺組織MMP-9蛋白具有抑制作用，可影響ECM的合成和降解，從而抑制慢阻肺氣道重塑進(jìn)展，達(dá)到治療及改善慢阻肺的作用[6]。

本研究結(jié)果，治療組治療后的FEV1，F(xiàn)EV1%，F(xiàn)EV1/FVC均高于治療前和對(duì)照組，TLR4、NF-κB、TGF-β1mRNA低于治療前和對(duì)照組，MMP-9水平低于治療前和對(duì)照組，TIMP-1水平高于治療前和對(duì)照組（P＜0.05）。結(jié)果說(shuō)明噻托溴銨粉霧劑改善COPD患者的氣道重塑可能是通過(guò)抑制TLR4/NF-κB/TGF-β1表達(dá)有關(guān)，最終抑制MMP-9釋放，促進(jìn)TIMP-1釋放，穩(wěn)定其平衡。