VEGF和MMP-10在上皮性卵巢癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及預(yù)后分析

董雪茹 王鵬遠(yuǎn)

上皮性卵巢癌是1種常見的婦科惡性腫瘤，由于許多確診時處于晚期，5年生存率不足40%。導(dǎo)致腫瘤發(fā)生、發(fā)展的1個關(guān)鍵因素是腫瘤新生血管。目前所知的，作用最強的促血管生長因子，就是血管內(nèi)皮生長因子。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)會增加癌細(xì)胞的浸潤能力，以及腫瘤血管的通透性，促進內(nèi)皮細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)新生血管形成，使腫瘤發(fā)展、轉(zhuǎn)移。腫瘤新生血管對于卵巢腫瘤的生長、浸潤、轉(zhuǎn)移都有重要的作用[1-3]?；|(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)可以激活大多數(shù)基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)前體，一種間質(zhì)溶解素類，激活其他基質(zhì)金屬蛋白酶[4-6]。為探究VEGF和MMP-10在上皮性卵巢癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及預(yù)后關(guān)系，特選取我院80例上皮性卵巢癌患者進行研究，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取我院80例上皮性卵巢癌患者。從2017年12月到2018年12月?；颊吣挲g25～70歲，平均年齡(50.2±3.7)歲。其中有Ⅰ期12例，Ⅱ期19例，Ⅲ期39例，Ⅳ期10例。低分化癌66例，高、中分化癌14例。黏液性癌33例，漿液性癌47例。同時選取30例交界瘤患者。40例良性瘤組織患者。

1.2 方法

選取標(biāo)本，使用10%甲醛固定，用石蠟包埋，切片，進行免疫組化染色，主要是VEGF和MMP-10。免疫組化染色，已知的基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)陽性結(jié)腸腫瘤，為陽性對照。已知的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)陽性乳腺腫瘤，作為陽性對照。陰性對照 PBS液，代替一抗。通過半定量方法，分析血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)表達(dá)。觀察MMP-10表達(dá)：腫瘤細(xì)胞間質(zhì)、胞漿中，有棕黃色顆粒出現(xiàn)代表陽性。觀察VEGF表達(dá)：腫瘤細(xì)胞胞膜、胞漿，出現(xiàn)棕黃色顆粒代表陽性。使用低倍鏡，根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)比值，分為陰性(-)、低度表達(dá)(+)、中度表達(dá)(++)、高度表達(dá)(+++)。陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)超過50%，為高度表達(dá)(+++)。陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)為25%～50%，為中度表達(dá)(++)。陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)低于25%，為低度表達(dá)(+)。無陽性表達(dá)細(xì)胞，為陰性(-)。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察不同惡性程度，上皮性卵巢癌免疫組化染色結(jié)果，上皮性卵巢腫瘤免疫組化染色的情況，以及上皮性卵巢腫瘤中VEGF和MMP-10表達(dá)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 不同惡性程度上皮性卵巢腫瘤免疫組化染色結(jié)果

如下表1所示，上皮性卵巢腫瘤不同的惡性程度，包括良性瘤、交界瘤、癌，免疫組化染色的結(jié)果顯示，80例上皮性卵巢癌患者，40例良性瘤組織患者，30例交界瘤患者，VEGF和MMP-10表達(dá)存在明顯的差異性，根據(jù)Kruskal-Wallis H檢驗，MMP-10：H為60.387，P=0.001，VEGF：0：H為57.914，P=0.001。

表1 不同惡性程度上皮性卵巢腫瘤免疫組化染色結(jié)果/例

2.2 上皮性卵巢癌免疫組化染色結(jié)果

如下表2所示，80例上皮性卵巢癌，組織學(xué)類型黏液性癌33例，漿液性癌47例，免疫組化染色實驗結(jié)果顯示，在黏液性癌、漿液性癌之間，VEGF和MMP-10表達(dá)無明顯差異，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，其中VEGF：Z=0.526，P=0.223，MMP-10：Z=0.413，P=0.527。

表2 上皮性卵巢癌免疫組化染色結(jié)果/例

47例有腹腔積液，33例無腹腔積液，免疫組化染色結(jié)果顯示，在有無腹腔積液中，VEGF和MMP-10表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中VEGF：Z=-4.297，P=0.001，MMP-10：Z=-2.658，P=0.001。

臨床分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期19例，Ⅲ期39例，Ⅳ期10例，免疫組化染色結(jié)果，在Ⅰ期、Ⅱ期間，Ⅲ期、Ⅳ期間，VEGF和MMP-10表達(dá)沒有明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。如果Ⅰ期、Ⅱ期為早期，Ⅲ期、Ⅳ為晚期，VEGF和MMP-10表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中VEGF：Z=-5.623，P=0.001，MMP-10：Z=-4.714，P=0.001。

低分化癌66例，高、中分化癌14例，免疫組化染色結(jié)果顯示，在高、中分化癌，以及低分化癌之間，VEGF和MMP-10表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，其中VEGF：Z=-5.129，P=0.001，MMP-10：Z=-4.325，P=0.001。

預(yù)后≥5年有20例，預(yù)后<5年的有60例，免疫組化染色結(jié)果顯示，在預(yù)后≥5年，以及<5年之間，VEGF表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，VEGF：Z=-2.856，P=0.001。同時，MMP-10表達(dá)沒有明顯的差異性(P>0.05)，無統(tǒng)計學(xué)意義，MMP-10：Z=-0.588，P=0.397。

2.3 上皮性卵巢腫瘤中VEGF和MMP-10表達(dá)的相關(guān)性

如表3所示，相關(guān)系數(shù)0.825，P=0.001，在上皮性卵巢腫瘤中，VEGF和MMP-10表達(dá)與其呈正相關(guān)的關(guān)系。

表3 上皮性卵巢腫瘤中VEGF和MMP-10表達(dá)的相關(guān)性/例

3 討論

卵巢惡性腫瘤病死率較高，腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移是1個多基因、多階段、多步驟的過程，與血管生成、移動、降解、黏附等有關(guān)。腫瘤細(xì)胞對細(xì)胞外基質(zhì)移動、黏附、降解，導(dǎo)致浸潤，促進轉(zhuǎn)移?；|(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)在浸潤、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要的作用。其中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)發(fā)揮著重要的作用[7-9]。腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移的前提，是腫瘤的浸潤、侵襲。由于新生血管的形成，使局部腫瘤細(xì)胞能夠物質(zhì)代謝，發(fā)生轉(zhuǎn)移。與腫瘤組織自身血管生成，以及轉(zhuǎn)移部位密切相關(guān)，腫瘤在轉(zhuǎn)移組織中是否可以生存?；|(zhì)金屬蛋白酶10會對其他的基質(zhì)金屬蛋白酶進行激活，被激活的基質(zhì)金屬蛋白酶，與血管內(nèi)皮生長因子相互誘導(dǎo)，從而促進轉(zhuǎn)移。通過免疫組織化學(xué)染色方法，對卵巢腫瘤表達(dá)中的MMP-10、VEGF進行檢測，從而分析其與預(yù)后、病理等關(guān)系，有利于為尋求治療卵巢惡性腫瘤的方法提供參考。在上皮性卵巢癌中，VEGF和MMP-10都呈現(xiàn)高表達(dá)的情況，反映了MMP-10、VEGF的表達(dá)情況，與上皮性卵巢癌的良性、惡性有密切的關(guān)系。VEGF可以對血管內(nèi)皮增生形成強烈刺激，從而誘導(dǎo)血管生成[10-11]。MMP-10可以對基質(zhì)中的纖黏蛋白、彈性蛋白、層黏蛋白、糖蛋白蛋白核心等，進行降解，激活其他許多的基質(zhì)金屬蛋白酶。惡性腫瘤組織經(jīng)常出現(xiàn)壞死，導(dǎo)致組織缺血缺氧，造成VEGF高表達(dá)?；|(zhì)金屬蛋白酶是一類蛋白水解酶，依賴Zn2+，降解細(xì)胞外基底膜基質(zhì)。卵巢惡性腫瘤組織，往往伴有浸潤、轉(zhuǎn)移，必然出現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)降解。其中降解中發(fā)揮重要作用的就是MMP-10，因此上皮性卵巢癌中，MMP-10呈現(xiàn)高表達(dá)，尤其是在浸潤、轉(zhuǎn)移中[12-14]。

本次研究顯示，在有無腹水中，VEGF和MMP-10表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。如果Ⅰ期、Ⅱ期為早期，Ⅲ期、Ⅳ為晚期，VEGF和MMP-10表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在高、中分化癌，以及低分化癌之間，VEGF和MMP-10表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。提示VEGF、MMP-10表達(dá)與上皮性卵巢癌的有無腹水、病理分級、臨床分期，存在明顯的差異性。腫瘤只有1 mm3到2 mm3，新的血管還沒有生長以前，并且不會轉(zhuǎn)移。腫瘤營養(yǎng)和轉(zhuǎn)移的途徑是血管。新血管生成后，轉(zhuǎn)移的風(fēng)險就會明顯增加，腫瘤不斷增長。VEGF與上皮性卵巢癌的病理分級、臨床分期有關(guān)。低分化腫瘤，惡性程度高，腫瘤轉(zhuǎn)移容易發(fā)生。有腹水的上皮性卵巢癌患者中，VEGF呈現(xiàn)高表達(dá)，尤其是腹水量超過500 ml。VEGF能夠使血管的通透性增強，是增加血管通透能力的重要因子。纖維蛋白原、血漿蛋白、液體從血管中外滲，與VEGF有關(guān)。VEGF也能夠促進腫瘤細(xì)胞進入腹腔。產(chǎn)生腹水，對腹膜血管造成進一步刺激，從VEGF中創(chuàng)造條件，腹腔種植腫瘤細(xì)胞，腹腔表面的腫瘤細(xì)胞，使血管通透性進一步增強，VEGF和MMP-10呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系[15]。MMP-10表達(dá)與有無腹水、病理分級、臨床分期有關(guān)。在病理類型中，黏液性癌、漿液性癌之間，VEGF和MMP-10表達(dá)無明顯差異，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。VEGF和MMP-10表達(dá)不能幫助判斷上皮性卵巢癌的病理類型。與病理類型無關(guān)。黏液癌、漿液癌就可以發(fā)生浸潤、轉(zhuǎn)移，在較早期。本次研究顯示，在預(yù)后≥5年，以及<5年之間，VEGF表達(dá)有明顯的差異性，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，MMP-10表達(dá)沒有明顯的差異性(P>0.05)，反映了VEGF表達(dá)與上皮性卵巢癌的預(yù)后有密切的關(guān)系，可以為預(yù)后評估提供參考。VEGF在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中，發(fā)揮著重要的作用，是重要的血管生成因子之一，VEGF表達(dá)可以作為判定疾病進展的一個標(biāo)志。在目前研究中，以VEGF為靶點的抗腫瘤血管生成治療，是關(guān)注的熱點。

綜上所述，VEGF和MMP-10表達(dá)與上皮性卵巢癌病理分級、臨床分期、有無腹水密切相關(guān)，在上皮性卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用，VEGF表達(dá)與上皮性卵巢癌的預(yù)后相關(guān)，可以作為判斷預(yù)后的1個指標(biāo)。